全 文 ：°≤测定独一味中木犀草素苷的含量
丁广治 t o王智民 u 3 o王维皓 u o高慧敏 u
kt1西北农林科技大学 生命学院 o陕西 杨陵 ztutss~
u1中国中医科学院 中药研究所 o北京 tsszssl
≈收稿日期 ussx2sw2u|
≈基金 项 目 / {yv 0 创 新 药 物 和 中 药 现 代 化 项 目
kusswuuvzvs2tyl
≈通讯作者 3 王智民 oר¯}kstsl{wstwtu{o∞2°¤¬¯}½«°ºtuv
uyv1± ·¨
独一味 Λαµ ιοπηλοµ ισροτατε k
±¨·«1l ∏§²为唇
形科独一味属 Λαµ ιοπηλοµ ισ仅有的一种植物 o早在
t sss多年前的藏医学名著 5四部医典 6和 5晶珠本
草 6中已有记载 o是藏药中的主要药物 o藏医将其用
于骨髓炎 !关节黄水病 !骨折 !跌伤 !枪伤 !筋骨疼痛 !
跌打瘀痛等 ≈t ∀经现代临床医学证明其具有较好
的止血 !镇痛 !活血化瘀 !抗菌消炎 !抑菌作用和显著
提高免疫系统的功能 ≈u ∀独一味的有效成分主要
包括以木犀草素苷为代表的黄酮苷和环烯醚萜苷
类 o由于黄酮类成分的药理作用与独一味的临床应
用具有一定的相关性 o为更好的控制药材及成药的
质量 o本研究对独一味中的固有成分木犀草素苷进
行了含量测定研究 o为建立独一味药材及其制剂的
标准提供参考 ∀
1 仪器与试药
ª¬¯¨ ±·ttss高效液相色谱仪 ~± p uxs
超声
仪 k昆山市超声仪器有限公司 l~木犀草素苷对照品
kvχowχox2三羟基 2黄酮 2z2Ο2Β2∆葡萄糖苷 l由本实验
室自制 o纯度 |{h ~独一味药材采于青海 !四川和甘
肃 o由中国中医科学院中药研究所生药室何希荣主
管技师鉴定 ∀所有试剂均为色谱纯 ∀
2 方法与结果
211 色谱条件
°«¨ ±²° ±¨ ¬¨ ∏±¤ ≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ uxs
°°ox Λ°lo流动相甲醇 2水 2磷酸 kwsΒysΒs1wlo流速
t °# °¬±pt o柱温 ux ε o检测波长 vys ±° ∀理论
塔板数按木犀草素苷峰计算大于 v sss∀独一味药
材及对照品高效液相色谱图如图 t∀
212 对照品溶液的制备
图 t 独一味药材 °≤图
1对照品 ~
1药材 ~t1木犀草素苷
精密称取木犀草素苷对照品 x1sw °ªo加甲醇
制成浓度为 s1tss { °ª# °pt的溶液 o作为对照品
溶液 ∀
213 线性关系考察
精密称取木犀草素苷对照品溶液 x1sw °ªo置
xs °量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o摇匀 o配成浓度
为 s1tss { °ª# °pt的溶液 ∀分别精密吸取 uowo
yo{otsotu Λ注入高效液相色谱仪 o测定 ∀以木犀
草素苷进样量 kΛªl为横坐标 kΞ) ,木犀草素苷峰面
积为纵坐标 (Ψlo进行线性回归 o得回归方程为 Ψ
{ys1xvsΞ p x1yzv, ρ s1||| |o表明木犀草素苷在
s1ust y ∗ t1us| y Λª与峰面积呈良好的线性关系 ∀
214 药材供试品溶液的制备
21411 提取方法的选择 取独一味药材 k过 ws目
筛 l约 t1s ªo共 |份 o精密称定 o按表 | kvw l正交设
计表 o以木犀草素苷含量为指标 o考虑到苷类化合物
的性质 o考察提取溶剂 !溶剂用量 !提取时间 v个因
素对独一味药材样品中木犀草素苷的影响 o见表 to
u∀
表 t 因素水平
水平
Α
提取溶剂
Β
溶剂用量
r倍
Χ
提取时间
r°¬±
t 水 ws vs
u 甲醇 ys wx
v xsh甲醇 {s ys
#yz#
第 vu卷第 t期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ t
¤±∏¤µ¼o ussz
表 u 正交试验结果
²q 木犀草素苷 tl ²q 木犀草素苷 tl
t tvuqs y wxwq{
u tvuq{ z wxwqx
v tuyqx { xuyqy
w vz|qv | xv|q{
x wvyqx
注 }tl折算峰面积数据
直观分析 Α, Β因素的 v水平 , Χ因素的 t水平
最佳 ;方差分析 Α因素的 v个水平有显著性差异 ,且
