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黄连保护酶活性和膜透性的研究



全 文 :#研究报告 #
黄连保护酶活性和膜透性的研究
马开森 3 o陈仕江 o钟国跃 o张德利 o李隆云
k重庆市中药研究院 o重庆 wsssyxl
≈收稿日期   ussz2st2tz
≈通讯作者   3 马开森 oר¯}tv{s{vzxsuu
黄连是我国传统常用中药材 o为多年生草本植
物 o从移栽到收获 o需要 x年左右 ∀黄连是对光照强
度很敏感的阴生植物 o在生育前期强光往往会导致
植株萎蔫 o叶片枯黄 ∀植物生物膜保护酶对各种逆
境有抵抗作用 o可保护生物的正常代谢 o本研究通过
对不同生育期黄连几种膜保护酶的动态变化及其与
细胞膜透性的关系的研究 o为黄连的栽培育种提供
有价值的基础数据 ∀
1 材料与方法
黄连样品 k味连 Χοπτισ χηινενσισl取于重庆石柱
县黄水镇黄连规范化种植基地 ∀超氧化物歧化酶
k≥’⁄l活性用氮蓝四唑光化还原法测定 ≈t  ∀过氧
化氢酶 k≤„×l活性用碘量法测定 ≈tou  ∀过氧化物酶
k°’÷ l活性用愈创木酚法测定 ≈t2v  ∀丙二醛 k ⁄„l
含量用硫代巴比妥酸法测定 ≈v  ∀细胞膜透性用电
解质渗透率表示 o脯氨酸含量用磺基水杨酸法测
定 ≈uov  ∀热稳定蛋白质的测定参照李美茹 ≈w 等的方
法 o实验均在室温 kux ε 左右 l下测定 ∀
2 结果与分析
2q1 黄连不同生育期膜保护酶活性与热稳定蛋白质
的变化规律 各年生黄连的 ≥’⁄活性在 v月和 tt月
样品中较低 ox月份和 {月份样品中 ≥’⁄活性均较高
k表 tlo逐年变化为四年生达最高 k图 tlo五年生为
最低 ∀各年生黄连的 ≤„×和 °’÷的逐月变化规律性
不强 o而其热稳定蛋白以 {月份含量相对较高 o且这 v
种物质的年平均活性在逐年上升 o到第 w年达到高
峰 o但是到了第 x年明显下降 ∀
2q2 黄连细胞膜透性 !脯氨酸与丙二醛的变化研究
通过分析电解质渗透率 k表 ulo可见各年生的黄
连膜透性逐月提高 o至 {月份达到顶点 o而后开始下
降 ∀而各年生黄连中丙二醛 k ⁄„l和脯氨酸的含
表 t 黄连保护酶活性与热稳定蛋白的动态变化
株龄
取样
月份
≥’⁄
r˜# ªpt
≤„×
r°ª# ªpt #
°¬±pt
°’÷
rΛ°²¯# ªpt #
°¬±pt
热稳定蛋白
r°ª# ªpt
一年生 v wx1v uy1x vx1x tv1uw
x xu1t uu1w wt1u tu1vx
{ yz1u u|1v u{1x tw1uu
tt ww1x t{1z us1z ty1xt
二年生 v vy1w uw1t u|1v tu1tt
x w|1x ux1z uv1y tv1wz
{ v{1w vu1u vu1w t{1yx
tt vu1t uz1w uz1{ tw1vs
三年生 v wt1w uu1x vt1x tv1t|
x wx1z vw1t v{1z tx1yy
{ xu1w u{1v vu1u t|1ww
tt wt1x uz1z uy1t ty1z{
四年生 v xt1x vu1v vx1z tz1wu
x yu1w u|1w ws1u us1tt
{ xz1x vw1x vt1v ut1x|
tt w|1y uy1z u|1x t{1|z
五年生 v vw1w ut1w uy1y tw1yv
x v{1u ux1x u|1w ty1zx
{ wu1w t{1{ uv1u t|1su
tt vt1t ut1w us1x tw1zw
图 t 黄连保护酶活性动态年变化图
量高峰期出现各有不同 ∀
3 讨论
3q1 植物在生长过程中不停地产生活性氧 o在环境
胁迫下由于代谢发生障碍 o活性氧会大幅度增加 ∀
°µ¤¶¤§等认为高水平的活性氧可使膜质过氧化及大
分子蛋白质间聚合 o导致膜结构和功能的破坏或蛋
白质变性 o引起膜结构的变化及电解质外渗 ∀ ≥’⁄o
°’÷ o≤„×作为活性氧的有效清除剂 o它们的活性水
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第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·o ussz
表 u 黄连细胞膜透性 !脯氨酸与丙二醛含量的动态变化
株龄
取样
月份
电解质外渗率
rh
脯氨酸
rΛª# ªpt
丙二醛
rΛ°²¯# ªpt
一年生 v {1wu vu1y ts1x
