全 文 ：何首乌提取工艺设计
白海波t 3 o王剑飞u o龙 娟u
kt q浙江中医学院 o浙江 杭州 vtssxv ~
u q海南养生堂 药物研究中心 o浙江 杭州 vtssszl
≈摘要 目的 }分别以何首乌提取物 u ov ow ox2四羟基二苯乙烯2u2 Ο2Β2∆2葡萄糖苷水平和提取物抗氧化能力为
检测指标对何首乌进行提取工艺设计 o并检验 u ov ow ox2四羟基二苯乙烯2u2 Ο2Β2∆2葡萄糖苷和抗氧化能力之间的相
关性 ∀方法 }采用正交实验法以乙醇浓度k Α) !溶剂量( Β) !提取时间( Χ)和提取次数( ∆lw个因素 o每个因素选取 v
个水平进行实验 ∀结果 }因素 Α, ∆对 u ov ow ox2四羟基二苯乙烯2u2 Ο2Β2∆2葡萄糖苷的含量有显著影响 o同样对何首
乌的抗氧化能力影响也最为显著 o经检验 u ov ow ox2四羟基二苯乙烯2u2 Ο2Β2∆2葡萄糖苷含量与何首乌的抗氧化能力
之间呈显著线性相关k Π s qstl ∀结论 }以 ys h乙醇 o{倍量提取 v次 o每次 t qx «为最佳提取工艺 ∀
≈关键词 何首乌 ~u ov ow ox2四羟基二苯乙烯2u2 Ο2Β2∆2葡萄糖苷 ~提取工艺 ~抗氧化
≈中图分类号 u{v ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusswlsv2sut|2sv
何首乌为蓼科植物何首乌 Πλοψγουµ µυλτιφορρυµ
׫∏±¥q的干燥块根 o是乌须发 !悦颜色 !养精益血 !抗
衰老的要药 ∀现代药理研究证明 o何首乌及其所含
的二苯乙烯苷类化合物具有抗衰老 !提高免疫功能 !
防治动脉硬化及保肝等作用≈t ∀所以应将测定二苯
乙烯苷类化合物的含量作为何首乌及其制剂的质控
指标 ∀本实验以 u ov ow ox2四羟基二苯乙烯2u2 Ο2Β2∆2
葡萄糖苷k简称二苯乙烯苷l为对照品 o使用 °≤
方法对何首乌的提取工艺进行设计 o并研究何首乌
的抗氧化作用与 u ov ow ox2四羟基二苯乙烯2u2 Ο2Β2∆2
葡萄糖苷含量的相关性 ∀
1 实验材料与仪器
°ttss高效液相色谱仪 o⁄⁄检测器 o°ttss
工作站 o°«²·²¦«¨ °抗氧化检测仪器 ∀
何首乌药材由华东医药公司提供 o二苯乙烯苷
对照品由中国药品生物制品检定所提供 o乙腈为色
谱纯 o水为超纯水 o°«²·²¦«¨ °所用试剂由德国 ∞
公司提供 ∀所有试剂如未注明规格 o均为分析纯 ∀
2 实验方法与结果
2 q1 高效液相色谱条件
按参考文献≈u 方法进行二苯乙烯苷测定 ∀色
≈收稿日期 ussu2sz2us
≈基金项目 浙江省科技厅资助项目ksuttsvxxvl
≈通讯作者 3白海波 oר¯ }ksxztl{yyvvx{z
谱柱为 ≥³«¨µ¬ª¨¯ ≤t{柱kw qy °° ≅ txs °° ox Λ°l o流
动相乙腈2水ktzΒ{vl o柱温 vs ε o流速 t °#°¬±pt o
检测波长 vus ±° o进样量 ts Λ∀
2 q2 抗氧化能力测定
何首乌提取物稀释后 o根据文献≈v 采用化学发
光法 o使用 ∞公司试剂盒 o在 °×≤∞ 专用
仪器上以维生素 ≤ 为对照品测定其抗氧化能力 o结
果以相当于 t Λ°²¯ 维生素 ≤ 清除自由基能力的相
对量表示 ∀
2 q3 正交实验设计及结果
根据何首乌所含成分的理化性质与预试验结
果 o其影响因素主要有醇浓度 !加醇量 !提取次数等 o
故分别以二苯乙烯苷提取含量和抗氧化能力为指
标 o以 |kvwl进行设计 o其因素水平见表 t o结果见
表 u !表 w o方差分析见表 v !表 x ∀
表 t 正交试验因素水平表
水 平
因 素
Α
乙醇浓度r h
Β
溶剂量r倍
Χ
提取时间r«
∆
提取次数r次
