全 文 ：≈v 魏开炬 q日本龟蜡蚧无公害防治实验初探 ≈ q中学生物学 o
ussxoutkstl}wsq
≈w 韩建华 o俎文芳 q果树介壳虫的综合防治措施 ≈ q河北果树 o
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≈责任编辑 张宁宁
≈收稿日期 ussz2sx2ts
≈基金项目 国家自然科学基金项目 kvsuzststl
≈通讯作者 3郭宝林 oר¯}kstslyu{|xsw|o∞2°¤¬¯}ª∏²¥¤²¯¬±sts
√¤«²²q¦²°q¦±
生长季节变化对朝鲜淫羊藿中黄酮类成分的影响
唐春风 tou o黄文华 t o彭玉德 tou o郭宝林 t3
ktq中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 o北京 tsss|w~
uq广西药用植物园 o广西 南宁 xvssuvl
朝鲜淫羊藿 Επιµ εδιυµ κορεανυµ ¤®¤¬是药典
规定的药材淫羊藿的主要来源植物之一 ∀郭宝林等
曾报道了朝鲜淫羊藿中的淫羊藿苷和总黄酮的含量
远高于药用淫羊藿的其他物种 ≈t ∀然而后来的研
究报道没有支持这一结果 o却发现淫羊藿苷的含量
常低于其他种类 o甚至低于药典标准 ≈u2x ∀经采收期
研究发现 o朝鲜淫羊藿在 x月上旬至中旬期间含量
是最高的 o其后降低 ≈y o而文献 ≈t 的材料来自于 x
月初开花期 o此时新叶刚刚萌出 o不是朝鲜淫羊藿的
采收季节 ∀作者新近对淫羊藿药材质量的系统研究
中发现 o采集于 {月中下旬 k正常的采收季节 l的 {
份样品 k包括了辽宁省和吉林省朝鲜淫羊藿的主要
分布区 l均低于药典含量标准 ≈z o生长季节变化对
朝鲜淫羊藿中黄酮类成分含量的影响成为淫羊藿质
量研究中最值得关注的问题之一 ∀有文献报道 ≈{ o
日本产的 Ε. χρεµ ευµ 有随生长季节 z2葡萄糖的苷
类含量降低 o而 z2的少糖苷化的化合物含量升
高的趋势 ∀由于 Ε. χρεµ ευµ 是淫羊藿属中朝鲜淫
羊藿的近缘种类 o本研究通过测定朝鲜淫羊藿中具
z2葡萄糖的苷类 ) ) ) 淫羊藿苷和朝藿定 ≤的含量 !
z2的化合物 ) ) ) 箭藿苷
的含量 o以及进行
°≤指纹图谱的考察 o研究生长季节对朝鲜淫羊
藿中黄酮类成分的影响 ∀
1 仪器与试药
• ¤·¨µ¶高效液相色谱仪 k• ¤·¨µ¶w{y双波长检
测器 o∞°³²º µ¨色谱工作站 l~∂ p uxxs紫外 2可见
光分光光度计 k≥ ⁄l~乙腈为色谱纯 ~水为双
蒸水 ~其余试剂均为分析纯 ∀淫羊藿苷 !朝藿定 ≤
和箭藿苷
由本研究组分离所得 o用光谱方法鉴定
结构 o并用 °≤面积归一法测定其纯度 ∴ ||h ≈| ∀
样品来源于辽宁凤城县城外的一个林下居群 o
进行了 |个生长期的均匀采样 o分别为 }x月 {日 ox
月 uv日 oy月 tx日 oy月 vs日 oz月 tx日 oz月 vs
日 o{月 tx日 o{月 vt日 o|月 tx日 o涵盖了该地区
的全部生长季节 o每次采集 vs株 o每 ts株的叶片混
合作为 t个研究样品 o因此每个采集期有 v份样品 ∀
其中 y月 tx日样品采集后部分丢失 o仅剩 {株 o作
为 t份样品测定 ∀
