全 文 ：⁄vst大孔树脂分离纯化大黄总蒽醌的研究
许汉林 3 o陈 军 o邵继征 o孙 芸 o张赤志
k湖北中医学院 药学院 o湖北 武汉 wvssytl
≈摘要 目的 }研究 ⁄vst大孔树脂对大黄总蒽醌的吸附性能及其分离纯化的工艺参数 ∀方法 }以大黄总蒽醌
中的代表成分大黄素为考察指标 o采用 °≤ 测定大黄素的含量 ∀结果 }⁄vst树脂对大黄总蒽醌的适宜交换吸附
条件为 o药液质量浓度为 s1x ª#°pt o³为 | o流速为 t
∂#«pt ~洗脱剂用 s1ts °²¯#pt盐酸 !zx h乙醇 o解吸效果较
好 ∀结论 }⁄vst树脂交换吸附大黄总蒽醌的纯化方法可取 o具有良好的应用前景 ∀
≈关键词 ⁄vst大孔树脂 ~大黄 ~大黄素 ~总蒽醌
≈中图分类号 u{w1u ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussyltw2ttyv2sw
≈收稿日期 ussx2sz2s{
≈基金项目 湖北省教育厅重点科技项目kussvsstl
≈通讯作者 3 许汉林 oר¯ }ksuzly{{|stsv o∞2°¤¬¯}¬«¯wust
¶¬±¤1¦²°
大黄 ¤§¬¬ ·¨«¬½²°¤ «¨¬来源于蓼科植物 o性
寒味苦 o是临床上常用中药之一 ∀大黄的化学成分
较复杂 o其主要成分为蒽醌类衍生物≈t ∀提取分离
大黄总蒽醌的方法 o有明胶沉淀法≈u !醇调 ³
法≈v ow !聚酰胺法≈x oy 等 o但采用大孔树脂分离纯化
的方法报道较少≈z ∀作者研究了 ⁄vst o
p { o÷ p
x o p u otsus等几种树脂从大黄中分离纯化总
蒽醌的方法及条件 o其中 ⁄vst用于大黄总蒽醌分离
纯化效果较好 ∀本研究旨在改进 ⁄vst树脂对大黄
总蒽醌的提取纯化工艺 o获得较高纯度的产品 o从而
为大黄中蒽醌类有效物质的提取和纯化提供参考 ∀
1 仪器与材料
°y{s °≤k⁄∞÷l ≤«µ²°¨ ¯¨ ²±色谱工作站 ~
×⁄p x型离心机k上海安亭科学仪器厂l ~°
p w
型 ³计k上海精密科学仪器有限公司l ~大黄饮片
k湖北省药材公司l ~⁄vst树脂k天津南开大学化工
厂l ~大黄素对照品k购自中国药品生物制品检定所 o
批号 szxy2ussttsl ~甲醇 !氯仿 !浓硫酸等均为分析
纯 ∀
2 方法与结果
211 大黄总蒽醌提取液的制备
称取适量大黄 o加入 ts倍量 ys h乙醇 o加热回
流提取 v次 o每次 t1x «∀过滤 o滤液减压浓缩至无
乙醇味时 o用 ¤溶液调节 ³至 | o离心 o取上清
液 o调整浓度至 s1x ª#°pt为大黄提取液母液k大黄
素质量浓度为 t1us °ª#°ptl ∀
212 大黄总蒽醌含量的测定方法
采用 °≤ o以大黄素为代表性成分进行含量测
定 o样品处理按照5中国药典6usss年版一部大黄的
供试品溶液的制备项下方法进行制备 ∀色谱条件为
色谱柱流动相甲醇 p s1sx h磷酸水溶液k{uΒt{l o流
速 t °#°¬±pt o检测波长 uxw ±° o柱温 vx ε ∀
213 交换吸附大黄总蒽醌
21311 ³对 ⁄vst树脂静态交换吸附大黄提取液
的影响 按表 t要求 o准确称取吸干其表面水分的
活化处理树脂各 w ªo置于 tss °三角瓶中 o各加入
ts °大黄提取液 o用稀盐酸调节 ³分别至 | oz ox o
置于 us ε 恒温水浴箱中 o每间隔 vs °¬±振荡 t °¬±o
ys次r°¬±o{ «后过滤 o分别吸取滤液 s1x °o对滤
液和母液进行 °≤ 测定大黄素含量 o计算吸附量
k°ª#ªptl和吸附率k h l o吸附结果不同 ³kx oy oz o
{ o|l下 ⁄vst大孔树脂静态交换吸附大黄提取液的
吸附量分别为 w1u{u ow1xyv ow1||{ ox1xu| oy1xvx °ª#
ªpt o吸附率分别为 s1w| h oyw1sw h ozs1tw h o
zz1x| h o|t1zt h o结果可知 ³对 ⁄vst树脂静态交
换吸附容量 o随着 ³的增加而增加 ∀
21312 流速对 ⁄vst树脂交换吸附容量的影响 各
取 xs ° ⁄vst 树脂装柱 o加入相同量 ks1xss