x z1vx vz1x |1{
{ |1ty vt1u tu1u
tt {1uw wu1s tv1t
二年生 v {1tu wv1w z1y
x z1wz vw1x ts1x
{ |1x{ uw1z tt1y
tt z1w| vu1u |1w
三年生 v y1wv wz1t ts1z
x z1tw ws1w tu1v
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tt {1sw wu1z |1z
四年生 v z1uw vw1w tt1u
x {1xt vs1x {1|
{ |1wx uw1x |1x
tt {1tz vz1y tu1t
五年生 v {1ux ws1t tu1v
x {1sy vy1v tt1w
{ |1vv u|1x tu1x
tt {1ut vx1z ts1w
平也决定了膜质过氧化反应的程度 ∀ ≥’⁄能催化
超氧阴离子自由基的歧化反应而形成 ’u和 ‹u ’u o
从而减轻对植物的毒害 ∀ °’÷ 和 ≤„×则进一步分
解 ‹u ’u ∀ ≥’⁄是一种典型的诱导酶 o它的活性变化
在一定程度上反映了植株受胁迫的变化程度 ≈x  ∀
黄连是阴生植物 o在生长发育过程中 o要求光照条件
逐渐提高 o强光易对植株产生伤害 ∀试验结果表明 o
各年黄连在夏季高温高光强情况下 ≥’⁄活性最高 o
≤„×和 °’÷的含量也是较高的 o是黄连
适应性反应之一 ∀因此 o黄连抗高温逆境的能力与
保护酶活性的大小及其防御功能是相关联的 ∀
3q2 生物膜在植物逆境胁迫研究中占重要地位 o是
植物抵御逆境伤害的敏感部位 o许多研究证实生物
膜 k特别是质膜 l与植物抗性关系密切 ≈y  ∀在不同
生长阶段生物膜透性的状况可以直接反映出植株的
生理状况 o在植物受到高温伤害时 o细胞质膜透性会
增加 ∀电解质渗漏率测定结果表明 o随着气温升高
光照强度增强而逐渐升高 o其膜透性增加 o有利于对
高温高光照强度的抵御 ∀  ⁄„是膜质过氧化作用
的产物 o可以反映细胞膜在光温条件下的过氧化程
度 o但随着气温升高光照强度增强 o丙二醛 k ⁄„l
并没有达到最大值 o可能除光温条件外 o还有其他的
影响因素 ∀
≈参考文献  
≈t  邹 琦 q植物生理生化实验指导 ≈   q北京 }中国农业出版社 o
t||{}{vq
≈u  波钦诺克 q植物生物化学分析方法 ≈   q北京 }科学出版社 o
t|{t}tytq
≈v  张志良 q植物生理学实验指导 ≈   q北京 }高等教育出版社 o
t||y}utyq
≈w  李美茹 o刘鸿先 q钙对水稻秧苗的效应 ≈ q植物学报 ot||yov{
k|l}zvxq
≈x  罗广华 o王爱国 o郭俊颜 q几种外源因子对大豆幼苗 ≥’⁄活性
的影响 ≈ q植物生理学报 ot||sotykvl}uv|q
≈y  王建华 o刘鸿先 o徐 同 q超氧物歧化酶 k≥’⁄l在植物逆境和
衰老生理中的作用 ≈ q植物生理学通讯 ot|{|ot}uq
≈责任编辑 张宁宁  
≈收稿日期   ussy2sy2us
≈通讯作者   3 王四旺 oר¯}ksu|l{wzzvu|so∞2°¤¬¯}º¤±ª¶¬ºƒ
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不同生长期女贞子中齐墩果酸和熊果酸的含量变化
戚志华 o王四旺 3 o王剑波 o谢艳华 o黎海妮 o涂剑波
k第四军医大学 药物研究所 o陕西 西安 ztssvul
女贞子是木犀科植物女贞 Λιγυστρυµ λυχιδυµ
„¬·q的果实 ∀在我国资源丰富 o华东 !华南 !西南及
华中各地均产 ∀具有滋补肝肾 !明目乌发之功
效 ≈t  ∀本实验旨在测定不同生长期女贞子中有效
成分齐墩果酸和熊果酸的含量 o对于指导该药的采
收时间及合理应用具有实际意义 ∀
1 仪器与试药
• ¤·¨µ¶yss高效液相色谱 ou||y二极管阵列检
测器 ozzux¬手动定量进样阀 o∞°³²º µ¨软件 ∀ „ª¬2
¯¨ ±·微量进样器 ∀ • uss⁄电子分析天平 k德国 ≥¤µ·²2
µ¬∏¶公司 l∀
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第 vu卷第 tx期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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