2 方法
2q1 色谱条件 ∂ ±¨∏¶¬¯≥
2≤t{色谱柱 kw1y °° ≅
uxs °°ox Λ°lo保护柱 }≥ ¦¨∏µ¬·¼ ∏¤µ§≤¤µ·µ¬§ª¨¶≤t{
kw1s °° ≅ v1s °°lk美国 °«¨ ±²° ±¨¨ ¬公司 l∀流动
相 }s °¬±乙腈 klΒ水 k
lkuxΒzxlouw °¬± uzh owv
°¬± w{h oyv °¬± {sh oy| °¬± tssh o流速 t1s
°# °¬±pt o检测波长 uzu ±°o柱温 us ε ∀
2q2 线性关系考察 朝藿定 ≤回归方程为 Ψ
t1yz ≅ tsy Ξ n w1zu ≅ tsw oρ s1||{ xo在 s1usw ∗
u1sw Λª呈现良好的线性关系 ∀淫羊藿苷回归方程
为 Ψ u1xw ≅ tsz Ξ n v1sx ≅ tsv oρ s1||| xo在
s1us{ ∗ u1s{ Λª呈现良好的线性关系 ∀箭藿苷
回归方程 Ψ t1{{ ≅ tsy Ξ p t1zx ≅ tsw oρs1||| |o
在 s1twz ∗ u1vx Λª呈现良好的线性关系 ∀
2q3 精密度试验 取同一对照品溶液 o重复进样 x
次 o测定朝藿定 ≤ !淫羊藿苷和箭藿苷
峰面积 o
≥⁄分别为 t1yh ov1th ou1th ∀
#{vwu#
第 vu卷第 uu期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uu
²√ °¨¥¨ µo ussz
2q4 稳定性试验 取同一供试品溶液 o在 touowo
yo{ «分别测定朝藿定 ≤ !淫羊藿苷和箭藿苷
含
量 o ≥⁄分别为 s1yzh os1wxh os1{uh ∀
2q5 供试品溶液的制备 每个采收期的朝鲜淫羊
藿样品平行 v份取样 o取干燥的叶片 o粉碎 o过 ws目
筛 o称取约 s1u ªo精密称定 o置于 xs °具塞锥形瓶
中 o精密加入 zsh 乙醇 us °o密封超声提取 vs
°¬±o放置至室温 o补足失重 o摇匀 o过滤 ∀精密量取
续滤液 u °o置于蒸发皿内 o{s ε 水浴锅上蒸干 o甲
醇溶解 o转移到 u °量瓶 o加甲醇定容至刻度 o摇
匀 o用微孔滤膜 ks1wx Λ°l滤过 o取续滤液作为供试
品溶液 ∀
2q6 加样回收率试验 精密称取已知含量的同一
批次样品 x份 k{月 vt号第 t份 lo分别精密加入淫
羊藿苷 !朝藿定 ≤ !箭藿苷
对照品适量 ∀按 2q1项
下方法制备供试品溶液 x份 o按上述方法测定 ∀计
算回收率 o淫羊藿苷 !朝藿定 ≤ !箭藿苷
分别为
tss1uh o||1{h o||1|h ∀
3 结果
3q1 朝藿定 ≤ !淫羊藿苷 !箭藿苷
及总黄酮的含
量测定结果 对照品的色谱图见图 to含量测定结
果见表 t∀
图 t v个对照品的 °≤图谱
tq朝藿定 ≤~uq淫羊藿苷 ~vq箭藿苷
表 t 不同采收期朝鲜淫羊藿中朝藿定 ≤ !淫羊藿苷 !箭藿苷
及总黄酮的质量分数 kν vl h
采收日期
朝藿定 ≤
平均值 ≥⁄
淫羊藿苷
平均值 ≥⁄
箭藿苷
平均值 ≥⁄
总黄酮
平均值 ≥⁄
sx2s{ s1vuy uy u1tt z1x s1s{v ut tx1s |1w
