全 文 ：江苏地产白首乌 ≤ut甾苷对 ∆2半乳糖
衰老模型小鼠的作用研究
张士侠 u o李 心 t o尹家乐 t o陈莉莉 t o张洪泉 t3
ktq扬州大学 医药研究所 o江苏 扬州 uuxsst~
uq淮安市第四人民医院 o江苏 淮安 uuvvssl
≈摘要   目的 }研究江苏地产白首乌 ≤ut甾苷 k≤≥Šl对 ∆2半乳糖 k∆2ª¤¯l衰老模型小鼠的影响 ∀方法 }小鼠分
为正常组 o模型组 o≤≥Š低 !中 !高剂量组 ktsousows °ª# ®ªpt # §pt l和维生素 ∞k∂ ¬·∞l对照组 ktss °ª# ®ªpt #
§pt lo除正常组外均采用 ∆2ª¤¯ ts °ª# ®ªpt颈背部皮下注射 o试验期为 xy §∀检测小鼠血清 !心 !肝 !脑组织中超氧
化物歧化酶 k≥’⁄l活性 !丙二醛 k ⁄„l含量及端粒酶活性 ∀结果 }与正常组相比 o模型组小鼠血清 !心 !肝 !脑组织
≥’⁄活性降低 o含量增加 o血清 !心 !肝端粒酶活性降低 kΠ  s1stl~与模型组比较 ov个 ≤≥Š组及 ∂ ¬·∞组小鼠血清 !
心 !肝 !脑 ≥’⁄活性升高 o ⁄„含量减少 kΠ  s1stl~低剂量 ≤≥Š组及 ∂ ¬·∞组小鼠血清端粒酶活性有升高的趋势 o
但差异不显著 o中 !高剂量 ≤≥Š组小鼠血清端粒酶活性升高 kΠ  s1stl~v个 ≤≥Š组及 ∂ ¬·∞组均能升高小鼠心脏
端粒酶活性 kΠ  s1stl~v个 ≤≥Š组及 ∂ ¬·∞组小鼠肝及脑组织端粒酶活性无明显变化 ∀结论 }≤≥Š能拮抗自由基
损伤 o提高 ∆2ª¤¯衰老模型小鼠血清 !心 !肝 !脑组织 ≥’⁄活性 o减少  ⁄„含量 o提高血清 !心组织端粒酶活性 ∀
≈关键词   白首乌 ≤ut甾苷 ~∆2半乳糖 ~超氧化物岐化酶 ~丙二醛 ~端粒酶活性
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszluv2uxtt2sw
≈收稿日期   ussy2tt2ts
≈基金项目   江苏省科技招标项目 k≥usswsyssxl
≈通讯作者   3 张洪泉 oר¯}ksxtwlz|z{{zzoƒ¤¬}ksxtwlz|z{{
uto∞2°¤¬¯} §¯¬¬§¬vƒ tuyq¦²°
白首乌是中医药传统补益药 o为萝藦科植物柏
氏牛皮消 Χψνανχηυµ βυνγει ⁄ ¦¨± o¨耳叶牛皮消 Χ.
