全 文 :刺五加叶皂苷对大鼠心肌缺血
再灌注损伤的保护作用
睢大员t 3 o曲绍春t o于小风t o陈燕萍u o马兴元u
kt q吉林大学 药学院 药理教研室 o吉林 长春 tvssut ~
u q吉林大学 化学院 天然药物化学研究室 o吉林 长春 tvssutl
≈摘要 目的 }观察刺五加叶皂苷k≥≥l对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用 ∀方法 }采用在体大鼠结扎冠
状动脉前降支 vs °¬±后 o松扎再灌注 tus °¬±造成心肌缺血再灌注模型 o计算心肌梗死范围k≥l o测定血清磷酸肌
酸激酶k≤l !乳酸脱氢酶k⁄l !超氧物歧化酶k≥⁄l !谷胱甘肽过氧化物酶k≥2°¬l活性及脂质过氧化物k°sl含
量 o血浆内皮素k∞×l !血管紧张素 µk±ªµl !前列环素k°ul及血栓素 uk×÷ul水平 ∀同时测心肌梗死及非梗死
区游离脂肪酸kƒƒl含量 ∀结果 }≥≥ 对心肌缺血 vs °¬±再灌注损伤 tus °¬±大鼠 o可明显缩小 ≥ o降低血清 ≤o
⁄活性及 °含量 o提高 ≥⁄及 ≥2°¬活性 o能使血浆 ∞× o±ªµ o×÷u 水平明显下降 o°u 水平及 °uΠ×÷u
比值明显增高 o亦可使心肌梗死及非梗死区 ƒƒ 含量明显降低 ∀结论 }≥≥对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有明显
保护作用 o可能与其增强抗氧化酶活性 o减少自由基对心肌的氧化损伤 o纠正心肌缺血时 ƒƒ代谢紊乱 o减少内源
性血管活性物质 ∞×及 ±ªµ释放 o纠正 °uΠ×÷u 失衡等机制有关 ∀
≈关键词 ≥≥ ~心肌缺血再灌注损伤 ~血清酶 ~心肌代谢 ~自由基 ~血管活性因子
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusswlst2sszt2sw
刺五加叶皂苷k≥≥l系从五加科植物刺五加
Αχαντηοπαναξ σεντιχοσυσk∏³µ¨·¤¬¬°l叶中提取分离
的含 ty种活性成分的总皂苷 o除 v种已知成分 «¨ §2
µ¨¤¶¤³²±¬±
o¨¯ ∏¨·«¨µ²¶¬§¨ 和 ¶¤³²±¬±2t外 o其他 tv
种均为邵春杰等≈t ou 新发现的化合物 o命名为 ¦¬º∏2
¬¤±²¶¬§¨k刺五加苷l2t ou ov ow o
o≤t o≤u o≤v o≤w o
⁄t o⁄u o⁄v 和 ∞∀此 ty种化合物的分子结构皆为三
萜皂苷 o在齐墩果烷型配基上连有单糖链或双糖链 ∀
本实验通过大鼠心肌缺血再灌注损伤模型 o观察
≥≥ 对心肌梗死范围k ≥l !血清磷酸肌酸激酶
k≤l及乳酸脱氢酶k⁄l活性及其自由基 o血管活
性物质和心肌游离脂肪酸kƒƒl代谢的影响 o探讨
≥≥抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制 o为其开发
利用提供科学依据 ∀
1 材料与方法
1 .1 动物 •¬¶·¤µ大鼠 o雌雄各半 o体重 uus ∗
uxsªo合格证号 }医动字第 ts2xttu o由长春高新医学
动物研究中心供给 ∀
≈收稿日期 ussv2s{2sx
≈基金项目 吉林省中医管理局科研基金重点课题k|{tzl
≈通讯作者 3 睢大员 oר¯ }kswvtlxyt|yys oƒ¤¬}kswvtlx|ux{uw
∞2°¤¬¯}§¤¼∏¤±¶∏¬ tyv q¦²°
1 .2 药品及试剂 ≥≥ 由吉林大学化学院天然药
物化学研究室提供 o纯度 {x h o以生理盐水配制所
需浓度使用 ~氯化硝基四氮唑蓝k
2×l由上海前进