ª#°pt otss °l的大黄提取液 o考察流速对 ⁄vst
树脂交换吸附大黄总蒽醌的影响 ∀分别收集流出
液 o定容至 xss °o取样测定流出液残余大黄素量 o
结果见表 t ∀
#vytt#
第 vt卷第 tw期
ussy年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ tw
∏¯¼ oussy
表 t 流速对 ⁄vstk¤l树脂交换吸附容量的影响
流速
r
∂#«pt
残余大黄素
r°ª
树脂吸附量
r°ª#ªpt
吸附率
r h
t tz qwv y qxvu {x qsw
u ut qu| y quzz {t qzu
v u{ qvx x q{tt zx qyy
w vu qt| x qxx{ zu qvz
x wx qwt w qy{z yt qsu
结果可知 o⁄vst树脂的交换吸附容量随着流速
的增加而降低 ∀当流速为 t
∂#«pt时 o流出液残余
大黄素总量最少 o为 tz1wv °ªo其吸附率为 {x1sw h ∀
21313 提取液浓度对 ⁄vst树脂交换吸附容量的影
响 各取 xs °⁄vst树脂装柱 o另各取不同含量相
同药材量的大黄提取液 o调节流速为 t1s
∂ #«pt ∀
分别收集流出液 o定容至 xss °o取样测定流出液
残余大黄素量 o结果见表 u ∀
表 u 提取液浓度对 ⁄vst树脂交换吸附容量的影响
提取液含量
rª#°pt
残余大黄素
r°ª
树脂吸附量
r°ª#ª2t
吸附率
r h
s qtux t{ q|| y qxwt {v q|v
s quxs tz qx{ y qyvx {x qtv
s qvzx tz qy{ y qyu{ {x qsw
s qxss tv qy{ y q|sv {{ qxz
s qyux ty qwx y qzs| {y qs{
从表 u结果可知 o在大黄提取液含量较低时 o
⁄vst树脂交换吸附大黄总蒽醌的能力随着提取液
含量的提高而增加 ∀当提取液含量为 s1xss °ª#
°pt时 o其交换能力最好 o为 y1|sv °ª#ªpt o其吸附
率为 {{1xz h ∀
214 洗脱大黄总蒽醌
21411 不同溶液对大黄总蒽醌静态洗脱效率的影
响 各取 u °已交换吸附大黄总蒽醌的 ⁄vst树脂
x份 o分别用 tss °的 xs h 乙醇 !s1t °²¯ #pt的
¤溶液 !s1t °²¯ #pt的 ≤¯ 溶液 !s1t °²¯ #pt
¤的 xs h乙醇溶液 !s1t °²¯ #pt ≤¯ 的 xs h乙
醇溶液洗脱 o洗脱 x次 o每次 us °溶液 o溶液加入
后各振荡 t °¬±oys次r°¬±o静置 vs °¬±后滤过 o分
别合并滤液定容至 tss °o取滤液测定其中大黄素
的含量 o计算解吸附率k h l o结果见表 v ∀
从表 v结果可以知道 o盐酸乙醇的溶液静态洗
脱效果最好 o其解吸附率为 zs1st h ∀
21412 不同盐酸浓度对大黄总蒽醌动态洗脱效率
的影响 各取 xs °已交换吸附大黄总蒽醌的
⁄vst 树脂装柱 o分别用 ys h 乙醇 os1sux os1sxs o
s1tss os1uss os1ws °²¯#pt的盐酸洗脱剂按 t1s
∂#
表 v 不同溶液静态洗脱大黄总蒽醌的效果
洗脱液 大黄素r°ª#ªpt 解吸附率r h
xs h乙醇 s q{zs tu qys
¤tl t qusz tz qw{
≤ t¯l t qxvx uu quw
¤tl的 xs h乙醇溶液 u qsu{ u| qv{
≤ t¯l的 xs h乙醇溶液 w q{vu zs qst
注 }tl浓度均为 s qt °²¯#pt
«p t的流速进行洗脱 ∀分别收集过柱液 o洗脱至洗脱
液近无色为止 o测定洗脱液中大黄素含量 ∀结果见
表 w ∀
表 w 盐酸浓度与洗脱大黄总蒽醌间的关系
盐酸r°²¯#pt 大黄素r°ª#ªpt 解吸附率r h
s qsux v qtzw wx q|{
s qsxs w qzws y{ qyz
s qtss y qvs{ |t qvw
s quss y quxs |s qxx
s qwss y qtt| {{ qyx
注 }吸附率为 |t qv| h
从表 w中可知 o盐酸浓度对洗脱大黄总蒽醌有
