全 文 ：左金丸抗肿瘤作用及对 Ｓ１８０荷瘤小鼠血清
肿瘤标志物的影响
王晓娜，周　琴，韩　旭，许丽娜，彭金咏
（大连医科大学 药学院，辽宁 大连 １１６０４４）
［摘要］　目的：研究左金丸的体内抗肿瘤作用，并探讨其对 Ｓ１８０荷瘤小鼠血清中肿瘤标志物酸性磷酸酶
（ＡＣＰ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、肌酸激酶（ＣＫ）、醛缩酶（ＡＬＤ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活力的影响，并与其配伍方药黄连
和吴茱萸进行比较。方法：建立Ｓ１８０实体瘤模型，昆明种小鼠右腋下接种０２ｍＬＳ１８０细胞悬液（５×１０６个／ｍＬ细
胞）后，随机分成５组，２４ｈ后分别给予左金丸（８５０８ｍｇ·ｋｇ－１）、黄连（７２９２ｍｇ·ｋｇ－１）和吴茱萸（１２１６ｍｇ·
ｋｇ－１）提取物１０ｄ，观察小鼠体重、脾指数，计算抑瘤率和生命延长率（ＩＬＳ），并检测不同组给药小鼠血清中 ＡＣＰ，
ＡＫＰ，ＣＫ，ＡＬＤ和 ＬＤＨ的活力。结果：左金丸对移植性 Ｓ１８０肿瘤的抑瘤率为５０５４％，对小鼠的 ＩＬＳ为６４９１％。
同时左金丸可显著提高小鼠血清ＡＣＰ（１２６７２±１１１６）Ｕ·１００ｍＬ－１和 ＡＫＰ（６７２７±１３４９）Ｕ·１００ｍＬ－１的活
力，且显著降低小鼠血清ＣＫ（２０６５±４２８）Ｕ·ｍＬ－１，ＡＬＤ（３１９１３±５３８７）Ｕ·Ｌ－１和ＬＤＨ（１０２９０４±４６８５６）Ｕ
·Ｌ－１的活力，与黄连和吴茱萸单独给药有着显著性差异（Ｐ＜００１）。结论：左金丸方中黄连和吴茱萸能产生明显
的配伍协同抗肿瘤作用，对血清５种肿瘤标志物的影响可能是其抗肿瘤作用的潜在机制。
［关键词］　Ｓ１８０；黄连；吴茱萸；左金丸；肿瘤标志物
［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）１９２２３００５
［收稿日期］　２００８０２１６
［基金项目］　大连市优秀人才基金项目（２００６Ｊ２３ＪＨ０２４）
［通 讯 作 者］　 彭 金 咏，Ｔｅｌ：（０４１１）８６１１０４１１，Ｅｍａｉｌ：
ｊｉｎｙｏｎｇｐｅｎｇ２００５＠１６３．ｃｏｍ
　　左金丸是出自《丹溪心法·火六》的名方，《中
国药典》有收载［１］，临床上主要用于治疗胃肠道疾
病［２］。其组方药材黄连ＣｏｐｔｉｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓＦｒａｎｃｈ．为毛
莨科黄连属多年生草本植物，具清热燥湿、泻火解毒
等功效，并有良好的抗菌、抗炎作用，主要活性成分
为小檗碱、黄连碱、巴马亭和药根碱等生物碱类成
分［３］。另一组方药材吴茱萸 Ｅｖｏｄｉａｒｕｔａｅｃａｒｐａ
（Ｊｕｓｓ．）Ｂｅｎｔｈ为芸香科植物吴茱萸近干燥成熟的
果实，具有温胃止吐、温脾止泻、镇痛等功效，主要活
性成分为吴茱萸碱、吴茱萸次碱和多糖等化合
物［４］，可舒张血管，促进胃排空等［５６］。有关左金丸
的研究主要集中在药理作用［７８］和组方不同比例配
伍后对主要成分溶出率的影响［９１０］等方面。但有关
左金丸的抗肿瘤作用，配伍方药黄连和吴茱萸在抗
肿瘤活性上的配伍协同作用以及相关作用机制等未
见报道。
肿瘤标志物（ｔｕｍｏｒｍａｒｋｅｒｓ，ＴＭ）是指存在于肿
瘤组织和细胞的特种物质，其性质与正常组织和细
胞所表达的物质和抗原有区别，并且是相互不发生
交叉反应的肿瘤特异性物质或抗原，ＴＭ反映了肿
瘤形成和发展过程中的复杂性。随着对肿瘤发病机
制的深入研究和分子生物学技术的不断发展，ＴＭ
对肿瘤的早期检测发挥着重要作用。
本研究中，建立移植性 Ｓ１８０肉瘤动物模型，研
究左金丸及其组方药材黄连和吴茱萸的抗肿瘤作
用，并通过对小鼠血清中肿瘤标志物 ＡＣＰ，ＡＫＰ，
ＣＫ，ＡＬＤ和ＬＤＨ的活力测定来研究左金丸抗肿瘤
的可能作用机制。
１　材料
１．１　动物和瘤株　昆明种小鼠，体重（２０±２０）ｇ，
雌雄各半，由大连医科大学 ＳＰＦ实验动物中心提
供，合格证号 ＳＣＸＫ（辽）２００４００１７，室温（２４±２）
