全 文 ：［参考文献］
［１］ 张 璐．千金方衍义［Ｍ］．北京：中国中医药出版社，１９９５：２２０．
［２］ 张 政．苦参汤新用举偶［Ｊ］．陕西中医，１９９８，１９（４）：１７５．
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［５］ 王新宏，安 睿，邹 云，等．数字化色谱指纹谱技术在双黄连
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ＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｏｆＫｕｓｈｅｎＴａｎｇａｎｄｉｔｓｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｔｏ
ＳｃｕｔｅｌａｒｉａｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓａｎｄＳｏｐｈｏｒａｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ
ＬＩＵＢｉｎ，ＳＨＩＲｅｎｂｉｎｇ，ＺＨＵＬｉｊｕｎ
（ＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１０２，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆｔｈｅｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｏｆＫｕｓｈｅｎＴａｎｇ，ａｎｄｔｏｓｔｕｄｙｉｔｓｃｏｒｅｌａｔｉｏｎｔｏ
ＳｃｕｔｅｌａｒｉａｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓａｎｄＳｏｐｈｏｒａｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｏｆｔｈｅｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｏｆＫｕｓｈｅｎＴａｎｇｗｅｒｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙＨＰＬＣ
ｕｎｄｅｒｔｗｏｄｅｔｅｃｔｉｖｅｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｓ２８０ｎｍａｎｄ３６５ｎｍ．ＴｈｅｃｏｒｅｌａｔｉｏｎｅｘｉｓｔｅｄｉｎｔｈｅｃｏｍｍｏｎｐｅａｋｓｏｆＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆＫｕｓｈｅｎＴａｎｇ
ａｎｄｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅｍｅｔｅｒｉａｍｅｄｉｃｉｎｅｓｗｈｉｃｈｃｏｍｐｏｓｅｄｔｈｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｗａｓｅｘｐｌｏｒｅｄｂｙａｎａｌｙｚｉｎｇｔｈｅＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｍ
ｐａｔｉｂｉｌｉｔｉｅｓ．Ｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗｈｉｃｈｔｈｅｃｏｍｍｏｎｐｅａｋｓｓｔｏｏｄｆｏｒｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙａｄｄｉｎｇｃｏｎｔｒｏｌｓｔｏｔｈｅｓａｍｐｌｅｓｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
Ｒｅｓｕｌｔ：Ｕｎｄｅｒｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｖｅｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ２８０ｎｍ，１９ｃｏｍｍｏｎｐｅａｋｓｗｅｒｅｆｏｕｎｄ，ｗｈｉｃｈｃａｍｅｆｒｏｍＳ．ｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓｅｘｃｅｐｔｔｈａｔｔｗｏｐｅａｋｓ
ｃａｍｅｆｒｏｍＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ，ａｎｄｅｉｇｈｔｐｅａｋｓｗｅｒｅｂａｉｃａｌｉｎ／ｔｒｉｆｏｌｉｒｈｉｚｉｎ，ｗｏｇｏｎｏｓｉｄｅ，ｌｕｔｅｏｌｉｎ，ｂａｉｃａｌｅｉｎ，ｏｒｏｘｙｌｉｎＡ，５，８ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ６，７
ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｆｌａｖｏｎｅ，ｗｏｇｏｎｉｎａｎｄｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ／ｃｈｒｙｓｉｎｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｖｅｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ３６５ｎｍ，２２ｃｏｍｍｏｎｐｅａｋｓｗｅｒｅ