一定影响 o在一定范围内 o随着盐酸浓度增加洗脱大
黄总蒽醌的效率提高 ∀盐酸浓度提高至 s1tss °²¯#
pt时 o洗脱效果最好 o其解吸附率为 |t1v| h ∀
21413 不同乙醇含量对大黄总蒽醌动态洗脱效率
的影响 各取 xs °已交换吸附大黄总蒽醌的
⁄vst树脂装柱 o分别用 s1ts °²¯ #pt盐酸 ovs h o
wx h oys h ozx h o|s h 的乙醇为洗脱剂按 t1s
∂ #
«pt的流速进行洗脱 ∀分别收集过柱液 o洗脱至洗脱
液近无色为止 o测定其中大黄总蒽醌总量 ∀结果见
表 x ∀
表 x 乙醇含量与洗脱大黄总蒽醌间的关系
乙醇r h 大黄素r°ª#ªpt 解吸附率r h
vs u qsvz u| qxt
wx v qztw xv q{s
ys y qt{w {| qx{
zx y qvv| |t q{v
|s y qwyw |v qyx
从表 x可知 o乙醇含量对洗脱大黄总蒽醌有一
定影响 ∀在一定范围内 o随着乙醇含量增加 o洗脱大
黄总蒽醌的效率提高 o用 zx h乙醇洗脱大黄总蒽醌
效果较好 ∀
215 验证试验
各取 xs °⁄vst树脂装柱 x份 o分别加入 tss
°的大黄提取液按优化的动态吸附条件 ³|1s !流
速 t1s
∂#«pt !提取液含量 s1xss ª#°pt进行动态
交换吸附 o然后用 x倍量蒸馏水洗至水澄清 o最后按
#wytt#
第 vt卷第 tw期
ussy年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ tw
∏¯¼ oussy
优化的动态洗脱条件 s1ts °²¯#pt盐酸 !zx h乙醇 !
洗脱流速 t1s
∂ #«pt洗脱 o并计算其 ⁄vst树脂对
大黄总蒽醌的动态交换容量 o吸附率 o解吸附率 o总
转移率 ∀结果见表 y ∀
表 y 验证试验
²q
动态交换容量
r°ª#ªpt
吸附率
r h
解吸附率
r h
转移率
r h
收膏率
r h
t y q{v| {z qzx {| quz z{ qvv | qz|
u y q|sw {{ qx{ |t q{w {s q|w | q|t
v y q|xv {| qut |t qxu {t qyx | q|v
w z qst| |s qsy |u qtx {u q|| ts qtt
x z qttu |t qux |u qvv {w qux ts qut
平均值 y q|yx {| qvz |t qvv {t qyv | q||
≥⁄r h t qxt t qxt t qvw u qzw t qy{
从表 y中可以看出 o⁄vst树脂分离纯化大黄总
蒽醌的工艺稳定可行 ∀
3 讨论
311 考察 ³对 ⁄vst树脂交换吸附大黄提取液的
影响时 o吸附量随着 ³ 的增大而增加 o是因为 ³
的增加 o可以增加蒽醌类物质在水中的溶解度 o有利
于蒽醌类分子被树脂吸附 o但是 o³ 过高可能对大
黄蒽醌类物质产生破坏 ∀
312 当动态吸附流速提高到 v
∂ #«pt时 o其吸附
率下降 o可能是由于蒽醌苷分子量较大 o扩散速率较
慢 o流速过大 o使大量大黄蒽醌苷来不及与 ⁄vst树
脂交换吸附而发生泄漏 ∀
313 考察动态吸附含量时 o随着提取液含量的升
高 o可交换吸附量增加 o但是药液的黏度也上升 o易
停止流动 o流速不易控制 ∀且大黄总蒽醌在 ⁄vst树
脂内部扩散能力也会降低 o使树脂的交换容量有所
下降 ∀
314 考察树脂的静态解吸附时 o酸性乙醇溶液比碱
性乙醇溶液的解吸附率高 u倍以上 o单独使用乙醇
溶液 !酸水溶液 !碱水溶液的洗脱效果都不好 o这可
能是被树脂吸附的大黄总蒽醌 o在乙醇溶液或碱水
溶液中不易解吸附 o而在酸水溶液中解吸附后的大
黄总蒽醌在溶液中的溶解度较低所致 ∀
315 考察树脂的动态解吸附时 o随着酸性乙醇溶液
中盐酸浓度的提高 o样品的洗脱能力增强 o但达到
s1ts °²¯#pt盐酸浓度以后 o洗脱效率未见有明显
变化 o反而有所下降 o这可能是过高的酸度减低了大
黄总蒽醌在乙醇中的溶解度所至 ~当乙醇为 ys h以
下时 o洗脱很不完全 o乙醇体积分数提高 o洗脱能
力增加 o这与大黄总蒽醌类成分在不同浓度的酸性
