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Determination of constant for the inclusion complex of Yinqiao volatile oil with β-cyclodextrin

银翘挥发油/β-环糊精包合常数的测定研究



全 文 :Στυδψ ον εξτραχτιον τεχηνολογψφορ εξτραχτ ανδ φλαϖονοιδσ
ιν Χηρψσαντηεµ υµ µοριφολιυµ βψ ορτηογοναλ δεσιγν
≠Œ‘‹²±ªtou o ‹˜ ≠²±ª2½«²∏t o ≠„‘Š ÷¬±2­¬u o׌„‘÷¬∏2¯ ¤±u o • „‘Š «¨ ±v
(t . Χολλεγε οφ Πηαρµαχευτιχαλ Σχιενχεσ , Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssvt , Χηινα ;
u . ϑιαξινγ Χολλεγε Μεδιχαλ Σχηοολ, ϑιαξινγ vtwsss , Χηινα ;
v . ϑιαξινγ Σεχονδ Πεοπλε. σ Ηοσπιταλ, ϑιαξινγ vtwsss , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¤¶¦¨µ·¤¬± ¬¨·µ¤¦·¬²± ·¨¦«±²¯²ª¼ ¦²±§¬·¬²± ©²µ ¬¨·µ¤¦·¤±§ ©¯¤√²±²¬§¶©µ²° Χηρψσαντηεµυµ µοριφολιυµ q
Μετηοδ : ׫¨ ²³·¬°¬½¬±ª∏¯·µ¤¶²±¬¦ ¬¨·µ¤¦·¬²± ¦²±§¬·¬²± ²±·«¨ ¥¤¶¬¶²© ¬¨·µ¤¦·¬√¨¼¬¨ §¯¤±§©¯¤√²±²¬§¶º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ ²µ·«²ª²±¤¯ §¨¶¬ª±q
Ρεσυλτ : ׫¨ ²µ§¨µ²©©¤¦·²µ¶º«¬¦«¤©©¨¦·¨§·«¨ ©¯¤√²±²¬§ ¬¨·µ¤¦·¬²± º¤¶ ¬¨·µ¤¦·¬²±·¬° ¶¨ ·¨«¤±²¯ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±  ∏¯·µ¤¶²±¬¦·¬°¨  ¶²¯√ ±¨·
∏´¤±·¬·¼qΧονχλυσιον : ׫¨ ²³·¬°∏° ∏¯·µ¤¶²±¬¦ ¬¨·µ¤¦·¬²±¶¤µ¨ Αu Βv Χv ∆v q≤²°³¤µ¨§º¬·«·µ¤§¬·¬²±¤¯ ¬¨·µ¤¦·¬²±o∏¯·µ¤¦·¬²± ° ·¨«²§¬¶·¬° ¶¨¤√2
¬±ªo¶¬°³¯¨·²²³¨µ¤·¨o¶·¤¥¯¨¤±§±¨ §¨±²·¥¨ «¨ ¤·¨§q
[ Κεψ ωορδσ] Χηρψσαντηεµυµ µοριφολιυµ ~©¯¤√²±²¬§¶~∏¯·µ¤¶²±¬¦ ¬¨·µ¤¦·¬²±~²µ·«²ª²±¤¯ ·¨¶·
≈责任编辑 袁桂京 
