全 文 ：龙胆泻肝汤对大鼠肾毒性的观察
张 娜 o谢 鸣 3
k北京中医药大学 方剂学学科 o北京 tsssu|l
≈摘要  目的 }观察配伍不同剂量关木通的龙胆泻肝汤给药不同时间的大鼠肾功能和组织形态学变化 ∀方
法 }用配伍不同剂量关木通的龙胆泻肝汤水煎剂按原药材每天 tv otw1x otz1x ª#®ªp t剂量k其中含关木通分别为
t1x ov oy ª#®ªp tl给大鼠灌胃 o连续 tu周 o分别于给药第 w o{ otu周测定大鼠肾功能指标 o观察肾脏组织形态学改变 ∀
结果 }龙胆泻肝汤中配伍小剂量关木通kt1x ª#®ªptl连续用药 tu周 o未见肾功能明显损伤 ~配伍中剂量关木通kv ª#
®ªp tl连续用药 tu周 o肾近曲小管上皮细胞出现轻微损害 ~大剂量的关木通ky ª#®ªp tl连续用药 w周即出现明显的
肾损伤 o且随着给药时间的延长 o损伤程度逐渐加重 ~病理观察到肾损伤的部位主要是皮髓交界处的近曲肾小管 ∀
结论 }龙胆泻肝汤的肾毒性与其关木通配伍用量和服药时间相关 ∀龙胆泻肝汤中配伍小量关木通在较短时间内具
有相对安全性 o而大剂量使用关木通可引起肾损害 ∀
≈关键词  关木通 ~龙胆泻肝汤 ~肾毒性
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussylts2s{vy2sw
≈收稿日期  ussx2sy2su
≈通讯作者  3谢鸣 oר¯ }kstslywu{y||u
马兜铃科中药关木通早在 us世纪 ys年代就被
5中国药典6t|yv年版收录 o曾被广泛用于临床随证
处方以及配制于包括龙胆泻肝丸 !妇科分清丸 !分清
止淋丸 !排石颗粒 !耳聋丸等多种成药的制剂中 ∀近
年来 o随着有关马兜铃酸肾毒性问题的提出≈t  o人们
对含有马兜铃酸的关木通及其复方使用的安全性提
出质疑 o同时也见有服用龙胆泻肝丸引起肾毒性的
临床报告≈u2y  o龙胆泻肝汤肾毒性的问题正引起广泛
关注 ∀本实验报告了龙胆泻肝汤的肾毒性及其与关
木通配伍用量及给药时程关系的研究 ∀
1 材料
111 药物 龙胆泻肝汤 }处方参照5方剂学6五版
教材所载 o由龙胆草 y ªo黄芩 | ªo栀子 | ªo泽泻 tu
ªo关木通 | ªo车前子 | ªo当归 v ªo生地黄 | ªo柴胡
y ªo生甘草 y ªo共 ts味中药所组成 ∀全部中药饮片
购自北京市鹤延龄中药饮片公司 o经北京中医药大
学中药学院生药系刘春生教授鉴定均为正品 ∀设计
关木通 | ªk小l !t{ ªk中l !vy ªk大lv种不同配伍剂
量的 v个龙胆泻肝汤配方 o即龙胆泻肝汤 „k含关木
通小剂量l !龙胆泻肝汤 …k含关木通中剂量l !龙胆
泻肝汤 ≤k含关木通大剂量l ∀将中药饮片置于煎煮
器中 o加相当于药材量 z倍体积的冷水浸泡 t «o加
热至沸 o煎煮 vs °¬±o倾出药液 ~残渣再加入 x倍体
积的水 o煎煮 us °¬±~合并 u次药液 o过滤 !水浴浓缩
后制成 uss h的水煎剂k相当于含生药 u ª#°ptl ow
ε 放置备用 ∀
112 动物 ≥⁄雄性大鼠 ws只 o体重ktxs ? tslªo
≥°ƒr∂ „ƒ级 o许可证号 ≥≤÷Žk京lussu2sssv o由北京
维通利华实验动物中心提供 ∀
113 试剂 血肌苷k≥¦µl !尿素氮k…˜‘l测定试剂
盒由北京利德曼试剂公司提供 ~Ν2乙酰氨基葡萄糖
苷酶k‘„Šl !Χ2谷胺酰转移酶kΧ2Š×l !尿蛋白定量试
剂盒由南京建成生物工程研究所提供 ~尿 Βu2微球蛋
白kΒu2Šl放免试剂盒 o由中国人民解放军总医院科
技开发中心放免研究所提供 ∀
114 仪器 ≤÷ p w全自动生化分析仪k美国贝克
曼库尔特公司l ~≥‘p y|x…型智能放免 Χ测量仪k上
