全 文 ：高效液相色谱测定凤尾茶中黄酮的含量
陈海云 t o樊 建 u o曹建新 u3
ktq云南民族大学 化学与生物技术学院 o云南 昆明 yxssvt~
uq昆明理工大学 生化学院 o云南 昆明 yxss|vl
≈摘要 目的 }建立用高效液相色谱法测定凤尾茶中黄酮含量的方法 ∀方法 }凤尾茶粉碎后 o用甲醇浸泡 o超
声提取 o过滤 o取滤液进样 ∀色谱仪为岛津 ≤ p ustso色谱柱为 ª¬¯¨ ±·∞¬·¨±§2 °柱 o流动相甲醇 2乙腈 2s1uh磷
酸 o流速 t1s °# °¬±pt o紫外检测波长 u{s ±°∀结果 }在 s1uww ∗ u1|u{ Λª线性关系良好 o方法回收率高 ∀结论 }
本方法快速 !简便 !准确 ∀
≈关键词 黄酮 ~凤尾茶 ~高效液相色谱
≈中图分类号 u{wqt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusszluu2uv{x2sv
≈收稿日期 ussy2sy2t|
≈基金项目 云南省教委项目 ksvsswl
≈通讯作者 3 曹建新 oר¯}ks{ztlv{sttuuo∞2°¤¬¯}¬¦¤²vut
¼¤«²²q¦²°q¦±
凤尾茶为香薷属植物东紫苏 Ελσηολτζια βοδινιερι
∂ ¤±χ·q的全草 o又名凉茶 !山茶 !香茶 o味甘苦微辛 o
性平 o能 /发散解表 o理气和胃 ∀治外感风寒 o消化
不良 0≈t o滇南各地少数民族作为日常茶饮广泛应
用 ∀作者曾报道了其水溶性成分主要为黄酮类化合
物 ∀本研究以分离的黄酮化合物为标示性成分 o建
立了液相色谱测定方法 o并对不同产地的凤尾茶进
行了测定 o为凤尾茶的进一步开发利用提供依据 ∀
1 仪器与试药
岛津 ≤ pusts高效液相色谱仪 o磷酸为分析
纯 o甲醇 !乙腈为色谱纯 o圣草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃
糖苷 o芦丁 o木犀草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖苷 o槲皮
素 z2Ο2Β2∆2半乳吡喃糖苷 o山柰酚 v2Ο2芦丁糖苷为
自制 o凤尾茶 ussv年 |月收购于云南省弥勒县各
地 ∀样品经中国科学院昆明植物研究所潘越芝副助
理研究员鉴定为香薷属植物凤尾茶 ~标本保存于中
国科学院昆明植物研究所标本室 ∀
2 色谱条件
ª¬¯¨ ±·∞¬·¨±§2 °柱 kw1y °° ≅ uxs °°o x
Λ°lo甲醇 2乙腈 2s1uh磷酸为流动相 o梯度洗脱 o洗
脱条件见表 t~检测波长 u{s ±°~流速 t1s °#
°¬±pt ~柱温 ws ε ~进样量 x Λ∀
3 溶液的配制
表 t °≤流动相梯度 h
τr°¬± s vs vx wu
s1uh磷酸 {x {x {x {x
甲醇 x x s s
乙腈 ts ts tx tx
3q1 对照品溶液的配制 取圣草素 z2Ο2Β2∆2葡萄
吡喃糖苷 o芦丁 o木犀草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖苷 o
槲皮素 z2Ο2Β2∆2半乳吡喃糖苷 o山柰酚 v2Ο2芦丁糖
苷适量 o减压干燥至恒重 o精密称定 o加甲醇制成对
照品溶液 o其质量浓度依次为 s1uwwos1tvyos1tt{o
s1s{vos1uxw °ª# °pt ∀
3q2 样品溶液的配制 取本品 tss ªo粉碎 o精密称
定 s1x ªo放入 xs °量瓶中 o加甲醇浸泡 t «o超声
处理 us °¬±o放至室温 o用甲醇稀释至刻度 o摇匀 o取
上清液用 s1wx Λ°微孔滤膜滤过作为供试品溶液 ∀
4 方法与结果
4q1 系统适用性 将样品溶液按上述色谱条件进
