全 文 ：ｅｎｔｏｒａｔｓｂｙｉｇ，ｔｈｅｄｏｓａｇｅｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎｗａｓ２９４７８ｍｇ·ｋｇ－１．Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎｉｎｒａｔｐｌａｓｍａｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙ
ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳａｓｓａｙａｎｄｍａｉｎｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｐａｒａｍｅｔｅｒｓｗｅｒｅｅｓｔｉｍａｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｍａｉｎｌｙｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｐａｅｏｎｉ
ｆｌｏｒｉｎｗｈｅｎａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄＲａｄｉｘＰａｅｏｎｉａｅＲｕｂｒａｏｎｌｙｗｅｒｅａｓｆｏｌｏｗｓ：Ｃｍａｘ（１５５±０５３）ｍｇ·Ｌ
－１，Ｔｍａｘ（０９±０３）ｈ，ｔ１／２（１５１±
０６３）ｈ，ＭＲＴ（３０８±０７４）ｈ，ＡＵＣ０→τ（４６８±０８５）ｍｇ·ｈ
－１·Ｌ－１．Ｗｈｅｎｔｈｅｔｗｏｄｒｕｇｓａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｔｏｇｅｔｈｅｒ，ｔｈｅｃｏｒｅ
ｓｐｏｎｄｉｎｇｐａｒａｍｅｔｅｒｓｗｅｒｅ（０９３±０４２）ｍｇ·Ｌ－１，（１５±０８）ｈ，（３０８±１７９）ｈ，（５１９±１９５）ｈ，（３３６±０５６）ｍｇ·ｈ－１
·Ｌ－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆＣｍａｘ，ＡＵＣ０→τａｎｄＭＲＴｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｃｈａｎｇｅｄ（Ｐ＜００５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＲａｄｉｘＡｎｇｅｌｉ
ｃａｅＳｉｎｅｎｓｉｓｃａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙａｆｅｃｔｔｈｅｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ，ｔｈｅｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｏｆＲａｄｉｘＰａｅｏｎｉａｅＲｕｂｒａ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ；ＨＰＬＣＭＳ／ＭＳ；ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ；ＲａｄｉｘＡｎｇｅｌｉｃａｅＳｉｎｅｎｓｉｓ
［责任编辑 古云侠］
［收稿日期］ ２００８０４１２
［基金项目］ 北京大学“十五”“２１１工程”教育振兴计划；国家
高技术领域研究“８６３”计划（２００２ＡＡ２Ｚ３４３Ｃ，２００４ＡＡ２Ｚ３７８３）；北京
市科委科技专项（Ｚ０００４１０５０４０３１１）和天然药物及仿生药物国家重
点实验室开放课题项目
［通讯作者］ 杨秀伟，Ｔｅｌ：（０１０）８２８０５１０６，Ｅｍａｉｌ：ｘｗｙａｎｇ＠
ｂｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
利用 Ｃａｃｏ２细胞单层模型预测柯楠碱、育亨宾、
阿马碱、萝芙木碱的人肠吸收
马 莲，杨秀伟
（北京大学 药学院 天然药物及仿生药物国家重点实验室 天然药物学系，北京 １０００８３）
［摘要］ 目的：研究中药化学成分柯楠碱（ｃｏｒｙｎａｎｔｈｉｎｅ，ＣＯＲ）、育亨宾（ｙｏｈｉｍｂｉｎｅ，ＹＯＨ）、阿马碱（ａｊｍａｌｉｃｉｎｅ，
