全 文 :第 30 卷 第 8 期
2 0 1 2 年 8 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 30 No. 8
Aug. 2 0 1 2
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学
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五叶草莓不同提取物抗 S180 瘤株有效部位的筛选
李巧兰1,吴楠2,李志刚1,徐晓明1
(1.陕西中医学院,陕西 西安 762046;2.长春市中医院高干病房,吉林 长春 130022)
摘 要:目的:通过药效试验筛选五叶草莓抗肿瘤的有效部位,为进一步开发五叶草莓奠定基础;方法:建立
S180 荷瘤小鼠腋下移植瘤模型,将实验分成 8 组:对照组、CTX组、五叶草莓 95%乙醇提取高、低剂量组,五叶草
莓 65%乙醇提取高、低剂量组,水提高、低剂量组,观察肿瘤生长情况及荷瘤小鼠免疫器官指数测定初步筛选五
叶草莓抗肿瘤的有效部位;结果:65%乙醇提取部位具有明显的抑瘤作用,高、低剂量组抑瘤率分别为 52. 6%和
41. 0%(P < 0. 01);与对照组比较,五叶草莓 65%乙醇提取部位各剂量组脾脏指数及胸腺指数均有所增高,但无
显著性差异;结论:五叶草莓 65%乙醇提取部位抑瘤作用明显,提示五叶草莓 65%乙醇提取部位是其抗肿瘤有效
部位。
关键词:五叶草莓;S180 肉瘤;抗肿瘤;有效部位
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1673 - 7717(2012)08 - 1746 - 03
creening Effective Fraction of Fragaria pentaphylla Different Extracts for Anti - S180
LI Qiao-lan1,WU Nan2,LI Zhi-gang1,XU Xiao-ming1
(1. Shaanxi University of Chinese Medicine,Xianyang 762046,Shaanxi,China;
2. Changchun Hospital of Traditional Chinese Medicine,Changchun 130022,Jilin,China)
Abstract:Objective:To screen the effective antineoplastic fraction of Fragaria pentaphylla through an pharmacodyna-
mic test,providing foundation for developing Fragaria pentaphylla. Method:Transplanted S180 in mice was used as a
mode. 180s rats were randomly divided into 8 groups:control group,CTX group,95% ethanol extract of Fragaria pen-
taphylla high - dose group,low - doses group;65% ethanol extract of Fragaria pentaphylla high - dose group,low - doses
group;water - extract high - dose and low - dose groups to investigate the growth of tumor and the immune organ index of
mice with S180 tumor in order to experiment the effective fraction of Fragaria pentaphylla. Results:65% ethanol extracts
had significant inhibitory effect,in high and low dose groups,inhibition rates were 52. 6% and 41. 0%(P < 0. 01);in the
control group,65% ethanol extract of Fragaria pentaphylla various doses of spleen extracts index and thymus index were
both increased,but not significantly different. Conclusion:65% ethanol extract of Fragaria pentaphylla could effectively in-
hibite the growth of S180 tumor,this suggests that 65% ethanol extract of Fragaria pentaphylla is the antineoplastic effec-
tive fraction.
