全 文 ：茜草愈伤组织诱导与快速繁殖的研究
薛建平 o张爱民 o程建平
k淮北煤炭师范学院生物系 o安徽 淮北 uvxsssl
≈摘要 目的 }研究茜草的茎段培养技术 o为茜草快繁建立最佳培养条件 ~建立诱导茜草愈伤组织的培养方
法 o为茜草所含次生代谢药用成分工业化生产 o提供方便 !快捷的途径 ∀方法 }利用植物组织培养技术 o将茜草茎段
分别在不同的培养基中培养 o诱导其成为完整植株 ~将茜草的茎 !叶 !根进行愈伤组织诱导 ∀结果与结论 } ≥ n u ow2
⁄u °ª#p t n ×s qt °ª#p t培养基适于茜草的愈伤诱导 ~ ≥ n y2
t qx °ª#p t培养基上茜草茎段能迅速生长
成苗 ~ ≥ n u ow2⁄ u °ª#p t n × s qt °ª#p t培养基与 ≥ n y2
t qx °ª#p t培养基先后使用 o可使茜草生根 ∀
≈关键词 茜草 ~愈伤组织 ~增殖 ~植物组织培养
≈中图分类号 u{u qu ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsu2stst2sv
茜草 Ρυβια χορδιφολια q为茜草科茜草属 Ρυ2
βια植物 ∀该属植物达 ys多种 o分布于欧洲 !亚洲 !
南非和美洲≈t o我国有 tu种≈u ∀茜草是我国传统常
用中药 o具有止血 !抑菌 !止渴 !祛痰 !升白等作
用≈v ∗ y ∀现代药理研究发现中国茜草含有高效低毒
的抗癌成分环己肽类 o但欧洲产的西洋茜草k Ρ .
τινχτορυ µ l没有抗癌作用≈z o而且欧洲茜草还含有
芦西丁k¯ ∏¦¬§¬±l o该化合物有较强的致基因突变 !细
胞转化及 ⁄ 结合作用≈{ o被美国 ƒ⁄ 明确列为
禁用药物≈| ∀中国茜草不仅不含芦西丁 o并且已分
离得到了 w个具有抗癌作用的单体化合物≈x ots o因
此中国茜草在世界上的销量激增 ∀但是 o由于茜草
属多年生草本 o自然生长十分缓慢 o野生资源趋于枯
竭 ∀为保护中国茜草野生资源 o实现茜草的现代化
栽培 o开展茜草的快繁及愈伤组织诱导的研究 o就显
得更为迫切和重要 ∀而有关中国茜草的组织培养研
究 o国内外还未见报道 ∀
1 材料和方法
1 q1 材料 茜草采自于浙江天目山 o经郭传友先生
鉴定为茜草 Ρ . χορδιφολια∀
1 q2 培养基 按不同用途编号如下 q ≥ n u ow2
⁄t qx °ª#p t n ×s qt °ª#pt ~
q ≥ n u ow2⁄ u
°ª#pt n × s qt °ª#p t ~ ≤ q ≥ n y2
t °ª#
pt ~⁄ q ≥ n y2
t qx °ª#pt ~∞ q ≥ n y2
t qx °ª#pt n s qx °ª#p t ~ƒ q ≥ n y2
u
≈收稿日期 usst2sw2uw
≈作者通讯 电话 }ksxytlv{suuux
°ª#pt n u °ª#pt ~ q ≥ n y2
u °ª#p t
n s qt °ª#pt ~ q ≥ n y2
s qx °ª#pt n
s qst °ª#pt ~q ≥ n s qu °ª#pt ~q
tru ≥ n s qu °ª#pt ~ q ≥ n y2
u °ª#
pt n s qx °ª#p t ~q ≥ n y2
v °ª#p t
n s qst °ª# pt ~ q ≥ n s qx °ª#
pt ~q ≥ 基本培养基 ∀以上培养基均含 v h 蔗
糖 !s q{ h琼脂 o³ 值为 x q{ ∗ y qs ∀其中 号 !