试剂厂生产 ~脂质过氧化物k°l o超氧化物歧化酶
k≥⁄l及谷胱甘肽过氧化物酶k≥2°¬l测定试剂盒
由南京建成生物工程研究所提供 ~内皮素k∞×l放免
药盒 !y2酮2前列腺素 ƒt¤ky2®¨·²2°ƒtΑl放免药盒及
血栓素
uk×÷
ul放免药盒由解放军总医院东亚免
疫技术研究所提供 ~血浆血管紧张素 µk±ªµl放免
测定盒由北京北方免疫试剂研究所提供 ∀
1 .3 实验分组 将 •¬¶·¤µ大鼠 tus只随机分为 x
组 o每组 uw只 ∀第 t组为假手术组 }舌下静脉注射
生理盐水 u °#®ªpt ~第 u组为模型组 }舌下静脉注
射生理盐水 u °#®ªpt ~第 v ∗ x组为 ≥≥小 !中 !大
剂量组 }分别舌下静脉注射 ≥≥ ux oxs otss °ª#
®ªpt ∀
1 .4 实验方法与观察指标 大鼠冠脉结扎按文献
≈v 方法稍加改进 o在乙醚麻醉下仰位固定于手术
台 o自左侧 v ∗ w肋间开胸 o暴露心脏 o于肺动脉圆锥
及左心房间找出冠脉左前降支 o除假手术组仅穿线
不结扎外 o其余各组均以 s号线立即结扎冠脉 o结扎
时用一细小乳胶管垫于血管与结扎线之间 o将心脏
#tz#
第 u|卷第 t期
ussw年 t月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ t
¤±∏¤µ¼oussw
送回胸腔 o并挤出胸腔内血液和气体 o迅速关闭胸
腔 o开胸时间不超过 vs ¶∀各组动物在结扎 vs °¬±
时分别舌下静脉给药或生理盐水 o然后松解结扎线
进行再灌注 ∀再灌注 tus °¬±后 o以戊巴比妥钠 vs
°ª#®ªpt腹腔注射麻醉 o每组一半动物腹主动脉插管
取血 o用 ≤
≥2ƒ 自动生化分析仪测血清 ≤°
及 ⁄ 活性 ~取血后剖取大鼠心脏 o用生理盐水洗
净心腔内积血 o去掉心房组织及脂肪 o称重 o将左心
室心肌横切 w ∗ x片 o然后浸入
2×磷酸缓冲液中 o
置 vz ε 恒温水浴 o待染色完全后取出 o正常组织染
色 o缺血组织不染色 ∀切下缺血心肌称重 o用缺血心
肌与左心室湿重的百分比计算 ≥ ∀另一半动物按
试剂盒方法测血清 °含量 o≥⁄o≥2°¬活性 ~另
取血抗凝分离血浆 o用放免法≈w 测血浆内皮素
k∞×l !±ªµ及前列环素k°ul和血栓素 u k×÷ul
的代谢产物 y 酮前列腺素 ƒtΑky2¨·²2°ƒtΑl和
×÷
u 水平 ∀取血后剖取大鼠心脏 o取缺血区及非缺
血区心肌各 tss °ªo用一次提取比色法≈x 测心肌游
离脂肪酸kƒƒl含量 ∀实验数据以 ξ ? σ表示 o用组
间 τ检验进行统计分析 ∀
2 结果
2 .1 ≥≥对心肌缺血再灌注损伤大鼠 ≥及血清
≤o⁄ 活性的影响 模型组与假手术组相比 o
≥及血清 ≤及 ⁄ 活性均明显增加k Π s qsx
或 Π s qsstl o表明大鼠心肌缺血再灌注损伤模型
建成 ∀ ≥≥ xs otss °ª#®ªpt组均能明显缩小心肌缺
血再灌注损伤大鼠的 ≥ o降低血清 ≤及 ⁄
活性 o与模型组比较差异显著k Π s qsx或 Π
s qst o表 tl ∀
2 .2 ≥≥对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清 ° o
表 t ≥≥对缺血再灌注损伤大鼠 ≥及 ≤o⁄活性的影响k ξ ? σoν tsl
组别
剂量
Π°ª#®ªpt
≥
Πh
≤
Π#pt
⁄
Π#pt
假手术组 s q{y ? s qztvl u{z quv ? xz qwvtl vu|x quv ? wyu qxytl
模型组 ut qvu ? w q{u vyz q|u ? zt qus wtxu qxt ? y{z qvt
