全 文 ：沪二二二二
萝 t
巴 l
币万 i而 6“ L)一 。 ,。 : 。 、
〔搪芥普 G 〕 l “ m o l / L ; 〔哇 巴 因〕 l 拜 m o l / L
图 5 L i n e w e a r e r 一 B u r k 作 圈 〔N a + 〕不 同时精芥
普 G 对 N a + , K 七 A T P 醉抑制曲线
本结构 亡6 〕有关 , 如 C l ; 和 件( )H 、 C * , 的 各不饱
和 内醋环及 C / D 环顺式稠合有关 ,可能形成
一 个具有相 当刚性的非极性凹 陷 ,通过疏水
作用 ,使非极性 同酶表面互相补合 ,而起抑制
作用 。 两者的结构的不同 ,均在于 C I。 , C , 1及
C
1 5位上 的 取代 基 不 同而 已 。 糖芥 昔 G 对
N a +
,
K
, 一
A T P 酶的抑制几乎不受 A T P 浓度
表 1 不 同浓度 A T P 对精芥普 G 抑制 N a + , K + 一 ^ T P 醉活性的影响〔“ m o l P i / (m g · h )〕
A T P ( m m o l / L )
搪芥昔 G ( l ” m o l / L )
哇 巴因 ( 1 拜m o l / L )
0 0
.
7 5 1
.
5 2
.
2 5 3
.
0 4
.
5 6
.
0 ’
2 6 1
.
4 2 7 3
。
3 2 7 2
.
4 2 6 6
.
2 2 5 4
.
4 2 6 3
.
4
3 3 6 2 5 12 2 5 2 6
.
4 6 6 2
.
2 6 3 1
.
3 5 6 3
.
5
韩晓燕 ,等 . 中国中药杂志 , 19 96 , 2 1 (5 ) : 2 9
且〕 r d f o r d M M . A n a l B io e h e m , 1 9 7 9 , 7 2 : 2 4 8
徐友涵 ,等 . 生物化学 与生物物理进展 , 19 86 , 4 ( l ) : 64
北 京医 学院北 京中医学 院主编 . 中草药成分化学 . 北
京 : 科学 出版社 , 1 9 80 : 4 08
( 1 9 9 9
一
0 5
一
1 7 收稿 )
月JJ任亡几b的影 响 , 提 示糖 芥 昔 G 可 能 主 要 作 用 于
N a +
,
K 十 一 A T P 酶作用机制的第一步 。
参 考 文 献
l 台宝山 , 等 . 药学通报 , 1 9 8 2 , 1 6 ( 6 ) : 3 2 5
2 常福 久 , 等 . 中医 药学报 , 1 9 7 , (1 ) : 27
当归四逆加吴茱英生姜汤和关木通 、
八月扎茎短期肾毒性实验研究△
天津 中医学院 ( 3 0 0 1 9 3) 马红梅 ’ 张伯礼 范英昌 孙静美 李 答
摘 要 对 比进行关 木通及 其所在 的当归 四逆 加吴茱英生 姜汤 旧方 和八月 扎茎及其所 在的 当归
四 逆加吴茱 英生姜汤新方 短期小 鼠肾毒性实验 , 每 日 咭 1次 . 关木通组 9 9 / k g 、 旧 方组 3 0 9 k/ g 、 八
月扎茎组 9 9 / k g 和新方组 3 0 9 k/ g , 连续 7 d 。 观察小鼠体重和血红蛋 白 、 肾功能及肾组织学变化 。
结果发现 :关木通组 及旧 方组 的体重 、 尿 蛋 白和 肾组织 均明显异常 , 与阴性对 照组 比有显著性差异
(尸 < 0 . 0 5 ) , 关木 通组病变较重 ;而八月扎茎组及新方组 未见 明显 异常 。 提示 :关木通及其组成 的旧
方有相 同的肾毒性趋 向 , 而八月 扎茎及其 组成的新方未见 肾毒性 反应 , 因而 , 当归四 逆加吴茱英生
姜 汤中用 木通科八月扎茎 可能 比用马兜铃科关木通更 安全 。
关健词 当归四逆加昊茱 黄生姜汤 关木通 八 月扎茎 肾毒性
中草药安全性 日益受到重视 , 自 1 9 9 3 年
始国际上连续报道中草药肾病 巨`一 5〕 , 1 9 9 7 年
日本又报告多例服用天津当归 四逆加吴茱英
生姜汤颗粒剂 (代号 K M 一 3 8 , 其 中关 木通用
量 1 9 / d ) 和关 木 通 茶后 出现 肾损 害 的 病
人阶 ’ 〕 。 国内也有报道因大量服用关木通导致
急性肾衰的病 例 8j[ , 但关木通作为 当归四 逆
加吴茱英生姜汤复方中的非君药成分 , 在中
国药典 ( 九五 版 ) 常用剂 量 (6 g 以下 ) 下使
用 , 以前未见 肾毒性的报道 。 为指导临床安全
A d d r e s s
:
M a H o n g m e n
,
T ia n ji n C o l le g e o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e m e d i e i n e
,
T i a n j i n
△本课题为天津市 自然基金资助项 目 ( 9 8 3 6 0 9 31 1)
一
7 6 0
.