sx2uv s1twx y1v s1ys| {1v s1swv vyy z1uw s1xx
sy2tx s1s|{ s1uwy s1s|u x1vx
sy2vs s1tz{ u1s s1u{y y1u s1ss{ ty {1xx t1|
sz2tx s1uy| {1u s1y|z tv s1stx t| tt1s y1w
sz2vs s1u{s vv s1xsz u| s1s{t ux tv1s tt
s{2tx s1usx v1| s1wv| y1z s1szs z1t |1z{ x1u
s{2vt s1utx uz s1xvz uy s1tws |1| |1sx tv
s|2tx s1tvu tu s1usx t| s1sus vw {1vt tu
3q2 样品的色谱指纹图谱 样品的指纹图谱中主
要色谱峰指定为 t ∗ {k图 ulo其中峰 v为朝藿定 ≤o
w为淫羊藿苷 oz为箭藿苷
o另外根据已有的定性
分析 ≈z o峰 t为朝藿定 ou为朝藿定
o{为宝藿苷
´ o峰 xoy分别为朝鲜淫羊藿的特征指纹峰 ∞和
k论文待发表 l∀
4 讨论
411 依据图 u显示的不同生长季节朝藿定 ≤ !淫羊
藿苷 !箭藿苷
及总黄酮的含量变化情况 ox月初朝
藿定 ≤ !淫羊藿苷及总黄酮的含量最高 o随之急速下
降 o到 x月下旬 o已仅到原含量的 truk朝藿定 ≤和
总黄酮 l或不足 trvk淫羊藿苷 loy月中旬到最低
点 o然后缓慢回升 oz月中旬到 {月底为含量稍高的
平台期 o|月份又降低 ~这 v种成分含量的变化趋势
是基本一致的 o其中含量最高期分别是最低期的约
v倍 !|倍和 v倍 ∀而箭藿苷
含量较低 o从变化趋
势看 o从 y月 tx日至 {月 tx日的含量变化与朝藿
定 ≤和淫羊藿苷含量变化呈相反趋势 ∀但其后呈
现一致变化 o而文献 ≈{ 报道 o随着朝藿定 ≤和淫羊
藿苷含量的降低 o箭藿苷
含量一直升高至 |月 o
原因可能是不同植物在不同气候下的生长习性略不
同 ∀
朝鲜淫羊藿随生长季节 k或采收期 l变化淫羊
藿苷和总黄酮含量变化的研究已有多篇报
道 ≈yott2tv o均有一个先降低 o后略升高 o又降低的过
程 o如从淫羊藿苷的含量看 o吉林临江的样品最低点
在 {月 us日 o|月初含量升高 k但降低和升高值不
十分显著 l≈tt o辽宁新宾的样品最低点在 z月 tz
日 o到 {月 ty日升至高点 ~辽宁本溪的样品最低点
在 z月 us日 k取得的样品时间段少 l~吉林敦化和
通化的样品最低点在 z月初 o再升至高点的时间弱
光区和强光区不甚一致 o弱光区为 z月 tv日 o强光
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第 vu卷第 uu期
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∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uu
²√ °¨¥¨ µo ussz
图 u 样品的 °≤指纹图谱
¤qx月 {日 ~¥qz月 tx日 ~¦q{月 vt日
区为 {月 v日 ∀由此可以看出 o朝鲜淫羊藿中淫羊
藿苷等成分含量随季节变化的规律又随分布地区 !
