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Anticancer effects of various fractions extracted from Dioscorea bulbifera on mice bearing HepA

黄药子抗肿瘤活性组分筛选及作用分析



全 文 :∆ΝΑ µιχροαρραψ αναλψσισ οφ προτεχτιϖε µεχηανισµ οφ
Βυψανγ Ηυανωυ δεχοχτιον ον φοχαλ χερεβραλισχηεµια/ ρεπερφυσιον ιν ρατσ
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¤±¤¯¼¶¨ ·«¨ ©¨©¨¦·¶²©…∏¼¤±ª ‹∏¤±º∏§¨¦²¦·¬²±k…≠‹ • ×l ²± §¬©©¨µ¨±·¬¤¯ ¼¯ ¬¨³µ¨¶¶¨§ª¨ ±¨ ¶§∏µ¬±ª¦¨µ¨¥µ¤¯
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[ Κεψ ωορδσ] °¬¦µ²¤µµ¤¼~ª¨ ±¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ~¥µ¤¬±¬¶¦«¨ °¬¤~…∏¼¤±ª ‹∏¤±º∏§¨¦²¦·¬²±
≈责任编辑 方文贤 
黄药子抗肿瘤活性组分筛选及作用分析
喻泽兰u o刘欣荣t o ¬¦«¤¨¯ ¦≤∏¯¯ ²¦«t o高 锦t 3
kt q中国科学院 生物物理研究所 生命科学应用研究与发展中心 o北京 tsstst ~
u q湘南学院 基础医学课部 药理教研室 o湖南 郴州 wuvsssl
≈摘要  目的 }分析中药薯蓣科植物黄药子可能的抗肿瘤组分及其作用机制 ∀方法 }将黄药子依次用石油醚 !
乙醇 !水系统地提取 o采用 ‹ ³¨„肿瘤细胞株在小鼠进行体内筛选和研究 o观察不同组分对肿瘤腹水生长及肿瘤细
胞的各种变化 o分析各组分抗肿瘤作用及特征 ∀结果 }石油醚提取物抑制肿瘤腹水生长作用强于乙醇提取物 o而水
提取物有一定的促生长作用 ∀石油醚提取物能显著延长小鼠存活期 o低降肿瘤腹水生成量和肿瘤细胞存活率 o用
药后肿瘤细胞再次传代 o肿瘤腹水的形成时间显著延长 ∀结论 }黄药子石油醚提取物具有显著的抗肿瘤活性 o且抗
肿瘤作用与直接的细胞作用有关 ∀
≈关键词  黄药子 ~提取 ~‹ ³¨„ ~腹水模型 ~形态观察
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsy2sxyv2sx
中药黄药子 ∆ιοσχορεα βυλβιφερα q是薯蓣科植物
黄独的根块 o性味苦平 o具有凉血 o降火 o消瘿 o解毒 o
化痰散结的功效 ∀传统中医药运用黄药子治疗肿瘤
类疾病历史悠久 o应用广泛≈t2w  ∀中医典籍5千金月
令6中记述 o单味药黄药子浸酒治疗颈部肿瘤 ~现代
5中药大辞典6记述 o黄药子对甲状腺肿瘤 !食道癌 !
