全 文 ：Στυδιεσ ον χηεµ ιχαλχονστιτυεντσ φροµ βαρκ οφ Βιεβερστεινια ηετεροστεµ ον
• ¤¬2©¨±ªtov o ÷¬¤²2©¨±ªt o ⁄∞ ≠ u¨ov o °¬uov o ⁄ ¬2¶«¨ ±ªu
(t. Τηε Νορτηωεστ Πλατεαυ Ινστιτυτε οφ Βιολογψ, Χηινεσε Αχαδεµ ψ οφ Σχιενχεσ, Ξινινγ {tsssz, Χηινα;
u. Χηενγδυ Ινστιτυτε οφ Βιολογψ, Χηινεσε Αχαδεµ ψ οφ Σχιενχεσ, Χηενγδυ ytsswt, Χηινα;
v. Γραδυατε Σχηοολοφ Χηινεσε Αχαδεµ ψ οφ Σχιενχεσ, Βειϕινγ tsssw|, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼ ·«¨ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶²©·«¨ º«²·¨ ³¯¤±·Βιεβερστεινια ηετεροστεµ ον k µ¨¤±¬¤¦¨¤¨ lq Μετη2
οδ : ׫¨ ·¨«¤±²¯ ¬¨·µ¤¦·²©·«¨ º«²¯¨³¯¤±·¶º¤¶¶¨³¤µ¤·¨§¥¼ √¤µ¬²∏¶¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦° ·¨«²§¶¤±§·«¨ ¦²°³²∏±§¶©µ²° ·«¨ ¬¨·µ¤¦·º µ¨¨
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§¨ µ¬√¤·¬√ ¶¨º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§©µ²° ·«¨ º«²¯¨³¯¤±·²©Βιεβερστεινια ηετεροστεµ ον ¤±§¬§¨ ±·¬©¬¨§¤¶ª¤¯ ª¨¬±¨k1lo χισ2w2«¼§µ²¬¼ª¤¯ ª¨¬±¨k2l
¤±§·µ¤±¶2w2«¼§µ²¬¼ª¤¯ ª¨¬±¨k3lq Χονχλυσιον: ׫¨ ·«µ¨¨¦²°³²∏±§¶º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§©µ²° ·«¬¶³¯¤±·©²µ·«¨ ©¬µ¶··¬° q¨
[ Κεψ ωορδσ] ׬¥¨ ·¤± ° §¨¬¦¬± ~¨ Βιεβερστεινια ηετεροστεµ ον~ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·
≈责任编辑 牛泽宇
≈收稿日期 ussy2sx2vt
≈通讯作者 3 黄勤安 oר¯}tv|xxvssuuto∞2°¤¬¯}«´ ¤¤tu{ ¶²2
«∏q¦²°
乌头碱水解转化规律的研究
黄勤安 t o张聿梅 u o何 轶 u o鲁 静 u o林瑞超 u
ktq皖南医学院 o安徽 芜湖 uwtsss~
uq中国药品生物制品检定所 o北京 tsssxsl
≈摘要 目的 }了解乌头碱的水解转化规律 ∀方法 }将乌头碱单体置纯水中 o密封加热 {otuotyousouw «o水解
液碱化萃取 o采用 °≤ 2 ≥分析主要水解产物 ~进一步采用中性氧化铝柱色谱分离 o得到主要水解产物 o并鉴定结
构 ∀结果 }经 °≤ 2 ≥分析 o鉴定主要水解成分峰为苯甲酰乌头原碱和乌头原碱 ∀水解 us «o苯甲酰乌头原碱的
转化率最高 ∀结论 }双酯型的乌头碱可水解转化为单酯型乌头碱和乌头原碱 ~在控制条件下 o苯甲酰乌头原碱为主