t xs { s qx t
u zs ts t u
v |x tu t qx v
由表 u o表 v可见 o以二苯乙烯苷含量为指标 o
则 }用 zs h乙醇k Αul ots倍量k Βu)提取 v次( ∆vl o
每次 t qx «k Χvl为最佳提取条件 ∀
#|tu#
第 u|卷第 v期
ussw年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ v
¤µ¦«oussw
表 u 何首乌药材以二苯乙烯苷
为指标的正交试验结果
试验号
二苯乙烯苷含量r°ª#ªpt
t u
t t qzw t qws
u y q|u y qtv
v tu qw{ y qv{
w z qv| y qu|
x { q|w w qvz
y v qzt x qxy
z u qs| u qx{
{ v qwz w qwu
| s qyv t qxt
表 v 影响何首乌药材二苯乙烯苷提取因素的方差分析
来源 离均差平方和 自由度 方差 Φ值 显著性
Α w| qts u uw qxx y qzy Π s qsx
Β tv q|{ u y q|| t q|v
Χ uu qxx u tt quz v qts
∆ ws qtz u us qs| x qxv Π s qsx
误差 vu qy{ | y q{x
注 }查方差分析表 oΦs qstku ot{l y qst oΦs qsxku ot{l v qxx
表 w 何首乌抗氧化能力正交试验结果
试验号
抗氧化能力
t u
t t qwt t qww
u t qyz t qy{
v t q{x t q{u
w u qsz u qsx
x t qvt t qvv
y t quv t qt|
z t qs{ t qsy
{ t qsw t qsu
| s qwv s qx|
表 x 影响何首乌药材抗氧化能力提取因素的方差分析
来源 离均差平方和 自由度 方差 Φ值 显著性
Α u qts u t qsx ytx qvt Π s qst
Β s qvv u s qtz |z q{w Π s qst
Χ s qtx u s qsz wu qvz Π s qst
∆ s q|w u s qwz uzw q|t Π s qst
误差 s qsu | s qssu
注 }查方差分析表 oΦs qstku ot{l y qst oΦs qsxku ot{l v qxx
由表 w o表 x可见 o以抗氧化能力为指标 o则 }用
xs h乙醇k Αtl o{倍量k Βul提取 v次k ∆vl每次 t «
k Χul为最佳提取工艺 ∀
2 q4 工艺验证
2 q4 q1 提取醇浓度的确定 在以抗氧化能力为指
标进行正交实验时发现 xs h乙醇提取与 zs h乙醇
提取时抗氧化性差异较小 o故选取 xs h oys h 和
zs h v个浓度的乙醇按 Βu ∆v Χu条件进行提取并进
行检测k ν wl o何首乌药材抗氧化能力分别为
t qzyt ot q|tx及 t qy|x ∀
何首乌在用 ys h乙醇提取时抗氧化能力较强 o
所以将何首乌提取的乙醇浓度确定为 ys h的乙醇 ∀
2 q4 q2 提取次数的确定 取何首乌药材用 ys h乙
醇提取 o以二苯乙烯苷提取率为指标 o结果表明二苯
乙烯苷在提取两次时提取效率为yz q{ h ov次为
{s qx h o所以确定其提取次数以 v次为好 ∀
综上所述 o本研究认为何首乌的最佳提取条件
为 ys h乙醇 o{倍量提取 v次每次 t «∀
2 q4 q3 何首乌抗氧化能力与二苯乙烯苷的相关性
分析 精密取何首乌药材分别以 xs h oys h和 zs h
的乙醇进行提取 o每种浓度制备 w份样本 o分别测定
二苯乙烯苷和抗氧化能力 o将所得数据进行线性相
关分析所得线性方程为 Ψ v uts qy Ξ p t s|z qx oρ