Key words:Fragaria pentaphylla;S180;antineoplastic;effective fraction
收稿日期:2012 - 03 - 10
基金项目:陕西省自然科学基金资助项目[2008K16 - 06(1)]
作者简介:李巧兰(1956 -),女,教授,硕士研究生导师,研究方向:
老年病的中医药防治。
五叶草莓(F. pentaphylla Lozinsk.),分布于我国陕西、
甘肃、四川等省。民间草医用全草煎服治疗胃脘痛、腹腔肿
块、小便不通、噎膈等病极有效验[1]。野生植物单味五叶
草莓全草水煎液,具有抑制胃癌等消化系肿瘤生长,并能调
节患者免疫功能的作用[2]。但其有效部位尚不明确。本
文对五叶草莓不同提取物进行体内抗肿瘤作用的研究,为
筛选其抗肿瘤有效部位,以便利用中药资源和开发抗肿瘤
新药奠定基础。
1 实验材料
1. 1 实验动物
昆明种小鼠,6 ~ 8 周龄,体重 18 ~ 22g,由西安交通大
学实验动物中心提供。
1. 2 五叶草莓不同提取物
取五叶草莓全草剪成约 1cm 长短,依次 95% 乙醇,
65%乙醇,蒸馏水提取,回收浓缩分别得五叶草莓 95%乙
醇提取物(I),每 1g 提取物相当于 5. 5g 生药;五叶草莓
65%乙醇提取物(Ⅱ),每 1g提取物相当于 5. 8g生药;五叶
草莓水提物(Ⅲ),每 1g提取物相当于 7. 96g生药。
1. 3 S180 瘤株
第四军医大学实验动物中心提供,小鼠腹腔传代培养。
1. 4 环磷酰胺
山西普德药业有限公司出品。95%乙醇:本院生化室
提供。
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DOI:10.13193/j.archtcm.2012.08.52.liql.041
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CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
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1. 5 仪器
旋转蒸发器、电热恒温水浴箱、循环水式多用真空泵、
电热鼓风干燥箱、电子天平等。
2 实验方法
2. 1 分组与给药
小鼠随机分为受试样品高、低剂量组,以 CTX 为阳性
对照组,每组 10 只小鼠。分组后,CTX 组,按 50mg /kg 体
重,腹腔注射,每天 1 次。受试样品组,按 0. 2mL /10g 等容
量不等浓度,灌胃给药,每天 1 次。五叶草莓 95%乙醇提
取物(I)高、低剂量组给药剂量分别为 8. 79,4. 40g /(kg·
d);五叶草莓 65%乙醇提取物(Ⅱ)高、低剂量组给药剂量
分别为 8. 26,4. 13g /(kg·d);五叶草莓水提取物(Ⅲ)高、
低剂量组给药剂量分别为 6. 03,3. 01g /(kg·d)。对照组
给予相同体积生理盐水灌胃。每组均连续给药 14 天。
2. 2 小鼠移植实体型肉瘤 S180 模型建立
所有小鼠先适应性喂养 7 天,后将在无菌条件下接种
7 天的荷瘤 S180 腹水瘤小鼠的腹水与 PBS 液按 1 ∶ 3 的比
例进行稀释,离心后弃上清液,并用红细胞计数板计数瘤细
胞[(2 ~ 3)× 107 个 /mL],用台盼蓝溶液染色进行活细胞
计数,若活细胞率 > 95%后,在小鼠左腋皮下注射 0. 2mL
稀释液,制成实体瘤模型。24h 后称重并随机分成 8 组。
按 2. 1 项下给药,每天观察小鼠的自主活动、眼睛和毛色及
瘤体大小等情况,随时记录。停药次日处死小鼠,分别称取
小鼠体重,解剖瘤体、脾、胸腺,分别称重,个别组出现提早
死亡的动物则提前解剖称重纪录。
2. 3 检测指标
(1)抑瘤率(%)= 1 - T /C × 100%(T /C:治疗组平均
瘤重 /对照组平均瘤重)
(2)脾脏指数 =脾脏重量(mg)/小鼠体重(g)
(3)胸腺指数 =胸腺重量(mg)/小鼠体重(g)
2. 4 数据处理
结果均以 珋x ± s,数据统计分析采用 SPSS 17. 0 for Win-
dows统计软件进行组间方差分析,以 P < 0. 05 作为差别有
显著意义标准,P < 0. 01 作为差别有非常显著意义标准。
3 结 果
3. 1 给药后小鼠精神状态情况
小鼠口服不同剂量受试样品后精神状态有所差异,主
要表现如下,见表 1。
表 1 不同剂量五叶草莓不同提取物
给药后小鼠精神状态情况
组别及剂量
自主活
动减少
眼睛
外凸
呼吸
异常
身体
瘦弱
动物 /
死亡数
95%乙醇部位(高) + - - + 10 /1
95%乙醇部位(低) - - - - 10 /0
65%乙醇部位(高) + + + + + 10 /2
65%乙醇部位(低) + - - - 10 /0