银翘挥发油rΒ2环糊精包合常数的测定研究
马坤芳t o任 勇u 3 o王 宣v o冒 麟v
kt q中国药科大学 新药研究中心 o江苏 南京 utsss| ~
u q南京师范大学 新药研究中心 o江苏 南京 utss|z ~
v q湖北民康药业公司 o湖北 宜昌 wwvssu l
≈摘要  目的 }测定中药多组分rΒ2环糊精的包合常数 ∀方法 }在多波长下探测银翘挥发油包合作用的紫外光
谱特征 o以经验公式处理紫外吸收2浓度关系 o测定其包合常数 ~以相溶解度曲线验证包合比 ~以饱和水溶液法制备
包合物 o差热法进行包合物鉴定 ∀结果 }紫外测定条件下 o银翘挥发油rΒ2环糊精包合反应能够在多波长处显示良好
的线形特征 o包合比为 tΒt ∀结论 }采用多波长法可测定中药多组分表观包合常数 o该方法可作为中药包合物的定
量研究方法之一 ∀
≈关键词  环糊精 ~紫外光谱法 ~包合常数 ~相溶解度曲线 ~差热扫描图谱
≈中图分类号  • u{v qy ~• u{w qt ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswls{2szv|2sw
随着环糊精k≤⁄l包合技术在药学领域中的应
用 o包合常数k Καl的测定显得尤为重要 ≈t  ∀但是 o
目前 ≤⁄在中药方面的研究大多关注于包合物制备
等方面 o关于 Κα值测定的研究仅有中药单体 Κα测
定的报道 ≈u2w  ∀由于中药成分复杂 o难以确定各组
≈收稿日期  ussv2sx2us
≈通讯作者  3 任勇 oר¯ }ksuxl{vx|{|u{ o∞2°¤¬¯}ussuµ¨¼²±ªƒ
tyv q¦²°
分及其浓度 o中药多组分的 Κα值测定目前未见文
献报道 ∀为探讨中药多组分包合的定量研究方法 o
作者对银翘挥发油rΒ2≤⁄的 Κα值测定进行了探索 ∀
银翘挥发油为薄荷 !荆芥和连翘 v种药材挥发油的
混合物 o是银翘伤风胶囊 !银翘片等中成药的有效成
分 o目前文献报道约有 uvs多种单体≈x2tt  ∀本实验采
用紫外光谱k˜∂l法在多波长下测定 Κα值 o得出有
意义的结果 o以尝试为中药多组分包合物的研究提
供定量方法和依据 ∀
#|vz#
第 u|卷第 {期
ussw年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ {
„∏ª∏¶·oussw
1 实验部分
1 q1 仪器与试剂
∞¬³¯²µ¨µ电子分析天平k’«¤∏¶≤²µ³²µ¤·¬²± ˜≥„l o
˜∂ p uwxs型紫外可见分光光度计k日本岛津公司l o
≤⁄• p w°型差动热分析仪k上海精密仪器有限公
司l o¬¯¯¬³²µ¨ 切向流超滤系统k美国密理博公司l o
超级恒温器k上海实验仪器有限公司l oŽ± p uxs⁄…
型数控超声波清洗器k昆山市超声仪器有限公司l o
• ƒ{ssp ⁄v…型紫外r可见分光光度计k北京瑞利
分析仪器公司l o≥‹„ p ≤ 恒温振荡器k常州国华电
器有限公司l ~Β2≤⁄k中国医药集团上海试剂公司 o经
纯化处理 l o连翘 !荆芥 !薄荷挥发油k湖北民康药业
公司l o纯净水k上海正广和饮用水有限公司l o标准
