全 文 ：五叶草莓 65%醇提液对 S180 荷瘤小鼠抑瘤及
免疫功能的影响
李巧兰，李惠，陈丽，允熙章，尚俊平
(陕西中医学院，陕西 咸阳 712046)
摘 要:目的:探讨五叶草莓 65%醇提液对 S180 荷瘤小鼠的抑瘤疗效及对免疫功能的影响。方法:将 40 只 SPF 昆
明小鼠制成 S180 实体瘤模型，分为模型组、CTX组、五叶草莓 65%醇提液高剂量组、五叶草莓 65%醇提液低剂量组，给
药 14 天，第 15 天处死小鼠，剥离瘤体，计算抑瘤率;剖取脾脏和胸腺，计算脾脏指数和胸腺指数，分离血清，用放射免疫
法检测血清中 IL － 2、TNF － a的含量。结论:实验结果表明，五叶草莓 65%醇提液具备抑瘤作用，而且能增加 S180 荷瘤
小鼠血清 IL － 2、TNF － α的含量，促进 S180 荷瘤小鼠免疫器官胸腺、脾脏的生长，从而改善 s180 荷瘤小鼠的免疫功能。
关键词:五叶草莓;S180 肉瘤;IL － 2;TNF － α;放射免疫法
中图分类号:R2 － 03 文献标识码:B 文章编号:1000 － 1719(2011)10 － 2093 － 03
65% alcohol extract of five Leaves strawberry S180 tumor bearing mice on the
role of inhibitory effect Tumor and immune function in rats
LI Qiao-lan，lI Hui，CHEN LiK，YUN Xi-zhang，SHANG Jun-ping
(Shanxi University of Chinese Medicine，Xianyang 712046，Shaanxi，China)
Abstract:Objective:65% alcohol extract of five Leaves strawberry on mice bearing S180 tumor efficacy and on immune func-
tion． Methods:40 mice into SPF S180 solid tumor models were divided into model group，CTX group，65% alcohol extract of five
Leaves strawberry high － dose group，65% alcohol extract of five Leaves strawberry low dose group，administration 14 days，15
days after the eyeball blood，the mice were killed by radioimmunoassay in serum IL － 2，TNF － a levels． Conclusion:The results
showed that65% alcohol extract of five Leaves strawberry increased S180 tumor － bearing mice serum IL － 2，TNF － α levels and
improved immune function in tumor － bearing mice，with significant antitumor effect．
Key words:five leaves of strawberry;S180 sarcoma;IL － 2;TNF － α;radioimmunoassay
收稿日期:2011 － 02 － 10
基金项目:陕西省教育厅资助项目(2008k16 － 06(1) )
作者简介:李巧兰(1956 －) ，女，陕西汉中人，教授、主任医师，硕士研究
生导师，研究方向:中医对老年病的临床与实验研究。
五叶草莓(又名泡儿、裁身泡;当地群众又称“白
泡儿“地瓢儿”、“白草毒”)是陕西省秦岭山区的一种
野生植物，属蔷薇科草莓属多年生草本，山区群众采集
白色成熟果实大量食用或酿酒，当地民间草医用全草
煎服治疗胃脘痛、腹腔肿块、小便不通、噎膈等病极有
效验。我们发现单味野生植物五叶草莓水煎液，具有
抑制胃癌等消化系肿瘤生长，并能调节患者免疫功能
的作用，且五叶草莓 65%乙醇提取部位抑瘤率超过水
提部位，为此本实验采用五叶草莓 65%醇提液进行抑
瘤实验。
制备方法(65%乙醇回流提取) :称取五叶草莓全
草 1250g，剪成约 1cm长短，置于蒸馏烧瓶中加入 65%
乙醇为提取溶剂，加入溶剂量分别为 12、10、8 倍，水浴
回流提取 3 次，时间分别为 4h、3h、2h，合并 3 次提取
物，过滤。滤液减压浓缩，回收乙醇至浸膏，得醇提浸
膏为 215g。
恶性肿瘤是一种常见病、多发病，有效防治肿瘤是
关系到人类前途命运的问题，一直被世界各国所关注。
肿瘤不仅是细胞增殖和分化异常的疾病，也是细胞凋
