全 文 ：反相高效液相色谱法
测定小野芝麻中毛蕊花糖苷的含量
蒋受军t o朱 斌t o林瑞超u o张尊建v
k广西药品检验所 o广西 南宁 xvssut ~
u q中国药品生物制品检定所 o北京 tsssxs ~v q中国药科大学 o江苏 南京 utsss|l
≈摘要 目的 }测定小野芝麻中毛蕊花糖苷的含量 ∀方法 }采用高效液相色谱法 oµ²°¤¶¬¯ ≤t{色谱柱kw qy °°
≅ txs °° ox Λ°l o流动相乙腈2水2冰醋酸ktvΒ{yΒtl o检测波长 vxs ±° ∀结果 }测得平均回收率为 |z qs h o ≥⁄为
t qy| h ∀结论 }方法准确可靠 o适合于小野芝麻中毛蕊花糖苷的含量测定 ∀
≈关键词 小野芝麻 ~毛蕊花糖苷 ~反相高效液相色谱法
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsw2svwv2sv
小野芝麻为唇形科植物小野芝麻 Γαλεοβδολον
χηινενσε k
¨ ±·«ql ≤ q≠ q• ∏的干燥全草≈t ∀性寒味
苦 o归肝 !脾 !肺经 ∀具清热解毒 o凉血止血 o止咳之
功效 ∀在民间 o用于治疗急性扁桃体炎 !气管炎 !肺
结核 !上呼吸道出血及肺部出血等症 o疗效显著 o国
内外尚未有对小野芝麻化学成分 !药理作用进行研
究的报道 ∀我们首次从小野芝麻药材中分离得到了
毛蕊花糖苷 !金丝桃苷等成分 ∀毛蕊花糖苷的含量
测定国内未见报道 o国外文献仅见 °≤ 法分析玄
参中毛蕊花糖苷的报道≈u o本文利用反相高效液相
色谱法 o对小野芝麻药材中毛蕊花糖苷的含量测定
方法进行了研究 o为控制药材质量提供了依据 ∀
1 仪器与试药
美国 • ¤·¨µ¶uy|s 型高效液相色谱单元k四元
梯度泵 !自动进样器 !柱温箱 !真空脱气机l o• ¤·¨µ¶
||y型二极管阵列检测器 o• ¤·¨µ¶ ¬¯¯ ±¨¬∏° vu 色
谱工作站 ~2± ¤¯¥²纯水发生器 ∀
小野芝麻药材 t|||年 w ox月采集于浙江乐清 !
江西 !福建等地 o由中国药品生物制品检定所张继副
主任药师鉴定 ∀
毛蕊花糖苷对照品 }从小野芝麻药材中分离 !精
制而得 o经光谱鉴定结构 o并利用二极管阵列检测器
进行纯度检查k含量为 |z q{y h o对照品 °≤ 图谱
见图 tl o基本符合含量测定要求 ∀
≈收稿日期 usst2tt2sv
≈通讯作者 电话 }kszztluyttyxv 传真 }kszztluytt{wy
图 t 毛蕊花糖苷对照品色谱图
t q毛蕊花糖苷
石油醚 !乙醇 !氯仿 !甲醇 !冰醋酸为分析纯试
剂 ~乙腈为色谱纯试剂 ~水为超纯水 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件 µ²°¤¶¬¯ ≤t{kw qy °° ≅ txs °° ox
Λ°l色谱柱k中国科学院大连化学物理研究所l o流
动相乙腈2水2冰醋酸ktvΒ{yΒtl o检测波长 vxs ±° o
流速 t qs °#°¬±p t o柱温室温 o进样量 ts Λ∀
2 q2 对照品溶液的制备 取在 xs ε 真空干燥至恒
重的毛蕊花糖苷对照品约 ts °ªo精密称定 o置 ts
°量瓶中 o加甲醇溶解并稀释至刻度 o摇匀 o即得
k每 t °含毛蕊花糖苷对照品 t qs °ªl ∀
2 q3 供试品溶液的制备 取本品 u ª精密称定 o置
索氏提取器中 o加氯仿2石油醚kvs ∗ ys ε lkwΒyl混
合液 tss °o水浴中提取至提取器中溶液近无色 o
弃去提取液 o残渣挥尽溶剂 o加甲醇 |s °o水浴中
提取至提取器中溶液近无色 o分取甲醇液置 tss °
量瓶中 o用适量甲醇洗涤容器 o溶液并入量瓶中并定
