全 文 ：°¨²©Λιγυστιχυµ χηυανξιονγ k∂ ’≤ ≥∞⁄⁄≥lq Μετηοδ : ׫¨ ¶¨ ©¯2¨ °∏¯¶¬©¼¬±ª¤¥¬¯¬·¼o ·«¨ ©¨©¬¦¬¨±¦¼ ²©¶¨ ©¯2¨ °∏¯¶¬©¬¦¤·¬²±o ·«¨ ³µ²³¨ µ2
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[ Κεψ ωορδσ] ∂ ²¯¤·¬¯¨ ²¬¯ ©µ²° • «¬½²°¨²©¬ª∏¶·¬¦∏° ≤«∏¤±¬¬²±ª~ ≥¨¯©2¨ °∏¯¶¬©¼¬±ª§µ∏ª§¨ ¬¯√ µ¨¼ ¶¼¶·¨°~ Ιν ϖιτρο √¨¤¯∏¤·¬²±
≈责任编辑 鲍 雷  
≈收稿日期   ussy2tu2tw
≈基金项目   湖北省科技攻关课题 kussy„„vst≤sul
≈通讯作者   3 张先洲 o ר¯}tx|zusxv|s|o ∞2°¤¬¯}µ°½¬½ƒ
tyv1¦²°
青藤碱微乳的制备及其体外经皮渗透研究
张先洲 t3 o祝红达 u o孟书舫 u o潘细贵 t
kt1武汉大学 人民医院药学部 o湖北 武汉 wvssys~
u1武汉大学 药学院 o湖北 武汉 wvssz|l
≈摘要   目的 }筛选最佳处方制备青藤碱微乳 o考察青藤碱微乳对离体大鼠皮肤的经皮渗透特征 ∀方法 }以油
酸 p聚山梨酯 {s2无水乙醇 2水作为微乳的组成进行伪三元相图研究 o采用改进的 ƒµ¤±½扩散池研究青藤碱微乳的
透皮行为 o筛选最佳处方组成 o并与青藤碱凝胶作透皮比较 ∀结果 }青藤碱微乳的透皮稳态流量大于青藤碱凝胶
kΠ  s1stlo青藤碱微乳平均透皮速率为 tty1ww Λª# ¦° pu # « pt o透皮吸收符合零级模式 kρ s1||l∀结论 }青藤
碱微乳有较强的透皮能力 o有望成为青藤碱的新型透皮给药制剂 ∀
≈关键词   青藤碱 ~微乳 ~伪三元相图 ~透皮吸收
≈中图分类号   • u{v ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlt|2ussz2sw
青藤碱 k¶¬±²° ±¨¬± l¨是从防己科植物青风藤的
根茎中提取的生物碱单体 o临床可用于治疗风湿 !类
风湿性关节炎及心律失常等 ∀相关文献对青藤碱抗
风湿性关节炎的作用机制 !结构修饰 !药代动力学特
性 !临床应用等进行了研究 o发现青藤碱口服后存在
生物利用度低 !半衰期短 !有胃肠道不良反应 !经体
循环后到达病变部位药量少等缺点 ≈t  o因此青藤碱
的透皮给药制剂已受到广泛的关注 ≈ uov  ∀微乳是一
种外观透明 !粒径小于 tss ±°!热力学稳定的体系 o
它具有许多其他透皮制剂不可比拟的优点 }可极大
增加难溶性药物的溶解度 !具有热力学稳定性 !制备
方法简单 !显著增加药物的局部传递等 ≈w  ∀本实验
以 ’ r• 型微乳为药物载体 o通过伪三元相图筛选
微乳处方 o在此基础上研究青藤碱微乳的经皮渗透
行为 ∀
1 材料和仪器