亡异常的疾病［14］中医中药因具有多途径、多靶点、毒
副作用小等优势，在肿瘤治疗和辅助治疗方面发挥着
不小的作用。我们从实验角度探讨五叶草莓 65%醇
提液对 S180 荷瘤小鼠模型的作用机制。
1 实验材料
1. 1 动物 健康雄性 SPF昆明小鼠 50 只，年龄 4 ～ 9
周，体重 19 ～ 22g，由西安交大医学院动物实验中心提
供，合格证号:SC·XK(陕)2007 － 001。
1. 2 瘤株 购自第四军医大学实验动物中心，荷瘤
S180 腹水瘤小鼠，每 7 天传代 1 次。
1. 3 药品与试剂 五叶草莓 65%醇提液:五叶草莓
采购自陕西秦岭山区，经陕西中医学院药学系生药教
研室胡本祥教授鉴定为蔷薇科植物五叶草莓的全草，
本药为正品。经 65%乙醇提取后，每 1g 提取物相当
于 5. 8g 生药，置 0 ～ 4℃冰箱里保存备用。环磷酰胺
(CTX) :由山西普德药业有限公司提供，生产批号
H14023686，临用时用生理盐水配制成所需浓度 2mg /
ml。IL － 2 放射免疫试剂盒和 TNF 放射免疫试剂盒:
由北京福瑞生物有限公司提供生产批号 090825。
1. 4 主要仪器 电子天平(FA1004N)由上海精密科
·3902·辽宁中医杂志 2011 年第 38 卷第 10 期
DOI：10.13192/j.ljtcm.2011.10.176.liql.066
学仪器有限公司天平仪器厂制造;低速离心机(KDC －
40)由科大创新股份有限公司中佳分公司制造;FM －
2000 全自动 r 免疫计数器由西安凯普机电有限责任
公司制造;膜式电动吸引器由上海医疗器械工业公司
医用吸引器厂制造。
2 实验方法
2. 1 动物模型的建立 所有小鼠先适应性喂养 7 天，
后在无菌条件下，用 5mL注射器接 8 号针头刺入已接
种 7d的荷瘤 S180 腹水瘤小鼠的腹腔中，采集 S180 小
鼠腹水，不加抗凝剂，1mL 腹水加 1mlPBS 液，放入离
心机 1000rpm /min离心 6min，连续 2 次，弃上清液，取
离心后溶液 1mL 加一滴 0. 2%台盼蓝溶液混匀，在显
微镜下用血球计数板计数，经检测活细胞率 ＞ 95%，用
PBS液稀释调整瘤细胞悬液密度至 1 × 107 个 /mL，每
只小鼠右侧腋部皮下被注入 0. 2mL 瘤细胞悬液接种
制成实体瘤模型。
2. 2 分组 小鼠被接种 24h后，按体重随机分为模型
组、CTX组、五叶草莓高剂量、五叶草莓低剂量组，每
组 10 只，分组后称重。所有小鼠均为普通饮食。
2. 3 给药 将分别给予五叶草莓 65%醇提液高剂量
(8. 26g· kg· d)组、五叶草莓 65% 醇提液低剂量
(4. 13g·kg·d)组、CTX(0. 04g·kg·d)组，五叶草莓
65%醇提液组灌胃给药，阳性对照 CTX 组腹腔注射，
生理盐水组灌胃量同五叶草莓醇提液每天灌胃量。以
上各组在接种瘤细胞后第 2 天开始给药。以上小鼠每
天给药 1 次，连续 14 天。
2. 4 处理方法 S180 荷瘤小鼠给药 14 天后，第 15
天处死小鼠，剥离瘤体，计算抑瘤率;剖取脾脏和胸腺，
计算脾脏指数和胸腺指数，分离血清，用放射免疫法检
测血清中 IL － 2、TNF － α的含量。
2. 5 统计方法 各组数据均按均数 ±标准差(珋x ± s)
表示，采用 t 检验及方差分析，运用 SPSS16. 0 统计软
件进行。
3 实验结果
3. 1 小鼠外观观察 接种前所有小鼠灵活，体毛光泽
致密，进食饮水可，生长良好。1 周后五叶草莓 65%醇
提液各剂量组及环磷酰胺组右腋下可见皮下肿块。正
常组小鼠饮食、饮水、活动正常，被毛光泽，反应灵敏。
模型组小鼠接种瘤细胞 1 周后瘤体生长迅速，进食、饮
水减少，小鼠活动明显减少，被毛无光泽，反应迟钝;五
叶草莓 65%醇提液各组及环磷酞胺组肿瘤生长相对
缓慢，而环磷酰胺组小鼠比五叶草莓 65%醇提液各剂
量组和模型对照组小鼠活泼，被毛略有光泽。
3. 2 五叶草莓 65%醇提液对 S180 荷瘤小鼠瘤重的
影响
表 1 五叶草莓 65%醇提液对 s180 荷瘤小鼠的抑瘤作用(珋x ± s)
组别 剂量 g /(Kg·d) 平均瘤重(g) 抑瘤率(%)
65%醇提高剂量组 8. 26 0. 95318 ± 0. 22164＊＊ 45. 05
65%醇提低剂量组 4. 13 1. 07952 ± 0. 2703* 37. 77
CTX组 0. 04 0. 838 ± 0. 07126 51. 69
模型组 － 1. 73462 ± 0. 37856 －
注:与模型组对比* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01。
3. 3 五叶草莓 65%醇提液对 s180 荷瘤小鼠胸腺指数
与脾脏指数的影响
表 2 五叶草莓 65%醇提液对 s180 荷瘤小鼠脾脏指数
及胸腺指数比较(珋x ± s)
