全 文 ：×≤t nt2µ澄清剂用于中药水提液澄清
张 萍 3 o吴月国 o刘 骅
k浙江省医学科学院 药物研究所 o浙江 杭州 vtsstvl
≈摘要 目的 }考察 ×≤t n t2µ澄清剂用于中药水提液的澄清效果 ∀方法 }采用 °≤和分光光度法 o以 uo
voxowχ2四羟基 2二苯乙烯 2u2Ο2Β2∆2葡萄糖 k二苯乙烯苷 lo总多糖和固形物含量为指标 o通过正交试验法 o考察澄清
剂用量 !药液浓度 !搅拌速度对澄清工艺的影响 ∀结果 }中药水提液的最佳澄清条件为 }澄清剂用量 xh o药液浓度
ktΒtslo搅拌速度 tss µ# °¬±pt ∀结论 }与传统水提醇沉法比较 o×≤t n t2µ澄清剂澄清工艺能保留水提液中大部
分指标成分 o且操作简单 !安全 ∀ ×≤t n t2µ澄清剂作为絮凝澄清剂可用于精制中药水提液 ∀
≈关键词 ×≤t n t2µ澄清剂 ~水提醇沉法 ~正交试验法
≈中图分类号 |wv ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusszlsu2sttv2sv
≈收稿日期 ussx2tt2s|
≈通讯作者 3 张萍 oר¯}ksxztl{{utxyvso∞2°¤¬¯}¶¤¯ ¼¯zytu
tyvq¦²°
中药复方制剂多采用水提醇沉工艺 o该工艺具
有澄清药液 !减少服用量等优点 ∀但该工艺在澄清
药液同时将中药中的一些醇不溶性的大分子如蛋白
质及部分多糖作为杂质除去 o而这些成分特别是多
糖通过药理学 !免疫学及临床研究表明具有调节免
疫作用和广泛的生理活性 ∀
絮凝澄清法是在混悬的中药提取液中加入一种
澄清剂以吸附架桥和电中和方式除去溶液中的粗粒
子 o以达到分离纯化目的的一种方法 o×≤t n t2µ澄
清剂是一种较好的絮凝澄清剂 ≈t2v ∀
作者以中药水提液作为研究对象 o此水提液为
中药复方制剂 o以何首乌 !黄芪 !菟丝子 !枸杞子 !山
药作为主药 o药理活性物质以多糖和首乌中含有的
苷类化合物 k如二苯乙烯苷等 l为主 o故以 uovoxo
wχ2四羟基 2二苯乙烯 2u2Ο2Β2∆2葡萄糖 k二苯乙烯
苷 lo总多糖和干膏收率含量为指标 o采用正交试验
法 o探索 ×≤t nt澄清剂的絮凝澄清效果 ∀
1 仪器与试药
高效液相色谱仪 kª¬¯¨ ±·ttss ≥ µ¨¬¨µ¶型 lo旋转
蒸发器 ∞ p xuk上海亚荣生化仪器厂 lo×y新世
纪紫外可见分光光度计 k北京普析通用仪器有限责
任公司 lo电热恒温水浴锅 k上海医疗器械五厂 lo
⁄ p|tuv型电热恒温鼓风干燥箱 k上海精宏实
验设备有限公司 lo×vu{分析天平 k上海天平仪
器厂 l∀
二苯乙烯苷对照品 k中国药品生物制品检定
所 o批号 s{ww2ussssvl~药材何首乌 !黄芪 !菟丝子 !
