全 文 ：补骨脂中两个黄酮类成分的高效液相色谱测定
林瑞民t o王大为u o熊志立u o许 勇u o李发美u
kt q鞍山师范学院 化学系 o辽宁 鞍山 ttwssx ~u q沈阳药科大学 药学院 o辽宁 沈阳 ttsstyl
≈摘要 目的 }同时测定补骨脂中的两个黄酮类成分 ∀方法 }以实验室制备的补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄
酮为对照品 o采用反相高效液相色谱法测定含量 ∀ × ¦¨«¶³«¨ µ¨ ⁄≥色谱柱kw qy °° ≅ uxs °° ox Λ°l ~流动相为甲
醇2us °°²¯#p t醋酸铵缓冲液k³ w qsl kyzΒvvl ~检测波长 uws ±° ∀结果 }补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮浓度
为 t qux ∗ us Λª# °p t o线性关系良好 ~补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮的平均回收率分别为 |w q| h 和 |y qu h ~
≥⁄分别为 v qt h和 v qy h ∀结论 }首次建立了同时测定补骨脂中补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮的 °≤ 分析
方法 o本方法结果准确 o重现性好 o适用于补骨脂黄酮类成分的分析测定 ∀
≈关键词 补骨脂 ~补骨脂二氢黄酮 ~补骨脂异黄酮 ~ °2°≤ 法
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussuls|2s2sv
补骨脂始载于5开宝本草6 o为豆科植物补骨脂
Πσοραλεα χορψλιφολια q的干燥成熟果实 o别名破故
纸 !黑故子 !胡故子等 ∀其性大温 o味辛 !苦 o入脾 !肾
经 o具有补肾 !壮阳 !止泻之功效 o为温肾助阳的常用
药 ∀用于阳痿遗精 o遗尿尿频 o腰膝冷痛 o肾虚作喘 o
五更泄泻 ~外用治白癜风 !斑秃≈t ∀此外 o补骨脂具
有雌激素样作用 !扩张冠状动脉 !促进二倍体细胞的
生长增殖 !抗衰老 !提高机体非特异性免疫的能
力≈u ov ∀
补骨脂的化学成分主要为香豆素类 o同时还有
黄酮类和单萜酚类化合物 o以及豆甾醇 !Β2谷甾醇葡
萄糖苷 !三十烷等≈u ov ∀香豆素类有呋喃香豆素类
和拟雌内酯类化合物 ∀黄酮类有二氢黄酮类 !异黄
酮类和查耳酮类化合物 ∀单萜酚类主要有挥发油补
骨脂酚等 ∀其中呋喃香豆素类化合物补骨脂素为治
疗白癜风的主要活性成分 o对牛皮癣 !斑秃也有很好
的疗效 ∀在我们的研究中发现补骨脂的两个黄酮类
化合物 ) ) ) 补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮 o具有
促进成骨样细胞增殖和分化的活性≈w ∀本文报道
°≤ 同时测定补骨脂中的这两个黄酮类化合物 ∀
1 实验方法
1 q1 仪器与材料 2ztts 高效液相色谱仪k 2
× ≤ o日本l o2zwss ∂ 紫外检测器k× ≤ o
≈收稿日期 ussu2sv2sv
≈通讯作者 李发美 电话 }ksuwluv{wvztt2vvyt ∞2°¤¬¯}
©¤° ¬¨¯¬ tyv q¦²°
日本l o江申色谱工作站k大连化物所l ~甲醇k山东禹
王实业有限公司 o色谱纯l ~乙醇 !乙酸乙酯 !冰醋酸 !
