全 文 ：#研究报告 #
高效液相色谱法测定连钱草中熊果酸的含量
张前军 tou o赵 超 t o杨小生 t3 o朱海燕 t o郝小江 t
ktq贵州省 中国科学院 天然产物化学重点实验室 o贵州 贵阳 xxssu~
uq贵州大学 精细化工中心 o贵州 贵阳 xxssuxl
≈收稿日期   ussx2s{2uv
≈通讯作者   3 杨小生 o ר¯} ks{xtl v{sxwx|o ƒ¤¬} ks{xtl
v{sxwx|o∞2°¤¬¯} ¼¤±ª¢¬¬¤²¶«¨ ±ªƒ ¼¤«²²1¦²°1¦±
连钱草为唇形科植物活血丹 Γλεχηοµ α λονγιτυβα
的干燥地上部分 o具有利湿通淋 !清热解毒 !散瘀消
肿的功效 o临床上用于治疗热淋 !石淋 !湿热黄疸等
疾病 ≈t  ∀作者对采自贵州省贵阳地区的连钱草进
行系统的提取与分离 o发现熊果酸的含量较高 ∀罗
启剑等 ≈u 曾用分光光度法测定了连钱草中熊果酸
的含量 ∀迄今为止 o尚未见 ‹°≤测定连钱草中的
熊果酸含量的报道 ∀因此建立了连钱草中熊果酸的
高效液相色谱测定法 o为连钱草的质量控制提供依
据 ∀
1 仪器与试药
„ª¬¯¨ ±·ttss高效液相色谱仪 o„ª¬¯¨ ±·ttss色
谱工作站 ∀连钱草样品购于贵阳 !凯里地区 o由贵阳
中医学院陈德媛教授鉴定为唇形科植物活血丹 Γ.
λονγιτυβα的干燥地上部分 ∀熊果酸对照品自制 o从
连钱草分离纯化得到 o经 ‘ • oŒ• o ≥鉴定为熊果
酸 o并用 ‹°≤ 面积归一化法测定 o其纯度为
|{1zh ∀乙腈为色谱纯 o其他试剂均为分析纯 ∀
2 方法及结果
2q1 色谱分析条件 ‹¼³¨ µ¶¬¯ ’⁄≥kwqy °° ≅ uxs
°°o x Λ°l色谱柱 o流动相乙腈 2sqtxh磷酸水溶液
k{xΒtxlo流速 tqs °# °¬±pt o检测波长 uts ±°o柱
温 vs ε o进样量 ts ˏ∀
2q2 对照品溶液的制备 精密称取熊果酸对照品
uxqvu °ªo置于 ux °量瓶中 ∀甲醇溶解并稀释至
刻度 o得含熊果酸 tqstv °ª# °pt的对照品溶液 ∀
2q3 供试品溶液的制备 取连钱草样品粉碎 k过
ys目 lotsx ε 干燥至恒重 o精密称取 t ª样品置于
tss °锥形瓶中 o加入氯仿 tss °o称重 o超声处理
ys °¬±o用氯仿补至原重 ∀过滤后取续滤液 xs °
浓缩至干 ∀残渣用甲醇溶解 o转移至 x °量瓶中 ∀
甲醇溶解并稀释至刻度 o摇匀 o微膜 ksqwx Λ°l过滤
即得 ∀色谱图见图 t∀
图 t 连钱草 ‹ °≤色谱图
„q对照品 ~…q连钱草药材 ~¤q熊果酸 ~¥q齐墩果酸
2q4 线性关系考察 精密移取熊果酸对照品储备
液 sqxotouovowox °o分别置于 ts °量瓶中 ∀甲
醇稀释至刻度 o配制成一系列浓度的标准工作液 ∀
在上述色谱条件进行测定 ∀以峰面积 Ψ对对照品
进样量 ΞkΛªl进行线性回归 o得熊果酸回归方程
Ψ €yww. y{Ξ p tv. s{, ρ€ s. ||| |o表明熊果酸的进
样量在 sqxt ∗ tsqtv Λª线性良好 ∀
2q5 稳定性试验 取同一样品溶液 o室温下放置 o
分别在 souowoyo{otu «进行测定 o峰面积的 • ≥⁄为
sqywh o表明样品溶液在 tu «内稳定 ∀
2q6 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液进样 o
每次 ts ˏo重复进样 x次 o峰面积 • ≥⁄为 sqtvh o
表明测定的精密度较好 ∀
2q7 重复性试验 精密称取同一批次的连钱草 x
份 o按 2q3项制备供试品溶液 o分别进样 ts ˏo测
定峰面积计算熊果酸的质量分数 o结果为 tqyu °ª
# ªpt o• ≥⁄为 tqsh o表明方法的重复性良好 ∀
2q8 加样回收率试验 精密称取已知含量的同一
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第 vt卷第 t{期
ussy年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφΧηινεσε Ματερια Μεδιχα
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≥ ³¨·¨°¥¨ µoussy
批次样品 x份 o每份样品各 sqx ªo置于 x个 tss °