枸杞子 !山药均购于胡庆余堂 o经刘骅副研究员鉴定
符合 5中国药典 6ussx年版标准 ~×≤t n t2µ天然澄
清剂 k津卫食准字 ≈tus 第 vx{{2t号 o购于天津正天
成澄清技术有限公司 lo流动相所用试剂为色谱纯 o
其他试剂均为分析纯 ∀
澄清剂溶液的制备 采用 ×≤t n t2µ天然澄
清剂 o按说明书配制 ∀ 组分溶液 }称取 s1xss ª
组分溶液细粉 o先用少量水搅拌成糊状 o再加水调至
xs °o溶胀 uw «∀搅拌 o双层纱布滤过 o即得 th黏
胶液 ∀
组分溶液 }称取 s1xss ª
组分溶液细粉 o
用少量 th乙酸溶液溶解并搅拌成糊状 o然后加 th
醋酸溶液调至 xs °o溶胀 uw «∀搅拌 o双层纱布滤
过 o即得 th黏胶液 ∀
2 方法与结果
211 干膏收率的测定 精取供试液 x °o置已干
燥至恒重的蒸发皿中 o水浴蒸干 o残渣放入烘箱中
tsx ε 烘 v «o取出 o置干燥器中放置 vs °¬±后称重 o
计算干膏收率 ∀
2q2 总多糖含量的测定
2q2q1 葡聚糖标准液的制备 精密称取 tsx ε 干
燥至恒重的标准品 ts1s °ªo置 tss °量瓶中 o加
水适量使溶解 o稀释至刻度 o摇匀即得 ∀
2q2q2 标准曲线的制备 精密吸取葡聚糖标准液
s1tos1uos1vos1wos1xos1yos1zos1{ °o分别置于
具塞试管中 o各加蒸馏水使成 u °o再加苯酚试液 t
#vtt#
第 vu卷第 u期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ u
¤±∏¤µ¼o ussz
°o摇匀 o迅速滴加浓硫酸 x °o静置 x °¬±后放入
沸水浴中反应 tx °¬±o取出 o冷却至室温 o在 w|s ±°
波长处测得其吸光度 ∀以吸光度 kΑl为纵坐标 o浓
度 kΧl为横坐标 o绘制标准曲线 o得回归方程为 Α
s1syy v n s1sty tΧoρ s1||| w∀溶液中多糖质量
浓度在 x ∗ ws Λª# °pt线性关系良好 ∀
2q2q3 样品溶液的测定 精密吸取 t °药液 o加
蒸馏水至 ts °溶解后 o再加 ws °无水乙醇 o静置
醇沉 vs °¬±o离心 o弃上清液 ∀沉淀加少量水溶解 o
移入 uxs °量瓶 o并稀释至刻度 o备用 ∀吸取样品
溶液 s1x °o置 ts °试管中 o加水使成 u1s °o加
t °苯酚试液 o摇匀 o迅速滴加 x °浓硫酸 o静置 x
°¬±后放入沸水浴中反应 tx °¬±o取出 o冷却至室
温 o在 w|s ±°波长处测得其吸光度 ∀
2q3 二苯乙烯苷的含量测定 ≈w
2q3q1 色谱条件与系统适用性试验 ª¬¯¨ ±·½²µ¥2
¤¬ ¦¨¯¬³¶¨ ÷⁄
~≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ uxs °°ox
Λ°l~流动相乙腈 2水溶液 kuxΒzxl~检测波长 vus
±°~柱温 vz1x ε ~理论板数按 uovoxowχ2四羟基二苯
乙烯 2u2Ο2Β2∆2葡萄糖苷峰计算不低于 u sss∀
2q3q2 对照品溶液的制备 精密称取 uovoxowχ2四羟
基二苯乙烯 2u2Ο2Β2∆2葡萄糖苷对照品 v1sx °ªo加水
溶解 !定容至 ux °棕色量瓶中 o作为对照品溶液 ∀
2q3q3 供试品溶液的制备 吸取 t °药液 o加 w
°水 o加乙醇定容至 ts °o离心 o取上清液过 s1wx
Λ°微孔滤膜 o作为供试品溶液 ∀
2q3q4 测定法 精密吸取对照品溶液与供试品溶
液各 ts Λo注入液相色谱仪 o测定 o即得 ∀
214 澄清条件优选 测得药液的 ³约为 x1xo确
定加入方式为先加
组分后加 组分 o比例为 tΒ
to溶液温度为 zs ε ∀对澄清剂用量 o提取液浓度
