全 文 :学#精神病学分册 oussu ouzkvl }tw{ q
≈tw 梁巧丽 o高宏成 q金丝桃素的研究进展 q中草药 ot||| ovsk|l
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≈tx 郑 莉 o刘国卿 q贯叶连翘提取物对单胺氧化酶与单胺递质
的影响 q中国药科大学学报 oussu ovvkul }tv{ q
Εξπεριµενταλστυδψ οφ τηετοταλφλαϖονοιδ ιν Ηψπεριχυµ περφορατυµ ον δεπρεσσιον
÷ ¬t o • ∞ ≤∏¬2 t¨ o ¬±ª2¥²u o • ¬¤±2±²±ªt o× °¨ ±ª2©¨¬u o ¬¤±2¬∏±t
(t1 Ρεσεαρχη Χεντερ οφ Ξιψυαν Ηοσπιταλ, Χηινα Αχαδεµψ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsss|t , Χηινα ;
u1 ∆επτ οφ Νατυραλ Μεδιχινεσ , Σχηοολ οφ Πηαρµαχευτιχαλ Σχιενχεσ , Πεκινγ Υνιϖερσιτψ, Βειϕινγ tsss{v , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨ ³«¤µ°¤¦²¯²ª¬¦¤¯ ©¨©¨¦·¶²©·«¨ ·²·¤¯ ©¯¤√²±²¬§¬± Ηψπεριχυµ περφορατυµ ²± §¨³µ¨¶¶¬²±q Μετηοδ :
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©¯¤√²±²¬§¬± Η1 περφορατυµ ²±·«¨ §¨³µ¨¶¶¬²±q Ρεσυλτ : ׫¨ ·²·¤¯ ©¯¤√²±²¬§¬± Η1 περφορατυµ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ §¨¦µ¨¤¶¨§·«¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²© o¬±2
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[ Κεψ ωορδσ] Ηψπεριχυµ περφορατυµ ~©¯¤√²±²¬§~§¨³µ¨¶¶¬²±~±¨ ∏µ²·µ¤±¶°¬·¨µ~°²±²¤°¬±¨ ²¬¬§¤¶¨ ≈责任编辑 古云侠
≈收稿日期 ussw2s{2vt
≈通讯作者 3郭兰萍 oר¯ }kszx|luv{zwtv o∞2°¤¬¯}¤±±³¨ ¤µ¯ttt ¼¤«²²q¦²°
丹参注射液对实验性兔肺气肿阻抑作用的研究
郭兰萍 3 o王志刚 o梁 标 o吴 斌 o周爱莲 o彭 勃
k广东医学院 附属医院 o广东 湛江 xuwsstl
≈摘要 目的 }探讨丹参注射液局部用药对实验性兔肺气肿的阻抑作用 ∀方法 }vy只兔随机分为肺气肿模型
对照组k ν tul !Αt2抗胰蛋白酶kΑt2×l治疗组k ν tul !丹参治疗组k ν tul ∀胰蛋白酶气管内滴注建立兔肺气肿
模型 o治疗组第 tw天起气管内滴注药物 o每周 t次 o连用 w周 ∀检测各用药前不同时期静脉血及肺泡灌洗液k
ƒl
中 Αt2×含量 o观察各组不同时间肺组织形态学变化 !检测肺泡平均内衬间隔值k∂l及单位面积肺泡数k°≥l ∀
结果 }各组肺泡灌洗液中 Αt2×水平于第 u周前无统计学差异k Π s1sxl o第 v ow ox oy o{周肺气肿组 Αt2×水平较 Αt2
×治疗组及丹参组明显下降k Π s1stl ∀血液中 Αt2× 水平同一时期各组无统计学差异k Π s1sxl o不同时期 Αt2
