全 文 ：注射用复方荭草k冻干粉针l指纹图谱研究
兰燕宇 o刘丽娜 o王永林 3 o李勇军 o黄 勇 o
何 迅 o郑 林 o王爱民
k贵阳医学院 药学院 o贵州 贵阳 xxssswl
≈摘要  目的 }采用 • °2‹°≤ 建立注射用复方荭草k冻干粉针l的指纹图谱检测标准 ∀方法 }用 Œ±¨ µ¶¬¯2’⁄≥2v色
谱柱 o乙腈2s1t h磷酸溶液梯度洗脱 ~流速 t1s °#°¬±2t ~检测波长 vss ±° ∀结果 }在相同色谱条件下获得药材 !中间
体和制剂的色谱图各色谱峰分离较好 o制剂与药材 !中间体的指纹图谱有良好的相关性 o达到指纹图谱的技术要
求 ∀结论 }指纹图谱 tz个共有峰的相对保留时间及峰面积比值 o可作为注射用复方荭草k冻干粉针l质量控制的重
要依据之一 ∀
≈关键词  注射用复方荭草k冻干粉针l ~荭草 ~高效液相色谱 ~指纹图谱
≈中图分类号  • u{v ~• u{w1t ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxlsy2swws2sv
≈收稿日期  ussw2sy2tu
≈基金项目  贵州省中药现代化科技产业研究开发专项基金项
目k黔科合中药专字≈ussw sv号l
≈通讯作者  3 王永林 oר¯ }ks{xtly|s{{|| o∞2°¤¬¯}ª¼º¼¯ ƒ °¦q
§¨¦q¦±
注射用复方荭草k冻干粉针l是在贵州民族用药
的基础上研制的中药新药 o已批准进入临床研究 ∀
本品以荭草为君药 o采用现代制备工艺研制而成 o具
有化瘀通络 o活血止痛功能 ∀临床用于冠心病心绞
痛心血瘀阻证 ∀化学成分主要含黄酮类和酚酸类化
合物≈t  o经药效学试验该类化合物为主要有效成分 ∀
根据注射剂指纹图谱的技术要求≈u  o采用 ‹°≤ 对
制剂的指纹图谱进行研究 o分别建立了药材 !中间体
和制剂的 ‹°≤ 指纹图谱检测标准 o以期对制剂的
质量控制提供有效的方法 ∀
1 材料 !仪器
注射用复方荭草k冻干粉针 o共 ts批 o贵阳医学
院药物研究所研制l ∀荭草 Πολψγονυµ οριενταλε 1≈v 
k贵州省惠水县 o{ ∗ |月采收 o贵阳医学院药物研究
所生药学研究室龙庆德副教授鉴定l ∀野黄芩苷对
照品k中国药品生物制品检定所 o供含量测定用 o批
号 {{s2usssstl ∀乙腈 !甲醇均为色谱纯 k美国
׌„⁄Œ∞l ~水为市售乐百事纯净水 ~乙醚 !正丁醇 !磷
酸等试剂均为分析纯 ∀
岛津≤ p ts„×√³泵 o岛津 ≥°⁄p ts„√³检测器 ~
×≤ p tss色谱柱恒温箱k天津特纳科技公司l ~威马
龙色谱工作站k广西南宁威玛龙色谱科技有限公
司l ∀贝克曼高效液相色谱黄金系统 o包括 tux泵 o
ty{阵列二极管检测器k波长 t|s ∗ yss ±°l o„¯ ·¯¨¦«
色谱柱恒温箱 ovu Ž¤µ¤·¨色谱工作站 ∀
2 方法及结果
211 色谱条件 Œ±¨µ¶¬¯ ’⁄≥2v色谱柱kw1y °° ≅ uxs
°°ox Λ°l∀流动相 „ s1th磷酸溶液 o… {sh乙腈 o梯
度洗脱 }s ∗ wx °¬±o…ktzh ∗ uzhl ~wx ∗ |s °¬±o…kuzh
∗ zshl~|s ∗ tss °¬±o… 保持 zsh ∀流速 t1s °#
°¬±pt ~柱温 vx ε ~检测波长 vss ±°~进样量 us ˏ∀
212 对照品溶液制备 精密称取野黄芩苷对照品
适量 o加甲醇制成每 t °含 s1tx °ª的溶液 o摇匀 o
即得 ∀
213 供试品溶液制备 取本品 ux °ªo置 ux °量瓶
中 o加水适量 o溶解 o用水稀释至刻度 o摇匀 o即得 ∀
214 精密度试验 取供试品溶液 o连续进样 x次 o
检测指纹图谱 ∀结果表明各共有峰的保留时间比值
和峰面积比值基本一致 o保留时间比值的 • ≥⁄均小
于 s1ww h ~峰面积比值的 • ≥⁄小于 s1y{ h o符合指
纹图谱技术要求 ∀
215 稳定性试验 取供试品溶液 o分别在 s ou ow o{ o
tu ouw «检测指纹图谱 o结果显示 o样品在 tu «内各
色谱峰的相对保留时间和峰面积比值的 • ≥⁄分别
小于 s1zw h和 t1{ h o符合指纹图谱技术要求 ∀
216 重复性试验 取同一批号的制剂 x份 o制备供
试品溶液 o分别进样 o检测指纹图谱 ∀结果表明各共
