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Influence of Qingpeng plaster on blood vessels and mast cells in skin tissue of channel points of nude mice

青鹏膏剂贴敷裸鼠穴区对皮肤内血管和肥大细胞的影响



全 文 :青鹏膏剂贴敷裸鼠穴区对皮肤内血管和
肥大细胞的影响
罗明富,李翠红,张 栋,郭 莹,何俊娜,马惠敏,王叔友,李顺月
(中国中医科学院 针灸研究所 形态研究室,北京 100700)
[摘要] 目的:通过体表穴区贴敷藏药制剂(青鹏膏剂),观察裸鼠皮肤组织血管和肥大细胞数量的变化,以
了解该药物对微循环血流的作用,方法:健康成年裸鼠15只,分为青鹏膏剂贴敷组和对照组。动物贴敷青鹏膏剂7
天后,分别在两组动物的背部取涂药部位(以第4胸椎为中心)和相应未涂药部位皮肤组织,进行切片染色观察。
结果:在涂青鹏膏剂的真皮深层以下的组织内明显可见扩张的血管和肥大细胞数量数量增多。在同体对照或对照
组的皮肤组织内,虽也见少量扩张的血管,但明显少于涂药的皮肤组织内的血管数量。统计学处理结果显示青鹏
膏剂组涂药部位的皮肤组织内血管数量和肥大细胞数量,均明显多于同体未涂药部位和对照组的数量,有非常显
著性差异(P<0001)。结论:青鹏膏剂对涂药部位皮肤组织内的血管明显有扩张作用和促肥大细胞聚集作用。
[关键词] 青鹏膏剂;诃子;血管;裸鼠
[中图分类号]R285.5 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)07081603
[收稿日期] 20071010
[通讯作者] 罗明富,Tel:(010)640144112769,Email:psy_
1mf@yahoo.com.cn
  中药穴位敷贴疗法是通过对皮肤的直接或间接
作用而达治病目的一种给药方法,属于针灸疗法中
的“天灸”类,又称敷灸法或药物灸法,是中医的治
疗手段之一,也是冬病夏治的经典手段,具有疗效明
显,操作简单等优点。青鹏膏剂由多种藏蒙药物组
成,敷贴体表可起到止痛、消肿和活血等治疗效果。
目前,对于药物贴敷疗法在皮肤的作用机制的实验
观察研究还很欠缺,故本研究拟以裸鼠为模型观察
穴位贴敷青鹏膏剂对皮肤组织的影响。
1 材料
1.1 动物与试剂 BALB/Cnu成年裸鼠,体重在
18~20g,SPF级,15只(雄性8例,雌性7例),购自
中国医学科学院实验动物研究所,许可证号 SCXK
(京20050013)。
1.2 药物与试剂 青鹏膏剂由棘豆、亚大黄、铁棒
锤、诃子(去核)、毛诃子、余甘子等有效成分按比例
配伍成方,经多次加热煮沸,提取药液,将提取液进
行减压浓缩,成为浓缩液,并与基质原料混合,而成
浅黄色软膏(西藏林芝奇正藏药厂,国药准字
Z54020140);试剂为酸性品红、苦味酸、甲苯胺蓝
(北京化学试剂公司)。
2 方法
2.1 分组 裸鼠15只,其中10只(雄性5例,雌性5
例)为青鹏膏剂贴敷组(简称药组);5只为对照组。
2.2 给药及处理方法 将青鹏膏剂均匀涂敷于以
第4胸椎为中心,直径为15cm的区域内。每次用
药量为25mg左右。第1次观察完毕后,动物进行
常规饲养,并每天涂药2次(上午8点和下午4点)。
对照组除在相应部位涂对照软膏外,其余处理均与
药组相同,第7天取皮肤组织。
2.3 组织切片方法 以每只动物的第4胸椎和第
2骶椎为中心(作同体对照)分别快速剪取面积为
2M2厘米的区域皮肤组织,将所取组织速冻于 -25
℃的固定台上,组织切片厚度为20μm,迅速用风扇
吹干后,依次进行不同组织细胞染色。
2.4 染色步骤 将吹干的组织切片入01%甲苯
胺蓝液内侵染 1min,然后洗去染液,用加样器取
VanGieson液[1](300~500μL)滴加于切片上,侵
染10s后,用蒸馏水洗掉染液。切片染色完毕后,
依次进行脱水、透明和树胶封片。
3 结果
3.1 血管形态观察 显微镜下,在涂青鹏膏剂的真
皮深层以下的组织内明显可见扩张的血管,数量增
多。扩张的血管主要以微细的动脉较多见,管径在
05~7μm,动脉壁结构清晰,它们主要在真皮与皮下
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第33卷第7期