≥≥ ux t| quv ? w q|s vws qty ? x{ q|t wsvw qtx ? xu{ quv
xs tx qvs ? x q{wtl vuy qxz ? yt qux vxsu qxv ? wtu qswtl
tss tv q{y ? y qutul vst quu ? wz qxztl vwux qtw ? w{u qwztl
注 }与模型组比较 otl Π s qsx oul Π s qst ovl Π s qsst k表 u ov ow ox同l
≥⁄及 ≥2°¬的影响 模型组与假手术组相比 o血
清 ° 含量明显增加 o而 ≥⁄o≥2°¬活性明显降
低k Π s qsx或 Π s qstl o表明大鼠心肌缺血再灌
注损伤时伴有体内自由基的堆积和抗氧化酶活性的
降低 ∀ ≥≥ xs otss °ªq®ªpt组均可显著降低血清°
含量 o并提高血清 ≥⁄及 ≥2°¬活性 o与模型组比
较差异显著k Π s qsx或 Π s qstl o见表 u ∀
表 u ≥≥对缺血再灌注损伤大鼠
血清 ° o≥⁄及 ≥2°¬的影响k ξ ? σoν tsl
组别
剂量
Π°ª#®ªpt
°
Π±°²¯#pt
≥⁄
ΠΛª#°pt
≥2°¬
Π∏#pt
假手术组 v qy| ? s qv{ul y quv ? t qvtul | q|v ? u qt{tl
模型组 w qwz ? s qwt w qyx ? t qsw { qsy ? t qwx
≥≥ ux w qvt ? s qxt w q|x ? t qtw { qvz ? t qty
xs v q{v ? s qw|tl x q|u ? t qtstl { qwv ? t qvx
tss v qzx ? s qvyul y qsu ? t qvxtl | qyx ? t qvytl
2 .3 ≥≥对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌 ƒƒ 含
量的影响 用一次提取比色法测定大鼠心肌梗死
区及非梗死区 ƒƒ含量 ∀结果模型组与假手术组相
比 o心肌梗死区及非梗死区 ƒƒ水平均明显增加kΠ
s qsx或 Π s qstl o表明大鼠急性心肌缺血再灌注损
伤时伴有心肌 ƒƒ 代谢的紊乱 ∀ ≥≥ xs otss °ª#
®ªpt组均可明显降低急性心肌缺血再灌注损伤大鼠
梗死区及非梗死区 ƒƒ水平 o与模型组比较差异显
著k Π s qsx或 Π s qstl o见表 v ∀
表 v ≥≥对缺血再灌注损伤大鼠
心肌 ƒƒ含量的影响k ξ ? σoν tsl
组别
剂量
Π°ª#®ªpt
ƒƒΠΛ∞´ #pt
梗死区 非梗死区
假手术组 z|x qz{ ? ty| qyxul zyx q{z ? t{y qxstl
模型组 tuu{ qvt ? vtz q{z |{| qxw ? utv qxw
≥≥ ux tstv quz ? uy{ qwt ||t qtu ? uwu qzt
xs |uu quv ? tz{ qtxtl z{u q{u ? tuv qy|tl
tss {ts qyz ? twu qyzul zz{ quv ? txt qxytl
2 .4 ≥≥ 对心肌缺血再灌注损伤大鼠血浆 ∞× 及
±ªµ水平的影响 用放射免疫分析法测定血浆 ∞×
及 ±ªµ水平 ∀结果模型组血浆 ∞×及 ±ªµ含量明
显高于假手术组k Π s qsx或 Π s qstl o表明大鼠
急性心肌缺血再灌注损伤时伴有体内 ∞× 及 ±ªµ
水平的增加 ∀ ≥≥ tss °ª#®ªpt组均可明显降低急性
心肌缺血再灌注损伤大鼠血浆 ∞×及 ±ªµ水平 o与