℃，自由进食与饮水；Ｓ１８０瘤株由大连医科大学组
织胚胎学教研室提供。
１．２　药品与试剂　黄连和吴茱萸药材购自云南千
草源药业有限公司，经刁云鹏博士（大连医科大学
药物化学教研室）鉴定为毛茛科植物 Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ
Ｆｒａｎｃｈ的干燥根茎和芸香科植物 Ｅ．ｒｕｔａｅｃａｒｐａ
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（Ｊｕｓｓ．）Ｂｅｎｔｈ的干燥成熟果实；环磷酰胺（江苏恒
瑞医药股份有限公司，生产批号０６１１５２１）；生理盐
水（吉林科伦康乃尔制药有限公司，生产批号
０７１００３）；酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、
肌酸激酶（ＣＫ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和醛缩酶
（ＡＬＤ）试剂盒（南京建成生物技术公司，生产批号
均为２００７１２１３）。
１．３　实验样品的制备　左金丸２１ｇ（黄连１８ｇ＋吴
茱萸３ｇ）及其与配伍方药黄连（１８ｇ）和吴茱萸（３
ｇ），分别用１０倍量水回流提取２次（２ｈ／次）。过
滤，合并滤液，分别减压浓缩至含生药 ４２５４，
３６４６，６０８ｇ·Ｌ－１的样品液，冰箱保存，备用。
１．４　仪器　Ｕ－３０１０型紫外分光光度计（日本日立
公司）；Ｒ５０２Ｂ型 ＳＥＮＣＯ恒温水浴锅（生海申生科
技有限公司）；９Ｂ－１－Ｂ型电子调温电热套（天津
市泰斯特仪器有限公司）；Ｈ－１６５０型台式高速离
心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司）。
２　方法
２．１　肿瘤模型的建立　参照文献［１１］，无菌条件
下抽取 Ｓ１８０小鼠腹水，稀释为含细胞密度５×１０６
个／ｍＬ，每只小鼠右腋下接种细胞液０２ｍＬ。将接
种后的小鼠随机分为对照组、环磷酰胺组、左金丸
组、黄连组和吴茱萸组单独给药，每组１４只，２４ｈ后
开始灌胃给药。
２．２　左金丸对Ｓ１８０荷瘤小鼠体重、脾指数、抑瘤率
的影响　取右腋窝接种肉瘤小鼠，灌胃给予黄连提
取物００２ｍＬ·ｇ－１（相当于７２９２ｍｇ·ｋｇ－１），吴茱
萸提取物００２ｍＬ·ｇ－１（相当于１２１６ｍｇ·ｋｇ－１）
以及左金丸提取物００２ｍＬ·ｇ－１（相当于８５０８ｍｇ
·ｋｇ－１），对照组给予生理盐水（００２ｍＬ·ｇ－１），连
续给药１０ｄ；环磷酰胺组（２０ｍｇ·ｋｇ－１）腹腔注射，
隔天给药（１０ｄ）。于第１１天，称体重，摘取脾脏，剥
取肉瘤，称瘤重，按下式计算脾指数和抑瘤率。
　脾指数＝ 脾重（ｍｇ）小鼠体重（ｇ）
　抑瘤率（％）＝（对照组平均瘤重－给药组平均瘤重）对照组平均瘤重 ×１００％
２．３　对血清肿瘤标志物的影响　各实验组小鼠断
头取血，于３５００ｒ·ｍｉｎ－１离心１５ｍｉｎ，得血清，并按
照试剂盒说明书进行 ＡＣＰ，ＡＫＰ，ＣＫ，ＡＬＤ和 ＬＤＨ
酶活力的测定。
２．４　左金丸对Ｓ１８０荷瘤小鼠ＩＬＳ的影响　取右腋
下接种肉瘤小鼠，按照２．２项下各组进行给药，记录
各组小鼠生存时间，按下式计算生存延长率。
生存延长率（％）＝（试验组平均存活天数对照组平均存活天数－１）×１００％
２．５　数据统计　数据用 珋ｘ±ｓ表示，应用ＳＰＳＳ１１５
统计软件进行分析，样本比较采用 ＯｎｅＡＮＶＯＡ方
差分析。
３　结果
３．１　左金丸对 Ｓ１８０荷瘤小鼠体重、脾指数及抑瘤
率的影响　Ｓ１８０荷瘤小鼠给药１０ｄ后发现，左金
丸组、黄连组和吴茱萸组小鼠体重和脾指数明显高
于环磷酰胺组 （Ｐ＜００１），且左金丸组小鼠脾指
数显著高于黄连、吴茱萸单独给药组，说明左金
丸、黄连和吴茱萸对机体免疫功能均具有一定的保
护作用。左金丸组平均瘤重明显低于环磷酰胺组、
黄连和吴茱萸给药组（Ｐ＜００１），抑瘤率分别为
５０５４％，３２５３％，２５８７％和１５５３％，表明左金丸
可提高小鼠脾指数，并具有显著抑制肿瘤生长的作
用，见表１。