ＡＭＣ）和萝芙木碱（ａｊｍａｌｉｎｅ，ＡＭＬ）在人肠 Ｃａｃｏ２细胞单层模型的转运吸收。方法：利用人源结肠腺癌细胞系
Ｃａｃｏ２细胞单层模型研究ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和ＡＭＬ由绒毛面（ＡＰ侧）到基底面（ＢＬ侧），ＢＬ侧到 ＡＰ侧两个方向的
转运吸收过程。应用高效液相色谱法分离、紫外检测法检测对上述４个生物碱进行定量分析，计算转运参数和表
观渗透系数（Ｐａｐｐ），并与在Ｃａｃｏ２细胞单层模型上呈易吸收的阳性对照药普萘洛尔和难吸收的阳性对照药阿替洛
尔的进行比较。用药物的ＡＤＭＥＴ预测软件，考察４个化合物的Ｐａｐｐ值与其ｌｏｇＤ值之间的关系。结果：ＣＯＲ，ＹＯＨ，
ＡＭＣ和ＡＭＬ由ＡＰ侧到ＢＬ侧的Ｐａｐｐ值分别为（１８６３±００５５）×１０
－５，（１５４０±００８２）×１０－５，（２５２２±０２４６）×
１０－５，（１１５５±００９９）×１０－５ｃｍ·ｓ－１；由 ＢＬ侧到 ＡＰ侧的 Ｐａｐｐ值分别为（２３９０±００１７）×１０
－５，（１９８７±
０１５４）×１０－５，（１３７４±０２６０）×１０－５，（２４１８±０１２４）×１０－５ｃｍ·ｓ－１，与普萘洛尔的 ＰａｐｐＡ→Ｂ值［（２２３±
０１０）×１０－５ｃｍ·ｓ－１］基本一致。ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和 ＡＭＬ的 ＰａｐｐＢ→Ａ／ＰａｐｐＡ→Ｂ分别为 １２８，１２９，０５４和 ２０９；
ＡＭＬ外流是摄取的２０９倍。结论：ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和ＡＭＬ能够通过Ｃａｃｏ２细胞单层被动吸收，属于良好吸收的
化合物。其中，ＡＭＬ在Ｃａｃｏ２细胞单层模型的转运可能存在外流机制。在４个生物碱的转运吸收过程中，油／水分
配系数起着关键性的作用。
［关键词］ Ｃａｃｏ２细胞单层；柯楠碱；育亨宾；阿马碱；萝芙木碱；肠吸收；表观渗透系数
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）２０２３７３０６
传统中药用药绝大多数为口服。药物分子进入
血液循环、到达靶器官、达到药效浓度、产生生物学
效应，足够量的药物分子从胃肠道吸收是一个关键
性环节。因此，在口服创新药物或先导化合物［１］、
中药有效成分［２］和有毒成分［３］研究过程中，其肠吸
收研究显得非常重要。由于人源 Ｃａｃｏ２细胞（ｔｈｅ
ｈｕｍａｎｃｏｌｏｎｉｃａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｉｎｅｓ）体外模型［４］
研究药物的吸收、吸收过程及其吸收机制等比较简
单、重复性好，已被广泛应用于药物研究与开发中，
在药物开发早期对药物或先导化合物的肠道吸收性
质所作出的科学评价大大推动了制药业创新药物开
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发的速度。Ｃａｃｏ２细胞单层模型在中医药领域应用
还有其特殊意义，根据中药化学成分是否能够被吸
收及吸收过程的机制，预测该化学成分是否为中药
有效成分和／或有毒成分；根据中药单味药或复方的
总化学组分（或提取物）中各化合物的表观渗透系
数（ａｐｐａｒｅｎｔｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔｓ，Ｐａｐｐ）值并与单
体化合物的Ｐａｐｐ值进行比较，预测化合物间的相互
作用等。在“药物的吸收、分布、代谢、排泄、毒性与
药效（ＡＤＭＥＴ／Ａｃｔ．）平台建设”过程中，前报报道了
“中药化学成分肠吸收研究中 Ｃａｃｏ２细胞模型和标
准操作程序的建立”［４］以及中药中某些生物碱的肠
吸收转运［５７］。本研究报道在所建立的平台上研究
柯楠碱（ｃｏｒｙｎａｎｔｈｉｎｅ，ＣＯＲ）、育亨宾（ｙｏｈｉｍｂｉｎｅ，
ＹＯＨ）、阿马碱（ａｊｍａｌｉｃｉｎｅ，ＡＭＣ）和萝芙木碱（ａｊｍａ
ｌｉｎｅ，ＡＭＬ）在Ｃａｃｏ２细胞单层模型中的转运吸收。
１ 材料