醋酸铵和提取用甲醇均为分析纯k沈阳化学试剂
厂l ∀
1 q2 对照品溶液的配制 自制的补骨脂二氢黄酮
和补骨脂异黄酮对照品经理化性质和光谱鉴定结
构≈w o以高效液相色谱归一化法测定含量 o分别为
|{ qs h和 |y qx h ∀分别精密称取补骨脂二氢黄酮
和补骨脂异黄酮对照品适量 o用甲醇配制成含补骨
脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮为 tux Λª#°p t的储备
液 ∀依次移取 s qt os qu os qw os q{ ot qy °定容于 ts
°容量瓶中 o配制成不同浓度的对照品溶液 o用于
标准曲线的绘制 ∀
1 q3 样品溶液的制备 市售补骨脂药材由沈阳药
科大学药用植物教研室孙启时教授鉴定为 Πσοραλεα
χορψλιφολια q的干燥成熟果实 ∀分别将不同产地的
补骨脂药材粉碎 o混匀 o干燥 o取 u qx ª置于 tss °
圆底烧瓶中 o每次加 us °|x h的乙醇于 |s ε 水浴
上回流 u «o减压抽滤 o滤渣加新鲜溶剂继续回流提
取 o共 v次 ∀合并 v次提取液于 uxs °茄形瓶中 o
用旋转蒸发仪回收溶剂得浸膏 ∀用 us °热水将
浸膏悬浮 o转移至分液漏斗中 ∀然后每次用 us °
乙酸乙酯萃取 o共萃取 v次 ∀将乙酸乙酯萃取液转
移至 uxs °茄形瓶中 o在旋转蒸发仪上挥干溶剂 o
残余物用甲醇溶解 o定容于 xs °容量瓶中 o移取该
溶液 t °于 x °容量瓶中用甲醇定容至刻线 o摇
匀 o过滤 o即得含生药 ts °ª#°p t的样品溶液 ∀
#|yy#
第 uz卷第 |期
ussu年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²q|
≥ ³¨·¨°¥¨µqoussu
1 q4 °≤色谱条件 × ¦¨«¶³«¨ µ¨ ⁄≥色谱柱
kw qy °° ≅ uxs °° ox Λ°l ~流动相甲醇2us °°²¯ #
pt醋酸铵缓冲液 o³ w qskyzΒvvl ~流速 s q{ °#
°¬±p t ~检测波长 uws ±° ~进样量 us Λ∀
2 实验结果
2 q1 色谱系统适用性试验 取样品溶液在上述色
谱条件下进样测定 o理论塔板数按补骨脂二氢黄酮
的色谱峰计为 y sss o补骨脂二氢黄酮峰的对称因子
为 t qsw ~补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮与相邻峰
的分离度均大于 t qx ∀取补骨脂二氢黄酮对照品溶
液重复进样 x次 o以峰面积计算 ≥⁄为 u qs h ∀
2 q2 线性关系 分别取各浓度的对照品溶液进样
v次 o记录色谱图 ∀以对照品浓度kΛª# °p tl为横
坐标 o峰面积平均值为纵坐标 o绘制标准曲线 ∀补骨
脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮在浓度为 t qux ∗ us Λª#
°p t oΑ与 Χ呈良好的线性关系 ,回归曲线方程为 :
补骨脂二氢黄酮 Αt p t .vw ≅ tsw n u .sy ≅ tsx Χt ,
ρ s .|||x ;补骨脂异黄酮 Αu t .|v ≅ tsw n t .uv ≅
tsx Χu , ρ s q|||x ∀
2 q3 重现性 精密称取同一补骨脂样品 x 份 o按
/样品的制备0项下操作制备样品 o进样 o记录色谱图
k图 tl ∀以外标法分别计算补骨脂二氢黄酮和补骨
脂异黄酮的含量 o计算 ≥⁄o分别为 v qt h和 v qy h ∀
图 t 补骨脂提取物的 °≤ 色谱图
t q补骨脂二氢黄酮 u q补骨脂异黄酮
2 q4 回收率 向已知含量的样品中加入对照品 o按
样品的制备项下操作 o制得加样样品 o进样测定 o计
算回收率 o平行测定 v次 o测得补骨脂二氢黄酮和补
骨脂异黄酮的平均回收率分别为 |w q| h和 |y qu h ∀
2 q5 样品的测定 将 {个不同产地的中药补骨脂
制得的样品重复进样 v次 o采用外标法计算相应浓
度 o求出药材中补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮的
百分含量 ∀将结果列于表 t ∀
3 讨论
中药补骨脂单味药及其复方的分析主要是测定
所含的呋喃香豆素类化合物补骨脂素和异补骨脂
表 t 不同产地的补骨脂中
补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮的含量测定
产地 补骨脂二氢黄酮r h 补骨脂异黄酮r h
四川 s qsux s qsvz
福建 s qsvu s qsvy
广州 s qstx s qsu{
湖南 s qsut s qsu|
安徽 s qsvu s qsvz
河南 s qsvy s qsvx
江西 s qst{ s qsuw
北京 s qsvy s qswu
素 o分析方法有薄层扫描法≈x o薄层荧光测定法≈y o
和高效液相色谱法≈z o{ ∀单萜酚类化合物补骨脂酚
的分析方法也有报道≈| ∀补骨脂中所含的另一类成
分黄酮化合物的分析测定未见报道 ∀而我们在进行
补骨脂促进成骨细胞增殖和分化活性成分追踪研究