胃癌等均具有抗癌作用 ∀但黄药子抗肿瘤活性部位
的筛选和相关实验研究报道较少≈x oy  ∀本研究组在
≈收稿日期  ussv2ts2t{
≈通讯作者  3高锦 oר¯ }kstslyw{xwxs| o∞2°¤¬¯}­ª¤²ƒ ¶∏±x q¬¥³q
¤¦q¦±
利用中药配伍金石类药物抗肿瘤的工作中 o曾研究
了单味中药黄药子潜在的抗肿瘤价值≈z  ∀作者采用
荷瘤小鼠 ‹ ³¨„腹水模型 o系统观察黄独石油醚 !乙
醇和水不同极性溶剂提取物组分的抗肿瘤作用 o并
进一步分析活性组分的抗肿瘤作用特点 o旨在阐明
中药黄药子抗肿瘤作用特征及其可能机制 ∀
1 材料和方法
1 q1 药品与 ‹ ³¨„ 细胞株 黄药子为市售中药饮
片 o购自海淀药品批发部 ∀经中国中医研究院中药
研究所生药室何希荣主管药师鉴定 o所购中药饮片
为薯蓣科植物黄独 ∆ . βυλβιφχρα q的根块 o为传统中
药黄药子的正品 ∀实验用 ‹ ³¨„肿瘤细胞株由北京
#vyx#
第 u|卷第 y期
ussw年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ y∏±¨ oussw
大学药学院天然药与仿生药国家重点实验室筛选组
提供 o在本组昆明和 Œ≤• 小鼠长期传代备用 ∀
1 q2 黄药子石油醚 !乙醇和水提取物的制备 准确
称取黄药子饮片 yss ªo捣碎过 ys 目筛 o将药粉用石
油醚k沸程为 ys ∗ |s ε l渗漉 o浓缩浸出液并减压干
燥 o成略带清香味的黄色无定形固体 o得率为
s qvu h o称醚提取物 ∀石油醚提取后的黄药子药粉 o
待石油醚挥发后 o用无水乙醇渗漉 o浓缩浸出液并减
压干燥 o成棕黑色无定形固体 o得率为 v qsz h o称醇
提取物 ∀将药粉晾干 o用双蒸馏水渗漉 o浓缩浸出液
并减压干燥 o成棕色药粉 o得率为 ux q|v h o称水提取
物 ∀实验时将醚提取物和醇提取物加山梨醇甲酯和
精制植物油乳化 o然后加生理盐水配成所需浓度的
乳剂 o黄药子水提取物配成水溶液 o所有制剂灭菌后
备用 ∀
1 q3 抗肿瘤活性组分筛选 实验用动物购自北京
大学医学部动物中心 ow ∗ y 周龄 o体重 t{ ∗ uu ª的
雄性昆明种小鼠 o实验室稳定饲养 t周后取生长状
况良好的小鼠 xw只供实验用 ∀取生长旺盛的 ‹ ³¨„
肿瘤腹水 o用生理盐水配成 t ≅ tsz#°pt ‹ ³¨„细胞
悬液 o每只小鼠腹腔接种 s qu °o然后将小鼠随机
分为 t个对照组和 y个实验组 o对照组 tu只小鼠 o
实验组每组为 z只小鼠 ∀于接种后次日起分别腹腔
注射生理盐水 !黄药子醚提取物 !醇提取物和水提取
物 o隔日 t次 o连续给药 u周 ∀观察小鼠腹水增长情
况及存活期 ∀
1 q4 黄药子醚提取物抗肿瘤作用分析 实验用动
物购自北京市实验动物中心 ow ∗ y 周龄 o体重 t{ ∗
uu ª的雄性 Œ≤• 种小鼠 o实验室稳定饲养 t 周后取
生长状况良好的小鼠 xs只供实验用 ∀取生长旺盛
的 ‹ ³¨„腹水 o用生理盐水配成活细胞数为 y qw ≅ tsy
#°pt ‹ ³¨„细胞悬液 o每只小鼠腹腔接种 s qu °o
随机分为对照组ktu只l和 w个实验组kts只r组l o
于接种后次日起对照组给予不加药的乳化剂生理盐
水溶液 o实验组分别腹腔注射黄药子醚提取物 u qx o
{ qs oux o{s °ª#®ªpt隔日 t次 o连续给药 u周 o于实验
第 t{天 o将小鼠处死 o测定各组小鼠腹水量 o每组随
机挑选荷瘤小鼠 v只计数腹水中死 !活肿瘤细胞数 o
并计算算术平均数 ∀
1 q5 黄药子醚提取物对 ‹ ³¨„肿瘤细胞作用的形态
观察 从北京大学医学部动物中心购买 w 周龄 Œ≤•
种小鼠 o取生长旺盛的 ‹ ³¨„ 腹水 o配成 t ≅ tsz #
°pt ‹ ³¨„ 细胞悬液 o每只小鼠腹腔接种 s qu °o
然后将小鼠随机分为对照组和实验组 o于接种后次
日起分别腹腔注射高剂量黄药子醚提取物 o隔日 t
次 o连续给药 u周 ∀取腹水涂片 o在 w ε 下用 ≤¤µ±²¼
液固定 o‹∞染色 o光镜观察 ∀另取腹水 s qx °o用
u qx h预冷的戊二醛缓冲液预固定后 o按常规制作扫
描电镜标本后扫描电镜观察 ∀
1 q6 黄药子醚提取物对 ‹ ³¨„再次致瘤作用分析
从北京市实验动物中心购买 w ∗ y 周龄 Œ≤• 雄性小
鼠 o选择体重为 t{ ∗ uu ª小鼠 uw 只 o随机分组 ∀
‹ ³¨„肿瘤细胞取自给予不同浓度醚提取物的实验
组和对照组 o小鼠腹腔接种 ‹ ³¨„后连续 u周给药 o
每组随机挑选 v只荷瘤小鼠 o在无菌条件下每只小
鼠抽取肿瘤细胞腹水 v °o组内混合后用生理盐水
t xss µ#°¬±pt ots °¬±o洗 u 次 o苔盼蓝染色 o计数死 !