ｆｏｕｎｄ，ｗｈｉｃｈｔｈｉｒｔｅｅｎｐｅａｋｓｃａｍｅｆｒｏｍＳ．ｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓａｎｄｓｉｘｐｅａｋｓｃａｍｅｆｒｏｍＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ．Ａｍｏｎｇｔｈｅｍ，ｅｌｅｖｅｎｐｅａｋｓｗｅｒｅｂａｉｃａ
ｌｉｎ，ｗｏｇｏｎｏｓｉｄｅ，ｂａｉｃａｌｅｉｎ，ｏｒｏｘｙｌｉｎＡ，５，８ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ６，７ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｆｌａｖｏｎｅ，ｗｏｇｏｎｉｎ，ｃｈｒｙｓｉｎ／７ｍｅｔｈｏｘｙｆｌａｖｏｎｅ，２′，４ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ
４′，６′ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｃｈａｌｃｏｎｅ，４，４′ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｃｈａｌｃｏｎｅ，ｘａｎｔｈｏｈｕｍｏｌａｎｄｋｕｒａｒｉｄｉｎｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｃｏｍｍｏｎｐｅａｋｓｏｆ
ＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆｔｈｅｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｏｆＫｕｓｈｅｎＴａｎｇ，ｗｈｉｃｈｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｕｎｄｅｒｔｈｅｔｗｏｄｅｔｅｃｔｉｖｅｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｓ２８０ｎｍａｎｄ３６５ｎｍ，
ｃａｍｅｆｒｏｍＳ．ｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓａｎｄＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ．ＩｔｗａｓｍｏｒｅｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃａｎｄｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｔｈａｔｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇｔｈｅＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆｔｈｅｆｌａ
ｖｏｎｏｉｄｓｏｆＫｕｓｈｅｎＴａｎｇｕｎｄｅｒｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｖｅｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ３６５ｎｍ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ＫｕｓｈｅｎＴａｎｇ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ；Ｓｃｕｔｅｌａｒｉａｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓ；Ｓｏｐｈｏｒａｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ ［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００６０７１９
［通讯作者］ 张启伟，Ｔｅｌ：（０１０）６４０１４４１１２８４８，Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｑｗ１９５５＠１６３．ｃｏｍ
ＨＰＬＣ测定胆南星中猪去氧胆酸的含量
赫 炎１，张永欣２，赵惠东２，张启伟２
（１中国中医科学院 中医临床基础研究所，北京 １００７００；
２中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［摘要］ 目的：建立胆南星中猪去氧胆酸含量测定方法，为其质量控制提供方法。方法：用ＨＰＬＣ蒸发光散射
检测测定样品的猪去氧胆酸含量。色谱和检测条件：ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），柱温３５℃；流
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第３２卷第１６期