样 o记录色谱图 k图 tl∀结果显示 o圣草素 z2Ο2Β2∆2
葡萄吡喃糖苷 !芦丁 !木犀草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖
苷 !槲皮素 z2Ο2Β2∆2半乳吡喃糖苷 !山柰酚 v2Ο2芦丁
糖苷色谱峰的理论板数分别不低于 v sssou xsso
v sssov sssou ssso且各对照品色谱峰峰形好 o与前
后峰的分离度均不低于 t1x∀
4q2 线性关系 取化合物 1 ∗ 5对照品溶液 o按上
述色谱条件 o分别进样 touowo{otuotyous Λ分别
记录 x个对照品的峰面积 o以对照品进样量为纵坐
标 o其峰面积为横坐标 o绘制标准曲线 ∀统计学处
理 o圣草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖苷的回归方程为
#x{vu#
第 vu卷第 uu期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uu
²√ °¨¥¨ µo ussz
图 t 凤尾茶 °≤图
q对照品 ~
1样品
tq圣草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖苷 ~uq芦丁 ~
vq木犀草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖苷 ~wq槲皮素 z2Ο2Β2∆2
半乳吡喃糖苷 ~xq山柰酚 v2Ο2芦丁糖苷
Ψ w1xus ≅ tspy Ξ p t1z{x ≅ tspu oρ s1||| |o说明
样品在 s1uww ∗ u1|u{ Λª线性关系良好 ~得芦丁的
回归方程为 Ψ t1t|| ≅ tspy Ξ p y1|uv ≅ tspv oρ
s1||| so说明样品在 s1tvy ∗ t1yvu Λª线性关系良
好 ~木犀草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖苷的回归方程为
Ψ w1z{w ≅ tspz Ξ p x1u|u ≅ tspv oρ s1||| |o说明
样品在 s1tt{ ∗ t1wty Λª线性关系良好 ~槲皮素 z2
Ο2Β2∆2半乳吡喃糖苷的回归方程为 Ψ t1{vw ≅
tspy Ξ p v1||v wy ≅ tspv oρ s1||| |o说明样品在
s1s{v ∗ s1||z Λª线性关系良好 ~山柰酚 v2Ο2芦丁
糖苷的回归方程 Ψ {1{v| ≅ tspz Ξ p t1ttt wu ≅
tspu oρ s1||| |o说明样品在 s1uww ∗ u1|u{ Λª线
性关系良好 ∀
4q3 精密度试验 取圣草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖
苷 o芦丁 o木犀草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖苷 o槲皮素
z2Ο2Β2∆2半乳吡喃糖苷 o山柰酚 v2Ο2芦丁糖苷对照
品溶液 o按含量测定的方法重复进样 x次 o ≥⁄分别
为 t1xh ot1uh ot1uh ot1wh和 t1zh kν xl∀
4q4 重复性试验 分别取同一批样品 x份 o按上述
色谱条件各测定 u次 o其圣草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃
糖苷 o芦丁 o木犀草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖苷 o槲皮
素 z2Ο2Β2∆2半乳吡喃糖苷 o山柰酚 v2Ο2芦丁糖苷的
分别为 t1xh osot1|h osou1wh kν xl~其中芦丁 !