活细胞数 o配成活肿瘤细胞数为 t ≅ tsz#°pt的细胞
悬液 o随机接种于 w组小鼠腹腔内 o每只 s qu °∀观
察出现腹水时间 ∀
2 结果
2 q1 黄药子醚提取物 !醇提取物和水提取物对昆明
种小鼠腹水型 ‹ ³¨„肿瘤的作用
2 q1 q1 对肿瘤腹水形成的影响 小鼠腹腔接种一
定浓度的 ‹ ³¨„肿瘤细胞后 o可形成腹水 o随着腹水
的增长 o小鼠的体重不断增加 o与腹水量呈平行关
系 ∀结果表明 o给予 ts otss °ª#®ªpt醚提取物和醇
提取物均具有抑制肿瘤腹水形成的作用 o其中高 !低
u个剂量醚提取物分别于第 y天和第 |天出现明显
抑制肿瘤腹水形成作用k Π s qstl o直到第 tx天 u
组均具有非常显著的抑制腹水生长的作用k Π 
s qsstl o且高剂量组显著强于低剂量组k Π s qstl ∀
给予 ts otss °ª#®ªpt醇提取物第 tx 天均产生抑制
腹水生成的作用 o高剂量组与对照组比具有极其显
著作用k Π s qsstl ∀ts otss °ª#®ªpt黄药子水提取
物具有一定的促进肿瘤腹水形成的作用 ∀见表 t ∀
2 q1 q2 对荷瘤小鼠存活期的影响 小鼠腹腔接种
一定浓度的 ‹ ³¨„肿瘤细胞 t 周后 o可形成腹水 o随
着肿瘤腹水的增长 o小鼠出现致死性病理变化 o小鼠
的死亡时间与肿瘤的致死性病理状态呈平行关系 ∀
结果表明 o给予 tss °ª#®ªpt醚提取物能显著延长荷
瘤小鼠的存活期k Π s qstl o生命延长率为 vw qw h ∀
低剂量组醚提取物和醇提取物未见延长小鼠生存期
的作用 ∀
#wyx#
第 u|卷第 y期
ussw年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ y∏±¨ oussw
表 t 黄药子醚提取物 !醇提取物和水提取物对荷瘤小鼠腹水生成的影响k ξ ? σl
组别
剂量
r°ª#®ªpt
ν
体重rª
给药前 第 y天 第 |天 第 tu天 第 tx天
对照 tu uu q| ? u qy u| qx ? v qs vv q| ? v qs v| qv ? v qw wu q{ ? w qv
醚提取物 ts z uv q{ ? u qv uz qv ? u qs vs q{ ? u quul vx qx ? u qxul v{ qu ? u qzvl
tss z uw qy ? t qs ux qy ? u qtul u{ qw ? u qwul vs q| ? u qsvl vw qw ? u quvl
醇提取物 ts z uv qu ? u qu uz q| ? w q| vu q{ ? x qu vz qy ? w qv v{ qu ? v q|tl
tss z uv qw ? t qv u{ qu ? u qu vu qx ? v qy vx qu ? x q{ vy qw ? x qwul
水提取物 ts z uv q{ ? t q| vv qu ? v quul v{ qu ? w qtul wv qs ? v q{ul
tss z uw qv ? t qw vt qu ? t qx vx q| ? u q{ v| qu ? w qt
注 }与对照组比 tlΠ s .sx , u) Π s .st ,v) Π s qsstk表 u同l
给予 ts otss °ª#®ªpt黄药子水提取物具有缩短
荷瘤小鼠生存期的作用 o其中高剂量组与对照组比
较有差异k Π s qsxl o低剂量组与对照组比较有显著
差异k Π s qstl ∀说明水提取物缩短荷瘤小鼠生存
期与剂量无关 ∀见表 u ∀
表 u 黄药子醚提取物 !醇提取物和水提取物
对荷瘤小鼠存活期的影响k ξ ? σl
组别 剂量r°ª#®ªpt ν 存活时间r§
对照 tu t{ qv ? t qx