水提部位(高) + + + - + 10 /1
水提部位(低) + + + - + 10 /0
CTX + + + - + + 10 /1
对照组 - - - - 10 /0
给药 1 天后,自主活动减少,随着剂量的增大程度加
剧。五叶草莓 65%醇提高剂量组予给药 5 天后眼睛外凸、
毛发竖立、呼吸同时腹部随之抽动,不活动时,身体呈蜷缩
状,给药一周出现死亡现象。水提高剂量组给药八天出现
死亡现象,死亡时身体瘦弱、尸检未见明显脏器异常。水提
低剂量组动物的活动、眼睛和毛色等情况与给药 3 天后恢
复正常。小鼠口服受试样品后的精神状态一方面反映对药
物的敏感性(治疗作用),另一方面反映药物的不良反应。
综合以上现象可知,65%乙醇部位存在一定的,主要表现在
眼睛外凸和呼吸异常方面。
3. 2 五叶草莓以不同溶剂提取对 S180 小鼠瘤重的影响
见表 2。
3. 2. 1 对照组小鼠肿瘤生长情况 接种成瘤率 100%,平
均瘤重为(2. 97 ± 0. 32)g,小鼠体重增长明显,平均增重
11. 8g,见表 2 ~ 3。
表 2 五叶草莓有效部位对 S180 的抑瘤作用(珋x ± s)
组别
剂量
g /(kg·d)
平均瘤重
(g)
抑瘤率
(%)
95%醇提高剂量组 8. 79 2. 29 ± 0. 35* 22. 9
95%醇提低剂量组 4. 40 2. 52 ± 0. 34* 15. 0
65%醇提高剂量组 8. 26 1. 41 ± 0. 37** 52. 6
65%醇提低剂量组 4. 13 1. 75 ± 0. 22** 41. 0
水提高剂量组 6. 03 1. 88 ± 0. 25* 36. 6
水提低剂量组 3. 01 2. 00 ± 0. 17* 32. 5
CTX组 0. 05 0. 56 ± 0. 13** 81. 6
对照组 - 2. 97 ± 0. 32 -
注:* P < 0. 05,表示与对照组比较差异显着;**P < 0. 01,表
示与对照组比较差异极显着。
表 3 各组小鼠免疫器官指数
组别 脾脏指数 胸腺指数
对照组 5. 39 ± 1. 03 2. 08 ± 0. 28
CTX组 3. 13 ± 0. 21** 1. 57 ± 0. 11*
95%醇提高剂量组 5. 25 ± 1. 40 1. 68 ± 0. 67
95%醇提低剂量组 4. 91 ± 1. 88 1. 95 ± 0. 75
65%醇提高剂量组 6. 29 ± 1. 10 2. 34 ± 0. 51
65%醇提低剂量组 4. 33 ± 0. 87 2. 50 ± 0. 57
水提高剂量组 5. 60 ± 0. 73 1. 89 ± 0. 60
水提低剂量组 5. 38 ± 1. 10 2. 32 ± 0. 56
注:* P < 0. 05,表示与对照组比较差异显着;**P < 0. 01,表
示与对照组比较差异极显着。
3. 2. 2 环磷酰胺对 S180 抑瘤作用 在本实验所给剂量
下,环磷酰胺对 S180 表现出极为明显的抑瘤作用,平均瘤
重为(0. 56 ± 0. 13)g,抑瘤率达到 81. 6%,但小鼠的体重计
脾脏、胸腺等免疫器官与对照组相比,明显受到抑制。
3. 2. 3 五叶草莓不同提取物对 S180 抑瘤作用 实验结果
表明 65%乙醇提取部位具有明显的抑瘤作用,高、低剂量
组抑瘤率分别为 52. 6%和 41. 0%(P < 0. 01);95%乙醇部
位抑瘤作用不明显;水提部位具有一定的抑瘤作用,高、低
剂量组抑瘤率分别为 36. 6%和 32. 5%(P < 0. 05)。提示
五叶草莓 65%乙醇提取部位是其抗肿瘤有效部位,结果见
表 3。
3. 2. 4 五叶草莓不同提取物对小鼠免疫器官的影响 与
对照组比较,五叶草莓 65%乙醇提取部位各剂量组脾脏指
数及胸腺指数均有所增高,但无显着性差异;水提部位各剂
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收稿日期:2012 - 03 - 24
基金项目:吉林省中医药管理局资助项目(2011 - js10)
作者简介:刘桂霞(1963 -),女,教授,硕士研究生导师,研究方向:
中医治疗眼部疾病。
量组脾脏指数有所增高,水提部位高剂量组胸腺指数有所
增高;95%乙醇提取部位高剂量组脾脏指数有所增高,低剂
量组胸腺指数有所增高,但五叶草莓有效部位各剂量组其
脾脏指数及胸腺指数与对照组相比均无明显差异(P <
0. 05)。而环磷酰胺则可显着抑制小鼠的胸腺与脾脏等免
疫器官。结果见表 4。
4 讨 论
肿瘤(tumor)是以细胞分化异常、增殖异常,生长失去
控制为特征的一类疾病。近年来,在世界范围内,除宫颈癌
和食管癌的发病率和死亡率有所下降外,其他所有肿瘤呈
不同程度的上升趋势。特别是男女两性的肺癌明显增加。
癌症已成为第 2 位死因。估计到 2015 年,全世界癌症发病