要水解产物 ∀
≈关键词 乌头碱 ~苯甲酰乌头原碱 ~乌头原碱 ~水解转化
≈中图分类号 u{wqt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusszlus2utwv2sv
川乌为常用中药 o具有回阳救逆 o温中补肾 o散
寒止痛等功效 ∀生川乌主要含双酯型生物碱 o包括
乌头碱 !次乌头碱和新乌头碱等 ∀双酯型生物碱对
心脏有致颤作用 o可引起心室纤颤 o有降压作用 o能
扩张血管 o并对垂体 2肾上腺皮质系统具有兴奋作
用 ∀对神经系统则有麻醉 o镇痛 o抑制呼吸中枢和致
皮肤黏膜麻痹等作用 o毒性明显 o治疗剂量与中毒剂
量接近 ≈t o安全范围小 o传统上需经炮制后使用 ∀
经炮制后 o双酯型生物碱可转化为单酯型生物碱 o毒
性降低 ∀川乌炮制的原理主要是通过加水和加热处
理 o使双酯型乌头碱 ≤{位上的乙酰基水解 o失去一
分子乙酰基 o得到相应的单酯型苯甲酰乌头原碱类 o
其毒性为双酯型乌头碱的 trxs ∗ trxss~≤tw位上的
苯甲酰基再进一步水解 o失去 t分子苯甲酸 o得到亲
水性氨基醇类乌头原碱 o其毒性仅为双酯型乌头碱
的 tru sss ∗ trw sss∀炮制过程中由双酯型生物碱
转变为单酯型生物碱的转化规律尚不明确 ∀实验模
拟制川乌的炮制方法 ≈u o以乌头碱为例 o在水溶液
中加热处理 o分别考察不同的加热时间对乌头碱水
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第 vu卷第 us期
ussz年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ us
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解转化的影响 o对乌头碱的动态水解过程进行研究 o
分析了主要的水解产物及其比例 o为阐明双酯型乌
头碱水解转化规律提供了实验依据 ∀
1 仪器及试药
• ¤·¨µ¶uy|x高效液相色谱系统 ou||y二极管阵
列检测器 o ¬¦µ²°¤¶¶± usss p质谱检测器 o纯净水
为 p p ys型纯水机和 ¬¯¯¬p ±纯水系统二
次制备 ~高效色谱中性氧化铝 ƒ uxw预制板 k浙江
省台州市路桥四甲生化塑料厂生产 l~薄层硅胶预
制板 k青岛海洋化工厂生产 l~乌头碱为 µ¨¦®公司
试剂 ~稀碘化铋钾试液显色剂 ~乙腈 k¥∏µ§¬¦®lo四氢
呋喃 o异丙醇 k©¬¶«¨ µ¶¦¬¨±·¬©¬¦l为色谱纯试剂 ~其余
试剂均为分析纯试剂 ∀
2 实验方法
2q1 样品水解 取乌头碱 x份 o各 us °ªo置顶空
瓶中 o加蒸馏水 ts °o加盖密封 o置沸水浴中分别
加热水解 {otuotyo usouw «∀水解液以饱和碳酸氢
钠溶液碱化至 ³ {1xo以三氯甲烷萃取 v次 o每次
ux °o合并萃取液 o无水硫酸钠脱水 o控制水温 ws
ε 以下减压回收溶剂 o得水解产物 ∀
2q2 高效液相色谱 2质谱分析 高效液相色谱条
件 }色谱柱为 ⁄¬®°¤公司生产 ⁄¬¤°²±¶¬¯× ≤t{ kw1y
°° ≅ uxs °°ox Λ°l~流动相 为乙腈 2四氢呋喃
kuxΒtxlo流动相
为 s1t °²¯ # pt醋酸铵 kt sss
°含冰醋酸 s1x °l~流速 s1{ °# pt o检测波
长 uvx ±°~柱温为室温 ~流动相洗脱程序见表 t∀
表 t 梯度洗脱程序
时间 r°¬± 流动相 rh 流动相
rh
s ∗ tx tx ∗ uu {x ∗ z{
tx ∗ ys uu z{
质谱检测参数 }电喷雾电离子源正离子模式