αυριχυλατυµ • ²¼¯ ¨• ¬ª«·和隔山消 Χ. ωιλφορδιι  ¤¬¬°
的块根 ≈t  ∀有研究表明 o白首乌 ≤ut甾苷及甾苷元
具有较强的清除羟自由基的能力 ≈u  ∀白首乌总苷
可抑制过度运动所引发的氧化损伤 ≈v  ∀ ≤ut甾苷
kª¤ª¤°¬±¬± l¨能减少小鼠肝脏中过氧化脂质的形成
和在剂量依赖效应下有效抑制肝醛氧化酶活性 ≈w  ∀
本研究从衰老的自由基学说和端粒学说入手 o
采用 ∆2半乳糖 k∆2ª¤¯l衰老小鼠模型 o以抗氧化剂
维生素 ∞≈x 作为对照 o观察白首乌 ≤ut甾苷对其血
清 !心 !肝 !脑组织超氧化物歧化酶活性和丙二醛
k ⁄„l含量及心 !肝 !脑组织端粒酶活性的影响 o并
对其抗氧化 !抗衰老作用机制进行初步探讨 ∀
1 材料
1q1 动物
v月龄 Œ≤• 小鼠 o清洁级 o雌雄各半 o体重 uy ∗
vu ªo由扬州大学实验动物中心提供 o动物合格证号
≥≤÷Žk苏 lussu2sss|∀实验室温度 t{ ∗ uy ε o自然
照明 o实验前适应环境饲养 t周 ∀
1q2 药物
白首乌 ≤ut甾苷为江苏滨海产耳叶牛皮消 Χ1
αυριχυλατυµ k中国药科大学生药教研室王强教授鉴
定 l块根粗粉提取精制得 ≤ut甾苷部位 o由扬州大学
医药研究所提纯 o经结构分析和含量测定 o其可测成
分达 {sh以上 ∀临用前用 th的 ≤ ≤ 2‘¤配置成混
悬液 ∀
1q3 试剂
∆2ª¤¯k上海试剂二厂 o批号 |{tstvlo维生素 ∞
k东海制药厂 o批号 ussxswtulo端粒酶活性检测试剂
盒 k美国 …°…公司 o批号 ²¯·zsyutxlo考马斯亮蓝蛋白
测定试剂盒 k批号 ussysuttl!≥’⁄k批号 ussxs{tsl!
 ⁄„k批号 ussxtus{l检测试剂盒均由南京建成生物
研究所提供 o其余试剂均为国产分析纯 ∀
1q4 仪器
zuu分光光度计 k上海精密科学仪器有限公
司 lo°× p  • vtss⁄组织匀浆机 k瑞士 °²¯¼·µ²±公
司 lo∞÷{ss˜∂酶标仪 k美国 …Œ’ 2×∞Ž公司 lo°×≤
#ttxu#
第 vu卷第 uv期
ussz年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ uv
⁄ ¦¨¨°¥¨ µo ussz
puss°≤• 仪 k美国  公司 lo台式低温高速离心机
k德国 ‹ ·¨¬¦«公司 lo…°tt’≥电子天秤 k德国 ≥¤µ·²2
µ¬∏¶公司 lo׋ p |x恒温振荡仪 k太仓医疗器械
厂 lo‹‹ • ut pyss„电热恒温水温箱 k黄石市恒丰
医疗器械有限公司 l∀
2 方法
2q1 动物分组与处理
小鼠随机分为 y组 }正常组 !模型组 !白首乌 ≤ut
甾苷低 !中 !高 ktsousows °ª# ®ªpt # §pt l剂量组 o
维生素 ∞ktss °ª# ®ªpt # §pt l组 o每组 {只 ∀除正
常组外 o其他各组按文献 ≈y 方法造模 ∀将 ∆2ª¤¯溶
于注射用水 o体积分数 tsh o注射剂量为 ts °#
®ªpt小鼠体重 o颈背部皮下注射 o每天 t次 o连续 {
周 ∀正常组注射同体积的注射用水作对照 ∀在造模
的同时 o白首乌 ≤ut甾苷和维生素 ∞组按 us °#
®ªpt体重灌胃给药 o正常组和模型组给同体积的
th的 ≤ ≤ 2‘¤溶液 ∀ {周后 o摘眼球取血处死小
鼠 o分离血清 o快速摘取心 !肝 !脑 o在低温条件下进
行新鲜组织匀浆 o离心 o取上清检测 ∀
2q2 检测指标及方法
2q2q1 ≥’⁄活力测定和  ⁄„含量测定 小鼠心 !