２００７年８月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １６
Ａｕｇｕｓｔ，２００７
动相甲醇水冰醋酸（７５∶２５∶００１），流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１；漂移管温度８５℃，空气流速３０Ｌ·ｍｉｎ－１。结果：猪去氧胆
酸进样量在２４～２４μｇ，进样量和峰面积的对数呈线性（ｒ＝０９９９８）。平均加样回收率为９７１％，ＲＳＤ３０％（ｎ＝
５）。结论：方法简便，测定准确，且重复性好，可用于胆南星的质量控制。
［关键词］ 胆南星；猪去氧胆酸；含量测定；ＨＰＬＣＥＬＳＤ
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１６１６３４０３
胆南星为天南星炮制品之一，系由制或生天南
星细粉与牛、羊或猪胆汁经加工炮制而成。胆汁制
南星，既可减低生南星毒副作用，又使其药性由温转
凉，变温化寒痰药为清化热痰、息风定惊之品。本草
认为治惊风有奇效。胆南星的原药材为天南星，其
药用物质基础研究很少，特别是与传统药效相对应
的化学成分尚不清楚。目前，胆南星疗效成分也不
完全清楚，尚无完整而准确地表述和控制胆南星药
用质量的统一化学成分指标。因此，需要从化学成
分的层面提供对胆南星进行质量控制方法和实验研
究的支持。
作为胆南星主要加工辅料胆汁，古代和现代文献
均对其药效作用给予重要评价，现代实验药理学研究
也报道胆汁具有一定镇静、安神，调节心血管系统作
用。作者在胆南星工艺比较研究中，也见到了胆汁在
镇静方面有一定的作用，因此胆汁酸含量的变化无疑
可以部分反映炮制品药用质量及炮制工艺的稳定性。
现市售胆南星多为用猪胆汁做辅料加工而成。作者
按《中国药典》胆南星项下的发酵及混合蒸制法的炮
制工艺，用猪胆汁分别实验研制胆南星炮制品，对其
猪去氧胆酸含量检测方法进行了研究，在此基础上进
行了含量测定，以期为炮制品控制提供方法。
１ 仪器与试药
ＨＰ１１００型单元泵和３３９５型积分仪；Ａｌｔｅｃｈ５００
型蒸发光散射检测器；空气发生器（北京汇龙公
司）；沙得利司 ２００４ＭＰ型电子半微量天平。甲醇
（色谱级），超纯水（本所制备），其他试剂均为分析
纯。猪去氧胆酸（含量≥９８％，Ｓｉｇｍａ公司）。
药材为掌叶半夏 ＰｉｎｅｌｉａｐｅｄａｔｉｓｅｃｔａＳｃｈｏｔ的块
茎，制南星 按《中国药典》制南星项下的炮制法制
备。胆南星 按《中国药典》胆南星项下的发酵法及
混合蒸制法炮制。猪胆汁由北京房山畜牧屠宰厂提
供猪胆囊中直接取出后得到。制南星细粉与猪胆汁
混合加入量比为１∶６。
２ 方法与结果
２．１ 测定方法 色谱条件：ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８色谱柱
（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），柱温３５℃；流动相甲醇
水冰醋酸（７５∶２５∶００１），流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１；蒸发
光散射检测器漂移管温度８５℃，空气流速３０Ｌ·
ｍｉｎ－１。在此条件下，猪去氧胆酸与其他组分均能达
到较好分离，见图１。
图１ 猪去氧胆酸和胆南星分离色谱图
Ａ．猪去氧胆酸；Ｂ．胆南星；１．猪去氧胆酸
２．２ 溶液的制备 对照品溶液：精密称取猪去氧胆酸
对照品１２ｍｇ，置１０ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解，稀释至刻
度，摇匀，即得（每１ｍＬ中含猪去氧胆酸１２ｍｇ）。
供试品溶液：取胆南星粉末约０５ｇ，精密称定，
置５０ｍＬ三角瓶中，准确加入甲醇２０ｍＬ，称重，水
浴回流４５ｍｉｎ，放至室温，补至原重，摇匀滤过，取续
滤液（必要时适当浓缩，过滤）供色谱分析用。
２．３ 方法评价 精密度试验：取供试品溶液连续进
样５次，进样量１０μＬ，测定峰面积。猪去氧胆酸峰
面积的ＲＳＤ为１２％。
线性关系考察：精密称取猪去氧胆酸对照品
１２７８ｍｇ，用甲醇溶解，定容于１０ｍＬ量瓶中。分别
进样２，５，１０，１５，２０μＬ，测定峰面积。以猪去氧胆
酸进样量的对数为横坐标，以峰面积的对数为纵坐
标，得回归方程：ｌｏｇＡ＝１４６０８ｌｏｇｍ＋５４５０２，ｒ＝
０９９９８。对照品进样量在２４～２４μｇ，进样量的对
数与峰面积的对数呈线性。由于截距较大，采用外
标两点法定量。
样品溶液的稳定性：取新鲜制备的供试品溶液，
室温放置，于０，１，２，３，４，５，２４ｈ测定，含量的 ＲＳＤ
为１６％。
重复性试验：对同一批样品平行取样５份，进行
测定，计算含量的ＲＳＤ为０５３％。
回收率试验：取已知含量样品约０２５ｇ，精密称
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定，共５份。分别加入猪去氧胆酸对照品甲醇溶液
５ｍＬ（２３９１２ｍｇ·ｍＬ－１），再精密加入甲醇１５ｍＬ，
依供试品溶液制备方法操作。测定猪去氧胆酸，计
算回收率，结果见表１。
表１ 猪去氧胆酸加样回收率
称样量
／ｍｇ
样品中含量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