k∞≥n lo毛细管电压 v1u ®∂ o锥孔电压 w ∂ o预六极
杆电压 s1x ∂ o源温 tsx ε o去溶剂气流 u{s #
«pt o锥孔气流 xss # «pt ∀
2q3 柱色谱分离 将 us «水解萃取得到的固体物
以少量二氯甲烷溶解 o加中性氧化铝 ktss ∗ uss目 l
适量拌匀 o干法上至中性氧化铝柱 ∀以正己烷 2醋酸
乙酯 2甲醇不同比例溶剂梯度洗脱 ky1wΒv1yΒs1sx ∗
y1wΒv1yΒs1ulo收集洗脱液 o根据薄层色谱检视 o合
并相同组分 o回收溶剂 ∀
3 结果
3q1 °≤ 2 ≥联用分析 各水解产物的 °≤色
谱均显示多个色谱峰 o根据 °≤ 2 ≥的分子离子峰
可以确认其中主要含有苯甲酰乌头原碱 !乌头原碱
及未水解的乌头碱 ∀以 tu «水解产物的 °≤ 2 ≥
总离子流图为例 k见图 tl∀保留时间 uw1t{ °¬±o质
谱分子离子峰 ysvo为苯甲酰乌头原碱 ktl~保留时
间 xs1su °¬±o质谱分子离子峰 ywxo为乌头碱 kul~
保留时间 w1ux °¬±o质谱分子离子峰 w||o为乌头原
碱 kvl∀保留时间 y1zx °¬±和 u|1|t °¬±色谱峰 o
质谱分子离子峰分别为 xwt和 x{zo推测为乙酰乌
头碱和 {2去氧苯甲酰乌头原碱 o尚需进一步确认 ∀
图 t 乌头碱水解 tu «产物 °≤ 2 ≥总离子流图
tq苯甲酰乌头原碱 ~uq乌头碱 ~vq乌头原碱
3q2 水解产物的比例 不同水解时间得到的水解
产物总离子流图 o测定乌头原碱 !苯甲酰乌头原碱与
乌头碱峰面积值 o计算各组分的归一化百分比值 o结
果见表 u∀
表 u 各水解产物峰面积值分析结果
化合物 分子式 µ / ζ
峰面积 rh
{r« tur« tyr« usr« uwr«
乌头原碱 ≤ux wt | w|| ts1t ts1y tv1z tx1s wx1t
苯甲酰乌头原碱 ≤vu wx ts ysv uz1w uu1z v{1y xz1y us1w
乌头碱 ≤vw wz tt ywx yu1x yt1s v|1{ us1| |1vy
由表 u可以看出 o随着加热时间的延长 o乌头碱
的量逐渐减少 o各水解产物的相对转化率不同 ∀以
us «水解产物中苯甲酰乌头原碱的转化率最高 o见
图 u∀
图 u 不同水解时间水解产物的转化率
σ q乌头原碱 ~υ q苯甲酰乌头原碱 ~ϖ q乌头碱
4 苯甲酰乌头原碱结构鉴定
us «水解产物 o经柱色谱分离得到 t单体化合
物 o测定数据为 }t 2 kxss ½o≤⁄v ⁄l∆}t1tz
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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kv o·o2≤u ≤v low1suow1swow1syow1sz kv o
¤¨¦«¶ow ≅ ≤v low1|tkt o§oϑ x ½o 2twΒlo
z1v| ∗ z1wuku o°o 2uδoyδloz1xxkt o·o 2wδlo
{1su ∗ {1swku o°o 2vδoxδl∀tv ≤ 2 ktux ½o
≤⁄v ⁄l∆}{t1tk≤ 2tlov{1tk≤ 2ulozs1zk≤ 2vlowu1z
k≤ 2wlowy1wk≤ 2xlo{u1uk≤ 2yloww1yk≤ 2zlo|v1yk≤ 2
{loww1yk≤ 2|lowu1yk≤ 2tslow|1{k≤ 2ttlovv1tk≤ 2
tulozy1wk≤ 2tvloz|1tk≤ 2twlozy1wk≤ 2txlo|v1y
k≤ 2tyloyt1x k≤ 2tzlozy1w k≤ 2t{low|1s k≤ 2t|lo