用药 , 我们初步进行了 马兜铃科关木通及其
所在的当归四逆加吴茱英生姜汤旧方短期肾
毒性实验 l[’ 〕 , 并在此基础 上 , 对 比观察 了木
通科八月扎茎及其所在的当归四逆加吴茱英
生姜汤新方短期肾毒性反应 。
1 材料和方法
1
.
1 药物 : 当归 四 逆加吴茱 英生姜汤 旧方
(每 10 9 含关木通 1 9 )和新方 (每 10 9 含八
月扎茎 1 9 , 新方 中用八月扎茎代替 旧方 中关
木通 ) 颗粒剂 由 日本力 一个 株式会社提供 , 用
前以蒸馏水 稀释至所需浓度 。 关木通 A ir s -
t o loc h i
a m a n s h u ir e n s i s K o m
. 生 药 由天津 中
药集团公 司第二批发部提供 , 八月扎茎 A k e -
b i a t r ifo l i
a t a ( T h u n b
.
) K i o d z 生药 由天津长
城医保公 司提供 , 用前 以蒸馏水浸泡 l h 后
煮沸 4 0 m in , 过滤 ; 药渣加 3 倍蒸馏水再 煮
沸 3 0 m in , 过滤 , 合并滤液浓缩至所需浓度 ,
过滤分装密封 , 4 ℃保存备用 。
1
.
2 动物及分组 : 选择昆明小 鼠 1 0 0 只 , 体
重 1 8一 2 2 9 ,雌雄各半 , 由中国 医科院实验动
物繁育场提供 , 二级清洁动物 ,适应性喂养数
日后 , 称重 , 随机分 为 5 组 , 每组 20 只 : 1 .
当归四 逆加昊茱英 生姜 汤 旧方组 ; 1 . 关木
通组 ; 1 . 当归 四逆加昊茱英生姜汤新方组 ;
W
. 八月扎茎组 ; V . 阴性对照组 。
1
.
3 给药与观测 : 按成人剂量扩大 2 0 倍计
算 , 每 日 19 1 次 , 各组进药量依次 为 I 组 30
g / k g 体 重 , I 组 9 9 / k g 体重 , l 组 3 0 9 / k g
体重 , W组 9 9 k/ g 体重 , V 组等量蒸馏水 。 连
结 7 d , 每 日观察 1 次 。 7 d 后称重 ,代谢取尿 ,
取 血 杀 检 , 观 测 : ① 给 药 前 后 体 重 差 值
(△W ) : 用 德 国 G M B H 1 4 0 1 C M P 7一 2 型 电子
称 ; ②给药后血红蛋 白值 ( H G B ) : 电阻法 , 美
国 G o ut e r T 一 5 4 0 型血细胞计数仪 ;③给药后
肾功能变化 : 两点法测血肌醉 ( S C R ) 、 尿素氮
( B U N )
, 终点法测血尿酸 ( U A ) , 以上用瑞士
R o e h e 公 司 C o B A S M I R A p l u s 型全 自动生
化分 析 仪 ; 放 免法 测血 尿 月: 微 球蛋 白 (民-
M G )
: 用北京 核仪器 厂 F T 一 63 0 G 型 羊计数
器 ; 化学 比 色法测尿 N 一乙 酸书一氨基葡萄糖
《中草药 》 1 99 9 年第 3 0 卷第 1。 期
昔酶 ( N A G ) : 用西德 M er ke T B A 全 自动生
化分析仪 ; 干化学法测尿常规 ( R T )包括尿糖
( G L U )
、 尿蛋 白 ( P R O ) : 用 日本第一化学株
式会社 M A 一4 2 1 0 型尿分 析仪 ; ④给药后 肾
脏组织学改变 : 光镜检查肾小球及间质 一小管
病变等 。
1
.
4 死亡报告 : 尸 检验证阴性对照组有 1 只
小鼠因 19 不当致气胸死亡 。
1
.
5 统计学处理 : 采用方差分析和 q 检验 。
2 结果
2
.
1 体重和血红蛋白 : 结果见表 1 。 连续 19 7
d
,
I 组 体重 明 显 减 轻 , △W ~ ( 一 0 . n 士
。 . 8 8 ) g , 与阴性对照组 比 , 有非 常显著性差
异 , 尸 < 0 . 01 ; I 组 体 重 增 长 缓 慢 , △W ~
(1
.