模型组比较差异显著k Π s qsxl o见表 w ∀
#uz#
第 u|卷第 t期
ussw年 t月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu{ o¶¶∏¨ t
¤±∏¤µ¼oussw
表 w ≥≥对缺血再灌注损伤大鼠
血浆 ∞×及 ±ªµ水平的影响k ξ ? σoν tsl
组别 剂量Π°ª#®ªpt ∞×Π±ª#pt ±ªµΠ±ª#pt
假手术组 ts| qzy ? uv q|{tl vx{ q{z ? y{ qvuul
模型组 tww quv ? u| qxy wzu qwx ? {z qwy
≥≥ ux twz quy ? vt qts ww{ qxt ? {w qvw
xs tu| qyz ? u{ qzy wuz qvy ? yy qz{
tss ttu qtv ? ut qsytl v{| qwx ? xt qsztl
2 .5 ≥≥对心肌缺血再灌注损伤大鼠血浆 °u 及
×÷u 水平的影响 再灌模型组与假手术组相比 o血
浆 ×÷u 水平明显升高 o°u 水平及 °uΠ×÷u 比值
明显降低k Π s qsx或 Π s qstl o表明大鼠心肌缺
血再灌注损伤时伴有血管内皮细胞的平衡失调 ∀
≥≥ xs otss °ª#®ªpt组均可明显降低心肌缺血再灌
注损伤大鼠的血浆 ×÷u 水平 o增加血浆 °u 水平
及 uΠ×÷u 比值 o与再灌模型组比较差异显著k Π
s qsx或 Π s qstl o见表 x ∀
表 x ≥≥对缺血再灌注损伤大鼠血浆 °u 及 ×÷u 水平的影响k ξ ? σoν tsl
组别 剂量Π°ª#®ªpt °uΠ±ª#pt ×÷uΠ±ª#pt °uΠ×÷u
假手术组 wzx qyt ? x{ qt{ul t|x q{z ? xu qvwtl u qwv ? s q{zul
模型组 vzy qyz ? zy qxw uxy q{| ? yt qzy t qwz ? s qwt
≥≥ ux ws{ q{z ? yu quw uu{ qxz ? yt qyv t qz| ? s qxx
xs wxt qvy ? x{ qz{tl usw qtz ? xs quwtl u qut ? s qzttl
tss wyu qvs ? xs qw{ul ust qvx ? xu qtwtl u qvs ? s qy|ul
3 讨论
实验表明 o≥≥能明显缩小心肌缺血再灌注损
伤大鼠的 ≥ o降低血清 ≤及 ⁄ 活性 o对缺血再
灌注心肌具有明显保护作用 ∀心肌缺血再灌注损伤
时 o不仅氧自由基生成增多 o而且对自由基的清除能
力减低 o从而造成心肌组织中产生的氧自由基大量
蓄积 o引起心肌组织的严重损伤 ∀ ≥≥能明显降低
心肌缺血再灌注损伤大鼠血清 ° 含量 o升高 ≥⁄
及 ≥2°¬活性 o提示其可能通过抑制脂质过氧化过
程 o并同时提高内源性抗氧化酶活性而减轻氧自由
基对心肌的损伤 ∀心肌缺血再灌注损伤时 o血清
ƒƒ水平明显增高 o可增加心肌耗氧量而加重心肌
缺血 o既扩大梗死范围 o又可减弱心肌收缩力 o诱发
心律失常 ∀ ≥≥ 能明显降低心肌梗死区及非梗死
ƒƒ 含量 o表明其能纠正心肌缺血再灌注损伤时
ƒƒ代谢紊乱 o阻止 ƒƒ 对心肌的损伤 ∀心肌缺血
再灌注损伤时 o动脉内皮受损 o使主要产生于冠状动
脉血管内皮细胞的 °u 合成受干扰 o血小板粘附于
内皮下胶原组织 o进一步释放以 ×÷u 为主的缩血管
物质 ∀ ×÷u 可作为 ≤¤un 载体直接促进 ≤¤un 内流和
致密管道系统 ≤¤un释放 o从而促进血小板聚集和局
部血管收缩 o加重内皮损伤 ∀因此 o×÷u 与 °u 的
平衡失调可能是心肌缺血或心肌坏死的主要原因之