１．１ 药品和试剂 见参考文献［５］。
ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和ＡＭＬ由天然药物及仿生药
物国家重点实验室“天然提取物样品库”提供，它们
的化学结构如图１，ＨＰＬＣ检查其纯度皆大于９８％。
图１ ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和ＡＭＬ的化学结构式
Ｃａｃｏ２细胞株（ＡＴＣＣ＃ＨＴＢ３７）购自美国
ＡＴＣＣ（ａｍｅｒｉｃａｎｔｙｐｅｃｕｌｔｕｒｅｃｏｌｅｃｔｉｏｎ，ｒｏｃｋｖｉｌｅ，
ＭＤ，ＵＳＡ）；本试验使用 Ｃａｃｏ２细胞代数为４４～４５
代。
１．２ 仪器 见 参考文献［５］。
２ 方法
２．１ 细胞培养条件 见 参考文献［５］。
２．２ ＨＰＬＣ色谱条件 流动相按体积比进行配制，
ＣＯＲ为甲醇水（６０∶４０），ＹＯＨ为甲醇水冰醋酸
（３０∶７０∶１），ＡＭＣ为甲醇水（８０∶２０）和 ＡＭＬ为甲
醇水冰醋酸（２０∶８０∶２）；流速皆为１ｍＬ·ｍｉｎ－１；进
样量皆为２０μＬ；ＣＯＲ，ＹＯＨ和 ＡＭＣ的检测波长皆
为２６８ｎｍ；ＡＭＬ的检测波长为２５４ｎｍ。
２．３ 摄取、转运和外流试验 选取细胞跨膜电阻＞
５００Ω·ｃｍ－２的Ｃａｃｏ２细胞单层，分别在细胞两侧
加入受试化合物和ＨＢＳＳ溶液（ＡＰ侧５００μＬ，ＢＬ侧
１５００μＬ）。ＡＰ侧给药为摄取和转运试验；ＢＬ侧给
药为外流试验。药后于恒温摇床（３７℃，５０ｒ·
ｍｉｎ－１）上孵育。ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和 ＡＭＬ的给药量
皆为５０μｍｏｌ·Ｌ－１（ＤＭＳＯ终浓度为０５％）。孵育
９０ｍｉｎ，分别收集 ＡＰ室或 ＢＬ室的溶液，单孔取点，
每点平行３孔。当ＡＰ侧给药时，给药端ＡＰ室取样
４００μＬ，接受端ＢＬ室取样１３００μＬ；当 ＢＬ侧给药
时，给药端 ＢＬ室取样 ５００μＬ，接受端 ＡＰ室取样
４５０μＬ。所取样品经冷冻干燥后分别加入不同体积
的甲醇：给药端加入４００μＬ，接受端加入１５０μＬ，漩
涡混匀后超声溶解２０ｍｉｎ，在１７０００×ｇ条件下离
心１０ｍｉｎ，取上清液，按２．２项所述方法进行测定。
２．４ Ｐａｐｐ值计算和数据处理 ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和
ＡＭＬ在Ｃａｃｏ２细胞单层模型中的 Ｐａｐｐ值按下式计
算：
Ｐａｐｐ（ｃｍ·ｓ
－１）＝ｄＱ／ｄｔ×１／Ａ×１／Ｃ０
上式中，Ｑ是积累转运量（ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅａｍｏｕｎｔｏｆ
ｔｒａｎｓｐｏｒｔ），代表化合物在接收端（ｒｅｃｅｉｖｅｒ）出现的总
量，单位为μｍｏｌ，ｄＱ／ｄｔ是渗透速率，单位为μｍｏｌ·
ｓ－１；Ｃ０是化合物在给予端（ｄｏｎｏｒ）的初始浓度，单位
为μｍｏｌ·ｃｍ－３；Ａ是聚碳酯膜的表面积，单位为
ｃｍ２。每数据点为平行３孔的平均值，用 珋ｘ±ｓ表示。
３ 结果
３．１ 定量分析方法的建立 分别精密称取 ＣＯＲ
３５４ｍｇ，ＹＯＨ３５４ｍｇ，ＡＭＣ３５２ｍｇ和 ＡＭＬ３２６
ｍｇ，用二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）溶解，并定容至１ｍＬ，即
得４个生物碱的１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１浓度的储备液。精
密吸取储备液３０μＬ加最后一次洗细胞的 ＨＢＳＳ稀
释至３ｍＬ，再从中依次吸取 １０００，６００，５００，４００，
３００，２００，１００和５０μＬ，分别用 ＨＢＳＳ稀释至１ｍＬ，
冷冻干燥，加入甲醇定容至１ｍＬ，各浓度点吸取２０
μＬ进样分析，得到峰面积（Ｙ）与摩尔浓度（Ｘ，ｍｏｌ·
Ｌ－１）的线性回归方程，ＣＯＲ Ｙ＝１２５１５Ｘ＋１７０５７
（ｒ＝０９９９５），线性范围为 １００×１０－５～１００×