表１　左金丸对Ｓ１８０小鼠体重、脾指数、抑瘤率的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别
剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
体重
／ｇ
脾指数
／ｍｇ·ｇ－１
瘤重
／ｇ
抑瘤率
／％
对照　　 　 ２５４１±３６１ ６５３±０６９ １８２９±００９ 　
环磷酰胺 ２０ １９９８±３５４１） ５９９±０９２ １２３４±００４１） ３２５３
左金丸　 ８５０８ ２１７０±４７８２） ９１０±０６６２，４） ０９０５±００６２，４） ５０５４
黄连　　 ７２９２ ２２９９±２８１ ７３２±０７１２） １３５６±００９２） ２５８７
吴茱萸　 １２１６ ２２８２±１２０ ７１１±０８７３） １５４５±００５２） １５５３
　　注：与对照组比较１）Ｐ＜００１，与环磷酰胺组比较２）Ｐ＜００１，３）Ｐ＜００５；与黄连和吴茱萸给药组比较４）Ｐ＜００１
３．２　左金丸对Ｓ１８０荷瘤小鼠ＴＭ的影响　左金丸
组中，荷瘤小鼠血清中 ＡＣＰ（１２６７２±１１１６）Ｕ·
１００ｍＬ－１和 ＡＫＰ（６７２７±１３４９）Ｕ·１００ｍＬ－１的
酶活力显著升高，与环磷酰胺组（９９８３±１０６７）Ｕ
·１００ｍＬ－１、黄连（７８０５±６５９）Ｕ·１００ｍＬ－１和吴
茱萸组（６７６６±４０９）Ｕ·１００ｍＬ－１比较，均 Ｐ＜
００１；而左金丸组小鼠血清中 ＣＫ（２０６５±４２８）Ｕ
·ｍＬ－１，ＡＬＤ（３１９１３±５３８７）Ｕ·Ｌ－１和 ＬＤＨ
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（１０２９０４±４６８５６）Ｕ·Ｌ－１的酶活力均显著降
低，且明显低于黄连和吴茱萸单独给药组（Ｐ＜
００１），但左金丸降低 ＣＫ，ＡＬＤ和 ＬＤＨ活力作用与
环磷酰胺组比较无显著性差异。见表２。
表２　左金丸对Ｓ１８０荷瘤小鼠血清肿瘤标志物的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别
ＡＣＰ
／Ｕ·１００ｍＬ－１
ＡＫＰ
／Ｕ·１００ｍＬ－１
ＣＫ
／Ｕ·ｍＬ－１
ＡＬＤ
／Ｕ·Ｌ－１
ＬＤＨ
／Ｕ·Ｌ－１
对照　　 ５９９７±１００６ １０２６±１０４ ３１４１±２４ ５９０８１±５７６３ ３０６５０４±１５３６４
环磷酰胺 ９９８３±１０６７１） ５０７９±６９９１） ２４４９±４６４１） ３６６２５±２７７４１） １３１４７５±２９４６１）
左金丸　 １２６７２±１１１６２，４） ６７２７±１３４９２，４） ２０６５±４２８４） ３１９１３±５３８７４） １０２９０４±４６８５６４）
黄连　　 ７８０５±６５９２） ４０９７±６０９３） ２６７９±３４７ ４３９９３±６３６８３） １７１５４５±１０１６０
吴茱萸　 ６７６６±４０９２） ３１９２±５６７２） ２９４５±５２３３） ５１３２８±４２８５２） ２７５８４２±７０８０７
　　注：与对照组比较１）Ｐ＜００１；与环磷酰胺组比较２）Ｐ＜００１，３）Ｐ＜００５；与黄连和吴茱萸给药组比较４）Ｐ＜００１
３．３　左金丸对Ｓ１８０荷瘤小鼠ＩＬＳ的影响　小鼠接
种Ｓ１８０肉瘤后，分别给予左金丸、黄连和吴茱萸，测
定生存延长率。结果显示，左金丸可明显延长 Ｓ１８０
荷瘤小鼠的生存时间，ＩＬＳ为６４９１％，明显高于黄
连（２９８２％）和吴茱萸（２６３２％）单独给药组（Ｐ＜
００１），而与环磷酰胺组比无显著差异。见表３。
表３　左金丸对Ｓ１８０荷瘤小鼠ＩＬＳ的影响
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别
剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
平均生存时间
／ｄ
ＩＬＳ
／％
对照　　 － １１４±３６６ 　
环磷酰胺 ２０ １６６±４９５１） ４５６１
左金丸　 ８５０８ １８８±５８５２） ６４９１
黄连　　 ７２９２ １４８±５３１ ２９８２
吴茱萸　 １２１６ １４４±３６３ ２６３２