³‹缓冲剂2混合磷酸盐k上海雷磁创益仪器仪表有
限公司l ∀
1 q2 q1 测定原理及实验方法
Κα€ [ Χ∆ p Γ] / ([ Χ∆] s p [ Χ∆ p Γ] ) ([ Γ] s p [ Χ∆ p Γ] ) (t)
其中 ,[ Χ∆] s和[ Γ] s分别为主体分子( Χ∆)和客
体分子( Γ)的起始浓度 ,[ Χ∆ p Γ] 则为平衡时形成
的包合物浓度 ∀在主体分子大大过量的情况下 ,
[ Χ∆] s p [ Χ∆ p Γ] Υ [ Χ∆] s ,
(t)式可简化为 :
Κα€ [ Χ∆ p Γ] / [ Χ∆] s([ Γ] s p [ Χ∆ p Γ] ) (u)
包合物的形成在吸收光谱上反映为吸光度的变
化 ,即[ Χ∆ p Γ] 正比于 ϖ Α∀假设所有的客体分子
都形成包合物时吸光度的变化为 ϖ Αµαξ ,则
[ Χ∆ p Γ] € ( ϖ Α/ ϖ Αµαξ)[ Γ] s ,
代入(u)式则有
Κα€ ( ϖ Α/ ϖ Αµαξ)[ Γ] s/ [ Χ∆] s([ Γ] s p ( ϖ Α/ ϖ Αµαξ)[ Γ] s)
即得 :
t/ ϖ Α€ t/ ( ϖ ΑµαξΚα[ Χ∆] s) n t/ ϖ Αµαξ (v)
以(t/ ϖ Α)对 (t/ [ Χ∆] s) 作图 ,即可由截距和
斜率得到 Κα值[ t] ∀
另外 ,除以(v)式计算外 ,还可用另一方法求 Κα
值 ,由实验条件 [ Χ∆] s   [ Γ] s ,可有 [ Χ∆] Υ
[ Χ∆] s ,则有
[ Χ∆ p Γ] € Κα[ Χ∆] s[ Γ] s/ (t n Κα[ Χ∆] s) (w)
因为溶液的吸光度是体系各组分吸光度的总
和 ,以 ΕΧ∆ , ΕΓ , ΕΧ∆ p Γ分别代表 Χ∆ , Γ及 Χ∆ p Γ的摩
尔吸光系数 ,所以
Α€ ΕΧ∆[ Χ∆] n ΕΓ[ Γ] n ΕΧ∆ p Γ[ Χ∆ p Γ]
€ ΕΧ∆([ Χ∆] s p [ Χ∆ p Γ] ) n ΕΓ([ Γ] s p [ Χ∆ p
Γ] ) n ΕΧ∆ p Γ[ Χ∆ p Γ]
€ ΕΧ∆[ Χ∆] s n ΕΓ[ Γ] s n (ΕΧ∆ p Γ p ΕΧ∆ p ΕΓ)[ Χ∆
p Γ] (x)
将之变形为 :
( Αp ΕΧ∆[ Χ∆] s p ΕΓ[ Γ] s)/ (ΕΧ∆ p Γ p ΕΧ∆ p ΕΓ) € [ Χ∆ p
Γ] (y)
设 ϖ Α€ Αp ΕΧ∆[ Χ∆] s p ΕΓ[ Γ] s ,
ϖ Ε€ ΕΧ∆ p Γ p ΕΧ∆ p ΕΓ ,则(y)式变为 :
[ Χ∆ p Γ] € ϖ Α/ ϖ Ε (z)
将(z)带入(w)得 :
ϖ Α/ ϖ Ε€ Κα[ Χ∆] s[ Γ] s/ (t n Κα[ Χ∆] s)
变形为 : ϖ Α€ p (t/ Κα)( ϖ Α/ [ Χ∆] s) n ϖ Ε[ Γ] s ({)
由({)以 ϖ Α对 ϖ Α/ [ Χ∆] s 作图得一直线 ,由
直线斜率也可求 Κα值[ tu] ∀
1 q2 q2 包合常数的测定 将银翘挥发油作全波长
扫描k见图 t的 ¤曲线l o选合适的波长作为测定波
长 ∀配制 ³‹ € y q{{kux ε l的混合磷酸盐缓冲溶液 !