和搅拌速度 v个影响因素按 | kvw l正交表安排试
验 ∀见表 t∀取上述样品 tss °按前述的方法处
理并测定含量 ∀正交设计结果综合评分 ≈x o结果
见表 u∀
表 t 因素与水平
水平
Α
澄清剂用量
rh
Β
药液配比
Χ
搅拌速度
rµ# °¬±pt
t u tΒu xs
u x tΒx tss
v ts tΒts txs
表 u 正交设计结果综合评分
²q 二苯乙烯苷
tl
rª
总多糖 tl
rª
干膏收率 tl
rh 综合评分
ul
t s1yss tz1uzw vs1wu zz1|u
u s1zsy t|1uxv vx1{x |s1y|
v s1yuv t{1{|t vw1|{ {u1z{
w s1y|v tz1z|s vu1su {z1s|
x s1zv| us1y{| vx1wx |w1{x
y s1z{| us1v|| vv1y{ |{1w{
z s1zxz tx1|uv vs1s| |s1w{
{ s1zs{ t|1vux vx1{s |s1|u
| s1zx| ut1vu| vw1zw |z1sv
注 }tl t个处方量药材中的含量 ~ ul二苯乙烯苷含量评分 二苯
乙烯苷含量 r最大二苯乙烯苷含量 ≅ s1z ≅ tss~总多糖含量评分 总
多糖含量 r最大总多糖含量 ≅ s1u ≅ tss~干膏收率评分 干膏收率 r
最大干膏收率 ≅ s1t ≅ tss~综合评分 二苯乙烯苷含量评分 n总多
糖含量评分 p干膏收率评分
2q5 结果分析 由表 t可看出 o由综合评分数据的
极差大小显示各因素作用主次为 Α Β Χo最佳工
艺条件为 ΒuΑv Χu o即澄清剂用量 xh o药液浓度 tΒ
tso搅拌速度 tss µ# °¬±pt ∀
216 验证实验 称取药 v份 o分别按最佳条件进
行 ∀测得 v份样品中干膏收率分别为 vu1uwh o
vt1xzh ovt1yyh o ≥⁄ t1twh ~多糖含量分别为
us1zz out1vyous1{t ªo ≥⁄ t1xzh ~二苯乙烯苷含
量分别为 s1z{yos1zzzos1z|v ªo ≥⁄ t1suh ∀
217 不同澄清工艺的含量比较 ≈y 取 tΒu的浓缩
液 tss °o加乙醇使含醇量达到 yxh o静置 w{ «o过
滤 o滤液浓缩至无醇味 o再用水调整至 tss °o作为
水醇法样品备用 ∀取 tΒts的浓缩液 tss °o加热
至 zs ε o分别加入一定量的 ×≤t n t2µ澄清剂溶
液 o搅拌速度 tss µ# °¬±pt o摇匀 o静置 vs °¬±后 o
u sss µ# °¬±pt离心 ts °¬±o取上清液定容至 tss
°o作为供试品备用 ∀另取 tΒu的浓缩液 o按样品
测定方法进行含量测定 ∀结果见表 v∀
表 v 不同澄清工艺的含量比较 kν vl
澄清工艺
二苯乙烯苷
rª
保留率
rh
总多糖
r°ª
保留率
rh
水提液 s1|yz tss u|1yu tss
水提醇沉液 s1ztv zv1z y1v| ut1y
澄清剂处理液 s1z{x {t1u us1|{ zs1{
由对比试验可知 o水提醇沉后 o二苯乙烯苷保留
率为 zv1zh o而总多糖保留率仅为 ut1yh ~经澄清
剂处理的水提液 o二苯乙烯苷保留率为 {t1uh o而
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第 vu卷第 u期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ u
¤±∏¤µ¼o ussz
总多糖保留率为 zs1{h ∀
3 讨论
通过正交试验优选澄清工艺的条件 o结果表明 }澄
清剂用量 xh o药液浓度 tΒtso搅拌速度 tss µ# °¬±pt ∀
水提醇沉后 o二苯乙烯苷保留率为 zv1zh o而
总多糖保留率仅为 ut1yh o说明水提醇沉后总多糖