2008年4月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.33,Issue 7
April,2008
组织交界处出现较多(图1)。在同体对照(未涂药的
第2骶椎部位)或在对照组的皮肤组织内,虽也见少
量扩张的血管,但明显少于药组的血管数量(图2)。
图1 青鹏膏剂组未涂药部的皮肤组织内血管
(空心箭头)和肥大细胞(实心箭头)(×200)
图2 青鹏膏剂组涂药部位的皮肤组织内血管
(空心箭头)和肥大细胞(实心箭头)(×200)
3.2 血管计数统计 在每只动物涂药部位和未涂
药部位,分别计数10个组织切面内的血管数,并计
算该组10只动物上述两部位的各总血管数。对涂
药部位与未涂药部位血管总数的统计学处理结果显
示二者具有非常显著性差异(P<0001)(表1)。
表1 青鹏膏剂对皮肤组织内血管和肥大细胞(MC)
数量的影响(珋x±s,n=10)
项目 血管 肥大细胞
涂药部位  5340±94661) 5470±69772)
未涂药部位 3220±5653 4410±4701
  注:与未涂药部位比1)P<001,2)P<0001
3.3 肥大细胞形态观察 显微镜下,在涂药和未涂
药的组织切片内,从真皮至皮下组织、肌肉组织,均可
见到肥大细胞。它们呈圆形、卵圆形、梭形或不规则
形,细胞大小不一,胞核多呈圆形。胞质充满圆形嗜
碱性颗粒,多而密集,它们多沿血管等结构分布,有发
生脱颗粒现象。特别在青鹏膏剂直接涂抹的皮肤组
织内的血管周围聚集数量较多的肥大细胞,发生脱颗
粒的细胞数增多(图1)。未涂药部位的肥大细胞数
量较少,血管周围的肥大细胞数量也较少(图2)。
3.4 肥大细胞计数统计 在每只动物涂药部位和
未涂药部位,分别计数10个组织切面内的肥大细胞
数,并计算该组10只动物上述两部位的肥大细胞总
数。对肥大细胞数量的统计可见,二者具有极显著
性差异(P<0001)(表1)。
3.5 实验药组与对照组血管和肥大细胞数量的比
较 通过与对照组的观察,青鹏膏剂组涂药部位的
血管数量和肥大细胞数量均明显多于对照组涂对照
软膏的相应区域的血管数量和肥大细胞数量,统计
学处理结果显示用药组与对照组有显著性或非常显
著性差异(P<001,P<0001)(表2)。
表2 青鹏膏剂组与对照组皮肤组织内的血管数和
MC数的比较(珋x±s,n=10)
组别 血管 肥大细胞
青鹏膏剂 3220±56531) 4410±47012)
对照   2340±5225 2380±2168
  注:与对照组比1)P<001,2)P<0001
4 讨论
根据经络学说:经络是人体气血运行的通道,它
纵横交错,沟通表里上下,联系全身.药物敷贴体表
穴区可将药物作用的信息,透过皮肤、俞穴、络脉,进
入血液循环,传达到经气失调的病所,起到到缓解症
状、增强免疫力,降低过敏反应,治愈疾病的目的。
青鹏膏剂内所含的余甘子,诃子和毛诃子等是藏蒙
医药的常用药物,具有清热解毒,收敛养血,活血化
瘀以及对多种细菌的抑制作用[2]。
本实验观察到青鹏膏剂组涂药部位的皮肤组织
内血管数量和肥大细胞数量,均明显多于同体未涂
药部位和对照组的血管数量和肥大细胞的数量,统
计学处理结果显示二者间有非常显著性差异,扩张
的血管数量增多与肥大细胞数量增加呈正相关性。
这说明青鹏膏剂的药效作用与血管和肥大细胞的参
与密切相关。
众所周知,肥大细胞(MC)是构成机体免疫系统
的重要成分之一,它们主要通过脱颗粒释放数十种
生物活性物质发挥和参与对机体内的生理或病理反
应过程,如引起淋巴细胞反应和毛细血管扩张和血管
通透性增加,并还与人体经络现象密切相关[3,4]。
本实验曾经观察到电针或灸刺激都可引起皮肤
组织内血管的扩张和 MC数量增加[5],但针和灸对
血管的扩张作用都不如青鹏膏剂的作用强。这提示
青鹏膏剂活血化瘀作用可能与其使皮肤血管扩张密
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    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
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