×水平有显著差异k Π s1stl ∀第 y o{周肺气肿组肺气肿形态学形成 o肺泡内衬间隔值及单位面积肺泡数与 Αt2×
治疗组及丹参治疗组均有显著差异k Π s1stl ∀丹参及 Αt2×治疗组形态学统计无差异k Π s1sxl ∀结论 }丹参在
兔肺气肿形成中气管内滴注可增加局部肺组织 Αt2× 的浓度 ~丹参及 Αt2× 早期局部应用均可阻抑实验性肺气肿
的形成 o两者无统计学差异 ∀
≈关键词 肺气肿 ~丹参注射液 ~胰蛋白酶 ~Αt2抗胰蛋白酶
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第 vs卷第 tx期
ussx年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs o¶¶∏¨ tx
∏ª∏¶·oussx
≈中图分类号 u{x1x ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussxltx2tt{{2sw
以往认为肺气肿是由于肺泡进行性破坏导致的
肺组织不可逆性的损伤 o近年研究表明 o如果能早期
合理给与药物治疗可能阻抑肺气肿的病理变化 o研
究证实有药物可逆转啮齿类动物肺气肿解剖及功能
改变≈t2v ∀丹参注射液提取于丹参 o其主要成分为丹
参酮 ∀本研究旨在探讨丹参注射液局部应用对胰蛋
白酶诱发的实验性肺气肿的阻抑作用 o对比丹参及
Αt2抗胰蛋白酶kΑt2×l对胰蛋白酶诱发的实验性肺
气肿的疗效 o为临床拓宽慢性阻塞性肺疾病防治途
径提供实验基础 ∀
1 材料
111 动物与分组 雄性纯白普通级兔 vy只 o体重
ku1w ? s1vl ®ªo购自海军 wuu医院动物实验中心 o动
物合格证书编号 }≥≠≥ussv2ssts ∀随机分为 v组 }
肺气肿组 o丹参治疗组 oΑt2×治疗组 o每组 tu只 ∀
112 药品及试剂 丹参注射液k广东永康药业股份
有限公司 o批号 zsvsx{l ~胰蛋白酶k上海伯奥生物科
技有限公司 o批号 |ytstyl ~Αt2抗胰蛋白酶 o美国 ≥¬ª2
°¤公司l ~Αt2× 血浆蛋白参考血清及抗血清k上海
上升生物制品公司 o批号 |wsystl ~抗血清稀释液
k³ z1u os1t °²¯#pt·µ¬¶碱液 o自备l ∀
113 仪器 电子显微镜k日本l ~光学显微镜及电
子图像分析仪k日本l ~wxs型酶标仪k日本l ~样品微
量振荡器k上海沪西仪器厂l ∀
2 方法
211 肺气肿模型建立及用药组治疗方法 所有动
物均以 v h苯巴比妥麻醉后气管内一次性滴注胰蛋
白酶 u sss #®ªpt制作肺气肿模型≈w ∀实验第 tw o
ut ou{ ovx天肺气肿组气管内分别滴注生理盐水 u
°o丹参治疗组气管内滴注丹参注射液 u ª#®ªpt o
Αt2×治疗组气管内滴注 Αt2× s1x °ª#®ªpt ∀
212 组织标本制作及观察 第 {周解剖兔后 o沿
肺门取左上叶 !右中叶肺组织 o同时取右上叶边缘肺
组织 o部分为 ts h福尔马林固定 !石蜡包埋 !切片 o
∞染色 o光学观察 o测量肺泡平均内衬间隔值kΛ°l
及单位面积kux ≅ tsw Λ°ul肺泡数 ∀电镜标本以 u h
戊二醛固定 !醋酸双氧铀染色 o观察其超微结构的变
化 ∀
213 Αt2× 水平的检测 实验前取静脉血k抗凝血 t
°l o血标本于 p w ε ox sssµ#°¬±pt离心 ts °¬±o分离
血清贮于 p us ε 冰箱待测 ∀肺泡灌洗液k
ƒl收集
后 vs °¬±内 w ε 低速kvss µ#°¬±ptl离心 x °¬±o分离
上清液与细胞 ∀血清 Αt2× 检测采用免疫微量比浊
法 }取 Αt2× 抗血清 t °o以抗血清稀释液稀释 {倍 o
取 Αt2× 血浆蛋白参考血清 t °以蒸馏水 t °稀释