一≈y ∀ ≥≥可明显降低血浆 ×÷u 水平 o并能明显增
高 °u 水平及 °uΠ×÷u比值 o提示其可能通过纠
正 °u 与 ×÷u 之间的平衡失调发挥抗心肌缺血再
灌注损伤作用 ∀缺血缺氧促进 ∞×大量释放≈z o引起
冠状动脉持续而剧烈收缩 o甚至造成冠脉血流停止 ∀
∞×可促进心肌及血管平滑肌合成释放 ±ªµ o而
±ªµ又可作用血管或心内皮细胞 o增加 ∞× 释放 ∀
血浆 ±ªµ升高时 o可阻碍血流流畅 o减低心排血量
和局部组织灌注 o并调控胞浆 ≤¤un浓度与蛋白激酶
≤ o促进原癌基因 ¦2©²¶o¦2°¼¦表达 o使细胞生长增殖 o
引起心肌肥厚和血管重构 o进而加重心血管系统的
损伤 ∀ ≥≥可明显降低血浆 ∞× 及 ±ªµ水平 o长期
给药可否能抑制心室及血管重构发挥远期保护心肌
作用 o有待进一步研究 ∀
≈参考文献
≈t ≥«¤² ≤ o¼²¬o÷∏⁄oετ αλq≥¤³²±¬±¶©µ²°¯¨ ¤√¨ ¶²©¤¦¤±·«²³¤±¤¬
¶¨±·¬¦²¶∏¶«¤µ°¶o¦¬º∏¬¤q¶·µ∏¦·∏µ¨¶²© ¦¬º∏¬¤ ±²¶¬§¨¶
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≈u ≥«¤² ≤ o ¼²¬o ÷∏ ⁄oετ αλq≥¤³²±¬±¶©µ²° ¯¨ ¤√ ¶¨²©¤¦¤±·«²2
³¤±¤¬¶¨±·¬¦²¶∏¶«¤µ°¶o¦¬º∏¬¤µ q≥·µ∏¦·∏µ¨¶²© ≤¬º∏¬¤ ±²¶¬§¨¶
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t o u o v o w ¤±§⁄v q Χηεµ Πηαρµ Βυλλot|{| ovzktl }wu q
≈v 睢大员 o吕忠智 o于小风 o等 q益心口服液对急性心肌缺血大鼠
心肌梗死面积和血液流变学的影响 q中国实验方剂学杂志 o
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¨ §¯¬±ª q׫¨ ¬±§¨±·¬©¬¦¤·¬²±¤±§§¨ ¬¯±¨ ¤2
·¬²± ²© °¼²¦¤µ§¬¤¯ ¬±©¤µ¦·q Αρχη Πατηολot|yz o
w }vtu q
≈x 徐淑云 o卞如濂 o陈 修 q药理实验方法学 q第二版 q北京 }人民
卫生出版社 ot|{u q|vv q
≈y 石湘云 o姚松朝 o杨 哗 q血管活性物质与临床 q北京 }北京医
科大学 中国协和医科大学联合出版社 ot||v qwu otwx q
≈z °¨ µ±²º q∞±§²·«¨ ¬¯±¬± °¼²¦¤µ§¬¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤¤±§µ¨³¨µ©∏¶¬²±q Χαρδιο2
ϖασχ Ρεσot||z ovvkvl }xt{ q
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第 u|卷第 t期
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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Προτεχτιϖε εφφεχτ οφ ΑΣΣ ον µψοχαρδιαλισχηεµια2ρεπερφυσιον ινϕυρψιν ρατσ
≥ ⁄¤2¼∏¤±t o ± ≥«¤²2¦«∏±t o ≠ ÷¬¤²2©¨ ±ªt o≤∞≠¤±2³¬±ªu o ÷¬±ª2¼∏¤±u