海核所日环光电仪器有限公司l ~• ƒ{ss p ⁄u型紫
外2可见分光光度计k北京第二光学仪器厂l ∀
2 方法
211 分组及给药 将大鼠按体重随机分为 w组 o
每组 ts只 ∀即龙胆泻肝汤 „ o…o≤ 组 !正常对照组
k‘l ∀ „ o…o≤各组大鼠分别按每天 tv otw1x otz1x ª#
®ªpt剂量kv组含关木通的剂量分别为 t1x ov oy ª#
®ªptl予以中药龙胆泻肝汤灌胃 o每天给药 t次 o连
续 tu周 ∀正常对照组予以等量饮用水 ∀给药期间
#yv{#
第 vt卷第 ts期
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大鼠自由饮食饮水 ∀
212 指标检测 分别于灌胃第 w o{ otu周 o代谢笼
内留取 uw «尿液 ~眼眶后静脉丛取血 t °ovz ε 水
浴 t «后 o离心取血清 ~给药 tu周后处杀全部大鼠 o
取双侧肾脏 o纵剖后 w h多聚甲醛固定 ∀
生化指标测定 } ≥¦µk全自动生化分析仪法l !
…˜‘k全自动生化分析仪法l !uw «尿蛋白定量k≤……
法l !尿 Βu2Šk放免法l !‘„Šk比色法l !Χ2Š×k比色
法l ∀
组织病理学检查 }肾组织固定后 o经脱水 !透明 !
石蜡包埋 !切片后行 ‹∞染色 o光镜检查 ∀
213 统计方法 数据以 cξ ? σ表示 o采用 ≥·∏§¨±·2
‘¨º°¤±2Ž¨∏¯¶检验 o非正态分布资料用非参数统计
分析 Žµ∏¶®¤¯2 • ¤¬¯¯¬¶检验 ∀全部数据用 ≥°≥≥ tt1x统
计软件处理 ∀
3 结果
311 对大鼠血清 ≥¦µo…˜‘的影响 结果见图 t ou ∀
图中可以看出 o与 ‘组比较 o„ o…组大鼠连续用药
tu周 o血清 …˜‘o≥¦µ水平无明显变化 ~≤组大鼠在用
药 w周开始血清 …˜‘o≥¦µ水平显著升高k Π s1stl o
第 {周和第 tu周均持续升高 o有显著或非常显著性
差异k Π s1sx和 Π s1stl ∀
图 t 不同时间点各组大鼠血清 ≥¦µ水平的比较
„ o…o≤分别为龙胆泻肝汤小 !中 !大剂量组 o‘为正常对照组 ~与
‘组相比 3 Π s1sx o3 3 Π s1stk图 u ∗ y同l
图 u 不同时间点各组大鼠血清 …˜‘水平的比较
312 对大鼠尿蛋白和尿 Βu2Š的影响 结果见图
v ow ∀图中可以看出 o与 ‘组相比较 o„ o…组大鼠连
续给药 tu周 o尿中蛋白 !Βu2Š水平均无明显差异 ~
≤组大鼠给药 w周时尿蛋白水平无明显差异 o但尿
Βu2Š水平显著升高k Π s1stl ~≤ 组大鼠给药第 {
周尿蛋白和 Βu2Š水平均显著升高k Π s1stl o其
中尿蛋白水平持续到给药第 tu周达最高点k Π 
s1stl o尿 Βu2Š水平升高至给药第 { 周达最高点
k Π s1stl后开始下降 o给药 tu周时与正常对照组
无明显差异 ∀
图 v 不同时间点各组大鼠尿蛋白水平的比较
图 w 不同时间点各组大鼠尿 Βu2Š水平的比较
313 对大鼠尿 ‘„Š和 Χ2Š×的影响 结果见图 x o
y ∀图 x显示 o与 ‘组相比 o„ o…组大鼠连续用药 tu
周 o尿 ‘„Š活性无明显差异 ~≤ 组大鼠的尿 ‘„Š活
性在用药第 w o{ otu周均显著升高k Π s1stl o其中
给药第 {周时达最高 o第 tu周时有所降低 ∀
图 x 不同时间点各组大鼠尿 ‘„Š水平的比较
图 y显示 o与 ‘组比较 o„ 组大鼠连续用药 tu
周 o尿 Χ2Š×的活性均无明显差异 ~…组大鼠给药 w o{
周时尿 Χ2Š×的活性无明显差异 o但给药第 tu周时
的尿 Χ2Š×的活性显著升高k Π s1stl ~≤ 组大鼠尿