号
为愈伤组织诱导培养基 o≤ ∗ 号为苗增殖培养基 o
∗ 号为生根培养基 ∀
1 q3 方法 先用流水将茜草茎段和根茎冲洗干净 o
然后置于超净工作台上对其进行消毒接种 ∀先于
zs h酒精中浸泡 ts ¶o再用 s qt h ª≤ u¯浸泡 { °¬±o
最后取无菌水冲洗 x次 ∀将消毒后的茜草茎段 !叶
片和根 o接种到愈伤诱导培养基中 ~将部分茎段接种
到增殖培养基中 ~取 v ¦°长的增殖苗 o接种到生根
培养基中诱导生根 ∀
1 q4 培养条件 温度kux ? tl ε o光照时间 tu «#
§p t o光照强度 t xss ∗ u sss ¬¯∀
2 结果
2 q1 愈伤诱导 茎段和叶片在 号培养基中 z §
开始愈伤化 ∀
号培养基接种第 x 天后开始愈伤
化 o且都发生在剪切部位和分裂旺盛部位 ∀根茎在
号 !
号培养基中均未见到愈伤化 ∀愈伤组织色
淡黄 o致密 ∀w 周后 o在
号培养基中愈伤组织的
量 o明显多于 号培养基 ∀此时愈伤组织有褐化现
象 o色变为棕褐色 o分裂速度减慢 ∀把褐化的愈伤组
织块切除 o将剩余组织切成小块转入暗培养 ox §后 o
#tst#
第 uz卷第 u期
ussu年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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褐化减慢 o分裂加强 o愈伤组织增大 ∀ ∞号 !ƒ 号培
养基中茎段的基部也能形成愈伤组织k见图 tl ∀经
长期观察发现 o褐化现象较少 o组织致密 o但分裂速
度慢于愈伤诱导培养基的诱导 o色为淡黄绿色 ∀
号 !号培养基中茎段基部愈伤化程度较慢 o长期培
养后褐化现象比 ∞号培养基明显 ∀ 号培养基中 o
茎段基部的愈伤组织深绿色且生长较快 ∀
图 t 茜草茎段基部愈伤化
2 q2 苗增殖培养 在初代培养时 o使用 ≤ ∗ 号培
养基 o苗在各培养基中反应不一 ∀由表 t看出苗增
殖采用 ⁄号培养基最好k图 ul ∀
图 u 茜草增殖愈伤化
表 t 激素对茜草幼苗增殖培养的影响
培养基
编号
生长
状况
侧芽
基部
愈伤化
植株
色泽
≤ 慢 无 无 绿
⁄ 较快 每节间有 u ∗ v个 无 淡绿
∞ 很慢 无 有 绿
ƒ 较慢 无 有 绿
快 无 有 淡绿
很慢 无 有 绿
2 q3 生根培养 取 v ¦°长的幼苗移入 号 !号培
养基 o经 t月后 o只见基部愈伤化 o并未生根 o且愈伤
组织增殖速度比直接愈伤诱导慢 ∀愈伤组织呈淡黄
色 o致密 ∀苗健壮 o色墨绿 o仍在生长 ∀转入 号 !