　　注：与对照组比较１）Ｐ＜００５；与黄连和吴茱萸给药组比较２）Ｐ＜
００１
４　讨论
组织发生癌变后，结构基因表达异常，细胞内蛋
白质合成发生改变，作为肿瘤的标志物，在组织血液
或其他体液中以酶的形式表现出来，所以 ＴＭ对肿
瘤测定起着至关重要的作用［１２］。在本试验中，黄
连、吴茱萸配伍后可有效提高Ｓ１８０小鼠抑瘤率和脾
指数，增强机体免疫功能，从而显著提高 ＩＬＳ，增强
抗肿瘤作用，其机制可能是影响血清中肿瘤标志物
的活力。
ＡＣＰ是一种在酸性条件下水解磷酸单脂的酶，
存在两种类型［１３］，ＡＣＰ的活性直接与细胞的凋亡有
密切关系，而且细胞浆的酸化也直接与细胞的凋亡
有关［１４］。ＡＫＰ是一种肿瘤细胞的标志酶，通过某
种机制参与了细胞信息传递，细胞膜溢缩、代谢、
ＤＮＡ表达水平以及细胞周期中相关蛋白（酶）的磷
酸化和去磷酸化，从而调控肿瘤细胞增殖分化。此
外，ＡＫＰ可反映成骨细胞活性［１５］，且对许多血液系
统疾病的鉴别诊断也具有重要意义［１６］。本实验中，
左金丸可非常明显的提高 ＡＣＰ和 ＡＫＰ活力，作用
比黄连和吴茱萸单独给药组强，此点可能是其增强
抗肿瘤活性的潜在机制之一。ＣＫ是一种细胞内
酶［１７］，正常情况下，肌细胞膜结构完整，使 ＣＫ极少
渗出细胞膜而进入血液，当细胞损伤和／或细胞膜通
透性增加时，ＣＫ从细胞渗出引起ＣＫ增加。曾有报
道，肺癌和消化道恶性肿瘤患者血清中 ＣＫ及同工
酶明显增高［１８］。ＡＬＤ是糖酵解过程中一种重要的
裂合酶，在发生癌变时，组织中大量释放 ＡＬＤ致使
血清中ＡＬＤ活性升高。Ａｓａｋａ［１９］等人早在１９８３年
就测定了 ２６０例各种类型恶性肿瘤病人血清中
ＡＬＤＡ水平明显超过正常范围。ＬＤＨ是细胞进行
糖酵解过程中的一种重要的氧化还原酶，催化丙酮
酸加氢生成乳酸的可逆反应（无氧酵解的终末步
骤）。因其分子结构的不同可产生 ５种同工酶
（ＬＤＨ１ＬＤＨ５），且在肿瘤组织中可检测到此酶，对
肿瘤检测起到重要作用［２０２１］。本实验，左金丸可明
显降低ＣＫ，ＡＬＤ和ＬＤＨ的活力，可能是其显著抑制
肿瘤生长的潜在机制。
本实验结果显示左金丸在有效保护免疫系统的
同时，可显著增强抑制 Ｓ１８０肿瘤生长和延长 ＩＬＳ，
此作用明显强于黄连和吴茱萸单独给药，表明左金
丸中黄连和吴茱萸在抗肿瘤活性上存在明显的配伍
协同作用。通过对５种肿瘤标志物的测定，研究了
二者配伍后增强抗肿瘤的作用机制，而有关从基因
和蛋白的表达上来解释左金丸抗肿瘤的配伍协同作
用机制还需要进一步的研究。
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（１０）：１８７３．
［２０］　ＦａｎｔｉｎＶＲ，ＳｔＰｉｅｒｅＪ，ＬｅｄｅｒＰ．ＡｔｅｎｕａｔｉｏｎｏｆＬＤＨＡ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｕｎｃｏｖｅｒｓａｌｉｎｋｂｅｔｗｅｅｎｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓ，ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ
ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ａｎｄｔｕｍｏｒｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ［Ｊ］．ＣａｎｃｅｒＣｅｌ，２００６（９）：
４２５．
［２１］　ＳｕｈＳＹ，ＡｈｎＨＹ．Ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅａｓａｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃｆａｃｔｏｒ
ｆｏｒｓｕｒｖｉｖａｌｔｉｍｅｏｆｔｅｒｍｉｎａｌｙｉｌｃａｎｃｅｒｐａｔｉｅｎｔｓ：ａｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ
ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．ＥｕｒＪＣａｎｃｅｒ，２００７，４３（６）：１０５１．
ＡｎｔｉｃａｎｃｅｒａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＺｕｏｊｉｎｗａｎｉｎｖｉｖｏａｎｄｉｎｆｌｕｅｎｃｅｔｏ
ｔｕｍｏｒｍａｒｋｅｒｓｉｎｍｉｃｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄｗｉｔｈｓａｒｃｏｍａ１８０
ＷＡＮＧＸｉａｏｎａ，ＺＨＯＵＱｉｎ，ＨＡＮＸｕ，ＸＵＬｉｎａ，ＰＥＮＧＪｉｎｙｏｎｇ
（ＣｏｌｅｇｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＤａｌｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ１１６０４４，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅａｎｔｉｃａｎｃｅｒａｃｔｉｏｎｏｆＺｕｏｊｉｎｗａｎｉｎｍｉｃｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄｗｉｔｈｓａｒｃｏｍａ１８０ｉｎｖｉｖｏ，ａｎｄｄｅｔｅｃｔ
ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｆｉｖｅｋｉｎｄｓｏｆｔｕｍｏｒｍａｒｋｅｒｓ（ＴＭ）ｉｎｃｌｕｄｉｎｇａｃｉｄｐｈｏｓｐｈｏｔａｓｅ（ＡＣＰ），ａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈｏｔａｓｅ（ＡＫＰ），ｃｒｅａｔｉｎｅｋｉｎａｓｅ
（ＣＫ），ａｌｄｏｌａｓｅ（ＡＬＤ）ａｎｄｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ（ＬＤＨ）ｉｎｓｅｒｕｍｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＣｏｐｔｉｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓａｎｄＥｖｏｄｉａｒｕｔａｅｃａｒｐａ．Ｍｅｔｈｏｄ：
ＴｈｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄＳ１８０ｔｕｍｏｒｍｉｃｅｍｏｄｅｌｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ，ａｎｄｔｈｅｍｉｃｅｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｒａｎｄｏｍｌｙｆｉｖｅｇｒｏｕｐｓ．ＴｈｅｅｘｔｒａｃｔｏｆＺｕｏｊｉｎｗａｎ
（８５０８ｍｇ·ｋｇ－１），Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（７２９２ｍｇ·ｋｇ－１）ａｎｄＥ．ｒｕｔａｅｃａｒｐａ（１２１６ｍｇ·ｋｇ－１）ｗｅｒｅａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｆｏｒ１０
ｄ．Ｔｈｅｎ，ｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔ，ｓｐｌｅｅｎｉｎｄｅｘｏｆｍｉｃｅ，ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｓｏｆｔｕｍｏｒ，ａｎｄｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｌｉｆｅｓｐａｎ（ＩＬＳ）ｗｅｒｅａｌ
ｔｅｓｔｅｄ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＡＣＰ，ＡＫＰ，ＣＫ，ＡＬＤａｎｄＬＤＨｏｎｄｉｆｅｒｅｎｔｔｅｓｔｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅａｌｓｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｚｕｏｊｉｎｗａｎ
ｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅＳ１８０ｔｕｍｏｒｇｒｏｗｔｈｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｗｉｔｈｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｏｆ５０５４％ ａｎｄｔｈｅＩＬＳｏｆｍｉｃｅｒｅａｃｈｅｄｔｏ６４９１％．
Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＡＣＰ（１２６７２±１１１６）Ｕ·１００ｍＬ－１ａｎｄＡＫＰ（６７２７±１３４９）Ｕ·１００ｍＬ－１ｗｅｒｅｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄｔｈｅ
·３３２２·
第３３卷第１９期
２００８年１０月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　１９
　Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８
ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＣＫ（２０６５±４２８）Ｕ·ｍＬ－１，ＡＬＤ（３１９１３±５３８７）Ｕ·Ｌ－１ａｎｄＬＤＨ（１０２９０４±４６８５６）Ｕ·Ｌ－１ｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｂｙＺｕｏｊｉｎｗａｎｔｒｅａｔｅｄｇｒｏｕｐｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＣ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓａｎｄＥ．ｒｕｔａｅｃａｒｐａｔｒｅａｔｅｄｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜００１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｉｎｔｈｅ
ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｏｆＺｕｏｊｉｎｗａｎ，ｔｈｅｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｏｆｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆａｎｔｉｃａｎｃｅｒａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｔｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｏｆＣ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓａｎｄ
Ｅ．ｒｕｔａｅｃａｒｐａ．Ｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｍｉｇｈｔｂｅｉｎａｃｃｏｒｄｉｎｇｗｉｔｈｔｏｉｎｆｌｕｅｎｃｅｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｔｈｅｆｉｖｅｋｉｎｄｓｏｆｔｕｍｏｒｍａｒｋｅｒｓ（ＴＭ）ｉｎｍｉｃｅ
ｓｅｒｕｍ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｓ１８０；Ｚｕｏｊｉｎｗａｎ；Ｃｏｐｔｉｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ；Ｅｖｏｄｉａｒｕｔａｅｃａｒｐａ