中发现 o补骨脂中黄酮化合物补骨脂异黄酮和补骨
脂二氢黄酮在体外有直接促进成骨细胞增殖和分化
活性 o因此对于补骨脂中黄酮类化合物的分析测定
具有重要意义 ∀本文首次建立了同时测定补骨脂中
补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮的 °≤ 分析方
法 ∀
对于补骨脂的样品制备采取乙醇回流提取 u o
w oy «进行比较 o发现 y «提取物中补骨脂黄酮含量
高 o且与索氏提取 tw «含量相近 ∀因为补骨脂中黄
酮含量很低 o其他主要成分的干扰严重 o因此采用乙
酸乙酯进行萃取 o对提取液进行初步纯化和浓缩 ∀
加样回收率试验证实了该方法的可行性 ∀
由于所测定成分为黄酮类化合物 o含有酚羟基
显弱酸性 o因此选择醋酸铵2醋酸缓冲液 ³ w qs作
为流动相 o在 tx ous oux °°²¯#pt浓度下 o³ x qx o
w qx ow qs的缓冲液进行试验 o发现 ³ x qx时 o均出
现峰拖尾现象 o³ w qx时有所改善 o进一步降低 ³
至 w qs时 o峰较锐且为对称峰 ∀缓冲盐浓度低时 o基
线漂移 o峰拖尾 o分离度也不好 o最终选择流动相为
甲醇2us °°²¯#pt醋酸铵缓冲液 o³ w qskyzΒvvl ∀
在上述色谱条件下进样 xs °¬±后仍有峰出现 o因此
当被测定组分被洗脱后kuu °¬±l o用大比例k|sΒtsl
的甲醇2缓冲液冲洗色谱柱 x °¬±o再以流动相平衡
tx °¬±o以缩短分析时间 o并确保不对下一个样品产
生干扰 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qusss qtwz q
#szy#
第 uz卷第 |期
ussu年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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≥ ³¨·¨°¥¨µqoussu
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展 q沈阳药科大学学报 ot||y ovkvl }uus q
≈w • ¤±ª⁄o¬ƒ o¬¤±ª q¶·¨²¥¯¤¶·¬¦°µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ≥·¬°∏¯¤·¬±ª ¦2
·¬√¬·¼ ²©°¶²µ¤¯ ¤¨ ≤²µ¼¯¬©¯¬¤∞¬·µ¤¦·¶¤±§·¶× º² ƒ¯ ¤√²±²¬§¶q°¯ ¤±2
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社 ot||z qvww q
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素的高效液相色谱测定法 q中国中药杂志 ot||x ouskul }|| q
≈| 姚三桃 o杨 滨 o徐植灵 q补骨脂中补骨脂酚的含量测定 q中国
中药杂志 ot||x ous kttl }y{t q
ΗΠΛΧ ∆ετερµινατιον οφ Τωο Φλαϖονοιδ Χοµ πουνδσιν Πσοραλεα χορψλιφολια
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µ¨³²µ·²± ¶¬°∏¯·¤±¨ ²∏¶§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©¥¤√¤¦«¬± ¤±§¦²µ¼¯¬±¬± °≤ º¬·«¶¤·¬¶©¤¦·²µ¼ ¤¦¦∏µ¤¦¼ ¤±§µ¨³µ²§∏¦¬¥¬¯¬·¼ q
[ Κεψ ωορδσ] Πσοραλεα χορψλιφολια ~¥¤√¤¦«¬±~¦²µ¼¯¬± ~ °2°≤
≈责任编辑 李 禾
小野芝麻化学成分的研究k ´l
蒋受军t o朱 斌t o魏 锋u o林瑞超u o鲁 静u
kt q广西壮族自治区药品检验所 o广西 南宁 xvssut ~
u q中国药品生物制品检定所 o北京 tsssxsl
≈摘要 目的 }对小野芝麻的化学成分进行了化学鉴定 ∀方法 }采用色谱技术进行分离 !纯化 o利用 ƒ
2 ≥ o
o ∂ ot2 otv2≤ o⁄∞°× o ± ≤ o
≤ 等手段及理化常数鉴定结构 ∀结果 }分离得到 u个化合物 o分别
为芹菜素2z2 Ο2Β2 ∆2kyχ2对羟基肉桂酸基l2甘露糖苷kl o毛蕊花糖苷k µl ∀结论 }化合物 为新化合物 o化合物 µ为
首次从该植物中分离得到 ∀
≈关键词 小野芝麻 ~化学成分 ~小野芝麻苷 ~毛蕊花糖苷
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussuls|2s2sv
≈收稿日期 usst2tt2sv
≈通讯作者 电话 }kszztluyttyxv ∞2°¤¬¯}¬¤±ª¶«²∏∏± ¶¬±¤q¦²°
#tzy#
第 uz卷第 |期
ussu年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²q|
≥ ³¨·¨°¥¨µqoussu