乙醇中的溶解度性质有关 ∀
≈参考文献
≈t 王慕邹 q常用中草药高效液相色谱分析 q北京 }科学出版社 o
t||| }ty q
≈u 李翠萍 q当归对大黄注射液中总葸醌含量的影响 q中医药研
究 ot||z otvkxl }x{ q
≈v 芦喜珍 o刘焱文 o何再安 o等 q大黄注射液的制备及含量测
定 q中国医院药学杂志 ot||w otwk{l }vzz q
≈w 罗 军 o刘振安 o刘焱文 o等 q大黄注射液质量标准的研究 q
中国实验方剂学杂志 ot||{ owkul }wt q
≈x 夏之宁 o周 闯 o孙冠芸 o等 q吸附脱附法提取分离大黄葸醌
甙成分 q中成药 ot||| outk|l }wz{1
≈y 孟 云 o严宝珍 o胡高飞 o等 q芦荟中蒽醌类化合物成分研
究 q北京化工大学学报k自然科学版l oussw ovtkvl }zs1
≈z 黄 圆 o徐雄良 o张志荣 o等 q大黄总蒽醌纯化工艺的研究 q
中成药 oussv ouxktsl }z{v q
Στυδψ ον σεπαρατιον ανδ πυριφιχατιον οφ αντηραθυινονεσιν
Ραδιξ Ετ Ρηιζοµα Ρηει βψ ∆301 µαχροπορουσ ρεσιν
÷ ¤±2¯¬±o≤∞∏±o≥ ¬2½«¨ ±o≥≠∏±o ≤«¬2½«¬
( Ηυβει Χολλεγε οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Ωυηαν wvssyt , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ׫¨ ³¤µ¤° ·¨¨µ¶²©¤¥¶²µ³·¬²±¤±§³∏µ¬©¬¦¤·¬²± ²©·²·¤¯ ¤±·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¶¬± ¤§¬¬∞·«¬½²°¤ «¨¬¥¼ ⁄vst °¤¦µ²2
³²µ²∏¶µ¨¶¬± º µ¨¨ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨§¬±·«¬¶³¤³¨µq Μετηεδ : °≤ º¤¶∏¶¨§·²¤±¤¯¼½¨ ·«¨ ¦²±·¨±·²©·²·¤¯ ¤±·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¶¬± ¤§¬¬∞·«¬½²°¤º¬·«
°¨²§¬± ¤¶¦²±·µ²¯ q Ρεσυλτ : ׫¨ ¤³³µ²³µ¬¤·¨ ¤§¶²µ³·¬²± ¦²±§¬·¬²±¶º µ¨¨ }¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²© ¬¨·µ¤¦·s1x ª#°pt ~³ | ~©¯²º µ¤·¨ t
∂#«p t q
• «¨ ±·«¨ zx h ·¨«¤±²¯ º¤¶∏¶¨§¤¶¨¯∏·¬²± ¤±§·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²© ≤¯ º¤¶s1t °²¯#pt o¤±§·«¨ ©¯²º µ¤·¨ º¤¶t1s
∂#«p t o·«¨ ©¨©¨¦·²©
§¨¶²µ³·¬²± º¤¶¶¤·¬¶©¤¦·²µ¼qΧονχλυσιον : ⁄vst µ¨¶¬± ³µ²√¬§¨§¤ª²²§ ©¨©¨¦·²±·«¨ ¬¨¦«¤±ª¤±§¤¥¶²µ³·¬²± ²©·²·¤¯ ¤±·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¶¬± ¤§¬¬ ∞·
«¬½²°¤q
[ Κεψ ωορδσ] ⁄vst µ¨¶¬±~ ¤§¬¬ ∞·«¬½²°¤ «¨¬~¨ °²§¬±~·²·¤¯ ¤±·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¶ ≈责任编辑 鲍 雷
#xytt#
第 vt卷第 tw期
ussy年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt o¶¶∏¨ tw
∏¯¼ oussy