［责任编辑　古云侠］
［收稿日期］　２００７１１１０
［通讯作者］　赵军艳，Ｔｅｌ：１３１０２０８１５７６，Ｅｍａｉｌ：ｚｊｙ３２７＠１２６．
ｃｏｍ
苦参碱和氧化苦参碱对 ＳＭＭＣ７７２１细胞增殖及
Ｓｔａｔ３，Ｓｔａｔ５基因表达的影响
郑艳敏，李　轩，赵红艳，赵军艳
（武警医学院 附属医院 消化内科，天津 ３００１６２）
［摘要］　目的：观察苦参碱和氧化苦参碱对肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１增殖及Ｓｔａｔ３，Ｓｔａｔ５基因表达的影响。方法：
苦参碱和氧化苦参碱干预肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１，ＭＴＴ法检测其对肝癌细胞增殖的影响，双荧光染色观察细胞凋亡
率，ＲＴＰＣＲ法检测其对ＳＭＭＣ７７２１细胞Ｓｔａｔ３，Ｓｔａｔ５ｍＲＮＡ的影响。结果：苦参碱和氧化苦参碱作用于肝癌细胞
后，能显著抑制肝癌细胞增殖，促进其凋亡，并呈时间剂量依赖性；二者均能下调 Ｓｔａｔ３，Ｓｔａｔ５ｍＲＮＡ表达水平。以
相同浓度苦参碱和氧化苦参碱比较，苦参碱对肝癌细胞Ｓｔａｔ３，Ｓｔａｔ５ｍＲＮＡ下调作用更显著（Ｐ＜００５或Ｐ＜００１）。
结论：苦参碱和氧化苦参碱能显著抑制ＳＭＭＣ７７２１细胞增殖，其机制可能与下调 Ｓｔａｔ３，Ｓｔａｔ５的基因表达，抑制细
胞信号传导通路有关。
［关键词］　苦参碱；氧化苦参碱；信号传导；Ｓｔａｔ３；Ｓｔａｔ５
［中图分类号］Ｒ２８５５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）１９２２３４０４
　　苦参有抗肿瘤、抗肝损伤、免疫调节等作用［１］。
苦参碱和氧化苦参碱是其主要有效成分，二者在体
外均可抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡［２４］。但其抗
肿瘤机制如何，是否与细胞信号转导通路有关，目前
尚不清楚。本研究以不同浓度苦参碱和氧化苦参碱
作用于人肝癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１，观察其对ＳＭＭＣ
７７２１细胞增殖及 ＪＡＫＳＴＡＴ通路的影响，从基因转
录水平研究其对 Ｓｔａｔ３，Ｓｔａｔ５ｍＲＮＡ表达的影响，为
寻求治疗肝癌的新药提供理论基础。
１　材料
１．１　药物　苦参碱（纯度９８％，上海第一生化药业
公司，批号９８０２１５），氧化苦参碱（纯度９８％，上海生
物化学制药厂，批号９６１０４４）。
１．２　细胞　人肝癌 ＳＭＭＣ７７２１细胞株，中国科学
院上海细胞生物学研究所提供。
１．３　试剂　溴化四唑蓝（ＭＴＴ）试剂（美国Ｓｉｇｍａ公
司）；Ｔｒｉｚｏｌ（美国 Ａｍｒｅｓｃｏ公司）；Ｒｎａｓｉｎ，ｄＮＴＰ，
ＲａｎｄｏｍＰｒｉｍｅｒ，ＭＭＬＶ逆转录酶（美国 Ｐｒｏｍｅｇａ公
司）；ＤＥＰＣ（美国Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司）。Ｓｔａｔ３引物，Ｓｔａｔ５
引物，βａｃｔｉｎ引物均由北京赛百盛生物工程公司合
成。
２　方法
２．１　细胞培养　用含５％ ＦＣＳ（胎牛血清）、青霉素
１００Ｕ·ｍＬ－１链霉素１００ｍｇ·Ｌ－１的 ＲＰＭＩ１６４０培
养液培养人肝癌细胞株 ＳＭＭＣ７７２１，置于 ３７℃，
５％ＣＯ２孵育箱中培养，３～４ｄ传代１次，取对数生
长期的细胞用于试验。
２．２　苦参碱和氧化苦参碱对肝癌ＳＭＭＣ７７２１细胞
株增殖影响　肝癌细胞株用０２５％胰蛋白酶消化，
ＰＢＳ冲洗，取含５×１０４～６×１０４个／ｍＬＳＭＭＣ７７２１
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第３３卷第１９期
２００８年１０月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　１９
　Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８