容至刻度 o摇匀 o精密量取 xs °置三角瓶中 o减压
#vyu#
第 uz卷第 w期
ussu年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qw
³µqoussu
浓缩至干 o加 us °水分数次溶解残渣 o加于已处
理好的聚酰胺柱k玻璃柱 o直径 t qx ¦° o聚酰胺 u ªo
|s ∗ t{s目 o水装柱l上 ∀用 xs °水超声洗涤容
器 o加于柱上洗脱 o弃去水液 o再用 ts h乙醇溶液 vs
°超声洗涤容器 o加于柱上洗脱 o弃去洗脱液 o再
用 xs h乙醇 tss °溶液超声洗涤容器 o加于柱上
洗脱 o收集洗脱液 o减压浓缩至干 o残渣加甲醇溶解
并定容至 x °o摇匀 o用 s qwx Λ°滤膜滤过即得 ∀
2 q4 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液kt qtu
°ª#°p tlu ow oy o{ ots ous ows Λk自动进样器样品
管体积为 uss Λl分别注入液相色谱仪 o以毛蕊花
糖苷对照品的进样量kΛªl为横坐标 o以毛蕊花糖苷
峰面积为纵坐标 o计算回归方程为 }Ψ y .uysx ≅
tsx Ξ n u .w{yt ≅ tsx , ρ s q||||| ∀结果表明毛蕊
花糖苷在 u quw ∗ ww q{ Λª线性良好 ∀
2 q5 精密度试验 在上述色谱条件下 o精密吸取对
照品溶液 ts Λo连续进样 x针 o测定峰面积 o结果
≥⁄ t qyx h ∀
2 q6 稳定性试验 取供试品溶液k江西产l置棕色
量瓶中室温下保存 o放置 s ot ou ow otu «分别测定样
品含量 o平均含量为 t qxz h o ≥⁄ s qxy h k ν xl ∀
2 q7 重复性实验 精密称取供试品k江西产lu ª≅
x份 o按拟定的方法试验 o测定平均含量为 t qxy h o
≥⁄ t qtw h k ν xl ∀
2 q8 加样回收率试验 采用加样回收法 o精密称取
已知含量的供试品k江西产lt qx ª≅ x份 o精密加入
毛蕊花糖苷对照品适量 o按样品提取测定方法测定 ∀
结果见表 t ∀
表 t 小野芝麻中毛蕊花糖苷加样回收率试验结果
含量
r˪
加入量
r˪
测得量
r˪
回收率
r h
平均值
r h
≥⁄
r h
uv qwv vv qt{ |y qu
uv qv| vv qtt |y qs
uv q|z ts qtv vw qsv || qv |z qs t qy|
uv qvz vv qsv |x qw
uv qw| vv qwv |{ qt
2 q9 样品的测定 按 2 q3 项下方法制备 w个不同
产地小野芝麻样品的供试液 o取 ts Λ进样 o测得毛
蕊花糖苷的峰面积 o并带入回归方程计算毛蕊花糖
苷的含量 o结果见表 u o样品色谱图见图 u ∀
3 讨论
3 q1 流动相的选择 试验中曾选用甲醇2水kwxΒ
xxl !甲醇2s qt h磷酸溶液kwsΒysl !甲醇2t h冰醋酸
图 u 小野芝麻中毛蕊花糖苷 °≤ 色谱图
t q毛蕊花糖苷
表 u 小野芝麻药材中毛蕊花糖苷含量测定结果k ν vl
产地 含量r h ≥⁄r h
浙江 s qwt u qwx
浙江乐清 s q|y u qsx
江西 t qxy v qzx
福建 t qzy t q{v
溶液kwsΒysl !乙腈2t h冰醋酸溶液ktvΒ{zl等流动
相进行试验 o结果以乙腈2t h冰醋酸溶液ktvΒ{zl为
流动相的分离效果为最好 o毛蕊花糖苷与其他成分
达到基线分离 ∀
3 q2 因本品为全草植物 o所含色素等杂质较多 ∀本
文利用氯仿2石油醚kvs ∗ ys ε lkwΒyl的混合液初