s q|uv ∀可知何首乌的抗氧化能力与二苯乙烯苷呈
线性相关关系 ∀
2 q4 q4 何首乌热稳定性试验 按正交试验所得何
首乌药材最佳提取工艺制得何首乌提取液 tu份 o分
为 v组 o分别置于 tsx ε oyx ε 和常温下 o待干燥后
定容 o进行抗氧化能力检验和 °≤ 含量检测 o结果
见表 y ∀
表 y 不同干燥温度对何首乌提取液
抗氧化能力的影响
温度r ε 抗氧化能力 含量r°ª#ªpt
tsx t q{vttl tv qvvtl
yx t q|zv tw qvu
常温 u qtwt tw qyv
注 }tl Π s qsx
可知 o何首乌提取液在 tsx ε 干燥时二苯乙烯
苷含量有较多损失 o抗氧化能力也降低 ∀
3 讨论
本研究证明 o何首乌药材的抗氧化性与二苯乙
烯苷的含量能很好地线性相关 o故以二苯乙烯苷作
为何首乌及其制剂的质控指标较为合理 ∀
戚爱棣以 xs h ozs h o|x h乙醇浓度进行 |kvwl
正交试验 o结果影响何首乌二苯乙烯苷的主要因素
是乙醇浓度 o以 xs h乙醇浓度为佳 o此结果基本与
本研究一致 o但该文献未对提取次数进行探讨 ∀在
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第 u|卷第 v期
ussw年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ v
¤µ¦«oussw
药理研究方面 o有文献≈x 报道 o何首乌醇提液提高
老年大鼠组织 ≥⁄活性显著优于水提液 o提示何首
乌以醇提为佳 ∀
何首乌按其炮制方法不同有生首乌和制首乌之
分 o有多篇文献≈w oy 报道 o何首乌炮制后二苯乙烯
苷含量下降 o有必要从工艺和相关化学分析 !药理方
面进一步研究制首乌的合理性和科学性 o为何首乌
炮制和质量改进提供新的科学依据 o使之更好地应
用于临床 ∀
≈参考文献
≈t 李玉芳 o和玄华 q何首乌现代研究进展 q中成药 ot||z ot|kxl }
vz q
≈u 鲁 静 o粟晓黎 o董海荣 o等 q高效液相色谱法测定何首乌及
制首乌中羟芪衍生物的含量 q药物分析杂志 ousss ouskul }
tsw q
≈v °²³²√ q¨º¬± ¤±·¬²¬¬§¤·¬√¨ «²° ²¨¶·¤¶¬¶}¦«¤µ¤¦·¨µ¬½¤·¬²± ¥¼ ° ¤¨±¶
²©¦«¨ °²¯∏°¬±¨ ¶¦¨±··¨¦«±¬´∏¨ q±} °¨ ·«²§¶¬± ±¨½¼°²¯²ª¼ √²¯∏°¨
vss o²¬¬§¤±·¶¤±§ ¤±·¬²¬¬§¤±·¶ ³¤µ·
§¨q Λεστερ Παχκερ Αχαδεµιχ
Πρεσσ , t||| q|y q
≈w 戚爱棣 q何首乌中二苯乙烯苷提取工艺优选及炮制对其含量
的影响 q中草药 oussu ovvkzl }ys| q
≈x 韩志芬 o顾文聪 q不同何首乌提取液对老年大鼠心 !肝 !脑自
由基代谢及脑内 2
的影响 q中国中医药科技 ot||x ou
ktl }vy q
≈y 马长华 o王金星 q何首乌炮制前后二苯乙烯苷含量比较 q中药
材 ot||x ot{kzl }vxs q
Στυδψ ον οπτιµιζινγ εξτραχτιον προχεσσ οφ ροοτ οφ Πολψγονυµ µ υλτιφλορυµ
¤¬2¥²t o • ¬¤±2©¨¬u o ∏¤±u
(t . Ζηεϕιανγ Χολλεγε οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Ηανγζηου vtssxv , Χηινα ;