kt q ∆επαρτµεντ οφ Πηαρµαχολογψo Σχηοολ οφ Πηαρµαχευτιχαλ Σχιενχεσo ϑιλιν Υνιϖερσιτψo Χηανγχηυν tvssut o Χηινα~
u q ∆επαρτµεντ οφ Νατυερ Μεδιχιναλ Χηεµιστρψo Σχηοολ οφ Χηεµιχαλ Σχιενχεσo ϑιλιν Υνιϖερσιτψo Χηανγχηυν tvssut o Χηιναl
≈ Αβστραχτ Οβϕεχτιϖε}ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·²©¦¤±·«²³¤±¤¬¶¨±·¬¦²¶∏¶¶¤³²±¬±¶k≥≥l ²± °¼²¦¤µ§¬¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤2µ¨³¨µ©∏¶¬²±
¬±∏µ¼¬±µ¤·¶q Μετηοδ }׫¨ °¼²¦¤µ§¬¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤2µ¨³¨µ©∏¶¬²± °²§¨¯ º¤¶¬±§∏¦¨§¥¼ vs °¬± ¯¨©·¤±·¨µ¬²µ§¨¶¦¨±§¬±ª¦²µ²±¤µ¼ ²¦¦∏¯∏¶¬²± ¤±§
tus °¬± µ¨³¨µ©∏¶¬²±¬±µ¤·¶q׫¨ ¦«¤±ª¨¶²© °¼²¦¤µ§¬¤¯ ¬±©¤µ¦·¶¬½¨ k≥l o·«¨ ¶¨µ∏° ¦µ¨¤·¬±¨ ³«²¶³«²®¬±¤¶¨k≤l ¤±§ ¤¯¦·¤·¨ §¨«¼§µ²ª¨ ±¤¶¨
k⁄l ¤¦·¬√¬·¼ o·«¨ ¶¨µ∏° ¬¯³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²± k°l ¦²±·¨±·¤±§¶∏³¨µ²¬¬§¨ §¬¶°∏·¤¶¨ k≥⁄l ¤±§ª¯∏·¤·«¬²±¨ ³¨µ²¬¬§¤¶¨k≥2°¬l ¤¦·¬√¬·¼
¤±§³¯¤¶°¤ ±¨§²·«¨ ¬¯±k∞×l o¤±ª¬²·¨±¶¬±µk±ªµl o³µ²¶·¤¦¼¦¯¬±¨ k°ul ¤±§·«µ²°¥²¬¤±¨ uk×÷ul ¯¨ √¨¯¶¤±§ °¼²¦¤µ§¬¤¯ ©µ¨¨©¤·¼ ¤¦¬§
kƒƒl ¦²±·¨±·²©¬±©¤µ¦·¤±§±²±¬±©¤µ¦·¤µ¨¤ º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¨ §q Ρεσυλτ }±µ¤·¶·µ¨¤·¨§¥¼ ≥≥ k¬± ¤§²¶¤ª¨ ²©ux oxs ¤±§tss °ª#®ªpt ¬√ ¤·
vs °¬± ¤©·¨µ¦²µ²±¤µ¼ ²¦¦∏¯∏¶¬²±l o·«¨ ≥ º¤¶¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ µ¨§∏¦¨§o·«¨ ¶¨µ∏° ≤¤±§⁄ ¤¦·¬√¬·¼o·«¨ ³¯¤¶°¤∞× o±ªµ ¤±§×÷u ¯¨ √¨¯
¤±§ °¼²¦¤µ§¬¤¯ ƒƒ ¦²±·¨±·§¨¦¯¬±¨ §oº«¬¯¨ ³¯¤¶°¤°u ¯¨ √¨¯ ¤±§°uΠ×÷u º¤¶¬±¦µ¨¤¶¨§¶¬ª±©¬¦¤±·¯¼ q± ¤§§¬·¬²±o¶¨µ∏° ° ¦²±·¨±·§¨2
¦¯¬±¨ §o≥⁄¤±§≥2°¬¤¦·¬√¬·¼ º µ¨¨ ¬±¦µ¨¤¶¨§°¤µ®¨ §¯¼ qΧονχλυσιον }≥≥ «¤¶³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·²± °¼²¦¤µ§¬¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤2µ¨³¨µ©∏¶¬²±¬±∏µ¼o