醚提取物 ts z t{ qs ? t qv
tss z uw qy ? t qvul
醇提取物 ts z t{ qx ? u qu
tss z tz qu ? s qw
水提取物 ts z tx qw ? t qzul
tss z ty qy ? t qutl
2 q2 黄药子醚提取物对 Œ≤• 小鼠腹水型 ‹ ³¨„肿瘤
的作用
2 q2 q1 对肿瘤腹水生成量的影响 黄药子醚提取
物 { .s oux o{s °ª#®ªpt均具有抑制肿瘤腹水生成的
作用 o且随着剂量的增加 o作用加强 ∀其中 { qs °ª#
®ªpt即具有明显作用k Π s qsxl o剂量增加到 ux °ª#
®ªpt具有显著作用k Π s qstl ∀实验结果显示 u qx
°ª#®ªpt没有抑制肿瘤腹水生成的作用k Ё s qsxl o
表明该剂量为无效量 ∀见图 t ∀
图 t 黄药子不同剂量醚提取物对荷瘤小鼠腹水生成量的影响
„ qu qx °ª#®ªpt o…q{ °ª#®ªpt o≤ qux °ª#®ªpt o⁄q{s °ª#®ªpt ~
3 Π s .sx , 3 3Π s qst
2 q2 q2 对腹水中肿瘤细胞活性的影响 醚提取物
{ .s oux o{s °ª#®ªpt均具有促进腹水中肿瘤细胞死
亡的作用 ∀连续给药 u周 { oux o{s °ª#®ªpt组较对照
组分别减少活细胞 t| qv h ovt qs h ow| qt h ∀见表 v ∀
表 v 黄药子醚提取物对荷瘤小鼠腹水中
肿瘤细胞数及其活性的影响
组别
剂量
r°ª#®ªpt
肿瘤细胞数r°pt
活细胞 死细胞数 活细胞比率r h
对照 | qx{ ≅ tsy w qus ≅ tsx |x q{
醚提取物 u qx | qss ≅ tsy t qss ≅ tsy |s qs
{ qs z qyx ≅ tsy u qvx ≅ tsy zy qx
ux qs y qw{ ≅ tsy v qxu ≅ tsy yw q{
{s qs w qyz ≅ tsy x qvv ≅ tsy wy qz
2 q3 黄药子醚提取物对荷瘤小鼠腹水中 ‹ ³¨„肿瘤
细胞形态的影响
2 q3 q1 光镜下肿瘤细胞形态的观察 取各组肿瘤
腹水涂片 o随机选择视野 o高倍镜下计数 tss 个细
胞 o观察每组退化肿瘤细胞 !炎性细胞的数量和肿瘤
细胞的形态 ∀结果表明 o给生理盐水的对照组中肿
瘤细胞大小不均 o分裂活跃 o细胞核大 o核浆比例严
重失调 o瘤巨细胞较多 ∀视野内退化的肿瘤细胞和
渗出的炎性细胞极少见 ∀给予有效量的醚提取物连
续 u周后 o与对照组比较视野内退化的肿瘤细胞显
著增加 o可见散在的各种渗出的炎性细胞 o视野内可
见到肿瘤细胞核固缩 o染色质凝集等肿瘤细胞退化
表现 ∀
2 q3 q2 电镜下肿瘤细胞表面超微结构的观察 扫
描电镜超微结构观察发现 o给生理盐水的对照组中
肿瘤细胞大小不均 o肿瘤细胞表面有整齐的微绒毛
均匀覆盖k图 ul o微绒毛呈现细小杆状独立存在k图
vl ∀给予有效量的醚提取物连续 u周后 o与对照组
比较肿瘤细胞大小较均匀 o肿瘤细胞表面微绒毛出
现倒伏 !减少 !甚至消失的变化k图 wl ∀随着剂量的
增加 o肿瘤细胞表面微绒毛显著减少 o大剂量组肿瘤
#xyx#
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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细胞微绒毛几乎完全消失 o同时可见肿瘤细胞表面
明显的异常 o呈凹凸不平状k图 xl ∀
图 u 对照组扫描电镜下肿瘤细胞超微结构
示肿瘤细胞大小不均
图 v 对照组电镜下肿瘤细胞超微结构
示肿瘤细胞表面有整齐微绒毛均匀覆盖
图 w 醚提取物组扫描电镜下肿瘤细胞超微结构