被大量除去 ~经澄清剂处理的水提液 o二苯乙烯苷保
留率为 {t1uh o与醇沉法较为接近 o而总多糖保留
率为 zs1{h o比醇沉法提高了 v1x倍 ∀应用 ×≤t n
t2µ澄清剂处理后 o二苯乙烯苷与总多糖的保留率
都较高 o因此 ×≤t nt2µ天然澄清剂用于复方中药
煎液的澄清工艺是可行的 ∀
≈参考文献
≈t 程 志 o王波云 o于 洋 q吸附澄清剂在中药提取液中的应用
≈ q河北中医药学报 oussvot{kul}uzq
≈u 颜 红 q天然澄清剂在中药水提液澄清工艺中的应用 ≈ q中
医药导报 oussxottktl}{sq
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艺 ≈ q中国医院药学杂志 ousswouwkttl}yyzq
≈y 姜合田 o王瑞成 o王有强 q×≤t n t天然澄清剂与乙醇用于银
黄口服液除杂质的对比研究 ≈ q山东医药工业 oussvouukxl}
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Χλαριφψινγ εφφεχτ οφ ΖΤΧt nt2µ χλαριφψιχαντ φορ δεχοχτιον οφ
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(Ινστιτυτε οφΜατερια Μεδιχα, Ζηεϕιανγ Αχαδεµ ψ οφΜεδιχαλΣχιενχεσ, Ηανγζηου vtsstv, Χηινα)
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[ Κεψ ωορδσ] ×≤t n t2µ ¦¯¤µ¬©¬¦¤±·~ §¨ ¦²¦·¬²± ¤±§¤¯¦²«²¯ ¶¨§¬° ±¨·¤·¬²± ·¨¦«±¬´∏¨ ~ ²µ·«²ª²±¤¯ ·¨¶·§¨ ¶¬ª±
≈责任编辑 鲍 雷
ussz年全国中药学术研讨会暨第八届全国中药鉴定学术研讨会征文通知
中华中医药学会中药鉴定分会和中国中西医结合学会中药专业委员会定于 ussz年 {月在湖南长沙市召开 / ussz年全国
中药学术研讨会暨第八届全国中药鉴定学术研讨会 0 ∀
征文内容包括 }t1有关中药鉴定学的研究进展及评述 ∀ u1中药鉴定新方法 !新技术 !新思路 !新观点 ∀ v1中药品种考证
及相关内容 ∀ w1中药质量标准研究 !品质评价新思路与方法 ∀ x1中药资源可持续利用的关键技术研究 ∀ x1中药药效机理及
配伍规律研究 ∀ yq中药安全性评价 !药代动力学研究 ∀ z1中药药性理论及本草文献学研究 ∀ {1分子生物学技术 !信息技术 !
生物工程技术在中药现代化研究中的应用等 ∀ |15中药鉴定学 6等中药教学方法 !教学手段 !教学改革等方面的论文 ∀
论文要求 ~所投稿件为尚未公开发表的新论文 o并在首页右上角注明中药鉴定研讨会稿件字样 ∀稿件用 • ²µ§文档 w版
面 ox号宋体字 o另附 wss字以内的摘要 k最好有英文摘要 l及关键词 ∀论文征集截止日期 ussz年 x月 t日 ∀
联系人 }湖南中医药大学药学院中药鉴定教研室 }刘塔斯 !潘清平 !肖冰梅 ∀
联系地址 }湖南省长沙市韶山中路 ttv号 o邮政编码 }wtssszo电话 }szvt2{wx{uvwk l~tvsvyz|wwusotv|zw{t{svy∀传真 }
szvt2{wx{uuzo∞2°¤¬¯}ª¤¯ |¨{{{ tyv1¦²°~ ¬¯∏·¤¶¬ tuy1¦²°∀
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第 vu卷第 u期
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