银翘挥发油溶液及 Β2≤⁄溶液 ∀uv qx ε 时测定不同
Β2≤⁄浓度在选定波长下的 ˜∂ 吸光度 Α值 o分别用
方程kvl和k{l求算 Κα值 ∀
1 q2 q3 银翘挥发油rΒ2≤⁄相溶解度曲线的绘制
参照文献≈v ow otv2ty 方法 o先测得银翘挥发油溶解
度标准曲线 Χ€ s .sst xΑp z ≅ tsp x , ρu € s q||| v o
精密配制ks ∗ t qvxl °°²¯#pt的 Β2≤⁄溶液 o依次加
入充分过量的银翘挥发油 o于 vz ε 恒温振荡器中平
衡 v §o于最大吸收波长 uxs ±°处测 Α值 o由标准曲
线得溶解度 o绘制银翘挥发油rΒ2≤⁄的相溶解度曲
线 ∀
1 q2 q4 包合物的制备 用饱和水溶液法 o将银翘
挥发油与 Β2≤⁄以 tΒ{k ςΒ µl的比例投料 o在 vz ε
的恒温振荡器中反应 uw «o然后 w ε 冰箱中放置 uw
«o抽滤 o先后用石油醚 !纯水洗涤多次 ows ε 干燥得
白色粉末≈tz2t|  ∀
1 q2 q5 包合物的物相鉴定 取 Β2≤⁄!银翘挥发油
与 Β2≤⁄的物理混合物 !银翘挥发油rΒ2≤⁄的包合物
v种样品进行差示扫描量热分析≈us out  }以 „¯ u’v 为
参比 o准确称取 x qs °ª样品 o量程为 ? ux Λ∂ o升温
范围为 us ∗ vzs ε o升温速率为 tu ε # °¬±pt o作
⁄ׄ图谱 ∀
2 结果及讨论
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第 u|卷第 {期
ussw年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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„∏ª∏¶·oussw
2 q1 包合常数的测定 一般而言 o在不同 ≤⁄浓度
下 o单体包合物通常在特征波长处呈现上述公式所
示的 ≤⁄浓度与吸光度之间的线型关系 o且各波长
的 Ž¤值互相较为接近 ∀本实验结果表明 o银翘挥发
油在多个选定波长显示规律性 ˜∂ 吸收k Α值l o本
实验用方程kvl和k{l分别计算 !作图 o各波长处均得
很好的线性关系 o证明多组分银翘挥发油与 Β2≤⁄形
成了包合物 o且包合比为 tΒt ∀中药多组分的性质
是各组分化合物性质的综合 o不同波长的吸收综合
体现着不同成分的特征 o因此测得的包合常数是表
观包合常数 ∀本实验 Ž¤值的测定为中药多组分的
包合提供了定量研究的依据 o可预测包合物稳定性
及探讨包合工艺 ∀
uv qx ε ³‹ € y q{{时银翘挥发油rΒ2≤⁄的 ˜∂
扫描图谱见图 t o在多波长下采用不同经验公式处
理的数据见表 t ∀本实验在各选定波长处得到的 Κα
值不同 o说明在溶液中同时存在多组分包合平衡 ∀
本实验用 u个方程均能求得 Κα值 o方程kvl推导中
简化了许多影响因素如原料 Β2≤⁄的吸收等 o易获得
线形关系好的结果 ~方程k{l考虑到 Α € ΑΧ∆ p Γ n
ΑΧ∆ n ΑΓ的情况 o较方程kvl 更接近实际也更严格 o
试验操作要求高 o原料的吸收较难排除时 o用方程
k{l较为合适 o但应注意方程k{l的应用有一定要求 }
一般是 [ Χ∆] s   [ Γ] s o且仅适用于包合比为 tΒt
的情况 ∀
图 t 扫描图谱
¤q银翘挥发油 ~
¥∗ ©q逐渐增大 Β2≤⁄浓度的银翘挥发油rΒ2≤⁄
2 q2 绘制的相溶解度曲线为 „型 o见图 u o证明形
成了包合比为 tΒt的包合物 o且 Β2≤⁄对银翘挥发油
有增溶作用 ∀
图 u 银翘挥发油rΒ2≤⁄相溶解度曲线
表 t 不同波长下采用不同方程式处理所得 Κα值
波长r±° 方程kvl 方程k{l