示肿瘤细胞大小较均匀 o细胞表面微绒毛出现倒伏 o
减少 o甚至消失
图 x 大剂量醚提取物扫描电镜下肿瘤细胞超微结构
示肿瘤细胞表面微绒毛显著减少 !消失 o
细胞表面明显异常 o呈凹凸不平状
2 q4 黄药子醚提取物对 Œ≤• 荷瘤小鼠腹水中 ‹ ³¨„
肿瘤细胞致瘤性的影响 小鼠腹腔中接种一定数量
活力正常的肿瘤细胞后 ox ∗ | §小鼠腹腔可产生肉
眼可见的腹水生成现象 o表现为腹部膨隆和明显的
鼓胀 o伴随着体重快速增长 o是肿瘤细胞致瘤生长的
重要指标之一 ∀接种经黄药子醚提取物 { qs oux °ª#
®ªpt治疗组的肿瘤细胞 o与对照组比较出现腹水的
时间显著延长 o在给定的观察时间内 o出现腹水的荷
瘤小鼠比例显著下降 o表明肿瘤细胞致瘤性下降 ∀
其中 { qs °ª#®ªpt即具有明显的作用 ∀在剂量为 ux
°ª#®ªpt时 o延缓肿瘤腹水出现的时间更加明显 ∀实
验结果显示 u qx °ª#®ªpt组没有明显的延缓肿瘤腹
水形成的作用 ∀见表 w ∀
表 w 黄药子醚提取物对荷瘤小鼠腹水中
‹ ³¨„肿瘤细胞再次致瘤作用的影响
组别
剂量
r°ª#®ªpt
样本
ν
出现腹水的荷瘤小鼠比率
x § y § z § { § | §
对照 | wr| xr| xr| zr| |r|
醚提取物 u qx x urx wrx wrx wrx xrx
{ qs x srx srx srx trx urx
ux qs x srx srx srx srx srx
3 讨论
祖国医学认为 o肿瘤类疾患是/七情0内伤和外
感/六邪0相互作用使体内气血瘀滞所形成的疾病 ∀
本研究采用的 ‹ ³¨„为小鼠肝细胞肿瘤细胞系 o不仅
在皮下接种可形成实体肿瘤模型 o而且腹腔接种一
定浓度的肿瘤细胞可形成肿瘤腹水模型 o具有中医
临床肿瘤疾患的病理状态 ∀研究结果表明 o给予黄
药子醚提取物和醇提取物均具有抑制肿瘤腹水形成
#yyx#
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的作用 o以醚提取物的作用最强 o水提取物具有一定
的促进肿瘤生长的作用 ∀醚提取物抑制腹水生长的
起效剂量为 { °ª#®ªpt o随着剂量的增加 o作用加强 o
高剂量能显著延长荷瘤小鼠的存活期k Π  s qstl ∀
体内研究发现 o醚提取物不仅具有杀伤腹水中肿瘤
细胞的作用 o而且能促进肿瘤细胞退化 o增加机体对
肿瘤细胞的反应性 o使肿瘤细胞表面结构发生变化 o
出现微绒毛倒伏 !减少 !甚至消失的变化 o影响程度
与剂量相关 ∀通过有效剂量醚提取物作用肿瘤细胞
再次传代致瘤作用进一步证明 o醚提取物对肿瘤细
胞超微结构的影响是抗肿瘤作用的结构基础 ∀
中草药中含有多种活性成分 o大量研究集中在
中药水溶性成分上 ∀有研究表明植物类中药含大量
的具有生物活性的脂类成分≈|  ∀中药黄药子含有各
种脂类 !糖 !苷类 !鞣质和多种黄独素 o黄药子抗肿瘤
活性随提取溶剂的极性降低而作用加强 ∀新近发现
同薯蓣科属植物含有细胞毒活性的皂苷类物质≈ts  ∀
本研究证实中医药认为黄药子凉血 !降火和解毒 o主
诸恶疮等的抗肿瘤功效与亲脂性成分有关 o不仅为
民间用酒炮制黄药子防治肿瘤提供了理论依据 o而
且为进一步开发抗肿瘤新药提供了实验佐证 ∀
≈致谢  部分工作得到本所生物大分子国家重点实验
室潘宪明研究员的帮助 ∀
≈参考文献 
≈t  刘春安 o彭 明 q抗癌中草药大辞典 q武汉 }湖北科学技术出版
社 ot||w q|uw q
≈u  唐迎雪 q黄药子古今临床应用研究 q中国中药杂志 ot||x ous
kzl }wvx q
≈v  郑肖莹 o中药治疗大肠癌的研究现状 o中成药 ot||x otzktl ov| q
≈w  徐增莱 o丁志遵 q黄药子的研究进展 o中草药 ot||{ ou|kul }tux q