至含量为 t1uwx ª#pt配置稀释 w倍 !u倍的参考血清
k加蒸馏水稀释l∀于 |y孔板加入 uss Λ抗血清稀释
液 o空白孔内不加参考血清 o依次各孔分别加入稀释w
倍 !稀释 u倍 !原液 !u倍 !w倍及 y倍的参考血清各 u
Λ每份 u孔 ∀测定孔内加入待测血清 u Λ每份样本
u份 ∀加毕样品将测量板置于微型振荡器上振荡 x
°¬±o使样品充分混匀 o消除测量孔内气泡 o将测量板
放入 wxs型酶标仪内将波长调制 wsx ±°o测定其 Α
值 o制作标准曲线 o根据标准曲线求出待测血清 Αt2×
值 ∀
ƒ中 Αt2× 值测量方法同血清 ∀
ƒ内 Αt2
× 含量较低 o配置稀释参考血清 yw ovu oty o{ ow ou倍 ∀
取上清液每孔分别为 uss Λ∀测试步骤同血清 ∀
214 统计学分析 实验数据以 cξ ? σ表示 o显著性
检验采用 ≥°≥≥ ts1s统计软件包 o对多组数据样本均
数之间采用方差分析 θ检验 ∀
3 结果
311 各组不同时期血清 Αt2×及肺泡灌洗液 Αt2×
检测结果 检测各组用药前 !后不同时期血清及
ƒ中 Αt2× 水平k见表 t oul o结果表明同一时期
各组血 Αt2× 水平无显著差异 o不同时期血清 Αt2×
水平有显著差异 o其中 Αt2×第 z天升至最高 o第 ut
天 Αt2×值降至最低 o后渐恢复正常 o最低值及最高
值与实验前正常值比较均有显著差异 ∀
ƒ中 Αt2
×水平肺气肿组明显下降 o最低值为第 ut天 ∀治
疗组之间 Αt2×无统计学差异 ∀治疗组
ƒ中 Αt2
×值第 tw天最低 o第 u{天最高 ∀
312 肺组织形态学变化 分别于第 tw owu oxy天观
察各组肺组织显微及超微结构形态及胶原蛋白的变
化k见图 tl o同时检测肺泡平均内衬间隔值k °¨ ¤±
¬¯±¨ ¤µ¬±·¨µ¦¨³·√¤¯∏¨ o∂ l及单位面积肺泡数k·«¨
±∏°¥¨µ¶²©¤¯√¨ ²¯¬³¨µ¶´∏¤µ¨ o°≥lk见表 vl ∀结果表
明丹参及 Αt2× 治疗组治疗后第 wu天肺组织结构
正常 o无肺泡腔的扩大及明显损伤 o而肺气肿组第
wu天见典型的肺气肿改变 ∀电镜下第 xy天丹参组
肺泡壁可见丰富的基质 o肺气肿组肺泡壁基质显著
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第 vs卷第 tx期
ussx年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 t v组兔不同时期血清 Αt2×水平kcξ ? σ, ν tul
组别
剂量
r°ª#®ªpt
Αt2×r°ª#°pt
t § z § tw § ut § u{ § vx § xy §
肺气肿组 p t qxt ? s qsv u qxz ? s qsttl t qtz ? s qsw s qyv ? s qsuul s q|w ? s qss t qyw ? s qsw t q{{ ? s qst
丹参组 u sss t qyu ? s qsw u qs| ? s qsvtl t qvt ? s qsu s q{s ? s qswul t qut ? s qst t qyy ? s qst u qus n s qsvtl
Αt2×组 s qx t qw| ? s qsu u qvv ? s qsutl t qyx ? s qsu s qzz ? s qstul t qt| ? s qsw t qzt ? s qsw u qss ? s qsvtl
注 }同用药前比tl Π s1sx oul Π s1st
表 u v组兔不同时期
ƒ中 Αt2×水平kcξ ? σ, ν tul
组别
剂量
r°ª#®ªpt
Αt2×r°ª#pt
t § tw § ut § u{ § vx § xy §