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１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１；ＹＯＨ Ｙ＝００８５８Ｘ＋００４７１（ｒ＝
０９９９７），线性范围为１００×１０－５～１００×１０－４ｍｏｌ
·Ｌ－１；ＡＭＣ Ｙ＝０１２５２Ｘ－００８３８（ｒ＝０９９９８），
线性范围为 ２５０×１０－６～６００×１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１；
ＡＭＬ Ｙ＝００５２９Ｘ－００４１（ｒ＝０９９７７），线性范
围为２００×１０－５～１００×１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１。４个生物
碱对照品（Ａ１～Ａ４）和 Ｃａｃｏ２体系（Ｂ１～Ｂ４）中的
ＨＰＬＣ图见图２。
Ａ１～Ａ２分别是ＷＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ，ＡＭＬ对照品；
Ｂ１～Ｂ４分别是ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ，ＡＭＬ经Ｃａｃｏ２转运样品；
１ＣＯＲ；２ＹＯＨ；３ＡＭＣ；４ＡＭＬ
图２ ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和ＡＭＬ的ＨＰＬＣ图
３．２ 回收率试验 ＡＰ侧给药，ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和
ＡＭＬ给药浓度皆为５０μｍｏｌ·Ｌ－１。药后９０ｍｉｎ，分
别取ＡＰ室和ＢＬ室液按２．３项方法处理，按２．２项
方法测定，计算 ４个生物碱原形化合物的回收率
（ＡＰ和 ＢＬ侧的总和）皆大于 ９０％，证明它们在
Ｃａｃｏ２细胞内基本无或仅有少量蓄积，对实验结果
分析没有影响。
３．３ 摄取转运试验 ＡＰ或 ＢＬ侧给药，ＣＯＲ，
ＹＯＨ，ＡＭＣ和ＡＭＬ的给药浓度皆为５０μｍｏｌ·Ｌ－１。
温育９０ｍｉｎ后，分别取 ＡＰ或 ＢＬ室和 ＢＬ或 ＡＰ室
液，按２．３项方法处理，按２．２项方法测定，按２．４
项方法计算，４个生物碱从 ＡＰ侧到 ＢＬ侧和从 ＢＬ
侧到ＡＰ侧的Ｐａｐｐ值见表１。
Ａ１～Ａ４：分别为对照品 ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和
ＡＭＬ；Ｂ１～Ｂ４：分别为Ｃａｃｏ２细胞单层模型接收端
的 ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和 ＡＭＬ；ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和
ＡＭＬ的保留时间分别为 ８５４９，５９０１，７３１６和
９４８２ｍｉｎ。
ＰａｐｐＢ→Ａ：化合物从ＢＬ侧到ＡＰ侧的外流实验表
观渗透系数；ＰａｐｐＡ→Ｂ：化合物从 ＡＰ侧到 ＢＬ侧的转
运实验表观渗透系数；所有数据用 珋ｘ±ｓ（ｎ＝３）表
示；Ｐ：化合物的油／水分配系数；Ｄ：在ｐＨ７３５环境
中化合物的表观分配系数。本试验中，在 Ｃａｃｏ２细
胞单层模型呈良好转运的阳性对照药普萘洛尔的
ＰａｐｐＢ→Ａ值为（２２３±０１０）×１０
－５ｃｍ·ｓ－１，呈难转
运的阳性对照药阿替洛尔的 ＰａｐｐＢ→Ａ值为（２４５±
００１）×１０－７ｃｍ·ｓ－１。
３．４ Ｐａｐｐ与ｌｏｇＤ值的相关性考察 被动转运化合
物的吸收与化合物的极性相关，鉴于油／水分配系数
难以获得，以 ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和 ＡＭＬ在 Ｐａｌａｓ软
件预测的表观油／水分配系数ｌｏｇＤ（ｐＨ７３５）值代
表４个化合物的极性，考察了ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和
表１ ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和ＡＭＬ在Ｃａｃｏ２细胞单层双向转运的Ｐａｐｐ值（×１０
－５ｃｍ·ｓ－１）及其分析结果