槲皮素 z2Ο2Β2∆2半乳吡喃糖苷在本批次样品中未检
出 ∀
4q5 加样回收率试验 精密称取凤尾茶样品细粉
适量 |份 k每份约 s1ux ªlov份为一组 o分别精密加
入高 !中 !低 v个量的圣草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖
苷 o芦丁 o木犀草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖苷 o槲皮素
z2Ο2Β2∆2半乳吡喃糖苷 o山柰酚 v2Ο2芦丁糖苷对照
品 o按样品测定方法测定 o计算回收率 ∀平均回收率
分别为 |y1{h k ≥⁄ v1th oν |lo|z1xh k ≥⁄
w1sh oν |lo|x1{h k ≥⁄ v1wh oν |lo|x1uh
k ≥⁄ w1vh oν |lo|x1uh k ≥⁄ v1yh oν |l∀
5 样品含量测定
取不同产地凤尾茶样品 y批 o按 312项下方法
制备样品溶液 o按 2项下色谱条件进行测定 o进样量
ts Λo记录色谱图 k图 tl∀以外标法计算样品中各
成分含量 o结果见表 u kν vl∀
表 u 凤尾茶中黄酮成分的含量测定 rh
产地
t v x
质量分数 ≥⁄ 质量分数 ≥⁄ 质量分数 ≥⁄
弥阳镇 x1ts t1w u1s| t1{ s1vs t1w
新哨镇 w1tw t1x t1{{ t1x s1tz t1{
红溪镇 v1vy t1v u1ty t1z s1vt t1x
朋普镇 u1|v t1| s1xu t1z s1ux t1|
检司镇 t1u{ t1w t1s| u1u s1t| u1t
竹圆镇 u1xz t1| t1uw t1{ s1tt u1v
注 }化合物 uow在样品中未检出
6 讨论
本研究建立了凤尾茶中黄酮成分的高效液相分
析方法 o从 y个不同产地样品测定结果看圣草素 z2
Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖苷 o木犀草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃
糖苷芦 !山柰酚 v2Ο2芦丁糖苷是其黄酮成分中的主
成分 o特别是圣草素 z2Ο2Β2∆2葡萄吡喃糖苷 o含量最
高达 x1th ~芦丁 !槲皮素 z2Ο2Β2∆2半乳吡喃糖苷 o
在此次分析中未在样品中检出 o而芦丁在本品化学
研究中曾分离得到 ≈t o槲皮素 z2Ο2Β2∆2半乳吡喃糖
苷在本属其他植物中亦有分离得到的报道 ≈v o因此
它们可能是本品中的微量成分 ∀测定结果表明 o不
同产地的植物样品其中黄酮成分含量及比例相差较
大 ∀
≈致谢 昆明涞章医药科技有限公司提供相关对照品
及实验仪器 ∀
≈参考文献
≈t 江苏新医学院 1中药大辞典 ≈ q上海 }上海科学技术出版
社 ot||z}w{|q
#y{vu#
第 vu卷第 uu期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uu
²√ °¨¥¨ µo ussz
∆ετερµ ινατιον οφ φλαϖονεσ ιν Ελσηολτζια βοδινιερι βψ ΗΠΛΧ
≤∞¤¬2¼∏± t o ƒ¬¤± u o ≤ ¬¤±2¬¬± u
(t. ∆επαρτµ εντ οφΧηεµ ιστρψ ανδ Βιοτεχηνολογψ, Ψυνναν Μινοριτψ Υνιϖερσιτψ, Κυνµ ινγ yxssvt, Χηινα;
u. Κυνµ ινγ Υνιϖερσιτψ οφ Σχιενχε ανδ Τεχηνολογψ, Κυνµ ινγ yxss|v, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ §¨ √¨¯²³¤± °≤ ° ·¨«²§©²µ·«¨ ° ¤¨¶∏µ¨° ±¨·²©©¯¤√²± ¶¨¬± Ελσηολτζια βοδινιεριq Μετηοδ : ±¤¯¼¶¬¶
