全 文 :[8] LabelPH,SotaB,MinginiacEEndogenouslevelsofABAand
IAAduringinvitrorootingofwildcheryexplantsproducedbymicro
propagationPlantGrowthRegul,1989,8:325
[9] JarvisBC,ShannonPRM,YasminSInfluenceIBAandcordy
eepinonrootingandRNAsynthesisinstemcutingofPhaseolus
arureusRoxbPlantCelPhysiol,1983,24:139
[10] 史春余,王振林,郭风法,等 甘薯块根膨大过程中 ATP酶活
性、ATP和ABA含量的变化 西北植物学报,2002,22(2):315
[11] 甘立军,曾晓春,周 燮 茉莉酸类与植物地下储藏器官的形
成 植物学通报,2001,18(5):546
[责任编辑 王康正]
RPHPLC测定地骨皮中肉桂酸的含量
李 康,袁昕蓉,韩 洁,毕开顺
(沈阳药科大学 药学院,辽宁 沈阳 110016)
[收稿日期] 20031218
[通讯作者] 李康,Tel:(024)238437113363
地骨皮为茄科植物枸杞 LyciumchinenseMil或
宁夏枸杞 LbarbarumL的干燥根皮。性味甘、
寒。具有凉血除蒸,清肺降火的功效。主治阴虚潮
热,骨蒸盗汗,肺热咳嗽,咯血,衄血,内热消
渴[1]。地骨皮中含生物碱、有机酸等多种化学成
分[2]。但关于地骨皮药材中成分分离与测定的报道
不多[3]。本研究用反相高效液相色谱法首次分离并
测定了不同产地地骨皮药材中肉桂酸的含量,方法
简便快速,灵敏准确,为该药材的质量评价提供参
考依据。
1 仪器和试药
2010A型高效液相色谱仪 (Shimadz);ClassVP
色谱数据处理系统。肉桂酸对照品 (购自中国药品
生物制品检定所);乙腈、甲醇为色谱纯;水为二
次蒸馏水;其他试剂为分析纯;地骨皮药材购于各
地药店,所有药材均由沈阳药科大学孙启时教授鉴
定。
2 方法和结果
21 色谱条件 DiomonsilC18色谱柱(46mm×200
mm,5μm);流动相甲醇乙腈1%冰醋酸水溶液
(15∶15∶70)pH30;流速09mL·min-1,柱温25℃。
检测波长272nm。肉桂酸在此条件下有较好分离,
理论塔板数按肉桂酸计不低于5000。
22 对照品溶液的制备 精密称取肉桂酸 100
mg,用甲醇溶解于10mL量瓶中,再吸取上述溶液1
mL于10mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,配制为01
mg·mL-1的对照品溶液。
23 供试品溶液的制备 精密称取各地药材 1g,
置索氏提取器中,用95%乙醇100mL提取15h,提
取液经减压回收溶剂,残渣用甲醇溶解至10mL量
瓶中,稀释至刻度,即得。各产地均做一平行样。
24 标准曲线的制定 精密吸取对照品溶液005,
010,020,040,060,080mL,分别置 10mL量
瓶中,用甲醇稀释至刻度,进样 10μL,测定峰面积。
分别重复3次操作,以峰面积平均值(Y)为纵坐标,
其对应成分进样量(X)为横坐标,进行回归计算,得
回归方程为 Y=9×106X+66205,r=09999,在
00050~00800μg线性关系良好。
25 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液
(0002mg·mL-1)10μL,进样,连续测定6次,求
得峰面积值的 RSD为 10%,表明仪器精密度良
好。
26 稳定性试验 精密吸取对照品溶液10μL,进
样,分别于1,2,3,5,8,12,24,36h重复上述操作,计
算峰面积值的 RSD为08%,表明对照品溶液在36
h内基本稳定。
27 回收率试验 精密称取已知含量的同产地药
材约1g,按高中低 3个浓度加入一定量对照品溶
液,按23项方法制备供试品,采用上述色谱条件进
样测定,肉桂酸回收率大于981%(见表1)。