81 士 1 . 0 8 ) g , 低 于 阴性 对 照 组 , 尸 <
0
.
05
。
vI 和 皿组体重均呈正常上升变化 , 与阴
性对照组 比 , 尸 > 0 . 05 。 血红蛋 白在正常 范
围 , 尸 > .0 0 5 。
衰 1 体 , 和血红蛋 白侧定结果 ` 士 s)
组别 , △W ( g ) H G B ( g / L )
1 2 0 1
.
8 1士 1 . 0 8 . 1 5 8 . 8 1士 1 1 . 8 7
1 2 0 一 0 . 11士 0 . 8 8△ 1 3 8 . 4 9士 2 9 . 7 2
三 2 0 3 . 64士 1 . 2 5 1 5 3 . 1 2士 7 . 7 5
VI 2 0 4
.
0 5士 1 . 6 8 1 3 7 . 3 8士 2 1 . 3 7
V 19 3
.
2 3士 1 . 6 8 1 5 4 . 0 3士 8 . 5 9
与阴性对照 ( v )相比 : “ 尸 < 0 . 05 ; 与各组 比 : △尸 < 。 . 01
2
.
2 肾功能 : 结果见表 2 。 连续 19 7 d ,关木
通组尿蛋 白为 ( 0 . 7 0 士 0 . 0 0) 9 / L , 明显高于
阴性对照组 ,尸 < 0 . 01 。 各组血肌配在正常范
围 , 其 中 I , I , l 组 高 于 阴性 对 照 , 尸 <
0
.
05
。
l 组出糖尿 ,但与其他组比 ,尸 > 0 . 05 。
I 和 皿组尿素氮明显低于 阴性对 照组 和 I
组 。 各组血尿酸 、 血尿 份 M G 、 尿 N A G 无显
著差别 , 尸> 0 . 05 。
2
.
3 肾组织学改变 : 光镜下 , I 和 皿组均可
见近端 肾小管上皮细胞变性 、 坏死 、 脱落 , 肾
间质出血 、 寮血 、 水肿 ,并有炎性细胞浸润 ; 肾
小球内皮细胞肿胀 。 其中 I 组病变较重 。 l
和 w 组 、 阴性对照组肾小球及间质小管未 见
明显异常 。
3 讨论
.
7 6 1
.
表 2 肾功能侧定结果` 士 s)
血 尿
栩 如 ~ _ _ _ _ _
_ _
_ _义 R(p m ol /L B ) UN ( m m ol /L P ) R( O g /L )头一 M( G吨 /L )N ( AG U/L )
::
::
44 84士 5. 8 1任
4 5
.
5 6士 6. 2 7`
4 7
.
10士8 . 4 6番
37
.
28士 3. 7 7
34
.
10士 5. 79
2
.
9 6士0 . 2 5△
6
.
20士 1. 95
5
.
2 6士0 . 2 6书
6
.
24士0 . 50
6
,
64士1 . 54
U A (科m o !/L )
269
.
69士61 , 06
289
.
93士 46 . 61
293
.
72士76 . 22
214
.
94士57 . 05
2 34
.
8 0士53 . 94
凡一 MG( m g / L )
0
.
032士0 033
0
.
008士0 . 010
0
.
014士0 . 024
0
.
020士0 . 024
0
.
011士0 . 0169
0 0013士0 . 00 10 4 , 00士4 . 24
0
.
0004士0 . 000 7 8 . 00士4 . 24
0
.
0022士0 . 00 12 8 . 50士6 . 36
0 10
.
00士1 . 41
0
.
0006士0 . 000 7 2 . 00士1 . 41
0
5
.
55士7 . 85
0
GLU (恤。】/ L )
0
.
15士0 . 21
0
.