w{1xk22≤u 2≤v lotw1x k22≤u ≤v loxx1| kt2
≤v lox{1v ky2≤v lo yt1x kty2≤v llo x|1u
kt{2≤v llo tyz1| k2 2≤ 2³«lo tvt1z k ≤ 2tδlo
tu|1wk ≤ 2uδo ≤ 2yδlotvt1s k ≤ 2vδo ≤ 2xδlotvw1t k ≤ 2
wδl∀根据以上光谱数据分析 o参考文献 ≈vow o确
定为苯甲酰乌头原碱 ∀
5 讨论
经液相色谱 2质谱分析 o乌头碱的主要水解产物
为苯甲酰乌头原碱和乌头原碱 ∀其他水解产物结构
待进一步确认 ∀ °≤ 2 ≥总离子流图显示的峰面
积值比率表明 o水解 us «苯甲酰乌头原碱转化率最
高 ∀水解 uw «后乌头碱残留量最少 o但同时转化成
较多其他形式 o在 °≤ 2 ≥保留时间 t|1y °¬±处
可见多一个色谱峰 o但在质谱中没有测得相应的分
子离子峰 ~保留时间 x1yy °¬±的峰也未能推测出结
构 o均有待于进一步研究探讨 ∀
≈参考文献
≈t 张聿梅 o鲁 静 o蒋 瑜 o等 q川乌和制川乌中单酯及双酯型生
物碱成分的含量测定 ≈ q药物分析杂志 oussxouxkzl}{szq
≈u 中国药典 ≈≥ q一部 qussx}uuzq
≈v 陈德昌 q中药化学对照品工作手册 ≈ q北京 }中国医药科技
出版社 ousss}x|q
≈w 常新全 o丁丽霞 q中药活性成分分析手册 ≈ q北京 }学苑出版
社 oussu}uxxq
Στυδιεσ ον ηψδρολψσισ οφ αχονιτινε
±¬±2¤±t o ≠∏2° ¬¨u o ∞ ≠¬u o ∏¬±ªu o ∏¬2¦«¤²u
(t. Χηεµ ιστρψ ∆επαρτµ εντ οφ Ωανναν ΜεδιχαλΧολλεγε, Ωυηυ uwtsst, Χηινα;
u. ΝατιοναλΙνστιτυτε φορΧοντρολοφ Πηαρµ αχευτιχαλανδ ΒιολογιχαλΠροδυχτ, Βειϕινγ tsssxs, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ©¬±§²∏·«¼§µ²¯¼¶¬¶µ¨ª∏¯¤µ¬·¼ ²©¤¦²±¬·¬± q¨ Μετηοδ : ¦²±¬·¬±¨º¤¶¤¬µ2·¬ª«·¨§¤±§«¼§µ²¯¼½¨ §¬± º¤2
·¨µ©²µ{o tuo tyo uso uw «q ׫¨ «¼§µ²¯¼¶¬¶³µ²§∏¦·¶º µ¨¨ ¤±¤¯¼½¨ §¥¼ °≤ 2 ≥q °¤²µ«¼§µ²¯¼¶¬¶³µ²§∏¦·º¤¶¬¶²¯¤·¨§¥¼ ¤¯∏°¬±¤
²¬¬§¨ ¦²¯∏°± ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼o ¤±§¬§¨ ±·¬©¬¨§¥¼t ¤±§tv ≤ 2 ¶³¨ ¦·µ¤q Ρ εσυλτ: °≤ 2 ≥ ¤±¤¯¼¶¬¶¶«²º¶·«¤··«¨ °¤²µ«¼§µ²¯¼¶¬¶
³µ²§∏¦·¶¤µ¨ ¥¨ ±½²¼¯ ¤¦²±¬±¨¤±§¤¦²±¬± q¨ ׫¨ «¼§µ²¯¼¶¬¶¦¤± °²¶·¯¼ ¥¨ ¦²°³¯ ·¨¨§º¬·«¬± us «²∏µ¶q Χονχλυτιον: ⁄¬¨¶·¨µ¤¦²±¬·∏° ¤¯2
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[ Κεψ ωορδσ] ¤¦²±¬·¬± ~¨ ¥¨ ±½²¼¯ ¤¦²±¬± ~¨ ¤¦²±¬± ~¨ «¼§µ²¯¼¶¬¶
≈责任编辑 牛泽宇
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