化合物 保留时间／ｍｉｎ ＰａｐｐＡ→Ｂ ＰａｐｐＢ→Ａ ＰａｐｐＢ→Ａ／ＰａｐｐＡ→Ｂ ｌｏｇＰ ｌｏｇＤ
ＣＯＲ ８５４９ １８６３±００５５ ２３９０±００１７ １２８ ２４０ －００１
ＹＯＨ ５９０１ １５４０±００８２ １９８７±０１５４ １２９ ２４０ －００５
ＡＭＣ ７３１６ ２５２２±０２４６ １３７４±０２６０ ０５４ １９４ ０９９
ＡＭＬ ９４８２ １１５５±００９９ ２４１８±０１２４ ２０９ １７７ －１０９
ＡＭＬ的Ｐａｐｐ值与其ｌｏｇＤ值之间的关系，得到图３。
４ 讨论
建立了 ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和 ＡＭＬ在 Ｃａｃｏ２细
胞单层模型中的 ＨＰＬＣ检测方法，４个生物碱峰面
积与质量浓度线性关系良好。应用该方法测定了
ＡＰ侧给药转运９０ｍｉｎ时间点ＡＰ室和ＢＬ室液中上
述４个原形生物碱的总残存量，回收率（ＡＰ室和ＢＬ
室的总和）皆大于９０％，说明它们在 Ｃａｃｏ２细胞内
基本无或仅有少量蓄积，对实验结果不会产生影响。
在本试验条件下，在 Ｃａｃｏ２细胞单层模型呈良
好转运的阳性对照药普萘洛尔的 Ｐａｐｐ为（２２３±
０１０）×１０－５ｃｍ·ｓ－１，文献报道值为 ２７５×１０－５
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图３ ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和ＡＭＬ的转运表观渗透系数
（ＰａｐｐＡ→Ｂ，Ａ；ＰａｐｐＢ→Ａ，Ｂ）和ｌｏｇＤ的关系
数据点为（珋ｘ±ｓ，ｎ＝３）
ｃｍ·ｓ－１［４］；呈难转运的阳性对照药阿替洛尔的
Ｐａｐｐ值为（２４５±００１）×１０
－７ｃｍ·ｓ－１，文献报道值
为１０×１０－７ｃｍ·ｓ－１［４］。从表１结果可见，ＣＯＲ，
ＹＯＨ，ＡＭＣ和 ＡＭＬ的双向转运 Ｐａｐｐ值皆在１０
－５数
量级，推断它们皆为良好转运的化合物。但是，化学
结构不同，转运效率亦不同。表１结果预测其口服
在体内的吸收性从大到小的顺序为：ＡＭＣ＞ＣＯＲ＞
ＹＯＨ＞ＡＭＬ。
ＣＯＲ，ＹＯＨ和ＡＭＣ皆为吲哚类生物碱，ＡＭＬ为
二氢吲哚类生物碱。本研究考察了这４个生物碱的
Ｐａｐｐ值与其ｌｏｇＤ值之间的关系。从图３Ａ看出，随
着ｌｏｇＤ值的增加，４个生物碱从 ＡＰ侧到 ＢＬ侧的
Ｐａｐｐ值呈上升趋势，且两者具有很好的线性相关，说
明这些化合物在由ＡＰ侧吸收透过Ｃａｃｏ２细胞单层
到ＢＬ侧的转运过程中，其极性和油／水分配系数起
着主要的作用，ｌｏｇＤ值越大，油水分配系数越大，极
性越小，受试生物碱越容易透过 Ｃａｃｏ２细胞单层到
ＢＬ侧。化合物的极性主要是由分子结构决定的，相
同母核结构取代基不同，会直接导致吸收的明显差
异。就上述４个结构相近的单萜吲哚类生物碱而
论，结构中没有羟基的ＡＭＣ极性最小，吸收最好，而
六元环上有２个羟基的 ＡＭＬ极性最大，吸收最弱，
这说明羟基对化合物极性贡献很大，一个非极性基
团ＣＨ２ＣＨ３（ＡＭＬ）仍不足以抵消掉羟基的这种影
响。而极性处于中间的２个化合物ＹＯＨ和ＣＯＲ是
一对同分异构体，只是 Ｃ１６酯基构型的微小差异
（图１），但在Ｃａｃｏ２细胞单层模型吸收转运中表现
出一定的差异。其原因可能是在 ＣＯＲ中，Ｃ１６和
Ｃ１７位取代基分别位于六元环平面的异侧，空间位
阻相对较小，极性相对较小，故吸收较强；而ＹＯＨ中
的Ｃ１６和Ｃ１７位２个取代基皆位于六元环平面的
同侧，空间位阻较大，极性增强，吸收减弱。这个现
象提示了除分子的平面结构和取代基差异影响其吸
收转运外，化合物的立体结构和空间构型同样是影
响其体内吸收的重要因素。从 ＢＬ侧到 ＡＰ侧的转
运（图３Ｂ），ＹＯＨ和ＣＯＲ符合上述规律。从表１数
据，ＡＭＣ的ＰａｐｐＡ→Ｂ约是ＰａｐｐＢ→Ａ的１８倍，吸收大于
外流；ＡＭＬ的ＰａｐｐＢ→Ａ约是 ＰａｐｐＡ→Ｂ的２１倍，外流大
于吸收。它们的吸收转运可能存在更复杂的机制，
推测ＡＭＣ可能还存在由载体参与介导的主动运输，
而 ＡＭＬ的转运则可能存在外排载体的参与。Ｐ糖
蛋白（Ｐｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ，Ｐｇｐ）是一种脂膜糖蛋白，是多