70士0 . 00△
与 阴性对照 ( v ) 相比 : ` 尸< 。 . 0 5 ; 与各组 比 : △尸< 0 . 01
1 9 9 7 年以来 , 日本关西地区 出现因服用
了 天 津 当归 四 逆 加 吴 茱 英 生 姜汤 颗 粒 剂
K M
一
38 而多发中草药 肾病的状况比 ’ 〕 。 其临
床特征是患者主诉全身倦怠 、 口 渴 、 多饮 、 多
尿 、 食欲不振 、 体重减少 、 时有发热等 ; 化验检
查出现贫血 、 肾性糖尿 、 肾小管性蛋 白尿 、 尿
潜血 、 低钙 血症 、 高磷 酸盐 尿 、 氨基 酸尿 、 低
钾 、 低磷 、 低尿酸血症 、 尿 份M G 及 N A G 增
高 ; 肾功能异常主要是血肌配上升 ,尿素氮异
常 , 最终发展为肾功能衰竭 。 肾活检病理特征
是 : 近端肾小管上皮 细胞显著变性 、 萎缩 、 坏
死 , 伴间质纤维化 , 肾小球病变轻微或基本正
常 。 综上所述 , 诊断为 F a cn o in 综合症 。
当归 四逆加吴茱英生姜汤 在 《伤寒论 》中
治疗手足厥寒 , 脉细欲绝 , 内有久寒者 。 方 中
通草经考证为木通科木通 , 现又称八月扎茎 ,
主要含木通皂昔和多量钾盐 , 古代本草记载
无 毒 , 现 亦 已 证 明 木 通 皂 昔 口 服 毒 性 较
小 〔卜 ` ’ 〕。 日本临床用本方颗粒剂 K M 一 38 治
疗虚寒型头部 、 手足 、 四肢 、 下腹 、 腰部逆冷疼
痛 。方 中所用木通为马兜铃科关木通 , 其主要
成分是 马兜铃酸 ( a r i s t o l o e h i。 a e id , A A ) , 研
究表明 : A A 对家兔 、 山 羊 、 大 鼠 、 小 鼠和人体
均有毒性作用 , 特别对 啮齿类动物有强致癌
作用 ;药代动力学研究提示 : A A 在人体内有
蓄 积 ; A A 对 肾脏 的损害 存在 量 一毒 依赖 关
系 , 主要 特征是 肾小 管坏 死 lz[ 〕 。 德 国学者
M en gs 还在组 织学和实验室研 究相结合 的
基础上 ,观察不同剂量 A A 的肾毒性 ,证实其
组织学表现为 肾小管上皮细胞坏死 ; 功能上
血肌醉和尿素氮上升同时伴尿糖 、 尿蛋 白 、 尿
N A G
、
y
一谷 氨酞胺转移酶 、 苹 果酸脱 氢酶相
应增加 1[ 3〕 。 国 内也有报道过超量服用单味药
关木通引起 中毒反应并致死亡的案例 ,其 中
最重要的表现为肾损害sj[ 。 但关木通作为当
归四 逆加吴茱英生姜汤复方 中的非君药组
分 ,在《中国药典 )}( 九五版 )常用剂量下使用 ,
以前未见中毒报道 。
我们的实验结果显示 : 关木通及其所在
复方当归 四逆加吴茱英生姜汤 旧方均有相同
的肾毒性趋 向 ,实验 中旧方 内关木通 中毒剂
量相当临床成人用量 20 9 d/ , 为至今已报道
的文献中关木通 中毒的最低剂量 。 而八月扎
茎及其所在的复方当归四逆加昊茱英生姜汤
新方未见肾毒性反应 ,提示 : 当归 四逆加吴茱
英生姜汤中用木通科八月扎茎可能比用马兜
铃科关木通更安全 。
参 考 文 献
1 Iz u m o t a n i T
, e t a l
·
N e p h r o n
,
1 99 3
,
6 5
:
13 7
2 V a n h e r w e g h e m J L
,
et a l
.
L a n e e t
,
1 9 93
,
3 4 1
:
3 8 7
3 C o s y n s J P
, e t a l
.
K id n e y l n t
,
19 9 4
, 4 5
:
1 6 8 0
4 V a n y p e r s e l e d e s t r ih o u C
, e t a l
.
N e p h r o l压 a l T r a n s -
P la n t
,
1 9 9 5
,
10
: 15 7
5 W u M S
, e t a l
.
N e Ph r o l 压 a l T r a n s p la n t , 1 99 6 , 1 1 :
8 6 7
6 田中敬雄 , 他 . 日本呀暇争含该 , 1 9 9 7 , 3 9 ( 4 ) : 4 3 8
7 黑川清 . 日本呀胶攀舍此 , 1 9 9 7 , 3 9 ( 7 ) : , , i
8 丁 涛 . 中草药不 良反应及防治 . 北京 : 中国中医药
出版社 , 1 9 9 2 : 2 9 2
9 谢宗万 . 中药通报 , 19 8 6 , 1 1 ( 5 ) : 1 3
1 0 王伯涛 . 浙江中医杂志 , 1 9 8 4 , 1 9 ( 1 2 ) : 56 1
n 王浴 生主编 . 中药药理与应用 . 北京 : 人 民卫生 出版
社 , 1 9 8 3 : 1 4 1 、 1 7 3
12 曾美怡 , 等 . 中药新药与临床药理 , 19 95 , 6( 2) : 48
1 3 M e n g s U
, e t a l
.
A r e h oT
x ie o l
, 19 9 3 , 6 7
: 3 0 7
14 马红梅 , 等 . 中药新药与临床药理 . 19 9 , 1 0( 5) : 37
( 1 9 9 9
一
0 3
一
1 6 收稿 )
.
7 6 2
.