青藤碱 k陕西太康生物科技公司 • ssxtsuwlo青
藤碱对照品 k中国药品生物制品检定所 oszzw2
ussusylo油酸 k天津市广成化学试剂有限公司 lo聚
山梨酯 {sk国药集团化学试剂有限公司 lo甲醇 !乙
腈均为色谱纯 o其他试剂均为分析纯 o大鼠 k武汉大
学医学院动物中心 l‹pv恒温磁力搅拌器 k江苏医
疗仪器厂 lo⁄⁄≥ p tt„数显电导率仪 k上海雷磁新
泾仪器有限公司 lo高效液相色谱仪 k美国戴安
³y{so紫外检测器 lo纳米粒度分析仪  ·¨¤¶¬½¨ µ‘¤±²
p ≥|sk英国  ¤¯√ ±¨仪器有限公司 l
2 方法与结果
211 青藤碱微乳体外透皮实验方法
21111 离体大鼠皮肤的制备
取大鼠 k雄性 ot{s ∗ uus ªlo脱毛剂脱毛后饲养
uw «o断颈处死 o取腹部皮肤 o去除皮下脂肪 o用生理
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盐水冲洗干净并浸泡在生理盐水中 o备用 ∀采用改
良 ƒµ¤±½扩散池 o将皮肤固定在扩散池的接合部 o角
质层朝向供给池 o真皮层与接受室相接 ∀在接收室
中注入接收液 ty °o保持 kvz ? s1xl ε 恒温水浴 o
于 touowoyo{otsotu «分别取出全部接受液 o并迅
速补充等体积新鲜接收液 o并排除接收室中的气泡 ∀
样液以 s1wx Λ°微孔滤膜滤过 o按 /体外分析方法
建立 0项下方法测定接受液中青藤碱的含量 o计算
单位面积累积透过量 kΘo Λª# ¦°pu l∀
21112 体外分析方法的建立
2111211 色谱条件与系统适应性 色谱柱为
≥«¬°2³¤¦® ≤≤ 2א ≥ ky1s °° ≅ txs °°ox Λ°l~流
动相为 s1xh 三乙胺溶液 2s1uh 冰醋酸 2乙腈 kvxΒ
wvΒuul~检测波长 uyu ±°~流速 t1s °# °¬±pt ~柱
温为室温 ~进样量 us ˏ∀在此色谱条件下 o微乳辅
料对青藤碱的测定无干扰 o理论板数以青藤碱计算
不小于 w ssso色谱图见图 t∀
图 t 青藤碱微乳 ‹ °≤图
„1对照品 ~…1样品 ~≤1空白样品
2111212 标准曲线 精密称取 ys ε 下减压干燥至
恒重的青藤碱对照品 w1wv °ªo置 ux °量瓶中 o用
甲醇适量使溶解并稀释至刻度 o摇匀得 tzz1u Λª#
°pt的对照品贮备液 ∀分别取贮备液 s1uos1xoto
uovow °至 ts °量瓶 o用甲醇稀释至刻度 o取各
对照品溶液 us ˏ进样 o以青藤碱质量浓度 Ξ对峰
面积 Ψ进行线性回归 o求得回归方程 Ψ €
s1tzx y ns1uxs {Ξ(ρ€s1||| {)o结果表明 o青藤碱
浓度在 v1xw ∗ zs1{{ Λª# °pt线性关系良好 ∀方
法回收率 |{1wsh o日内 • ≥⁄ s1|th o日间 • ≥⁄
t1uuh ∀
21113 接受液的筛选
接受液的选择应使实验过程中尽量保持漏槽状
态 o本试验分别以 ³‹y1{磷酸盐缓冲液 !生理盐水 !