Χ2Š×活性于给药第 w o{ otu 周均显著升高k Π 
s1stl o其中给药第 {周时达最高 o第 tu 周有所降
低 ∀
314 各组大鼠组织形态学观察 肾脏切片光镜下
可观察到 }‘组大鼠的肾小球 !肾小管结构正常 o未
见到明显病变 ~„组和 …组大鼠肾小球 !肾小管结构
#zv{#
第 vt卷第 ts期
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¤¼oussy

图 y 不同时间点各组大鼠尿 Χ2Š×水平的比较
基本正常 o但 …组大鼠的近曲小管上皮细胞可见较
明显的空泡变性的改变 ~≤ 组大鼠肾脏的肾小球周
围有局灶性炎性细胞浸润 o皮髓交界处的近曲肾小
管可见广泛性坏死 o并伴有局灶性炎性细胞浸润 o肾
间质可观察到细胞增生现象 ∀
4 讨论
笔者在预实验中曾观察到 o用含关木通 t1x ª#
®ªpt的龙胆泻肝汤ktv ª#®ªptl连续给大鼠灌胃 {周
未出现明显的肾功能和病理学改变 ∀本实验在此基
础上 o设计了 v种关木通不同配伍剂量的龙胆泻肝
汤配方 o给大鼠连续灌胃 tu周 ∀结果发现 o大鼠肾
功能和肾组织学因方中所含关木通的不同用量和不
同给药时间而出现不同改变 ∀其中含关木通 t1x ª#
®ªpt的龙胆泻肝汤ktv ª#®ªptl连续给大鼠用药 tu
周 o未出现明显的肾功能和病理学改变 ~含关木通kv
ª#®ªptl的龙胆泻肝汤ktw1x ª#®ªptl连续用药 tu
周 o肾近曲小管上皮细胞出现轻微损害 ~含关木通 y
ª#®ªpt的龙胆泻肝汤ktz1x ª#®ªptl连续给药 w周即
出现明显的肾毒性 o随着给药时间的延长 o损伤程度
逐渐加重 o损伤部位主要是皮髓交界处的近曲肾小
管 ∀结果表明 o龙胆泻肝汤的肾毒性与其关木通配
伍用量和服药时间相关 ∀含小量关木通的龙胆泻肝
汤在较短时间内使用具有相对安全性 o含大剂量关
木通则可引起肾损害 ∀
有研究曾观察到 o含关木通的龙胆泻肝丸水煎
液每天按 w ª#®ªpt给大鼠用药 tu周 o血 !尿指标虽
未见明显改变 o但肾脏可见到病理改变≈z  o反映出肾
损伤中的血 !尿生化指标与肾脏病理改变不一致的
情况 ∀本实验中按含关木通 v ª#®ªpt的龙胆泻肝汤
给大鼠连续灌胃 tu周 o发现反映肾滤过功能与小管
重吸收功能的血 ≥¦µ和 …˜‘!尿蛋白和 Βu2Š无明
显升高 o镜下病理改变不明显 o而反映近曲小管细胞
刷状缘损伤的尿 Χ2Š× 在用药第 tu周活性明显升
高 ∀说明该实验剂量条件下的龙胆泻肝汤对肾脏仍
有一定的损伤作用 o同时反映近曲小管细胞刷状缘
损伤的尿 Χ2Š×较为敏感 o提示其可能是药物性肾损
伤的早期指标 ∀关木通含量高ky ª#®ªptl的龙胆泻
肝汤连续给药 w周见到大鼠尿中 ‘„ŠoΧ2Š× 活性 o
Βu2Š含量 !血清 …˜‘与 ≥¦µ水平均显著升高 o表明
含大剂量关木通的龙胆泻肝汤连续给药 w周可引起
肾小管 !肾重吸收和滤过等功能的明显损伤 ∀
本研究发现 o含关木通 y ª#®ªpt的龙胆泻肝汤
连续给大鼠用药 tu周 o反映肾功能的血 ≥¦µ和 …˜‘
随给药时间呈现递进性的升高 o这与肾脏的持续损
伤和功能减低一致 ∀但给药第 w周尿 ‘„ŠoΧ2Š×活
性 oΒu2Š含量升高时 o尿液中的尿蛋白总量未见明
显升高 ~给药第 tu周 o尿蛋白 oΒu2Š和尿 ‘„ŠoΧ2
Š×反见下降 ∀推测其早期肾近曲小管上皮细胞损
伤 o溶酶体漏出 o肾小管重吸收功能降低 o肾小球滤
过功能下降 o但肾小球滤膜的完整性尚未完全破坏 o
或健全肾单位具有代偿功能 o尿蛋白总量尚未见明
显变化 ~之后随着给药时间的延长 o肾小管损伤严
重 o近曲小管上皮细胞中的酶总量消耗而漏出减少 !