锥形瓶中 o精密加入熊果酸对照品溶液 t °
kt1swy °ª# °pt l∀按 2q2方法制备供试品溶液 x
份 o按上述方法测定 ∀结果样品的平均回收率为
|zqxh o• ≥⁄为 sqw|h ∀
2q9 样品测定 按供试品溶液的制备方法分别制
备贵州 v个不同地点采收的连钱草供试品溶液 o分
别吸取对照品与样品溶液各 ts ˏo注入液相色谱
仪 ∀以外标法计算熊果酸的含量 o结果贵阳花溪 !贵
阳乌当 !贵州凯里连钱草样品中熊果酸的含量分别
为 sqtyh osquxh osqvuh ∀
3 讨论
3q1 提取条件的选择 根据熊果酸的溶解性能 o选
择氯仿 !甲醇 !乙醚作为提取溶剂 o比较了 v种提取
溶剂提取方法 k超声 !回流及索氏提取 l和不同提取
时间 ksqxotqsotqx «l对提取效果的影响 ∀结果显
示采用超声提取方法的提取率最高 o氯仿和甲醇对
熊果酸的提取率基本一致 ∀但甲醇提取物中杂质
多 o测定时干扰较大 ∀因此选用氯仿作为溶剂 o超声
tqs «为宜 ∀
3q2 分离条件的选择 根据文献调研 ≈vow  o选择了
甲醇 2水 !甲醇 2sqth磷酸水溶液 !乙腈 2水 !乙腈 2缓
冲溶液 !乙腈 2sqtxh磷酸水溶液等系统进行测定 ∀
结果表明乙腈 2sqtxh磷酸水溶液系统能使供试品
中熊果酸与齐墩果酸基本达到基线分离 ∀
3q3 采用本试验的 ‹°≤测定方法 o熊果酸具有较
好的分离效果和线性关系 ∀且消除了异构体齐墩果
酸的干扰 ∀本方法简单快速 !灵敏度高 !重复性好 o
可用于含连钱草药材及其制剂的质量控制 ∀
≈参考文献  
≈t  国家中医药管理局中华本草编委会 q中华本草 ≈  1第 z卷 1
上海 }上海科学技术出版社 ot|||}wzq
≈u  罗启剑 o祝德秋 o崔 岚 o等 q分光光度法测定连钱草中熊果酸
的含量 ≈ q药学服务与研究 oussvo v kwl} uy{q
≈v  刘成红 o刘 云 q高效液相色谱法测定马鞭草中熊果酸的含量
≈ q中国中药杂志 oussuo uz ktul} |tyq
≈w  袁 珂 o李根林 o李俊芝 o等 q车前草中熊果酸 !齐墩果酸的
‹°≤测定 ≈ q中草药 ot|||o vs ktul} |stq
≈责任编辑 张宁宁  
≈收稿日期   ussx2tt2tw
≈基金项目   国家 /十五 0科技攻关项目 kusst…„zst„x|l
≈通讯作者   3 张丽萍 oר¯}kstslyu{||zwv
蒙古黄芪和膜荚黄芪种子酯酶同工酶的研究
张丽萍 3 o史 静 o陈 阳 o李先恩
k中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 o北京 tsss|wl
黄芪为豆科植物蒙古黄芪 Αστραγαλυσµ εµ βρανα2
χευσkƒ¬¶¦«1l…ª¨ 1 √¤µ1 µ ονγηολιχυσk…ª¨ 1l ‹¶¬¤²或
膜荚黄芪 Α1µ εµ βραναχευσk ƒ¬¶¦«1 l …ª¨ 1 的干燥
根 ≈t  ∀二者的化学成分有差异导致其药效不同 ≈u  o
蒙古黄芪的药效更佳 o膜荚黄芪不仅药效 o而且栽培
管理技术 !产值均不如蒙古黄芪 ≈v  ∀二者在植物形
态特征和生物学特征方面有明显区别 o但其种子外
形比较相近 o肉眼难以区别 ∀本研究利用种子酯酶
同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳快速简便的鉴别了蒙古
黄芪和膜荚黄芪种子 ∀为蒙古黄芪种子真实性的检
验提供理论依据 ∀
1 材料与方法
111 供试材料 所采用的 z份蒙古黄芪种子和 v
份膜荚黄芪种子的编号 !产地和采收时间见表 ∀¯
表 t 供试材料
编号 种子来源 种类 采集年份
t 内蒙古包头 蒙古黄芪 usst
u 内蒙古包头 蒙古黄芪 ussu
v 内蒙古包头 蒙古黄芪 ussv
w 内蒙古赤峰 蒙古黄芪 ussw
x 宁夏 蒙古黄芪 ussv
y 山西浑源 蒙古黄芪 ussw
z 山西广灵 蒙古黄芪 ussw
{ 河北安国 膜荚黄芪 ussv
| 内蒙古赤峰 膜荚黄芪 ussw
ts 山东济南 膜荚黄芪 ussw
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第 vt卷第 t{期
ussy年 |月
中 国 中 药 杂 志
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