生态环境而不同 o可能也随生长年度产生变化 ∀综
合上述结果 o朝鲜淫羊藿的药材采收时间在 z月底
到 {月中旬比较适合 ∀
412 朝鲜淫羊藿的 °≤指纹图谱基本特征为 }保
留时间在 t{ ∗ u{ °¬±的
≤组峰 k即峰 t pw构成
的峰群 l中淫羊藿苷 k峰 wl的峰最高 o朝藿定
k峰
ul次之 o朝藿定 k峰 tl再次 o朝藿定 ≤ k峰 vl最
低 o存在有不同于其他种类淫羊藿的特征峰 ∞kx号
峰 l和 ky号峰 l∀从作者观察的季节变化来看 o上
述特征比较稳定 o对朝鲜淫羊藿具有很好的鉴别意
义 ∀值得注意的是 x月 {日 !y月 tx日和 {月 vt日
的指纹图谱中 o箭藿苷
k峰 zl和宝藿苷 k峰 {l以
及附近的少糖苷化的化合物色谱峰较其他采收时间
的样品多 o这一情况是否影响质量值得关注 ∀
413 采收期 x月 {日 !z月 vs日 !{月 vt日和 |月
tx日内的 v份样品之间的朝藿定 ≤ !淫羊藿苷及总
黄酮的含量差异较大 o而其他采集期差异较小 k箭
藿苷
因为含量低 o差异常比较大 lo表明由于取样
的差异会产生不同的结果 o取样策略将是药材质量
研究必须特别关注的问题 ∀
≈参考文献
≈t 郭宝林 o王春兰 o陈建民 o等 q药典内 x种淫羊藿中黄酮类成
分的反相高效液相色谱分析 ≈ q药学学报 ot||yovtkwl}
u|uq
≈u 徐玲玲 o黄礼杰 o顾国献 q不同产地和品种淫羊藿中淫羊藿苷
的 °≤分析 ≈ q中国现代应用药学杂志 ousssotzkul}
ttsq
≈v 梁建英 o陈 钧 o段更利 o等 q反相高效液相色谱法测定淫羊
藿叶和浸膏中淫羊藿苷的含量 ≈ q上海医科大学学报 o
usssouzkvl}t{xq
≈w 王明权 o毕志明 o李 萍 o等 q高效液相色谱法测定淫羊藿中
淫羊藿定 ≤和淫羊藿苷的含量 ≈ q中国中药杂志 oussvou{
kttl}tsuxq
≈x 郭 青 o张庆生 q反相高效液相色谱法测定淫羊藿中淫羊藿
苷的含量及采用其指纹图谱鉴定淫羊藿 ≈ q中国药事 o
usswot{kttl}y{zq
≈y 陈翠萍 o沙 明 o杨松松 q朝鲜淫羊藿黄酮类成分在不同采收
期的含量变化 ≈ q中国中药杂志 ot||youtkul}{yq
≈z 裴利宽 o郭宝林 o黄文华 q中药淫羊藿主要资源种类药材质量
的系统研究 ≈ q中国中药杂志 ousszovukutl}q
≈{ ¬½∏² ¬½∏±²o ∏± ®¨¤½∏¬±∏°¤o ײ¶«¬¼∏®¬×¤±¤®¤o ·¨¤¯q ≥ ¤¨2
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≈| 郭宝林 o余竞光 o肖培根 q淫羊藿化学成分研究 ≈ q中国中药
杂志 ot||youtkxl}u|sq
≈ts 彭玉德 o郭宝林 o黄文华 q淫羊藿提取物的质量研究 ≈ q中国
中药杂志 ousszovukt{l}t{x{1
≈tt 齐晓丽 o赵 露 o王秀红 o等 q临江产朝鲜淫羊藿黄酮类化合
物及淫羊藿苷积累动态研究 ≈ q中药研究与信息 oussxoz
ktul}tyq
≈tu 李 娜 o宋少江 o李 仁 q不同采收期朝鲜淫羊藿中淫羊藿苷
机总黄酮的含量测定 ≈ q中药研究与信息 oussxozkul}|q
≈tv 董 然 o冯玉才 o刘丽娟 o等 q光照对野生淫羊藿有效成分含
量的影响 ≈ q吉林农业大学学报 oussvouxkwl}wtvq
≈责任编辑 张宁宁
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