º¤¶¦¤µµ¬¨§²∏·²± ≥«¬°¤§½∏≤ 2usts °≤ ¶¼¶·¨°q ׫¨ ¶¨³¤µ¤·¬²± º¤¶³¨ µ©²µ° §¨²± ª¬¯¨ ±·∞¬·¨±§2 ° ≤t{ ¦²¯∏°± kw1y °° ≅ uxs
°°ox Λ°loº¬·«° ·¨«¤±²¯ 2¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ 2s1uh ³«²¶³«²µ¬¦¤¦¬§¤¶°²¥¬¯¨ ³«¤¶¨o¤±§·«¨ ©¯²º µ¤·¨º¤¶t1s °# °¬±pt ¤±§·«¨ §¨ ·¨¦·¬√¨
º¤√¨¯ ±¨ª·«º¤¶u{s ±°q Ρ εσυλτ: ª²²§ ¬¯± ¤¨µµ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³ ¤±§·«¨ ° ¤¨± µ¨¦²√ µ¨¼ º¤¶©²∏±§ º¬·«¬± ·«¨ µ¤±ª¨ q Χονχλυσιον: ׫¬¶
° ·¨«²§¬¶µ¤³¬§o¶¬°³¯¨¤±§¤¦¦∏µ¤·¨q
[ Κεψ ωορδσ] ©¯¤√²± ¶¨~ Ελσηολτζια βοδινιερι~ °≤
≈责任编辑 牛泽宇
≈收稿日期 ussy2tu2u{
≈基金项目 江苏省高校自然科学研究计划项目 ksv⁄vxssuyl
≈通讯作者 3 王俊 oר¯}ksxttlxyv|y|zo∞2°¤¬¯}º¤±ª∏±¶
·²°q¦²°
槲寄生多糖的提取分离和含量测定
王 俊 3 o朱一凡
k江苏科技大学 生物与环境工程学院 o江苏 镇江 utust{l
≈摘要 目的 }对国产槲寄生中的有效成分多糖进行提取分离和含量测定 ∀方法 }采用热水提取法提取槲寄
生多糖 o超滤膜分离 2离子交换色谱法分离纯化多糖组分 ~槲寄生多糖经苯酚 2硫酸显色后 o在 w|s ±°处进行比色测
定 ∀结果 }槲寄生药材 !槲寄生粗多糖 ≤∂ °≥2¶和槲寄生精制多糖 ≤∂ °≥2¶ 2≤中的多糖含量分别为 w1|vh k ≥⁄
t1swh oν vlowv1u{h k ≥⁄ t1v|h oν vl和 y|1xxh k ≥⁄ t1yuh oν vlo平均回收率为 |y1szh k ≥⁄ u1xwh o
ν xl∀结论 }该法简便 !快速 !准确 !灵敏度好 ∀
≈关键词 槲寄生 ~多糖 ~提取分离 ~含量测定
≈中图分类号 u{wqt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusszluu2uv{z2sw
槲寄生为桑寄生科槲寄生属植物槲寄生 ςισχυµ
χολορατυµ k²°ql ¤®¤¬的干燥带叶茎枝 o性平 !味
苦 o具有祛风湿 !补肝肾 !强筋骨 !安胎作用 o用于治
疗风湿痹痛 !腰膝酸软 !胎动不安 ∀在欧洲 o白果槲
寄生 ς. αλβυµ 是古代的民间药物 o有神奇药草之
称 o其水提取物被用于治疗癌症 !高血压 !肝炎 !精神
抑郁症等疾病 o市场上已开发有 ¶¦¤§²µo∞∏µ¬¬²µo 2¨
¬¯¬²µo¶²µ¨ 等¯多种槲寄生提取物制剂 ≈t ∀随着研究
的深入 o分离得到的槲寄生多糖主要有高度酯化半
乳糖聚合物 ≈uov ! ∂ ≈w !中性多糖 k平均相对分子
质量约 v万 l及酸性多糖 ≈x !∂ °≥≈y 等多糖 o由阿拉
伯糖 !半乳糖 !葡萄糖 !鼠李糖 !糖醛酸组成 o并含有
少量木糖和甘露糖 ≈x ∀
药理研究表明 o白果槲寄生多糖提取物具有保
护动物免受放疗或化疗损伤的作用 ≈z ~白果槲寄生
多糖 k∂ °≥l及其中性组分 k∂ °≥2tl与小鼠腹腔巨噬
细胞共同培养 o均可显著增强其 ׃2Αo2t的分
泌 ≈y ~白果槲寄生多糖还具有细胞免疫和体液免疫
作用 o且与凝集素类毒蛋白的抗癌活性有关 o其作用
机制在研究中 ≈wox ∀我国槲寄生资源丰富 o但其生
化类药物开发基础薄弱 o因此加大我国本土槲寄生
活性成分的应用基础研究尤为迫切 ∀本研究首次对
#z{vu#
第 vu卷第 uu期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uu
²√ °¨¥¨ µo ussz