提以及聚酰胺小柱 o可达到净化样品的目的 ∀
3 q3 利用 • ¤·¨µ¶ ¬¯¯ ±¨¬∏° vu色谱工作站的峰纯
度检查程序对样品色谱图中毛蕊花糖苷峰纯度进行
鉴定 o结果毛蕊花糖苷峰的纯度角小于阈值 o显示为
纯峰 ∀
≈参考文献
≈t 方文培 q中国植物志 q第二分册 q第 yx卷 q北京 }科学出版社 o
t|{t qw|w q
≈u ⁄¬¤½ oƒ µ¨±¤±§¨½ o¯¯¬√¬¨µ∞o ·¨¤¯ q √¨ µ¨¶¨2³«¤¶¨ ¬ª«°µ¨¶2
¶∏µ¨ ¬´∏¬§ ≤«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦±¤¯¼¶¬¶²© ¤µ³¤ª²¶¬§¨ o ≥¦²µ²§¬²2
¶¬§¨ ¤±§ ∂ µ¨¥¤¶¦²¶¬§¨ ©µ²° Σχροπηυλαρια σχοροδονια } ±∏¤±·¬·¤2
·¬√¨ ⁄¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± ²© ¤µ³¤ª²¶¬§¨ q°¯ ¤±·¤ §¨ot||{ oywktl }|w q
∆ετερµινατιον οφ ς ερβασχοσιδειν Ηερβα οφ Γαλεοβδολον χηινενσε βψ ΡΠ2ΗΠΛΧ
≥«²∏2∏±t o
¬±t o ∏¬2¦«¤²u o ∏±2¬¤±v
kt q∏¤±ª¬¬±¶·¬·∏·¨ ©²µ·«¨ ≤²±·µ²¯ ²© °«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¤¯ °µ²§∏¦·¶o¤±±¬±ª xvssut o∏¤±ª¬¬o≤«¬±¤~
u q¤·¬²±¤¯ ±¶·¬·∏·¨ ©²µ·«¨ ≤²±·µ²¯ ²© °«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¤¯ ¤±§
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第 uz卷第 w期
ussu年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ §¨·¨µ°¬±¨ ∂ µ¨¥¤¶¦²¶¬§¨ ¬± Γαλεοβδολον χηινενσε q Μετηοδ : °≤ ° ·¨«²§ º¤¶∏¶¨§o º¬·«·«¨ ¦²¯2
∏°± ³¤¦®¨ § º¬·« µ²°¤¶¬¯ ≤t{kw qy °° ≅ txs °° ox Λ° ol q ׫¨ °²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ º¤¶¤ °¬¬·∏µ¨ ²©¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ ¤±§t h ¤¦¨·¬¦¤¦¬§¬± ¤
µ¤·¬² ²©tv }{z o¤±§·«¨ ∏¯·µ¤√¬²¯ ·¨º¤√¨¯ ±¨ª·« º¤¶¶¨·¤·vxs±° qΡεσυλτ : × «¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¼ º¤¶|z qs h o·«¨ ≥⁄ ¥¨¬±ªt qy| h q
Χονχλυσιον : ׫¬¶° ·¨«²§¬¶¶¨±¶¬·¬√¨¤±§µ¨ ¬¯¤¥¯¨q·¦¤± ¥¨ ∏¶¨§·² §¨·¨µ°¬±¨ ¥¨¬±ª ∂ µ¨¥¤¶¦²¶¬§¨ ¬± Γαλεοβδολον χηινενσε q
[ Κεψ ωορδσ] Γαλεοβδολον χηινενσε ~√ µ¨¥¤¶¦²¶¬§¨ o °2°≤