º«¬¦« °¤¼ ¥¨ §∏¨ ·²¬·¶©∏±¦·¬²± ²©¬°³µ²√¬±ª©µ¨¨µ¤§¬¦¤¯¶¤±§°¼²¦¤µ§¬¤¯ ° ·¨¤¥²¯¬¶° o§¨¦µ¨¤¶¬±ª³¯¤¶°¤∞× o±ªµ ¤±§×÷u ¯¨ √¨¯¶¤±§¬±2
¦µ¨¤¶¬±ª³¯¤¶°¤°u ¯¨ √¨¯ ¤±§°uΠ×÷u µ¤·¬² ·¨¦q
≈Κεψ ωορδσ ≥≥ ~ °¼²¦¤µ§¬¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤2µ¨³¨µ©∏¶¬²±¬±∏µ¼~¶¨µ∏° ±¨½¼°¨~ °¼²¦¤µ§¬¤¯ ° ·¨¤¥²¯¬¶° ~©µ¨¨µ¤§¬¦¤¯¶~√¤¶²¤¦·¬√¨©¤¦·²µ¶
≈责任编辑 方文贤
鹿茸粗提液对大鼠成骨肉瘤细胞
增殖的调节作用
陈晓超t o柯李晶t o陈躬瑞t o刘树滔t o霍玉书u o饶平凡t 3
kt q福州大学 生物工程研究所 o福建 福州 vxsssu ~
u q美国德州大学 胜安东尼奥健康科学中心 o德州 z{uu| p v|ss o美国l
≈摘要 目的 }观察鹿茸粗提液k°∞l对大鼠成骨肉瘤细胞系 2tsy增殖的影响 o从而为研究鹿茸强筋健
骨的分子机理以及筛选鹿茸防治骨质疏松的生物活性成分提供实验依据 ∀方法 }通过 ≥ ³¨«¤¦µ¼¯ ≥2uss 凝胶过滤
色谱对 °∞进行初级分离 o用 ×× 法检测不同分离组分对 2tsy 细胞增殖的影响 ∀结果 }发现 ≥¨ ³«¤¦µ¼¯ ≥2
uss 凝胶过滤色谱第 u峰 °u次组分 o当其蛋白质浓度高于 s q|zu °ª#pt并低于 |z qu °ª#pt时 o对 2tsy细胞
增殖活性的影响表现为抑制 ~若浓度达到 |z qu °ª#pt后则会促进细胞的增殖 o且增殖效应随蛋白质浓度的增加而
明显上升 ∀当样品蛋白质浓度达到 | qzu ª#pt时 o相应的细胞增殖率为 wzz q|u h o接近 °∞的增殖水平kw|| qyu h l ∀
经 ≥⁄≥2°∞电泳分析第 u峰分子量集中于 x| ®⁄¤左右 ∀此外 o发现第 v !第 w和第 x峰对 2tsy细胞增殖有显
著的抑制作用 ∀结论 }鹿茸蛋白中含有多种双向调控 2tsy细胞增殖的生物活性因子 o既有剂量双向效应 o也有
与分子量相关的不同调控蛋白 o这对中药的双向调节作用提供研究线索 ∀
≈关键词 鹿茸粗提液k°∞l ~ 2tsy细胞 ~细胞增殖 ~ ××法
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusswlst2sszw2sw
鹿茸取自梅花鹿 Χερϖυσ νιππον × °¨°¬±¦®或马鹿
≈收稿日期 ussv2sy2uz
≈通讯作者 3 饶平凡 oר¯ }ksx|tlz{|vytu oƒ¤¬}ksx|tlvzvuwyu o
∞2°¤¬¯}³©µ¤²©½∏q¨§∏q¦±
ΧqΕλαοηυσ尚未骨化的幼角 ∀ 5本草纲目6中记载 }
鹿茸/生精补髓 o养血益阳 o强筋健骨0≈t ∀药理研究
表明 o具有增强机体免疫 !抗衰老 !加速创伤愈合 !促
进骨质修补等功能 o它能在短期内迅速生长发育成
具有成骨 !造血 !神经与表皮生长 !生毛与血管发育
#wz#
第 u|卷第 t期
ussw年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu{ o¶¶∏¨ t
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