v水平最高 , Β, Χ因素各水平间无显著性差异 ,可选
节省溶剂与超声时间条件 ,因此最佳提取方法为 Αv
ΒtΧt o即 xsh甲醇 ws °o超声提取 vs °¬±∀
21412 供试品溶液的制备方法 取独一味药材
k过 ws目筛 l约 t1s ªo精密称定 o置具塞锥形瓶中 o
精密加 ws倍量的 xsh 甲醇 o称重 o超声处理 vs
°¬±o放冷 o称重 o用 xsh甲醇补足失重 o摇匀 o静置 o
精密量取上清液 u °o置于 ts °量瓶中 o用甲醇
定容至刻度 o过 s1wx Λ°微孔滤膜即得 ∀
215 精密度试验
取同一供试品溶液 k产地甘肃 lo进样 ts Λo重
复进样 y次 o记录峰面积 o平均值为 wvt1yo ≥⁄为
t1v{h ∀
216 重复性试验
取独一味药材 k产地甘肃 lo按供试品制备项下
平行操作 y份 o进样 ts Λo记录峰面积 o计算 o平均
质量分数为 x1tt °ª# ªpt o ≥⁄为 t1ysh ∀
217 稳定性试验
取新制备的供试品溶液 o分别于制备后 souowo
{otuouw «进样测定 o木犀草素苷峰面积的 ≥⁄为
t1v{h o说明样品溶液中木犀草素苷在 uw «内的稳
定性良好 ∀
218 加样回收率试验
取独一味药材 k产地甘肃 l样品 y份 o每份约
s1x ªo精密称定 o根据 ussx年版 5中国药典 6规定 o
分别精密加入样品浓度的 zxh otssh otuxh v个含
量的木犀草素苷对照品 o每个含量平行做 u份 o按供
试品溶液制备方法制备样品溶液 o进样测定 o计算各
自的回收率和 ≥⁄∀结果见表 v∀
219 药材的含量测定
共收集了 ts个不同产地的独一味药材 o将上述
ts个产地的药材分别粉碎 o过 ws目筛 o制备供试品
溶液 o进行含量测定 o结果见表 w∀
表 v 木犀草素苷加样回收率 kν ul
样品中含量
r°ª
加入量
r°ª
测得值
r°ª
回收率
rh
平均值
rh
≥⁄
rh
uqxx tq|u wqwv ||qtt
uqxy tq|u wqwy ||qxx
uqxx uqxy xqux tsuqzw tssq|z tqwz
uqxx uqxy xqtv tssqv|
uqxy vqt| xq{y tstq|t
uqxy vqt| xq{z tsuqs|
表 w 独一味药材中木犀草素苷含量
²1 样品产地 木犀草素苷 r h
t
u
v
w
x
y
z
{
|
ts
甘肃玛曲阿万仓
甘肃玛曲齐合玛
甘肃碌曲
甘肃市售
青海玛多县
青海甘德县
青海久治县
青海市售
四川阿坝县
四川市售
s1t|
s1ws
s1w{
s1vy
s1ys
s1w{
s1zv
s1uv
s1y|
s1xt
3 讨论
311 药材不同粉碎粒度的比较 筛选独一味药材粉
碎粒度时取独一味样品 v份 o分别粉碎为 usowso{s目
粉末 o取 t1s ªo精密称定 ∀分别精密加入甲醇 ux °o
称重 o超声提取 vs °¬±o放冷 o用甲醇补足失重 o摇匀 o静
置 o精密量取上清液 u °o置于 ts °量瓶中 o用甲醇
定容至刻度 o过 s1wx Λ°微孔滤膜 o取续滤液 ts Λ进
样 o测定木犀草素苷的含量 ∀结果分别为 t1xyov1zuo
v1z| °ª# ªpt ∀药材粒度为 ws目与 {s目时 o提取率较
高 ows目与 {s目对木犀草素苷的提取效率几乎无差
别 o因此选择药材粉碎过 ws目筛 ∀
312 提取溶剂的考察 作者对甲醇体积分数进行了
单因素考察 o分别考察了 souxh oxsh ozxh otssh 不
同甲醇体积分数 o试验结果显示 xsh 甲醇提取率最
高 o为了使提取方法正交试验既说明问题又简单可行 o
甲醇体积分数选择了 soxsh 和 tssh ∀
313 不同产地独一味中木犀草素苷的质量分数为
s1t|h ∗ s1zvh o根据本研究建议独一味药材中的
木犀草素苷含量不小于 s1vxh ∀
≈参考文献
≈t 中国科学院中国植物志编辑委员会 1中国植物志 ≈ 1北京 }
科学出版社 ot|{uo yxkul}w{s1
≈u 易进海 o钟炽昌 o罗泽渊 o等 1糙苏属和独一味属植物的化学
成分及分类学的意义 ≈ 1中草药 1 t||uouvkzl}v{u1
≈责任编辑 鲍 雷
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