uwx Ψ€ s .suu t Ξ n t .xvs x Ψ€ p s .stz t Ξ n s .zx| w
ρu € s .||| y ρu € s .|wv z
Κα € y| .v Κα € x{ .x
uxs Ψ€ s .suv t Ξ n t .vzz t Ψ€ p s .st| u Ξ n s .{t| |
ρu € s .||| | ρu € s .|z{ s
Κα € x| .v Κα € xu .t
vss Ψ€ s .suw z Ξ n v .{{v z Ψ€ p s .ssz t Ξ n s .u{s t
ρu € s .||| w ρu € s .|vv x
Κα € txz Κα € twt
vwx Ψ€ s .sw|z Ξ n v .wuv | Ψ€ p s .sty x Ξ n s .vuz {
ρu € s .||| z ρu € s .|ys s
Κα € y{ .| Κα € yt
注 :令方程(v)中 Ψ € t/ ϖ Α, Ξ € t/ [ Χ∆] s ,令方程({)中 Ψ €
ϖ Α, Ξ € ϖ Α/ [ Χ∆] s
2 q3 差示热分析 ⁄ׄ图谱见图 v o包合物曲线在
u|s ε 附近出现一个放热峰 o而 Β2≤⁄与物理混合物
曲线均无此峰 o包合物 tss ε 以下的脱水峰呈现为
u个小峰 o且有放热峰出现 o也明显不同于 Β2≤⁄与
物理混合物的曲线k这 u个曲线基本相似l o由此推
测包合物确已形成 ∀
图 v 银翘挥发油rΒ2≤⁄ ⁄ׄ图谱
¤qΒ2≤⁄~¥qΒ2≤⁄与银翘挥发油物理混合物 ~
¦qΒ2≤⁄r银翘挥发油包合物
≈参考文献 
≈t  任 勇 o陈文华 q药物2环糊精超分子体系研究进展 q药学前
沿 q北京 }中国医药科技出版社 ousst qwy q
≈u  雍国平 o李光水 o刘少民 o等 qΒ2环糊精及羟丙基 Β2环糊精与香
兰素包合作用的光谱学研究 q化学研究与应用 oussu otwkxl }
xw| q
≈v  王茹林 o杨 郁 o双少敏 o等 qΒ2环糊精衍生物对黄酮类药物的
#twz#
第 u|卷第 {期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ {
„∏ª∏¶·oussw
增溶作用 q应用化学 oussu ot|kzl }zsu q
≈w  李向军 o双少敏 o潘景浩 o等 q相溶解度法研究芦荟大黄素和环
糊精及其衍生物的包结作用 q分析科学学报 ot||| otxkxl }vy{ q
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Ινστρυµ , t|yx ow }ttz q
≈tz  潘 琦 o何兰茜 o余勋荣 qΒ2≤⁄包结银翘解毒颗粒剂中挥发油的
实验研究 q云南中医学院学报 ot||| ouukwl }tx q
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高等学校化学学报 ot||{ ot|kzl }ttst q
≈ut 王晓平 o廖工铁 o侯世祥 q蟾酥冰片 Β2环糊精包合物的制备与鉴
定 q华西药学杂志 ot||u ozkvl }tv{ q
∆ετερµινατιον οφ χονσταντ φορ τηεινχλυσιον χοµ πλεξ
οφ Ψινθιαο ϖολατιλε οιλ ωιτη Β2χψχλοδεξτριν
„ Ž∏±2©¤±ªt o • ∞‘≠²±ªu o • „‘Š ÷∏¤±v o  „’ ¬±v
( t . Χεντερ οφ ∆ρυγ ∆ισχοϖερψ , Χηινα Πηαρµαχευτιχαλ Υνιϖερσιτψ, Νανϕινγ utsss| , Χηινα ;