组别 n 剂量(g /Kg)脾脏指数(mg /g)胸腺指数(mg /g)
正常组 10 5. 79 ± 0. 65 1. 81 ± 0. 074
模型组 10 5. 99 ± 0. 09 1. 93 ± 0. 037
环磷酰胺组 10 0. 04 4. 98 ± 0. 11＊＊ 1. 55 ± 0. 146＊＊
五 65 醇高组 10 8. 26 6. 83 ± 0. 73＊＊ 2. 17 ± 0. 077＊＊
五 65 醇低组 10 4. 13 6. 28 ± 0. 08＊＊ 2. 03 ± 0. 06＊＊
注:与模型组对比＊＊P ＜ 0. 01。
3. 4 五叶草莓 65%醇提液对 s180 荷瘤小鼠血清 TNF
－ α及 IL － 2 的影响
表 3 五叶草莓 65%醇提液对 s180 荷瘤小鼠血清
TNF － α及 IL － 2 的影响(珋x ± s)
组别 n 剂量(g /Kg)TNF － α(ng /ml) IL － 2(ng /ml)
正常组 10 0. 902 ± 0. 650 16. 743 ± 0. 023
模型组 10 0. 923 ± 0. 627 17. 58 ± 0. 020
环磷酰胺组 10 0. 04 0. 854 ± 1. 368＊＊ 13. 41 ± 0. 060＊＊
五 65 醇高组 10 8. 26 0. 9687 ± 1. 19＊＊ 20. 107 ± 0. 086＊＊
五 65 醇低组 10 4. 13 0. 937 ± 0. 736＊＊ 18. 45 ± 0. 019＊＊
注:与模型组比较＊＊P ＜ 0. 01。
3. 5 五叶草莓 65%醇提液对瘤组织结构的影响 光
镜下可见，模型组瘤细胞形态不规则，核浆比例大，核
异形性强，核大深染，可见病理性核分裂象，部分区域
可见肿瘤细胞侵及血管壁。五叶草莓 65%醇提液高、
低剂量组细胞异型性有所缓解，肿瘤细胞减少，瘤灶周
围伴有炎性反应。CTX 组肿瘤细胞明显减少，可见大
片炎细胞区域，见图 1 ～ 4。
4 结 论
本文从实验研究方面探讨了五叶草莓 65%醇提液
的抑瘤和改善机体免疫功能的作用，结果显示:五叶草
莓 65%醇提液高、低剂量组对 s180 荷瘤小鼠的肿瘤有
抑制作用，其机制是可能增加了 S180 荷瘤小鼠血清中
IL －2、TNF － α的含量，促进 S180 荷瘤小鼠免疫器官胸
腺、脾脏的生长，与改善荷瘤小鼠的免疫功能有关。
5 讨 论
近年来人们越来越认识到肿瘤的发生、发展与机
·4902· 辽宁中医杂志 2011 年第 38 卷第 10 期
体免疫功能密切相关。免疫系统不仅具有清除病原微
生物和其毒素、损伤或衰老的自身细胞、移植的外来细
胞的功能，也能清除那些因各种因素而发生突变的新
生细胞，即肿瘤细胞。免疫系统实现上述功能，主要是
依靠免疫细胞和细胞因子。肿瘤坏死因子(TNF)是机
体免疫反应中引起出血和坏死的细胞因子［2］。TNF －
α对恶性肿瘤的作用尤为突出。白细胞介素 2(IL －
2) ，原称 T 淋巴细胞生长因子，主要由抗原激活的 T
细胞产生，其最重要的作用是诱导 T 淋巴细胞的增殖
与分化，即 T淋巴细胞受抗原刺激后产生 IL － 2，IL － 2
又作用于 T 淋巴细胞，诱导其自身增殖、分化和发挥
功能，IL － 2 在机体抗肿瘤疫中有着重要地位，尤其在
增强 CTL(细胞毒性 T 细胞)及(Th)T 辅助细胞的活
性和激活 T细胞增殖等方面起关键作用［3 － 6］。本实验
以 S180 荷瘤小鼠为模型，对五叶草莓 65%醇提取物
进行了抗肿瘤实验研究。结果显示，五叶草莓 65%醇
收稿日期:2011 － 04 － 05
基金项目:辽宁省教育厅资助项目(2008440)
作者简介:孟安琪(1958 － )女，山东省龙口人，主任医师，硕士研究生
导师，硕士研究生，研究方向:中医药治疗妇科疾病研究。
通讯作者:鲁立宪(1954 － ) ，男，山东省潍坊人，主任医师，学士，研究
方向:中医药治疗乳腺病研究。
提取物对荷瘤小鼠的肿瘤生长有抑制作用，高剂量组
抑瘤率为 45. 05%，低剂量组抑瘤率为 37. 77%，五叶
草莓 65%醇提取物高、低剂量组与模型组比较 TNF、
IL － 2 含量增高，且具有显著差异(P ＜ 0. 01)。提示五
叶草莓 65%醇提取物各剂量组均能增加荷瘤小鼠血
清 TNF、IL － 2 含量，同时五叶草莓 65%醇提取物高、
低剂量组与模型组比较胸腺、脾脏指数明显升高(P ＜
0. 01)。说明五叶草莓 65%醇提取物能改善荷瘤小鼠
的免疫功能，从而达到治疗肿瘤的目的。
参考文献
［1］ sachs l，letenm j． control of programmed cell death in no rmal and leu-
kemic cells:new implications for therapy［J］． Blood，1993，82(1) :15
－ 17．
［2］ 孙卫民，王慧琴主编．细胞因子研究方法学［M］． 北京:人民卫生