≈x  高 锦 q一种单味中药抗肿瘤制剂及其制备方法 q中国专利 q专
利申请号 |zttyusx o公开号 tus|vvu q
≈y  陈晓莉 o吴少华 o赵建斌 q黄药子醇提取物对小鼠移植瘤的抑瘤
作用 o第四军医大学学报 ot||{ ot|kvl }vxw q
≈z  叶银英 o何道伟 o兰省科 o等 q苦楝 !黄药子抗癌成分的细胞学评
价 q中国生化药物杂志 ot||{ ot|kwl }t{z q
≈{  徐叔云 o卞如濂 o陈 修 q药理实验方法学 q北京 }人民卫生出版
社 ot|{x qvwy q
≈|  林启寿 q中草药成分化学 q北京 }科学出版社 ot|zz qv| q
≈ts  ⁄²±ª  oƒ ±¨ª ÷  o • ∏o ετ αλ. ׺² ‘¨ º ≥·¨µ²¬§¤¯ ≥¤³²±¬±¶©µ²°
·«¨ • «¬½²° ¶¨ ²© ⁄¬²¶¦²µ¨¤ ³¤±·«¤¬¦¤ ¤±§ ·«¨¬µ¦¼·²·²¬¬¦ ¤¦·¬√¬·¼q
Πλαντα Μεδ ousst oyzk|l }{xv q
Αντιχανχερ εφφεχτσ οφ ϖαριουσφραχτιονσ εξτραχτεδ φροµ
∆ιοσχορεα βυλβιφερα ον µιχε βεαρινγ ΗεπΑ
≠˜  2¨¯ ¤±u oŒ˜ ÷¬±2µ²±ªt o ¬¦«¤¨¯ ¦≤∏¯¯ ²¦«t oŠ„’ ¬±t 3
(t . Ινστιτυτε οφ Βιοπηψσιχσ , Χηινεσε Αχαδεµψ οφ Σχιενχεσ, Βειϕινγ tsstst , Χηινα~
u q≥·¤©©µ²²° ²©°«¤µ°¤¦²¯²ª¼ ²© ⁄¨ ³¤µ·° ±¨·…¤¶¬¦ §¨¬¦¬±¨ ÷¬¤±ª±¤± ˜±¬√ µ¨¶¬·¼o≤«¨ ±½«²∏wuvsss o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨ ·«¨ ¤±·¬2¦¤±¦¨µ¤¦·¬√¬·¬¨¶¤±§·«¨ ³²¶¶¬¥¯¨ ° ¦¨«¤±¬¶° ²© ≤«¬±¨ ¶¨ «¨µ¥ ∆ιοσχρεα βυλβιφερα .
Μετηοδ : ׫¨ «¨µ¥ º¤¶ ¬¨·µ¤¦·¨§¶¨ ∏´¨ ±·¬¤¯ ¼¯ º¬·« ³¨·µ²¯ ∏¨° ·¨«¨µo ·¨«¤±²¯ ¤±§ º¤·¨µq ׫¨ ¤±·¬¦¤±¦¨µ¶¦µ¨ ±¨ º µ¨¨ ¦¤µµ¬¨§²∏·¬± √¬√² º¬·«
‹ ³¨„ ¬± °¬¦¨ qΡεσυλτ : ׫¨ ¬±«¬¥¬·²µ¼ ©¨©¨¦·¶²±·«¨ ©²µ°¤·¬²± ²©¤¶¦¬·¨¶√²¯∏°¨¤±§‹ ³¨„ ¦¨¯¯ √¬¤¥¬¯¬·¼¬±¤¶¦¬·¨¶º µ¨¨ ©²∏±§¬±·«²¶¨ ¬¨·µ¤¦·¨§
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³¨·µ²¯ ∏¨° ·¨«¨µ©µ²° «¼§µ²³«²¥¬¦¦²±¶·¬·∏¨±·¶²© ∆ιοσχρεα βυλβιφερα ¤±§·«¨ ¤±·¬¦¤±¦¨µ ©¨©¨¦·¶º µ¨¨ µ¨ ¤¯·¨§·²§¬µ¨¦··²¬¬¦¬·¼ ²±·∏°²µ¦¨¯¯ q
[ Κεψ ωορδσ] ∆ιοσχορεα βυλβιφερα ~ ‹ ³¨„ ~¤¶¦¬·¨¶°²§¨¯~ °²µ³«²¯²ª¬¦¤¯ ¶·∏§¬¨¶
≈责任编辑 方文贤 
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第 u|卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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