uh °∞Š2wss水溶液为接受液 o按 21111项下方法研
究不同接受液对相同处方的青藤碱微乳皮肤渗透性
的影响 o所得方程分别为 }ΘΠΒΣ € vt1yu n tsu1|{τ,
ρ€s1||{ |; ΘΝαΧλ € 2u|1x{ n zy1w|zτ, ρ € s1||{ s;
ΘΠΕΓ2wss € 2tx1yv nts{1syτ, ρ€ s1||| s∀可见青藤碱
微乳在 v种接受液中的经皮渗透行为均接近零级释
药方程 o其中 uh °∞Š2wss水溶液的透皮速率常数
最高 o因此确定采用 uh °∞Š2wss水溶液为接受液 ∀
212 青藤碱微乳的制备
21211 微乳伪三元相图的研究
在预实验中通过测定青藤碱在 v种不同碳链的
油相 k油酸 !棕榈酸异丙酯 !肉豆寇酸异丙酯 l中的
饱和溶解度确定油酸为油相 o通过伪三元相图的比
较选择聚山梨酯 {s和无水乙醇为混合表面活性剂 ∀
将不同体积比的吐温 2{s和无水乙醇 kuΒvotΒtovΒ
uouΒtl置于具塞平底锥形瓶中混合 o在 ux ε 恒温
磁力搅拌器搅拌下加入油酸 o混合均匀后在搅拌下
滴加蒸馏水 o利用电导率判断微乳的类型 ≈x   o用 ’µ2
¬ª¬± y1t软件绘制伪三元相图以确定微乳区的界
限 ∀伪三相图中一个轴代表水相的含量 o另一个轴
代表表面活性剂和助表面活性剂 Σ°¬¬的含量 o第三
轴代表油相含量 ∀结果表明 Κ°为 uΒvotΒtovΒu时
微乳区域较大 oΚ°为 uΒt时微乳区域较小 o制备的
微乳不太稳定 o故选择 Κ°为 uΒvotΒtovΒu做进一步
筛选 o见图 u∀
图 u 不同 Κ°值时的伪三元相图
21212 青藤碱微乳的制备
根据相图选取 |个处方 k见表 tlo按处方比例
将表面活性剂和助表面活性剂混匀置于具塞平底锥
形瓶中 o在 ux ε 恒温磁力搅拌器搅拌下加入油酸 o
取处方量青藤碱加入上述混合溶液中搅拌至完全溶
解 o然后按比例滴入水相 o在磁力搅拌器下搅拌 o制
得质量浓度为 uh的淡黄色澄清透明青藤碱微乳 ∀
21213 处方筛选
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表 t 不同处方青藤碱微乳的经皮渗透 kν € vl
微乳处方 Κ° 油相 rh 表明活性剂 rh 水相 rh 拟合方程 累积经皮渗透率 rΛª# ¦° pu # «pt
t tΒt v ws xz Θ € yx. xxτp vs. zv(ρ€ s. ||| u) yx. xx
u tΒt x wx xs Θ € ||. wyτn {u. u{ (ρ€ s. ||y t) ||. wy
v tΒt { xs wu Θ € {v. {sτn uz. zz(ρ€ s. ||z u) {v. {s
w uΒv v ws xz Θ € |v. |sτp yx. uw( ρ€ s. ||| x) |v. |s
x uΒv x wx xs Θ € tty. wwτn tw. su(ρ€ s. ||| y) tty. ww
y uΒv { xs wu Θ € tsu. usτn z. zs(ρ€ s. ||{ v) tsu. us
z vΒu v ws xz Θ € yy. |sτp uu. s{ (ρ€ s. ||{ s) yy. |s
{ vΒu x wx xs Θ € tsy. vsτn tz. {s(ρ€ s. ||z z) tsy. vs
| vΒu { xs wu Θ € {v. w{τp tsu. us(ρ€ s. |{| s) {vqw{
精密量取 t °按表 t制备的不同处方微乳 o置
于扩散池中进行大鼠离体皮肤透皮吸收实验 o分别
于 touowoyo{otsotu «取样 o按 211项下方法处理
和测定 o比较不同微乳的体外累积渗透量和渗透速
率 o筛选最佳处方 ∀由表结果可知 o微乳中青藤碱的