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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有峰的保留时间比值和峰面积比值基本一致 o保留
时间比值的 • ≥⁄小于 t1t h ~峰面积比值的 • ≥⁄小
于 s1zu h o符合指纹图的要求 ∀
217 样品测定 精密吸取参照物溶液 !制剂供试品
溶液各 us ˏo分别注入液相色谱仪 o测定 ∀记录 zs
°¬±色谱图 ots批制剂供试品溶液测定结果见图 t ∀
以野黄芩苷色谱峰k≥峰l的保留时间及峰面积为 t o
计算各指纹峰的峰面积比值及相对保留时间 o峰面
积比值见表 t o非共有峰面积百分比在 s1y h ∗
u1z h o共有峰的峰号 k相对保留时间l分别为 }t
ks1tuxl ouks1uswl ovks1v|sl owks1xxtl oxks1yswl oy
ks1yxtl ozks1zssl o{ks1zztl o|ks1{svl otsks1{uwl o

ttks1{yzl otu ks1|ssl otv ks1|ysl o≥ kt1sssl otw
kt1t{xl otxkt1vzyl otykt1zxtl ∀
图 t 注射用复方荭草k冻干粉针l‹°≤ 指纹图谱
表 t 制剂中单峰面积大于 ts h的峰面积比值
峰号 • ‹Š2ty • ‹Š2us • ‹Š2ut • ‹Š2ux • ‹Š2uy • ‹Š2uz • ‹Š2u{ • ‹Š2u| • ‹Š2vs • ‹Š2vt 平均值
w s1vtt s1vsx s1vst s1u|| s1vst s1vsz s1u{y s1u{w s1vss s1vss s1vss
x s1uxz s1uxu s1uxv s1uxt s1uyt s1ux| s1uvz s1uvy s1uxv s1u{v s1uxw
≥ t1sss t1sss t1sss t1sss t1sss t1sss t1sss t1sss t1sss t1sss t1sss
注 }• ‹Š为注射用复方荭草k冻干粉针l批号
3 讨论
311 共有指纹峰的标定 通过对 ts批制剂供试品
溶液的 ‹°≤的分析 o其中 tz个峰为各批供试品所
共有 o因此确定这 tz个峰为共有指纹峰 o在共有峰
中 o以野黄芩苷峰面积最大和最稳定 o以该峰作为 ≥
峰 o单峰面积大于 ts h小于 us h的峰为 w ox号峰 o
计算其相对峰面积 o其余峰按其相对保留时间定性 ∀
312 色谱条件选择了 Ž• ’„≥Œ≤t{kx1s °° ≅ uss
°° ox Λ° ol o‹¼³¨µ¶¬¯≤t{kx1s °° ≅ uxs °° ox Λ° ol o
⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ° ol oŒ±¨ µ¶¬¯ ’⁄≥2
vkw1y °° ≅ uxs °° ox Λ° ol 等色谱柱 ~用甲醇2
s1x h醋酸 !乙腈2s1x h醋酸 !乙腈2s1t h磷酸为流动
相梯度洗脱 ∀结果 Œ±¨ µ¶¬¯ ’⁄≥2v色谱柱 o乙腈2s1t h
磷酸梯度洗脱可对 u种药材 !中间体及制剂进行指
纹图谱检测 o并且获得良好的分离 ∀
313 采用二极管阵列检测器对药材 !中间体和制剂
的指纹图谱检测波长进行了选择 o结果表明检测波
长在 vss ±°时 o药材 !中间体和制剂的色谱信息量
较大 o基线平稳 o各色谱峰分离较好 ∀
314 在相同色谱条件下对药材 !中间体和制剂进行
指纹图谱检测 o制剂中各特征峰均可在药材和中间体
中得到追踪 o结果表明 o注射剂 tz个共有峰与药材 tw
个 !中间体 ty个共有峰相对应 o药材 !中间体和制剂
的指纹图谱有良好的相关性≈w  o见图 t ∗图 x∀
315 采用国家药典委员会组织编制的/中药色谱指

图 u 荭草药材对照指纹图谱
图 v 灯盏细辛药材对照 ‹°≤指纹图谱
图 w 荭草半成品对照 ‹°≤指纹图谱
纹图谱相似度评价系统0软件≈x  o对 ts批制剂指纹
图谱相似度进行计算 o相似度均大于 s1| o见图 y ∀
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图 x 灯盏细辛半成品对照指纹图谱
≈参考文献 
≈t  郑尚珍 o王定勇 o刘武霞 o等 q荭草中黄酮类化合物 q西北师