肺气肿组 p u qts ? s qsv t qyt ? s qst s quv ? s qss s qwz ? s qst t qsu ? s qsw t q{{ ? s qsy
丹参组 u sss u qvt ? s qsx t qv{ ? s qsv u qsz ? s qswul v qst ? s qstul u q|t ? s qsvul u qtt ? s qss
Αt2×组 s qx t q|z ? s qsv t qxt ? s qst v qst ? s qsuu otl w qsz ? s qsuu otl u q{{ ? s qswul u qss ? s qst
注 }与丹参治疗组比tl Π s1sx ~与肺气肿组比ul Π s1stk表 v同l
下降k见图 t2 o
l ∀观察显示肺气肿组用胰蛋白酶
后第 t周 o胶原蛋白明显下降 o肺泡壁呈现多处散在
分布的泡沫样变化 o但第 xy天胶原蛋白明显较第 t
周增加 o而泡沫样改变明显减少 k见图 t2≤ o⁄l ∀
∂ 及 °≥治疗组与肺气肿组在第 wu oxy天有显
著统计学差异k见表 vl ∀
表 v v组兔肺组织中平均 ∂ 及 °≥检测值kcξ ? σ, ν tul
组别
剂量
r°ª#®ªpt
∂rΛ° °≥r ≅ tsw Λ°u
tw § wu § xy § tw § wu § xy §
肺气肿组 p ys quv ? tu quv |w qtu ? ut qwt tts ? uy wx q{s ? { qzy u{ q{z ? ts qtt tu qx ? v qy
丹参组 u sss xy qtv ? uu quv yz q{s ? tu qwxul xy ? tuul wz qtt ? ts qvv w{ qss ? tt qstul xv qu ? | q{zul
Αt2×组 s qx yv qwx ? tz quv ys quu ? ty qvzul yu ? { qsul w{ qsz ? y q{{ xw q{v ? tx qu{ul xs qu ? z q{tul
图 t 各组不同时间肺组织超微结构
形态及胶原蛋白的变化
1 第 {周丹参治疗组见肺泡壁有丰富的基质k ≅ t万l ~
1 第 y
周肺气肿对照组见肺泡壁基质明显减少k ≅ v sssl ~≤1 肺气肿组
第 t周见肺泡壁基质胶原蛋白显著减少同时见泡沫样变化散在
分布k ≅ w万l ~⁄1 肺气肿组第 {周胶原蛋白明显增加 o泡沫样变
化明显下降k ≅ w万l
4 讨论
目前研究证实由遗传 !炎症细胞及炎性介质所
致的内源性蛋白酶及抗蛋白酶系统失衡是导致肺气
肿形成的主要发病机制≈x oy ∀本研究证明胰蛋白酶
诱发的兔实验性肺气肿在气管内滴注胰蛋白酶后 y
周形成 o表现为肺泡腔扩张 !融合 o肺泡壁断裂 !显著
变薄 o远端见终末细支气管炎症 !管壁破坏 !呼吸性
细支气管囊状扩张 o平均 ∂ 几乎为正常组 u倍 o
°≥显著下降 ∀同期丹参及 Αt2× u 个治疗组
∂ o°≥正常 o肺组织切片表明丹参或 Αt2× 可
以抑制胰蛋白酶诱发的实验性肺气肿 o两者之间无
差异 ∀本实验结果提示丹参或 Αt2×在肺组织局部
用药显著影响肺组织局部 Αt2×水平 o对血清 Αt2×
无影响 o表明肺组织局部 Αt2×水平较血清 Αt2×对
阻抑肺气肿的作用更为重要 ∀国外有实验≈z 证实反
式维甲酸也可阻抑胰蛋白酶诱发的肺气肿 o先天 Αt2
×遗传缺陷中度肺气肿患者静注 Αt2× 较对照组
静注白蛋白者 ≤×观察肺组织损伤减轻 ∀目前针对
肺气肿形成的机理研究表明 o除先天性 Αt2× 缺乏
导致肺气肿形成外 o炎症反应是肺气肿形成的重要
原因≈{2ts o研究≈tt otu 证实中性粒细胞 !肺泡巨噬细
胞 !淋巴细胞均参与了这一系列的炎症过程 ∀丹参
是一种传统的广泛用于临床呼吸系统疾病的安全 !