≈责任编辑 李 禾
不同产地野菊花挥发油化学成分比较研究
张永明 o黄亚非 o陶 玲 o黄际薇
k中山大学 附属第三医院 o广东 广州 xtsyvsl
≈摘要 目的 }通过研究分析不同产地野菊花挥发油的成分 o为野菊花的开发利用提供实验依据 ∀方法 }采用
水蒸气蒸馏法提取野菊花挥发油 o用 ≤ 毛细管柱进行分析 o归一化法测其相对含量 o并用气相色谱2质谱法对化学
成分进行鉴定 ∀结果 }广西野菊花含主要成分 t{个 o广东野菊花 tz个 o湖北野菊花 us个 ∀结论 }广西 !广东 !湖北
野菊花挥发油化学成分种类和含量均有明显的差别 ∀
≈关键词 野菊花 ~挥发油 ~气相色谱2质谱 ~毛细管色谱
≈中图分类号 u{u qzts qv ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsw2svwx2sv
从野菊花中提取的挥发油具有清热解毒 !降压
作用≈t ∀野菊虽为单一品种 o但分布广 o曾有人对
河北赵县的香菊 !南京老山的野菊和北京西北郊的
野菊都有过报道≈u ∗ w ∀我院制剂喉咽灵多年来用
于治疗上呼吸道感染 !扁桃体炎疗效较佳 o其主要成
分野菊花常因产地不同而影响疗效 ∀我们就广州地
区市售的广东四会 !广西宾阳和湖北随州产的野菊
从化学成分上比较他们的差异 o提出其影响药效的
规律 o同时为上述资源的开发利用提供数据 o我们进
行了该项研究 ∀
1 实验材料
野菊花 }为菊科植物野菊 Χ. ινδιχυ µ 的干燥
头状花序 o野菊花产地分别是湖北随州 !广西宾阳 !
广东四会 o由广州市药材公司提供 ∀药材品种由广
东省药品检验所陈浩桉副主任药师鉴定 ∀
2 实验方法及结果
2 q1 总挥发油总量的测定
按 usss年版一部5中国药典6附录 yw页≈y o挥
≈收稿日期 usst2tu2ux
≈基金项目 广东省中医药管理局研究基金资助项目
ktssttul
≈通讯作者 电话 }ksusl{zxt|{{|
发油测定项下 ∀将野菊花粉碎使能通过 u ∗ v号筛 o
混合均匀 o称取不同产地的野菊花各 xs qs ªo分别加
wss °水 o浸泡 u «o分别以水蒸气蒸镏法提取挥发
油 o比较 v批野菊花的总挥发油含量 o结果见表 t ∀
表 t 不同产地野菊花的总挥发油含量测定结果
产地 生药重量rª 挥发油r h 性状
广西 xs qt s qv 黄色
广东 xs qv s qw 黄色
湖北 xs qv s qw 色浅黄
2 q2 挥发油的气相色谱分析
2 q2 q1 ≤2 ≥ 条件 ≥ 条件 }°y{|s≤r
x|zv ≥型气相色谱2质谱联用仪k美国惠普公司l o
°2t弹性石英毛细管柱kvs ° ≅ s qux °°l o柱初温
ys ε o恒温 v °¬±o以 x ε #°¬±p t升温速率升至 uws
ε o保持 x °¬±~载气 ¨o柱前压 ys ®°¤o分流比 zsΒ
t o进样量 s qx Λ∀
≥条件 }∞离子源 o电子能量 zs ∂¨ o扫描范
围 u| ∗ wss Λ° o四极杆温度 txs ε o离子源温度 uvs
ε o倍增器电压 t xss ∂ o≥2 ≥接口温度 u{s ε ∀
2 q2 q2 挥发油的总离子流图 按上述 ≤2 ≥ 条
件对挥发油进行分析 o得其总离子流图k图略l ∀
2 q2 q3 不同产地野菊花挥油化学成分分析 对总
离子流图中的各峰经质谱扫描后得到质谱图 o经过
#xyu#
第 uz卷第 w期
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qw
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