药耐药基因 ｍｄｒ１（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄ
ｇｅｎｅ１）的产物，存在于 Ｃａｃｏ２细胞中，其功能是外
排底物（或外排进入 ＢＬ侧的药物）。如果 ＡＭＬ为
其底物，Ｐｇｐ将其排到ＡＰ侧（肠腔侧），使它的吸收
减少［８］。此是否为其从 ＢＬ侧到 ＡＰ侧的 Ｐａｐｐ值大
于从ＡＰ侧到ＢＬ侧的Ｐａｐｐ值的原因，还有待进一步
的实验进行探讨和验证。
药物在 Ｃａｃｏ２细胞单层模型的转运过程主要
为：药物分子从Ｃａｃｏ２细胞单层的ＡＰ侧跨过Ｃａｃｏ
２细胞单层或经由细胞间隙到达 ＢＬ侧。吸收好的
药物通常脂溶性较大，易分布于肠上皮细胞膜，同时
由于刷状缘细胞面积巨大，脂溶性较大的药物本质
上是通过被动跨膜转运途径进入体循环的。亲水性
药物和多肽等不易分布至刷状缘，由旁路细胞转运
透过上皮，这类药物吸收缓慢且较差。但是，由于刷
状缘细胞面积远大于（≥１００倍）细胞侧面连接间
的面积，足以补偿两种转运间的差别，故亲水性药物
跨膜转运与胞旁转运基本相当。已有研究证明紧密
连接是亲水性药物胞旁转运通路的限速因素［９］，有
些药物由于与营养物质结构相似可经主动转运吸
收。已有研究亦证明药物在 Ｃａｃｏ２细胞单层模型
主要有３条主动转运途径［１０１１］，即二肽、寡肽和 Ｐ
ｇｐ等载体，其中绝大多数是半载体介导半被动转
运吸收。如果被动转运渗透系数小，可能存在载体
饱和现象，则使吸收分数下降。但对于 Ｐｇｐ介导的
药物外排作用，如果其过程存在饱和现象，则可使吸
收分数增加。由于胞饮作用容量小，在实际分析中
则很少考虑。
本项研究探讨了 ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣ和 ＡＭＬ在
Ｃａｃｏ２细胞单层模型的双向转运，从以上结果可以
预测，这些生物碱皆能进入体循环，发挥生物学活
性。
［参考文献］
［１］ 杨秀伟，杨晓达，蒲小平，等．创新药物研究中的吸收、分布、
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Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２０
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８
代谢、排泄／毒性（ＡＤＭＥ／Ｔｏｘ．）平台建设［Ｊ］．北京大学学报
（医学版），２００４，３６（１）：５．
［２］ 杨秀伟．基于体内过程的中药有效成分和有效效应物质的发
现策略［Ｊ］．中国中药杂志，２００７，３２（５）：３６５．
［３］ 杨秀伟．基于体内过程的中药毒性成分和毒性效应物质的发
现策略［Ｊ］．中华中医药杂志，２００７，２２（２）：６７．
［４］ 杨秀伟，杨晓达，王 莹，等．中药化学成分肠吸收研究中Ｃａ
ｃｏ２细胞模型和标准操作程序的建立［Ｊ］．中西医结合学报，
２００７，５（６）：６３３．
［５］ 马 莲，杨秀伟．盐酸黄连碱和小檗红碱在人源Ｃａｃｏ２细胞单
层模型中的吸收研究［Ｊ］．中国中药杂志，２００７，３２（２３）：２５２３．
［６］ 马 莲，王 莹，杨秀伟．利用Ｃａｃｏ２细胞模型研究白鲜碱和
茵芋碱在人小肠的吸收［Ｊ］．中国新药杂志，２００８，１７（２）：
１２４．
［７］ 马 莲，杨秀伟．利用人源Ｃａｃｏ２细胞单层模型研究罂粟碱、
Ｎ甲基四氢罂粟碱和头花千金藤碱在小肠道的吸收［Ｊ］．药
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ｔｉｏｎｂｙｍｕｌｔｉｐｌｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇＰｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ［Ｊ］．ＢｒＪ
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Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎｐｒｅｄｉｃｔｏｆａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｃｏｒｙｎａｎｔｈｉｎｅ，ｙｏｈｉｍｂｉｎｅ，ａｊｍａｌｉｃｉｎｅａｎｄ