有效肾单位减少引起肾小球滤过总量减少以及大鼠
尿量增加引起尿液稀释等因素导致尿蛋白 oΒu2Š
和尿 ‘„ŠoΧ2Š×反有所下降 ∀组织学观察提示药物
损害部位主要是肾脏皮髓交界处的近曲肾小管 o在
肾小球和近曲小管有局灶性炎性细胞浸润 o提示细
胞免疫机制可能参与病变的进展 o有待进一步的研
究 ∀
≈参考文献 
≈t  ∂¤±«¨µº ª¨«¨ ° o ⁄¨ ³¬¨µµ¨∏¬  o׬¨¯¨ °¤±¶≤ o ετ αλ1 •¤³¬§¯¼ ³µ²2
ªµ¨¶¶¬√¨ ¬±·¨µ¶·¬·¬¤¯ µ¨±¤¯ ©¬¥µ²¶¬¶¬± ¼²∏±ª º²° ±¨ } ¤¶¶²¦¬¤·¬²± º¬·«
¶¯¬°°¬±ªµ¨ª¬° ±¨¬±¦¯∏§¬±ª≤«¬±¨ ¶¨ «¨µ¥¶q Λανχετ , t||v ovwtk{{wul }
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杂志 oussu outktul }wuz q
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反应杂志 oussv oukul }tts q
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西医结合急救杂志 oussv oyktsl }v{v q
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研究 q中药药理与临床 oussw ouskvl }w q
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Τηε νεπηροτοξιχιτψιν ρατσ χαυσεδ βψ Λονγδαν Ξιεγαν δεχοχτιον
‹„‘Š ‘¤o÷Œ∞ ¬±ª
( ∆επαρτµεντ ον Φορµυλαολογψ, Βειϕινγ Υνιϖερσιτψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsssu| , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ µ¨±¤¯ ¬±­∏µ¼¬±µ¤·¶¬±§∏¦¨§¥¼ ²±ª§¤± ÷¬¨ª¤± §¨¦²¦·¬²± k⁄÷Š⁄l ¦²±·¤¬±¬±ª§¬©©¨µ¨±·§²¶¤ª¨¶
Αριστολοχηια µανσηριενσισq Μετηοδ : ≥⁄µ¤·¶º µ¨¨ §¬√¬§¨§¬±·²©²∏µªµ²∏³¶¤·µ¤±§²° o¤±§ º µ¨¨ ©¨ § º¬·«·«µ¨¨®¬±§¶²©⁄÷Š⁄ tv otw1x o
tz1x ª#®ªptk¦²±·¤¬±¬±ªµ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ Α. µανσηριενσισ t1x ov oy ª#®ªptl ¤±§§¬¶·¬¯¯ §¨º¤·¨µµ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼©²µtu º¨¨ ®¶q • ±¨¤¯ ©∏±¦·¬²±¤¯ ³¤2
µ¤° ·¨¨µ¶²± w o{ otu º º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¨ §¤±§¦«¤±ª¨¶²©«¬¶·²°²µ³«²¯²ª¼¬±µ¤·¶²±·«¨ ±¨§²© ¬¨³¨µ¬° ±¨·º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨q Ρεσυλτ : ׫¨ ⁄÷Š⁄
¦²±·¤¬±¬±ª ²¯º §²¶¨ kt1x ª#®ªp tl Α. µανσηριενσισ §¬§. ·¬±§∏¦¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ µ¨±¤¯ ¬±­∏µ¼ ¬± µ¤·¶§∏µ¬±ªtu º¨¨ ®¶~·«¨ ⁄÷Š⁄ ¦²±·¤¬±¬±ª