u . Ηαιναν Ψανγσηενγτανγ Μεδιχαλ Ρεσεαρχη Χεντερ, Ηανγζηου vtsssz , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε :ײ ²³·¬°¬½¨ ·«¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ³µ²¦¨¶¶²©µ²²·²© Πολψγονι µυλτιφλορι ¤±§√¤¯¬§¤·¨·«¨ ¬±·¨µµ¨ ¤¯·¬²± ¥¨·º¨¨ ± ¤±·¬²¬§¤2
·¬√¨¦¤³¤¦¬·¼ ¤±§·«¨ ¦²±·¨±·²©u ov ow ox2·¨·µ¤«¼§µ²¬¼¶·¬¯¥¨ ±¨ 2u2 Ο2Β2∆2ª¯∏¦²¶¬§¨ ¬± µ²²·²© Π. µυλτιφλορι q Μετηοδ : ׫¨ ²³·¬°∏° ¬¨·µ¤¦·¬²±
º¤¶¤¥¶¨µ√ §¨ º¬·«·«¨ ²µ·«²ª²±¤¯ §¨¶¬ª±~u ov ow ox2·¨·µ¤«¼§µ²¬¼¶·¬¯¥¨ ±¨ 2u2 Ο2Β2∆2ª¯∏¦²¶¬§¨ º¤¶§¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ °≤ ¤±§·«¨ ¤±·¬²¬¬§¤·¬√¨¦¤2
³¤¦¬·¼ ¥¼ ∏¶¬±ª³«²·²¦«¨ °¬¯∏°¬±¨ ¶¦¨±¦¨ §¨·¨¦·¬²± ° ·¨«²§ º¬·«·«¨ °«²·²¦«¨ ° ¶∏³³¯¬¨§¥¼ ±¤¯¼·¬® ¨±¤ ~·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²© ·¨«¤±²¯ o
¤°²∏±·²© ·¨«¤±²¯ o ¬¨·µ¤¦·¬²±·¬°¨¤±§ ¬¨·µ¤¦·¬²±·¬° ¶¨º µ¨¨ ·«¨ ©²∏µ©¤¦·²µ¶¬±·«¨ ¬¨·µ¤¦·¬²±qΡεσυλτ : ׫¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²© ·¨«¤±²¯ ¤±§ ¬¨·µ¤¦2
·¬²±·¬° ¶¨«¤§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¨©©¨¦·²±·«¨ ¦²±·¨±·²©u ov ow ox2·¨·µ¤«¼§µ²¬¼¶·¬¯¥¨ ±¨ 2u2 Ο2Β2∆2ª¯∏¦²¶¬§¨ ¤±§·«¨ ¤±·¬²¬¬§¤·¬√¨¦¤³¤¦¬·¼ ²©·«¨ ¦µ∏§¨
¬¨·µ¤¦·qΧονχλυσιον : ׫¨ ¥¨¶·¨ ¬·µ¤¦·¬²± ³µ²¦¨¶¶¬¶·² ¬¨·µ¤¦··«µ¨¨·¬° ¶¨¥¼ ∏¶¬±ªts©²¯§∞·kys h l oµ¨©¯∏¬¬±ª¤·{x ε ¤±§·² ¬¨·µ¤¦·¨ ²±¨
¤±§«¤¯©«²∏µ¶ ¤¨¦«·¬°¨q
[ Κεψ ωορδσ] Πολψγονυµ µυλτιφλορυµ ~u ov ow ox2·¨·µ¤«¼§µ²¬¼¶·¬¯¥¨ ±¨ 2u2 Ο2Β2∆2ª¯∏¦²¶¬§¨ ~ ¬¨·µ¤¦·¬²± ³µ²¦¨¶¶~¤±·¬²¬¬§¤·¬√¨¦¤³¤¦¬·¼
≈责任编辑 刘
本刊自 t||x年 t月 t日开始对来稿收取处理费k每篇 xs元l o请作者在寄发稿件的同时将处理费通过邮
局寄汇本刊k请勿在稿件中夹带现金l ∀汇单上请注明论文题目及第一作者姓名 ∀收款地址 }北京市东直门
内南小街 ty号5中国中药杂志6社 o邮编 tsszss ∀
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第 u|卷第 v期
ussw年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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