经皮渗透符合零级模式 kρs1||lo不同组成微乳中
药物的经皮渗透速率显著不同 kΠ  s1stl∀当聚山
梨酯 {s与无水乙醇的总量分别固定为 wso wxo
xsh时 o随着 Κ°由 uΒ v增至 tΒto药物的经皮渗透
速率显著减小 kΠ s1stlo当继续增至 vΒu时 o经皮
渗透速率反而增大 o这种现象可能与微乳的内在结
构有关 ∀根据药物的经皮渗透大小 o选择 Κ°为 uΒ
v∀当 Κ° € uΒv时 o随着油酸量的增加 o青藤碱的经
皮渗透速率先增大后减小 ∀根据文献报道 o这可能
与微乳中的水含量变化有关 o当水含量较高时 o微乳
中的水易与皮肤水合 o使角质层的结构变得疏松 o增
加药物通道 o从而有利于药物经皮渗透量的增加 ∀
还可能是与药物的热力学活性有关 o表面活性剂含
量较低的微乳中的热力学活性较高 o亦利于药物的
经皮渗透 ∀从以上的分析中可初步确定较优处方
为 }uh青藤碱 oxh油酸 owxh聚山梨酯 {s与无水乙
醇 kΚ° € uΒvloxsh的纯化水 k即处方 xl∀制备的
青藤碱微乳平均粒径为 wv1sw ±°o多分散指数
s1xuso如图 v∀
图 v 青藤碱微乳的粒径分布图
213 青藤碱微乳与青藤碱凝胶的透皮考察
经过处方筛选选择最佳处方 x制备青藤碱微
乳 o同时按文献 ≈y 制备相同药物含量的青藤碱凝
胶 o按照 211项下方法对比研究两者的透皮行为 o两
组供给池中青藤碱和青藤碱的量均为 us °ªo结果
如表 to以 Θ对 τ拟合成线性方程分别为 Θ凝胶 €
{|1|vτ2u|1x|(ρ€ s1||y v, ν € v) , Θ微乳 € tty1wwτn
tw1su(ρ€ s1||| y, ν € v)o将两者体外透皮实验结
果进行 τ检验 o二者透皮稳态流量具有显著性差异
kΠ s1stl∀平均累积释药曲线见图 w∀
图 w 青藤碱微乳和盐酸青藤碱凝胶的平均
累积经皮透过量 2时间曲线
σ青藤碱微乳 ~υ盐酸青藤碱凝胶
3 讨论
制备微乳所选用的油相和混合表面活性剂通常
也是促渗剂 o因此油相和混合表面活性剂的选择和
用量对微乳透皮行为都有较大影响 ∀通过预实验发
现青藤碱在油酸中有较好的溶解度 o而且自身又是
一种促渗剂 o能增强角质层脂质流动而促进皮肤渗
透 o但微乳中也并不是油酸量越多 o药物透皮速率越
高 o其用量应通过实验优化 ∀从本实验结果可知当
油酸由 vh增加至 xh时 o在不同 Ž°值下青藤碱稳
态流量都在增大 o继续增大至 {h时 o青藤碱透皮速
率反而减小 ∀适量的表面活性剂能增加药物的溶解
度但含量过多时则使药物增溶在胶束溶液中阻碍药
物的释放 ≈z  o且高浓度的表面活性剂能破坏皮肤角
质层结构 o导致皮肤刺激性 o因此在处方筛选中应根
据绘制的三相图和体外透皮实验 o选择药物透皮速
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率最大 o表面活性剂含量较小的处方 ∀
与青藤碱凝胶的体外透皮行为比较可知青藤碱
微乳的稳态流量大于青藤碱凝胶的稳态流量 otu «
累积透过量分别是 kt wtu1zw ? xt1|yl Λª# ¦°pu和
kt sw|1xz ? xx1vtl Λª# ¦°pu o表明青藤碱微乳具
有更强的透皮能力 o有望开发成新的青藤碱透皮给
药制剂 ∀
≈参考文献  
≈t  周莉玲 o李 锐 o周 华 o等 1青藤碱制剂药动学试验中药物
累积法与血药浓度相关性研究 ≈  1中成药 ot||yot{k|l}
tzy1
≈u  周莉玲 o刘 强 o李 锐 o等 1青藤碱贴片释放度测定 ≈ 1中
成药 ot|||outkyl}uz|1
≈v  张先洲 o罗顺德 o罗 毅 o等 1盐酸青藤碱凝胶稳定性研究
≈ 1中国中药杂志 ousstouykvl}usw1