肝 !脑组织用滤纸拭干后 o精密称重并尽快剪碎 o与
冷生理盐水按 tΒ|的比例 k质量体积比 l混合 o用匀
浆器 ts sss ∗ tx sss µ# °¬±pt的速度打匀 v ∗ x次 o
每次 ts ¶o之后以 v sss µ# °¬±pt的速度离心 ts
°¬±o分离出上清液即得 tsh的组织匀浆 o按照试剂
盒标注的方法测定  ⁄„含量 k硫代巴比妥酸法 l∀
将 tsh组织匀浆稀释 ts倍后按照试剂盒标注的方
法分别测定 ≥’⁄活力 k黄嘌呤氧化酶法 l和蛋白含
量 k考马斯亮蓝显色法 l∀
2q2q2 端粒酶活性检测 采用 °≤• 2∞Œ≥„法 ≈z  ∀
操作步骤按试剂盒说明书进行 o于酶标仪 wxs ±°处
测定吸收度 kΑl值 ∀
2q3 统计方法
实验结果以 cξ ? σ表示 o采用 ≥°≥≥ tt1s版本软
件进行处理 ∀两组间均数比较采用 τ检验 ~多组间
均数比较采用单因素方差分析 o多组间均数两两比
较采用 Θ检验 ∀
3 结果
3q1 各组小鼠血清 !心 !脑 !肝 ≥’⁄活力比较
与正常组比较 o模型组小鼠心 !脑 !肝 ≥’⁄活力
降低 ~和模型组相比 o白首乌 ≤ut甾苷和 ∂ ¬·∞组小
鼠血清心 !脑 !肝 ≥’⁄活力明显提高 ~与 ∂ ¬·∞组比
较 o白首乌 ≤ut甾苷 ws °ª组血清 !肝 !脑 ≥’⁄活力
变化无显著差异 o心肌 ≥’⁄活力提高程度高于 ∂ ¬·∞
组 ∀见表 t∀
表 t 各组小鼠血清 !心 !肝 !脑 ≥’⁄活力比较 kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量 r°ª# ®ªpt 血清 r˜# °pt 心 r˜# °ªpt 肝 r˜# °ªpt 脑 r˜# °ªpt
正常 p xuu1u{z ? vx1x|v tt|1{xy ? t{1{vw {y1sx| ? x1xvw uvx1uyt ? ux1vxy
∂ ¬·∞ tss wxs1|vy ? wt1wt{touowl ts{1uzy ? {1w|ttouowl {y1v|y ? |1wysul tyu1v|u ? uy1{xvtoul
白首乌 ≤ut苷 ts uzy1zww ? xt1z{ztouowovl |u1xuv ? |1uzwtoul ||1s|| ? |1susul twz1s{{ ? us1xxwtoul
us v{w1uxy ? ww1wwvtouovl tu{1usw ? z1|w{touovl |y1uwu ? tw1|yvul tw{1xyt ? u|1twsuotl
ws wty1ttt ? xv1|xttoul tvv1|vs ? vy1yvstoul |u1yv{ ? ty1ztwul tx|1szs ? ty1wy{toul
模型 p ut|1|u| ? u{1{{{tl zu1vy| ? |1s{ztl yz1xyw ? {1w|wtl |u1uxz ? uu1yyytl
注 }与正常组比较 tl Π  s1st~与模型组比较 ul Π  s1st~与 ∂ ¬·∞组相比 vl Π  s1st~与白首乌 ≤ut甾苷 ws °ª组比较 wl Π  s1stk表 u同 l
3q2 各组小鼠血清 !心 !脑 !肝  ⁄„含量比较
与正常组比较 o模型组小鼠心 !脑 !肝  ⁄„含量增
加 o与模型组比较 o白首乌 ≤ut甾苷和 ∂¬·∞组小鼠血清
心 !脑 !肝  ⁄„含量减少 ~与 ∂¬·∞组比较 o各白首乌
≤ut甾苷组脑中  ⁄„含量显著降低 o白首乌 ≤ut甾苷 ws
°ª组血清中  ⁄„明显低于 ∂¬·∞组 ∀见表 u∀
表 u 各组小鼠血清 !心 !肝 !脑中  ⁄„含量比较 kcξ ? σ, ν € {l
组别
剂量
r°ª# ®ªpt
血清
r±°²¯# °pt