ａｊｍａｌｉｎｅａｃｒｏｓｓｈｕｍａｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｂｙｕｓｉｎｇｈｕｍａｎ
Ｃａｃｏ２ｃｅｌｓｍｏｎｏｌａｙｅｒｓ
ＭＡＬｉａｎ，ＹＡＮＧＸｉｕｗｅｉ
（ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮａｔｕｒａｌａｎｄＢｉｏｍｉｍｅｔｉｃＤｒｕｇｓａｎｄＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮａｔｕｒａｌＭｅｄｉｃｉｎｅｓ，Ｓｃｈｏｏｌｏｆ
ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｐｒｅｄｉｃｔｔｈｅａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｃｏｒｙｎａｎｔｈｉｎｅ（ＣＯＲ），ｙｏｈｉｍｂｉｎｅ（ＹＯＨ），ａｊｍａｌｉｃｉｎｅ（ＡＭＣ）ａｎｄａｊｍａ
ｌｉｎｅ（ＡＭＬ）ａｓｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆｓｏｍｅｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｓｉｎｈｕｍａｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＢｙｕｓｉｎｇＣａｃｏ２
（ｔｈｅｈｕｍａｎｃｏｌｏｎｉｃａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｉｎｅｓ）ｃｅｌｍｏｎｏｌａｙｅｒｓａｓａｈｕｍａｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｍｏｄｅｌ，ｔｈｅｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙｏｆＣＯＲ，
ＹＯＨ，ＡＭＣａｎｄＡＭＬｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄｆｒｏｍａｐｉｃａｌｓｉｄｅ（ＡＰｓｉｄｅ）ｔｏｂａｓｏｌａｔｅｒａｌｓｉｄｅ（ＢＬｓｉｄｅ）ｏｒｆｒｏｍＢＬｓｉｄｅｔｏＡＰｓｉｄｅ．Ｔｈｅｆｏｕｒａｌ
ｋａｌｏｉｄｓｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）ｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈＵＶｄｅｔｅｃｔｏｒ．Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｐａｒａｍｅｔｅｒｓａｎｄａｐ
ｐａｒｅｎｔｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔｓ（Ｐａｐｐ）ｗｅｒｅｃａｌｃｕｌａｔｅｄａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｏｆｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ（ａｃｏｎｔｒｏｌｓｕｂｓｔａｎｃｅｏｆｈｉｇｈｐｅｒｍｅａｂｉｌｉ
ｔｙ）ａｎｄａｔｅｎｏｌｏｌ（ａｃｏｎｔｒｏｌｓｕｂｓｔａｎｃｅｏｆｐｏｏｒｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ）．ＴｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＰａｐｐａｎｄｌｏｇＤｖａｌｕｅｓｏｆｆｏｕｒａｌｋａｌｏｉｄｓｗａｓｉｎｖｅｓ