u . Χεντερ οφ ∆ρυγ ∆ισχοϖερψ , Νανϕινγ Νορµαλ Υνιϖερσιτψ, Νανϕινγ utss|z , Χηινα ;
v . Ηυβει Μινκανγ Πηαρµαχευτιχαλ Χοµπανψ, Ψιχηανγ wwvssu , Χηινα )
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ §¨·¨µ°¬±¨ ·«¨ ¦²±¶·¤±·©²µ·«¨ ¬±¦¯∏¶¬²± ¦²°³¯ ¬¨²© ≠¬±´ ¬¤²√²¯¤·¬¯¨ ²¬¯ º¬·«Β2¦¼¦¯²§¨¬·µ¬±q Μετηοδ : ׫¨
¶·¤¥¬¯¬·¼ ¦²±¶·¤±·©²µ·«¨ ¬±¦¯∏¶¬²± ¦²°³¯ ¬¨ ²© ≠¬±´ ¬¤²·«¨ √²¯¤·¬¯¨ ²¬¯ º¬·« Β2¦¼¦¯²§¨¬·µ¬± º¤¶§¨·¨°¬±¨ §∏±§¨µ°∏¯·¬º¤√¨¯ ±¨ª·«¥¼ ∏¯·µ¤√¬²¯ ·¨
¶³¨¦·µ²¶¦²³¼o¤±§¶³¨¦·µ²¶¦²³¼ ©¨¤·∏µ¨ ©²µ¬±¦¯∏¶¬²± ¦²°³¯ ¬¨ º¤¶¶·∏§¬¨§q׫¨ ³«¤¶¨ ¶²¯∏¥¬¯¬·¼2¦∏µ√¨¶«²º §¨·«¨ ¬±¦¯∏¶¬²± ³µ²³²µ·¬²±q׫¨ ¬±2
¦¯∏¶¬²± ¦²°³¯ ¬¨ ²© ≠¬±´ ¬¤²·«¨ √²¯¤·¬¯¨ ²¬¯ º¬·«Β2¦¼¦¯²§¨¬·µ¬± º¤¶³µ¨³¤µ¨§¥¼ ¶¤·∏µ¤·¨§¤´ ∏¨²∏¶¶²¯∏·¬²±q׫¨ ⁄ׄ ¶³¨¦·µ²¶¦²³¼ ²©¬±¦¯∏¶¬²±
¦²°³¯ ¬¨ º¤¶§¬©©¨µ¨±·©µ²° ±²·²±¯¼ ²¬¯ º¬·«Β2¦¼¦¯²§¨¬·µ¬± ¥∏·¤¯¶²·«¨ °¬¬·∏µ¨ ²©·«¨ ° qΡεσυλτ : ׫¨ ¬±¦¯∏¶¬²± ¦²°³¯ ¬¨²© ≠¬±´ ¬¤²·«¨ √²¯¤·¬¯¨
²¬¯ º¬·«Β2¦¼¦¯²§¨¬·µ¬± º¤¶©²µ° §¨q׫¨ ¬¨³¨µ¬° ±¨·¤¯ §¤·¤²©¬±¦¯∏¶¬²± ¦²°³¯ ¬¨©¬·¨§º¨¯¯·²·«¨ °²¯¤µµ¤·¬²²©tΒt q׫¨ µ¨ º¤¶ª²²§ ¬¯±¨ µ©¨ ¤2
·∏µ¨ ∏±§¨µ°∏¯·¬º¤√¨¯ ±¨ª·«²© ∏¯·µ¤√¬²¯ ·¨¶³¨¦·µ²¶¦²³¼q Χονχλυσιον : „§²³·¬±ª °∏¯·¬º¤√¨¯ ±¨ª·« ° ·¨«²§ °¤¼ §¨·¨µ°¬±¨ ·«¨ ¤³³¨ ¤µ¤±·¶·¤¥¬¯¬·¼
¦²±¶·¤±·²© °∏¯·¬¦²°³²±¨ ±·¬¤¯ ·µ¤§¬·¬²±¤¯ §µ∏ªq׫¨ §¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©·«¨ ¶·¤¥¬¯¬·¼ ¦²±¶·¤±·²©·«¨ ¬±¦¯∏¶¬²± ¦²°³¯ ¬¨ ¦¤± ¥¨ ∏¶¨§¬±·µ¤§¬·¬²±¤¯
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[ Κεψ ωορδσ] ¦¼¦¯²§¨¬·µ¬±¶~ ∏¯·µ¤√¬²¯ ·¨¶³¨¦·µ²¶¦²³¼~¦²±¶·¤±·²©·«¨ ¬±¦¯∏¶¬²± ¦²°³¯ ¬¨~ ³«¤¶¨ ¶²¯∏¥¬¯¬·¼2¦∏µ√¨~ ⁄ׄ ·«¨µ°²ªµ¤°¶
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≈责任编辑 袁桂京 
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第 u|卷第 {期
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