将达 1500 万,死亡逾 1000 万,死亡率超过心血管疾病占第
1 位[3]。中医药治疗肿瘤,是中国在肿瘤治疗领域的一大
特色,用传统中医或中西药结合方法治疗肿瘤疗效确切,效
果肯定,同时能有助于减轻现代医学疗法的不良反应。五
叶草莓是我国陕西省秦岭山区的一种野生植物,其对生长
环境要求不高,容易采摘,资源丰富,具有较广阔的开发前
景,本研究结果表明五叶草莓 65%乙醇提取部位与水提部
位具有抗肿瘤作用,高、低剂量组抑瘤率均超过 30%,但以
65%乙醇提取部位明显,抑瘤率超过水提部位,其随剂量增
高,抑瘤率亦增高。环磷酰胺对肿瘤有较强抑制作用,但同
时也抑制动物免疫系统,五叶草莓不同提取物各提取组对
免疫系统无明显抑制。五叶草莓 65%乙醇提取部位抑瘤
作用明显,提示五叶草莓 65%乙醇提取部位是其抗肿瘤有
效部位,其机理有待进一步研究。
参考文献
[1] 中国科学院西北植物研究所.秦岭植物志·种子植物[M].
北京:科学出版社,1974:545.
[2] 李巧兰,李斌,何瑾瑜.五叶草莓煎液对荷瘤小鼠免疫功能及
抑瘤率的影响[J].中华中医药学刊,2007,25(1):85.
[3] 陆再英,钟南山. 内科学[M]. 7 版. 北京:人民卫生出版社,
2008:396 - 401.
第 30 卷 第 8 期
2 0 1 2 年 8 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 30 No. 8
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学
刊
针刺治疗泪液分泌不足型干眼症临床观察
刘桂霞,周丹
(长春中医药大学附属医院眼科,吉林 长春 130021)
摘 要:目的:观察针刺疗法治疗泪液分泌不足型干眼症的疗效。方法:将 72 例泪液分泌不足型干眼症患者
随机分为治疗组和对照组,治疗组进行针刺,对照组人工泪液点眼,两组均 30 天为 1 个疗程。结果:治疗组总有
效率 88. 89%,对照组总有效率 55. 56%。统计学统计 P < 0. 05,有显著意义。结论:针刺治疗泪液分泌不足型干
眼症有效。
关键词:干眼症;针刺;临床观察
中图分类号:R591. 412 文献标识码:B 文章编号:1673 - 7717(2012)08 - 1748 - 02
Clinical Observation of Effect of Acupuncture on Treating
Xerophthalmia Caused by Inadequate Secretion of Tears
LIU Gui-xia,ZHOU Dan
(The Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine ,Changchun 130021,Jilin,China)
Abstract:Objective:To observe the clinical efficacy of acupuncture in the treatment of xerophthalmia which is caused
by inadequate secretion of tears. Methods:72 patients suffering from xerophthalmia caused by inadequate secretion of tears
were divided into treatment group and control group randomly. The treatment group was treated with acupuncture,the con-
trol group used artificial tears,30 days for a course. Results:The total effective rate of treatment group was 88. 89% and
the control group was 55. 56%(P < 0. 05). Conclusions:The acupuncture treatment of xerophthalmia which is caused by
inadequate secretion of tears is effective.
Key words:Xerophthalmia;Acupuncture;Clinical Observation
干眼是眼科临床上最常见的疾病之一。临床中常用人
工泪液增强泪膜稳定性来缓解泪液生成不足型干眼症,停
用后即又出现干眼等不适。而针刺眼周穴位,可刺激了泪
腺主动分泌,分泌的泪液质量明显提高,泪膜的稳定性增
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