价廉 !不良反应小的中草药≈tv o其阻抑肺气肿的作
用机制尚不完全清楚 ∀国内研究≈tx 发现丹参具有
抑制肿瘤坏死因子k׃l !2t分泌及肺泡巨噬细
胞异常激活的功能 o同时对肺泡巨噬细胞分泌细胞
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第 vs卷第 tx期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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因子具有调节作用 o而肺泡巨噬细胞在肺气肿肺泡
隔损伤发病机制中起重要作用 o对慢性肺组织损伤
尤其重要≈tx oty o研究≈tz 发现丹参明显增加外周血中
性粒细胞和单核细胞超氧化物的产生 o对其化学趋
化有显著抑制作用 o同时能调整中性粒细胞氧化过
程k呼吸爆发l o参与化学趋化作用 o因此丹参抑制肺
气肿的形成除其可以改善肺组织局部 Αt2×水平达
到阻抑肺气肿形成外 o丹参对炎症细胞 !炎性介质 !
细胞因子的作用对阻抑肺气肿形成也起了重要作
用 o但详细作用机理有待进一步研究 ∀
≈参考文献
≈t ≥±¬§¨µ ⁄q∞°³«¼½¨ °¤}·«¨ ©¬µ¶··º²¦¨±·∏µ¬¨¶¤±§¥¨¼²±§q Αµ Ρεϖ
Ρεσπιρε ∆ισ , t||u otwy }tytx q
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·«¨ ±∏°¥¨µ²©³∏¯°²±¤µ¼ ¤¯√¨ ²¯¬¬±µ¤·¶q Αµ ϑ Πηψσιο ot||youzs}vsxq
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Ρεσπιρε Χριτ Χαρε Μεδ , t||| otys }twy{ q
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≈tv 李洁兰 o刘 航 q复方丹参注射液在肺心脑血管疾病中的研
究 q中医药研究 ousss otyktl }xz q
≈tw 卢 青 o孙中吉 q丹参对 ⁄≥大鼠肺损伤的治疗保护和对
肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的调节作用 q中国急救医学 o
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≈tz 王潮临 oµ¶¤¯¤± o ∂¬ªª² ƒ
q丹参对外周血中性粒细胞和
单核细胞的调整作用 q广西医科大学学报 ot||z otwkvl }| q
Εφφεχτ οφ ∆ανσεν ινϕεχτιον ον εξπεριµενταλ εµ πηψσεµα ιν ραββιτσ
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οφ Γυανδονγ Μεδιχαλ Χολλεγε , Ζηανϕιανγ xuwsst , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨¦·²© ⁄¤±¶¨±¬±¨¦·¬²± ²±·«¨ ¬¨³¨µ¬° ±¨·¤¯ °¨³«¼¶¨ °¤¬±µ¤¥¥¬·¶q Μετηοδ : ׫¬µ·¼2¶¬¬µ¤¥2
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第 vs卷第 tx期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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