出版社，1999，584 － 618．
［3］ TatatsuguT，YasuhiroM． The IL － 2 / IL － 2 receptor system:a current
overview［J］． Cell，1993，73(l) :5．
［4］ Robb RJ． Interleukin2:the molecule and its function［J］． Immunol To-
day，1984，5(7) :203．
［5］ M1nigani MC． Human interleukin 2 promotes proliferation of Beells
Via surface receptor similar to those of aetivated T eells［J］． Nature，
1984，312(4) :641．
［6］ MertelsmannR． Human interlerkin2:molecular biology and elinieal
possibility［J］． Immunolbiol，1986，172(1) :93．
抗磷脂冲剂对小鼠抗心磷脂抗体的影响
孟安琪，鲁立宪，赵聪聪，李明明，张莹
(辽宁中医药大学附属医院，辽宁 沈阳 110032)
摘 要:目的:观察抗磷脂冲剂对环磷酰胺所致的抗心磷脂抗体产生的影响。方法:通过建立环磷酰胺所致小鼠体
内产生 ACA的模型，观察中药抗磷脂冲剂对 ACA的影响。结果:环磷酰胺能导致小鼠体内产生 ACA，抗磷脂冲剂对环
磷酰胺所致的小鼠体内 ACA有明显的降低作用，并随着使用剂量的增加，小鼠体内的 ACA 降低效果更明显。结论:抗
磷脂冲剂能够有效的降低小鼠体内的 ACA水平，并抑制抗磷脂抗体的产生及其对胚胎的损害，从而达到保胎的目的。
关键词:免疫性流产;抗磷脂冲剂;抗心磷脂抗体
中图分类号:R714． 21 文献标识码:B 文章编号:1000 － 1719(2011)10 － 2095 － 02
Antiphospholipid Granule’s Impact on Anti －Cardiolipin Antibodies in Mice
MENG An-qi，LU Li-xian，ZHAO Cong-cong，LI Ming-ming，ZHANG Ying
(Affiliated hospital of Liaoning University of traditional Chinese medicine，Shenyang 110032，Liaoning，China)
Abstract:Objective:To observe the impact of antiphospholipid granule on anti － cardiolipin antibodies induced by cyclophos-
phamide． Methods:With the establishment of cyclophosphamide － induced mice model in vivo ACA，to observe the effects of An-
tiphospholipid granules of traditional Chinese medicine on ACA． Results:Cyclophosphamide can lead to ACA production，An-
tiphospholipid granule has a significant role in reducing ACA，and as the dose increaing，ACA reducing effects of mice is more ob-
vious． Conclusion:Antiphospholipid granules can effectively reduce the ACA levels in mice and inhibie Antiphospholipid antibod-
ies and its damage to the embryo so as to achieve the objective of Preventing miscarriage
Key words:immune abortion;Antiphospholipid granule;anticardiolipin antibodies
抗心磷脂抗体是一种以血小板和内皮细胞膜上带
负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体。与流产尤其
是习惯性流产密切相关［1］。该抗体可以导致血栓形
成、不孕、胎儿畸形、死胎及自然流产等。目前西医治
疗抗心磷脂抗体阳性导致的流产多采用抗栓塞、抗凝、
免疫抑制等法，不良反应较多且效果不理想。近年来
·5902·辽宁中医杂志 2011 年第 38 卷第 10 期