范大学学报k自然科学版l ot||| ovxkwl }vz q
≈u  国家药品监督管理局 q国药管注≈usss vw{号 }关于印发5中药
注射剂指纹图谱的技术要求k暂行l6的通知 qusss1{1
≈v  贵州省药品监督管理局 q贵州省中药材 !民族药材质量标准 q
贵阳 }贵州科技出版社 oussv quyz q
≈w  冯文宇 o邱华荣 o田 吉 o等 q青银注射液指纹图谱实验研
究 q中国中药杂志 oussw ou|kul }twt q
≈x  国家药典委员会 q中药色谱指纹图谱相似度评价系统
kussw„l qussw q
图 y ts批号制剂 ‹°≤相似度评价图谱
≥tt1 对照指纹图谱
Στυδψ ον ΡΠ2ΗΠΛΧ φινγερπριντ οφ Χοµ πουνδ Ηονγχαο Ινϕεχτιον
„‘≠¤±2¼∏oŒ˜ ¬2±¤o • „‘Š ≠²±ª2¯¬±oŒ ≠²±ª2­∏±o ‹˜„‘Š ≠²±ªo ‹∞ ÷∏±o‹∞‘Š ¬±o • „‘Š „¬2°¬±
( Σχηοολ οφ Πηαρµαχψ, Γυιψανγ Μεδιχαλ Χολλεδγε , Γυιψανγ xxsssw , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«·«¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·§¨·¨¦·¬±ª¶·¤±§¤µ§²© ≤²°³²∏±§ ‹²±ª¦¤²Œ±­¨¦·¬²± ¥¼ µ¨√ µ¨¶¨§³«¤¶¨ «¬ª« ³¨µ©²µ2
°¤±¦¨ ¬¯´∏¬§¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼q Μετηοδ : ׫¨ ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦¦²±§¬·¬²±¶º µ¨¨ ¤¶©²¯ ²¯º¶}¤±Œ±¨ µ¶¬¯2’⁄≥2v ¦²¯∏°± º¤¶∏¶¨§~·«¨ °²¥¬¯¨ ³«¤¶2
¶¨k¤¦¨·²±·µ¬¯¨ ¤±§s1t h ³«²¶³«²µ¬¦¤¦¬§l º¬·«ªµ¤§¬¨±·¨ ∏¯·¬²±~·«¨ ©¯²º µ¤·¨ t1s °#°¬°p t ¤±§·«¨ ˜∂ ¤¥¶²µ¥¤±¦¨ §¨·¨¦·¬²± ¤·vss±° q
Ρεσυλτ : ˜±§¨µ·«¨ ¶¤°¨¶¨¯¨ ¦·¨§¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦¦²±§¬·¬²±¶o·«¨ ‹°≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²©µ¤º §µ∏ª¶¤±§·«¨¬µ¬±·¨µ° §¨¬¤·¨ o©¬±¬¶«¨ §³µ²§∏¦·¶º µ¨¨
²¥·¤¬±¨ § º¬·«ª²²§¶¨³¤µ¤·¬²± ¤±§¦²µµ¨ ¤¯·¬²± ¤¦¦²µ§¬±ª·²·«¨ ·¨¦«±¬¦¤¯ µ¨ ∏´¬µ¨° ±¨·¶²©©¬±ª¨µ³µ¬±·²±Œ±­¨¦·¬²± ²©≤«¬±¨ ¶¨ ·µ¤§¬·¬²±¤¯ ° §¨¬¦¬±¨ q
Χονχλυσιον : tz ¦²°°²± ³¨ ¤®¶¤¶º¨¯¯¤¶·«¨¬µµ¨·¨±·¬²±·¬° ¶¨¤±§³¨ ¤®¤µ¨¤µ¤·¬²¶²± ‹°≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¦¤± ¥¨ ∏¶¨§¤¶·«¨ ¬°³²µ·¤±·³¤µ¤° 2¨
·¨µ¶²©·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ©²µ≤²°³²∏±§ ‹²±ª¦¤²Œ±­¨¦·¬²±q
[ Κεψ ωορδσ] ≤²°³²∏±§ ‹²±ª¦¤²Œ±­¨¦·¬²±~ ‹ µ¨¥¤°²¯¼ª²±¬’µ¬¨±·¤¯¬¶~ ‹°≤ ~©¬±ª¨µ³µ¬±·
≈责任编辑 刘  
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稿件题目 ∀本刊将于收到稿件后的 t个月之内给予回执及发票 ∀
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