２５２１０ １２０３ ２４２２ １０１９ ９７１ ２．９
２５１０３ １１９８ ２３６３ ９７４
２５１３７ １２００ ２３３５ ９４９
２５３８５ １２１１ ２３５４ ９５６
２５０５９ １１９６ ２３３９ ９５６
注：加入量均为１１９６ｍｇ
２．４ 样品测定
精密取对照品溶液 ５，１０μＬ与供试品溶液
１０～２５μＬ进样，测定发酵法和混合蒸制法制品的３
批样品，结果见表２。
表２ ３批样品测定
样品名称 猪去氧胆酸／％
药典发酵法 ４３８
蒸法１ １７９
蒸法２ ０５４
猪胆汁 ０７２
３ 讨论
猪胆汁中的胆汁酸多以结合的形式存在，即主
要以甘氨猪去氧胆酸存在，但市场上很难得到对照
品。另外考虑到结合胆汁酸水解需在２０％氢氧化
钠、１２０℃条件下完成，这步操作在实际的质量控制
工作中不易实现，因此测定了胆南星中游离的猪去
氧胆酸。
本测定方法是在参考文献［１，２］的基础上，经在
所选色谱条件下注入胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸对
照品，证明在本系统中可以把猪去氧胆酸与上述常见
到胆汁酸分离，并且取制南星和生南星按供试品溶液
和样品测定项下提取分析，在猪去氧胆酸出峰的位置
无干扰，因此所建立的方法具有较强的专属性。
若实际检测样品的的猪去氧胆酸含量较低，如
按混合蒸炮制所得样品，可将甲醇提取液浓缩５倍
后进样。
本实验结果中，２种不同制法所得样品含量差
异较大，提示样品的发酵过程可能促进游离猪去氧
胆酸的形成。其中发酵法所得样品虽然游离的猪去
氧胆酸含量较高，但２种方法所得制品的药用质量
比较，还有待于进一步的药效和毒理学实验检测。
［参考文献］
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ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃｈｙｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄｉｎＢｉｌｅＡｒｉｓａｅｍａｂｙＨＰＬＣＥＬＳＤ
ＨＥＹａｎ，ＺＨＡＮＧＹｏｎｇｘｉｎ，ＺＨＡＯＨｕｉｄｏｎｇ，ＺＨＡＮＧＱｉｗｅｉ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｖｅｌｏｐａｎＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｈｙｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄｉｎＢｉｌｅＡｒｉｓａｅｍａ．Ｍｅｔｈｏｄ：
ＴｈｅｍｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｗｅｒｅｓｅｐａｒａｔｅｄｏｎａＤｉａｍｏｎｓｉｌＯＤＳｃｏｌｕｍｎｅｌｕｔｅｄａｔ３５℃ ｗｉｔｈａｍｉｘｔｕｒｅｏｆｍｅｔｈａｎｏｌｗａｔｅｒｇｌａｃｉａｌａｃｅｔｉｃａｃｉｄ
（７５∶２５∶００１）ａｔｆｌｏｗｒａｔｅ１０ｍＬ·ｍｉｎ－１．ＴｈｅｄｒｉｆｔｔｕｂｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆＥＬＳＤｗａｓ８５℃，ａｎｄｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｏｆａｉｒｗａｓ３０Ｌ·
ｍｉｎ－１．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｈｙｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄｉｎｍｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｗａｓｗｅｌｓｅｐａｒａｔｅｄ，ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｏｆｌｏｇａｒｉｔｈｍｓｏｆｉｎｊｅｃｔｉｏｎａｍｏｕｎｔａｎｄ
ｐｅａｋａｒｅａｗａｓｌｉｎｅａｒ（ｒ＝０９９９８）ｏｖｅｒｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ２４２４μｇ．Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ９７１％ （ＲＳＤ２９％，ｎ＝５）．Ｃｏｎｃｌｕ
ｓｉｏｎ：ＴｈｅｍｅｔｈｏｄｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄｆｏｒｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＢｉｌｅＡｒｉｓａｅｍａ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ＢｉｌｅＡｒｉｓａｅｍａ；ｈｙｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄ；ａｓｓａｙ；ＨＰＬＣＥＬＳＤ
［责任编辑 鲍 雷］
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