xh心肌匀浆
r±°²¯# °ªpt
tsh肝匀浆
r±°²¯# °ªpt
tsh脑匀浆
r±°²¯# °ªpt
正常 p x1|z{ ? s1yyu |1uts ? s1zux x1szy ? s1vzw tu1tw{ ? t1syu
∂ ¬·∞ tss x1vx{ ? s1vz|touowl ts1tt| ? t1z|yul w1uzt ? t1stvul tv1t{t ? t1{xtuowl
白首乌 ≤ut甾苷 ts x1wuy ? s1|vstouoowl |1{{t ? t1{zuul x1vzs ? s1{zvul tu1svy ? t1wzyuowovl
us x1{st ? t1s|stouowl tt1twy ? t1syxul w1{xv ? s1zzvul tt1{z{ ? t1tyvuowovl
ws w1ys{ ? s1|zutoul |1zxu ? t1ww|ul w1xsu ? s1{yzul ts1|vs ? t1w{suovl
模型 p z1swz ? s1|tvtl tw1wtx ? u1uyztl y1wvz ? t1tz{tl tz1v|u ? t1ywztl
3q3 各组小鼠心 !脑 !肝组织端粒酶活性比较
#utxu#
第 vu卷第 uv期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ uv
⁄ ¦¨¨°¥¨ µo ussz
在血清中 o中 !高剂量的白首乌 ≤ut甾苷能提高
∆2ª¤¯衰老模型小鼠血清中端粒酶活性 ∀在心脏组
织中 ov个剂量的白首乌 ≤ut甾苷组和 ∂ ¬·∞组对心
脏组织端粒酶活性有明显升高作用 o其中白首乌 ≤ut
甾苷 usows °ª组端粒酶活性提高幅度大于 ∂ ¬·∞组
kΠ  s1stlo白首乌 ≤ut甾苷 ts °ª组和 ∂ ¬·∞组相
比无显著差异 ∀在肝脏组织中 ov个白首乌 ≤ut甾苷
给药组的端粒酶活性无明显差异 o即白首乌 ≤ut甾苷
和维生素 ∞对 ∆2ª¤¯衰老模型小鼠肝脏组织端粒酶
活性无影响 ∀在脑组织中 o端粒酶活性变化均无显
著差异 ∀见表 v∀
4 讨论
表 v 各组小鼠心 !肝 !脑组织中端粒酶 kΑl活性比较 kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量 r°ª# ®ªpt 血清 心 肝 脑
正常 p zy1{{ ? {1{t xy1tu ? x1|w uy1yv ? v1z{ z{1ux ? tt1v|
∂ ¬·∞ tss xw1ss ? {1zstl vz1ss ? y1|xtoul t{1tv ? u1|stl zy1ux ? z1u{
白首乌 ≤ut甾苷 ts xv1v{ ? ts1z|tl v{1v{ ? v1wytoul t{1yv ? w1z{tl zz1tv ? |1t|
us ys1ss ? tu1{ztowovl wv1xs ? v1tytoul us1ux ? w1|xtl {w1{{ ? |1xt
ws yy1ss ? w1|vtoul w|1yv ? |1txtoul t|1ux ? w1|{tl {t1ss ? |1yuul
模型 p xu1tv ? z1yytl vu1xs ? w1vttl t{1ss ? w1u{tl z{1tu ? x1|t
注 }与正常组比较 tl Π  s1st~与模型组比较 ul Π  s1stowl Π  s1sx~与 ∂ ¬·∞组相比 vl Π  s1sx
白首乌为传统中药 o有强肝肾 o益精血功效 o现
代药理学研究表明其有抗肿瘤 !增强免疫功能 !抗氧
化 !延缓衰老等多方面的药理功能 ≈{  ∀江苏滨海为
白首乌主要产地之一 o滨海地产白首乌在国内外得
到广泛的使用和研究 ∀近年来有研究表明 o≤ut甾体