°¬§¶·§²¶¨kv ª#®ªp tl Α. µανσηριενσι󬱧∏¦¨§ ¬¯ª«·§¤°¤ª¨ ²© ³µ²¬¬°¤¯ ¦²±√²¯∏·¨§·∏¥∏¯¨ ³¨¬·«¨ ¬¯¤¯ ¦¨¯¯¶¬± µ¤·¶§∏µ¬±ªtu º¨¨ ®¶~·«¨
⁄÷Š⁄¦²±·¤¬±¬±ª«¬ª«§²¶¨ky ª#®ªptl Α. µανσηριενσι󬱧∏¦¨§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ µ¨±¤¯ ¬±­∏µ¼¬± µ¤·¶¤©·¨µ¤§°¬±¬¶·¨§w º¨¨ ®¶q „¯ ²±ª º¬·«·«¨
¤¯¶·¬±ª²©¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²±o·«¨ §¨ªµ¨¨²©¬±­∏µ¼ ¥¨¦¤°¨ °²µ¨ ¶¨µ¬²∏¶¯¼ q׫¨ °¤¬± µ¨±¤¯ ¬±­∏µ¼ ²¯¦¤·¬²± º¤¶¬± ³µ²¬¬°¤¯ ¦²±√²¯∏·¨§·∏¥∏¯¨qΧον2
χλυσιον : ׫¨ µ¨±¤¯ ·²¬¬¦¬·¼ ²©⁄÷Š⁄¬¶¦²µµ¨ ¤¯·¨§º¬·«·«¨ §²¶¨ ²© Α. µανσηριενσισ ¤±§·«¨ ·¬°¨²©¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²±q׫¨ ⁄÷Š⁄ ¦²±·¤¬±¬±ª
²¯º §²¶¨ Α. µανσηριενσισ «¤¶µ¨ ¤¯·¬√¨¶¨¦∏µ¬·¼q ‹²º √¨ µ¨o·«¨ ⁄÷Š⁄¦²±·¤¬±¬±ª«¬ª«§²¶¨ Α. µανσηριενσι󦤱¬±§∏¦¨ µ¨±¤¯ ¬±­∏µ¼q
[ Κεψ ωορδσ] Αριστολοχηια µανσηριενσισ~²±ª§¤± ÷¬¨ª¤± §¨¦²¦·¬²±~±¨ ³«µ²·²¬¬¦¬·¼
≈责任编辑 古云侠 
中药复方溶石剂对人体胆结石的直接溶解
作用及其安全性评价
杨 华t 3 o郭玉宁u o易 红t o杨昭徐u o张启伟t o张永欣t
kt1 中国中医科学院 中药研究所 o北京 tsszss ~u1 首都医科大学 附属北京天坛医院 o北京 tsssxsl
≈摘要  目的 }研究中药复方溶石剂对人体胆结石的直接溶解作用及其安全性 ∀方法 }采用体外和动物体内
溶石方法观察中药复方溶石剂的溶石效果 o并通过观察给药前后动物的血液生化指标 !各脏器的病理改变情况 !进
行急性毒性实验和黏膜刺激性实验评价中药复方溶石剂的安全性 ∀结果 }中药复方溶石剂在体外和体内对胆固醇
型和混合型胆结石均有较好的溶解作用 o体外实验胆石全溶的时间为 w ∗ x §o体内实验胆石全溶的时间为 z §之
内 o无毒副作用 ∀结论 }中药复方溶石剂对胆结石有溶解效果好 !安全性高的特点 o有必要进一步开展中药复方溶
石剂溶石机制和有效成分的实验研究 ∀
≈关键词  中药复方溶石剂 ~胆结石 ~灌注溶石法
≈中图分类号  • u{x1y ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussylts2s{v|2sw
≈收稿日期  ussx2tu2su
≈基金项目  北京市自然科学基金项目kzsuusvvl
≈通讯作者  3 杨华 oר¯ }kstsl{wstzvts o∞2°¤¬¯}¼¤±ª«∏¤uz|y ƒ
¶¬±¤q¦²°
近年来由于我国人民生活水平提高 o饮食习惯
的改变 o环境因素变化 o胆石病的发病率呈逐年上升
的趋势 ∀胆石症的治疗手段之一有直接灌注溶石 o
即将溶石剂经 ×管k术后l !或经内镜留置鼻胆管 !或
经皮经肝等注入胆道系统 o使溶石剂直接接触胆石
使其溶解 ∀这种方法的特点是 }药物可与胆石直接
接触 o可以不经肝脏代谢 o收效快 o较易做到人为控
制 ∀多年来 o国内外学者对灌注溶石药物进行了大
量研究工作 o实验室和临床研究的结果表明 o胆石接
#|v{#
第 vt卷第 ts期
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