≈w  Š„≥≤’  • 1  ¬¦µ²¨ °∏¯¶¬²±¶¬± ·«¨ ³«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¤¯ ©¬¨ §¯}³¨ µ2
¶³¨ ¦·¬√ ¶¨¤±§ ¤³³¯¬¦¤·¬²±¶o ¬± Œ±§∏¶·µ¬¤¯ „³³¯¬¦¤·¬²±¶²©°¬¦µ²¨ 2
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ktulotyt1
≈y  张先洲 o周 建 o何 文 o等 1促透剂对青藤碱凝胶经皮渗透
作用的研究 ≈ 1中草药 ousswotskvxl}tttx1
≈z  • ˜ ‹ o • ¬¨± µ¨‘ ⁄o • ¤°¤¦«¤±§µ¤± ≤o ·¨¤¯1ײ³¬¦¤¯ ·µ¤±¶³²µ·
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¦µ¨ ±¨ ·«¨ ²³·¬°∏° ©²µ°∏¯¤·¬²± ¤±§³µ¨³¤µ¨ ’ r• ¶¬±²° ±¨¬±¨°¬¦µ²¨ °∏¯¶¬²± ¤±§¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨ ¬·¶ιν
ϖιτρο ·µ¤±¶§¨ µ°¤¯ §¨ ¬¯√ µ¨¼ ¤¥¬¯¬·¼1 Μετηοδ : ׫¨ °¬¦µ²¨ °∏¯¶¬²±¶º µ¨¨ ³µ¨³¤µ¨§º¬·«·«¨ ©²µ°∏¯¤·¬²± ¦²±·¤¬±¬±ª ²¯ ¬¨¦¤¦¬§2·º¨¨ ± {s2§¨ 2
«¼§µ¤·¨§¤¯¦²«²¯ 2º¤·¨µ¥¼ ·«¨ ³¶¨∏§²2·¨µ±¤µ¼ ³«¤¶¨ §¬¤ªµ¤° 1׫¨ ³¨ µ° ¤¨·¬²± ©¯∏¬²©¶¬±²° ±¨¬±¨º¤¶§¨ ·¨µ°¬± §¨ιν ϖιτρο ¥¼ ƒµ¤±½§¬©©∏2
¶¬²± ¦¨¯¯ ©¬·¨§º¬·«µ¤·¶®¬±1 ׫¨ ¶¬±²° ±¨¬±¨º¤¶§¨ ·¨µ°¬± §¨¥¼ ‹°≤1 ׫¨ ·µ¤±¶§¨ µ°¤¯ ¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶²©¶¬±²° ±¨¬±¨°¬¦µ²¨ °∏¯¶¬²±
º µ¨¨ ¦²°³¤µ¨§º¬·«·«¤·²©¶¬±²° ±¨¬±¨ ª¨ ¶¯1Ρ εσυλτ: ׫¨ ¶·¨¤§¼ ¶·¤·¨ ©¯∏¬ ²©¶¬±²° ±¨¬±¨°¬¦µ²¨ °∏¯¶¬²± º¤¶¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ «¬ª«¨ µ·«¤±
·«¤·²©¶¬±²° ±¨¬±¨ª¨ ¶¯1 ׫¨ ¤√ µ¨¤ª¨ ³¨ µ° ¤¨·¬²± µ¤·¨ ²©¶¬±²° ±¨¬±¨°¬¦µ²¨ °∏¯¶¬²± º¤¶tty1ww Λª# ¦° pu # « pt ιν ϖιτρο1Χονχλυσιον:
׫¨ ¶¨ µ¨¶∏¯·¶¬±§¬¦¤·¨§·«¤··«¨ ¶·∏§¬¨§°¬¦µ²¨ °∏¯¶¬²± ¶¼¶·¨° º¬·««¬ª« ³¨ µ° ¤¨·¬²± µ¤·¨ °¤¼ ¥¨ ¤³²·¨±·¬¤¯ √ «¨¬¦¯¨©²µ·«¨ ·µ¤±¶§¨ µ°¤¯
§¨ ¬¯√ µ¨¼ ²©¶¬±²° ±¨¬± 1¨
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≈责任编辑 鲍 雷  
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u x{z~影响因子为 sqxz|~基金论文比例 sqwz∀另据中国学术期刊综合引证年度报告 kussyl}5中国中药杂志 6总被引频次为
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