ｔｉｇａｔｅｄｂｙｕｓｉｎｇｄｒｕｇｓＡＤＭＥＴｐｒｅｄｉｃｔｓｏｆｔｗａｒｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅＰａｐｐｖａｌｕｅｓｏｆＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣａｎｄＡＭＬｗｅｒｅ（１８６３±００５５）×
１０－５，（１５４０±００８２）×１０－５，（２５２２±０２４６）×１０－５ａｎｄ（１１５５±００９９）×１０－５ｃｍ·ｓ－１ｆｒｏｍＡＰｓｉｄｅｔｏＢＬｓｉｄｅ，ａｎｄ
（２３９０±００１７）×１０－５，（１９８７±０１５４）×１０－５，（１３７４±０２６０）×１０－５ａｎｄ（２４１８±０１２４）×１０－５ｃｍ·ｓ－１ｆｒｏｍＢＬｓｉｄｅｔｏ
ＡＰｓｉｄｅ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｗｈｉｃｈＰａｐｐｖａｌｕｅｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｃａｌｗｉｔｈｔｈａｔｏｆｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ［（２２３±０１０）×１０
－５ｃｍ·ｓ－１ｆｒｏｍＡＰｔｏＢＬｓｉｄｅ］．
ＴｈｅｒａｔｉｏｏｆＰａｐｐＢ→Ａ／ＰａｐｐＡ→ＢｏｆＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣａｎｄＡＭＬｗｅｒｅ１２８，１２９，０５４ａｎｄ２０９，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｗｈｉｃｈｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔ
ｔｈｅｅｆｌｕｘｔｒａｎｓｐｏｒｔｏｆＡＭＬｗａｓ２０９ｔｉｍｅｓｈｉｇｈｅｒｍｏｒｅｔｈａｎｉｔｓｉｎｆｌｕｘｔｒａｎｓｐｏｒｔ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＣＯＲ，ＹＯＨ，ＡＭＣａｎｄＡＭＬｃａｎｂｅ
ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｄａｎｄａｂｓｏｒｂｅｄａｃｒｏｓｓｔｈｅｈｕｍａｎＣａｃｏ２ｃｅｌｓｍｏｎｏｌａｙｅｒｓ，ａｎｄｔｈｅｙｂｅｌｏｎｇｔｏｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙａｂｓｏｒｂｅｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．ＡＭＬｍａｙ
ｈａｖｅｂｅｅｎｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｅｆｌｕｘｍｅｃｈａｎｉｓｍｉｎＣａｃｏ２ｃｅｌｓｍｏｎｏｌａｙｅｒｓｍｏｄｅｌｆｒｏｍｔｈｅＢＬｔｏＡＰｓｉｄｅｄｉｒｅｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｏｉｌｗａｔｅｒｐａｒｔｉｔｉｏｎｃｏ
ｅｆｉｃｉｅｎｔｐｌａｙｋｅｙｒｏｌｅｓｉｎｔｈｅｔｒａｎｓｐｏｒｔａｎｄａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｔｈｅｆｏｕｒａｌｋａｌｏｉｄｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｃａｃｏ２ｃｅｌｍｏｎｏｌａｙｅｒ；ｃｏｒｙｎａｎｔｈｉｎｅ；ｙｏｈｉｍｂｉｎｅ；ａｊｍａｌｉｃｉｎｅ；ａｊｍａｌｉｎｅ；ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ；ａｐｐａｒｅｎｔｐｅｒｍｅａ
ｂｉｌｉｔｙｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔｓ
［责任编辑 古云侠］
·７７３２·
第３３卷第２０期
２００８年１０月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２０
Ｏｃｔｏｂｅｒ，２００８