28 含量测定 分别精密吸取各地药材供试品溶
液10μL,进样,各产地进样2次,以外标法计算供试
品溶液中的肉桂酸含量(见图1)。各产地地骨皮中
肉桂酸含量测定结果见表2。
3 讨论
·003·
第30卷第4期
2005年2月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol.30,Issue 4
February,2005
表1 肉桂酸加样回收率试验
加入量
/μg·mL-1
测得量
/μg·mL-1
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
2000 1981 991 991 04
1975 988
1992 995
6000 5960 996 1002 23
5893 982
6160 1027
8000 7850 981 988 17
7796 975
8060 1007
图1 对照品和样品的HPLC图
A对照品;B样品;1肉桂酸
表2 各产地地骨皮中肉桂酸含量测定结果 μg·g
-1
产地 含量 产地 含量
河南濮阳 3476 内蒙古五原 2430
河北石家庄 3294 甘肃兰州 2206
宁夏中宁 1056 北京 6902
宁夏银川 3169 江苏杭州 6915
河北唐山 1773 河北辛集 1371
辽宁朝阳 2650 吉林四平 4863
四川成都 1012 贵州贵阳 1695
上海 3550 新疆乌鲁木齐 1370
广东广州 5199 内蒙古通辽 4615
山东济南 4303 云南昆明 1010
四川资中 1143 重庆 1828
辽宁兴县 1212 四川雅安 2429
青海西宁 9980 - -
31 地骨皮中脂溶性成分很少。先后用水,甲醇,
50%,70%,95%乙醇和无水乙醇提取,然后分别用
甲醇溶解进样;将上述溶剂提取后的提取物,分别用
水混悬,醋酸乙酯萃取,挥干醋酸乙酯后,再用甲醇
溶解进样;还采用上述溶剂提取后的提取物再碱提
酸沉纯化后甲醇溶解进样和直接生药材碱提酸沉之
后甲醇溶解进样,分别进行实验。结果表明,用
95%的乙醇提取效果好,杂质干扰少,肉桂酸含量
高。
32 提取药材时,采用水浴回流提取、超声提取、索
氏提取,最后证明索氏提取方便、提取完全。作者还
考察了索氏提取的时间,试验结果表明 15h可提
取完全。
33 经紫外扫描,肉桂酸在 272nm有最大吸收,
选择272nm为测定波长。
34 分析结果表明,各产地的地骨皮中肉桂酸的含
量有差别。其中广东、吉林产地的地骨皮中肉桂酸
的含量较大,甘肃产地的地骨皮中肉桂酸的含量较
小,有的产地的地骨皮中甚至不含有肉桂酸。地骨
皮的质量有待正确评价。
[参考文献]
[1] 中国药典 一部 200093
[2] 郑虎占 中药现代研究与应用 第二卷 北京:学苑出版社,
19981789
[3] 周兴旺,徐国钧,王 强 双波长薄层扫描法测定地骨皮中莨
菪亭的含量 药物分析杂志,199616(5):311
[责任编辑 王康正]
高效液相色谱法测定不同产地桂枝中原儿茶酸的含量
杨 松1,张会丽2
(1沈阳军区 联勤部 药品仪器检验所,辽宁 沈阳 110026;
2辽宁大学,辽宁 沈阳 110036)
[收稿日期] 20031116
[通讯作者] 杨松,Tel:(024)23069582,Email:syyangsong@
163.com
桂枝主产于广东、广西,为樟科植物肉桂 Cin
namomumcasiaPresl的干燥嫩枝,始载于《神农本草
经》,属辛温解表药,具有发汗解肌、温通经脉、助阳
化气、平冲降气之功效。用于风寒感冒、脘腹冷痛、
血寒经闭、关节痹痛、痰饮、水肿、心悸等。桂枝的主
要有效成分为桂皮醛、桂皮酸、桂皮醇、香豆素及原
儿茶酸等。文献报道对原儿茶酸的含量测定方法主
要有高效液相色谱法[1]和薄层色谱法[2],但对不同
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第30卷第4期
2005年2月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol.30,Issue 4
February,2005