苷类是白首乌主要有效部位 ≈|  o结构研究表明 o≤ut
甾苷因为其结构上具有不饱和双键 o因此具有体外
清除自由基减轻氧化损伤作用 ≈uov  ∀但应用整体衰
老动物模型研究白首乌 ≤ut甾苷的抗衰老作用未见
有报道 ∀
本研究显示 o白首乌 ≤ut甾苷能够全面提高 ∆2
ª¤¯衰老模型小鼠血清 !心 !肝 !脑组织中 ≥’⁄的活
性 o降低脂质过氧化代谢产物  ⁄„的含量 o结果表
明白首乌 ≤ut甾苷可通过体内直接清除氧自由基作
用和激活机体抗氧化防御系统等作用提高机体的抗
氧化作用 o减少自由基对机体的损伤 o起到延缓衰老
的作用 ∀
自由基和非酶促糖基化衰老学说认为氧代谢产
生的自由基和非酶促糖基化产生的糖晚期糖基化终
末产物 k„Š∞lo„Š∞不能进一步降解代谢 o成为机
体微损伤因子 ∀ „Š∞可沉积于细胞内 o直接损伤组
织细胞 o灭活 ‘’o出现微循环障碍和缺血性改变 o
促进 ⁄氧化产生大量自由基 o还可使 ⁄‘„出现
核酸转位 o基因突变 o≥’⁄失去抗氧化活性 o„Š∞也
是蛋白质老化的主要原因之一 ≈tt  ∀动物长期大剂
量注射半乳糖可产生类似于自然衰老的亚急性衰老
模型 ≈y  ∀本实验采用 ∆2半乳糖衰老小鼠作为实验
对象 o研究白首乌 ≤ut甾苷在衰老损伤过程中的保护
作用和机制 ∀
自由基是人体正常代谢的产物 o在代谢过程中
不断产生 o同时机体存在相应的防御系统 o在正常情
况下机体的白由基水平可保持动态平衡 ∀一旦平衡
由于某种原因遭到破坏 o大量积累的自由基 o特别是
氧自由基 o将诱发机体内一系列脂质氧化连锁反应 o
造成生物膜结构和功能损伤 o破坏核酸 o蛋白质等生
物分子 o引发衰老和疾病的发生 ≈tt  ∀依据自由基学
说 o若能通过适量补充外源性抗氧化剂 o增强机体自
由基防御系统机能 o即可达到抗衰老的目的 ∀本实
验结果显示 o白首乌 ≤ut甾苷能提高小鼠血清 !心 !
肝 !脑等组织中的 ≥’⁄活力 o降低  ⁄„含量 o说明
其具有清除自由基和增强机体自由基防御系统的活
力的作用 o能降低过氧化脂质代谢产物的含量 ∀
维生素 ∞为自由基清除剂 o公认的抗氧化抗衰
老药物 o还有研究表明 o维生素 ∞可以抑制癌细胞
端粒酶的活性 o从而发挥抗癌作用 o防治肿瘤和抗衰
老很有可能是通过影响端粒酶活性而达到防治目
的 ≈tu  ∀本试验以维生素 ∞为对照 o有助于客观评价
白首乌 ≤ut甾苷的抗衰老作用 ∀
端粒在染色体定位 !复制 !保护和控制细胞生
长 !寿命等方面具有重要作用 o并与细胞凋亡 !细胞
转化和永生化密切相关 o端粒长度缩短的减少可能
是由于明显降低细胞内的氧自由基 o或者激活了端
粒酶活性 ≈tvotw  ∀本实验结果显示 o白首乌 ≤ut甾苷
对 ∆2ª¤¯衰老模型小鼠血清 !组织端粒酶活性的影
响显示具有明显的器官差异性 o白首乌 ≤ut甾苷对小
鼠血清 !心肌组织端粒酶活性有提高作用 o而对肝和
脑组织中的端粒酶活性影响不明显 ∀提示激活部分
组织细胞的端粒酶活性 o延缓端粒缩短可能是其抗
#vtxu#
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∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ uv
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衰老作用的机制之一 ∀对不同器官组织中的端粒酶
活性影响有差异 o可能与各组织的细胞代谢状态差
异有关 ∀
≈参考文献  
≈t  ≥«¤± o ¬∏• ‹ o ≥«¨ ± ≠ ‹ o ·¨¤¯q Š¤¶·µ²³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·²©¤
·µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬± ¶¨¨ «¨ µ¥¤¯ §µ∏ª…¤¬¶«²∏º∏²± ¬¨³¨ µ¬° ±¨·¤¯ ª¤¶·µ¬¦
¯¨¶¬²±¶¬± µ¤·¶≈ q ∞·«±²³«¤µ°¤¦²¯o ussyotsz}v{|q
≈u  宋俊梅 o丁霄霖 q白首乌中 ≤ut甾甙及甾甙元清除羟自由基的
功能 ≈ q无锡轻工业大学学报 ot||{otzkul}wvq
≈v  ¨¨⁄ ˜o ≥«¬± ⁄ ˜o ‹∏«Žq Œ±«¬¥¬·²µ¼ ©¨©¨¦·¶²©ª¤ª¤°¬±¬± o¨ ¤
¶·¨µ²¬§¤¯ ¤¯®¤¯²¬§©µ²° ¦¼±¤±¦«∏° º¬¯©²µ§¬¬²± ¬¯³¬§ ³¨ µ²¬¬§¤·¬²±
¤±§¤¯§¨ «¼§¨ ²¬¬§¤·¨ ¤¦·¬√¬·¼≈ q ° ¤¯±·¤ §¨o t||yoyu}w{xq
≈w  ¨¨ ⁄ ˜o ≥«¬± ⁄ ˜o ‹∏« Žq ≥·µ∏¦·∏µ¨2¤¦·¬√¬·¼ µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³ ²©
ª¤ª¤°¬±¬±¨¤±§¬·¶§¨ µ¬√¤·¬√¨²± ·«¨ ¬±«¬¥¬·¬²± ²©«¨ ³¤·¬¦¤¯§¨ «¼§¨
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·¬√¬·¼ ¬± ⁄⁄2t «∏°¤± ¦²¯²µ¨¦·¤¯ ¤§¨ ±²¦¤µ¦¬±²°¤¦¨¯¯¶¥¼ ·²¦²·µ¬¨±²¯
¥¬²¦«¨ °¬¦¤¯ ¤±§¥¬²³«¼¶¬¦¤¯≈ q • ¶¨≤²°°∏±o ussyovw{}tzs1
Εφφεχτ οφ Χut τεροιδαλγλψχοσιδε φροµ ροοτ
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‹„‘Š ≥«¬2¬¬¤u o Œ÷¬±t o ≠ Œ‘¬¤2¯ t¨ o ≤‹∞‘¬2¯¬t o ‹ „‘Š ‹²±ª2´ ∏¤±t
(t. Τηε Μεδιχαλανδ Πηαρµ αχευτιχαλΑχαδεµ ψ οφ Ψανγζηου Υνιϖερσιτψ, Ψανγζηου uuxsst, Χηινα;
u. Ηυαιαν wτη ΠεοπλεjσΗοσπιταλ, Ηυαιαν uuvvss, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼·«¨ ©¨©¨¦·²©≤ut ¶·¨µ²¬§¤¯ ª¯¼¦²¶¬§¨ k≤≥Šl ©µ²° ·«¨ µ²²·²©Χψνανχηυµ αυριχυλατυµ ©µ²° ¬¤±2
ª¶∏²± ∆2ª¤¯¤¦·²¶¨ k∆2ª¤¯l ¬±§∏¦¨§ ¤ª¬±ª°²§¨ ¯°¬¦¨q Μετηοδ : ∆2ª¤¯ ¤ª¬±ª°²∏¶¨ °²§¨ ¯ º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ § ¥¼ ¦¨µ√¬¦²§²µ¶¤¯ µ¨ª¬²±
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≈责任编辑 古云侠  
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第 vu卷第 uv期
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中 国 中 药 杂 志
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