号 ! 号培养基中 o 号培养基中愈伤加大 o依旧不
生根 ∀号 !号培养基中苗基部褐化 o无生根现
象 ∀在愈伤诱导
号培养基中培养 ts §的茜草茎
段 o转入 ⁄号培养基中培养 ovs §后发现有根生长 o
根出于茎段基部 o非愈伤组织诱导生出k见图 vl ∀
在 号培养基中也未见生根 ∀
图 v 茜草生根愈伤化
2 q4 移栽 当根长 u ¦°以上时 o打开瓶口炼苗 v
§o移栽于消毒的砂石和珍珠岩kvΒtl混合的基质中 o
并覆盖塑料薄膜 ox §后即可去掉塑料薄膜 ots §后
定植于消毒的土壤中 o全部成活 ∀
3 讨论
3 q1 同一基因型外植体不同 o愈伤组织诱导效果不
同 外植体对激素的反应很可能与材料本身的生理
状态 o以及内源激素的合成和代谢上的差异有密切
关系≈tt otu ∀在实验中 o茜草茎尖 !叶腋培养后优先
愈伤 o紧接着茎段剪切端 o叶片破损处愈伤化 o根茎
经 t个月仍不见愈伤化 ∀这表明分裂旺盛的部位易
愈伤化 o剪切受损的部位易愈伤化 o地上部分比地下
易愈伤化 ∀造成这种差异的原因可能是由于不同外
植体中所含的内源细胞分裂素与生长素的绝对含量
和相对比值不同所致≈tt ∀因此 o在进行愈伤组织诱
导时 o应选用适宜的组织部位 ∀
3 q2 光照条件对茜草愈伤组织的影响 在 v ∗ w周
的光照培养下 o愈伤组织发生褐化 o分裂停滞 o而转
入暗培养 o褐化减缓 o继续分裂 ∀说明光照对愈伤组
织生长具有负面影响 o所以茜草愈伤组织的培养应
以暗培养为宜 ∀
3 q3 植物生物调节剂对茜草愈伤组织形成的影响
在本实验中 号 !
号培养基比 号 !号培养基
愈伤组织增殖要多要快 o因而 u ow2⁄诱导愈伤化效
果比 好 ∀对能形成愈伤组织的几组培养基进
行比较发现 o在含有 y2
的 ∞号 !ƒ号培养基中 o愈
伤组织可长期继代 o并且不褐化 ∀其原因可能是 y2
可延缓组织衰老≈tv otw o从而减缓或抑制了褐
化 ∀
3 q4 植物生物调节剂对苗增殖及生长的影响 由
表 t可看出 oy2
在 t ∗ u °ª#p t浓度时 o其苗生
长随着 y2
浓度的增加而加快 ~抑制苗生长 o
#ust#
第 uz卷第 u期
ussu年 u月
中 国 中 药 杂 志
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浓度达 s qx °ª#p t时现象尤为明显 o这与陈雅君在
药用植物北五味子的报道中结果一致≈tx ∀由表 t
还可得出 }y2
浓度在 t ∗ t qx °ª#p t时对侧芽分
化不是很理想 o与有关资料不符≈tx oty o增加 后
也没有变化 ∀侧芽分化可能与更多的激素在茜草内
部的活动 !分布有关 ∀
3 q5 植物生物调节剂对根的诱导的影响 号 ∗
号培养基 o都可诱导愈伤分化 o其中 号 ! 号培养
基可壮苗 o但均不适于生根 ∀说明 不适于茜草
生根 o或者最佳激素配比没有找到 ∀
在愈伤诱导培养基
号内培养的茜草茎段 ots
§后转入 ⁄号培养基中培养 ∀t个月后可生出健壮
的根 ∀
综上所述 o ≥ n u ow2⁄ u °ª#pt n × s qt °ª
#pt培养基 o适宜茜草愈伤组织诱导 o ≥ n y2
t qx °ª#p t培养基 o适于茜草幼苗增殖培养 o两种
培养基先后使用可诱导幼苗生根 o移栽后并能成活 ∀
对于茜草叶片 !茎段诱导的愈伤组织中 o其有效药用
成分的含量和变化 o有待进一步深入研究 ∀
≈参考文献
≈t 侯宽昭 q中国种子植物科属词典 q北京 }科学出版社 ot|{u q
wuu q
≈u 罗献瑞 q中国茜草科资料k五l q热带亚热带植物学报 ot||| oz
ktl }tx q
≈v 王素贤 o华会明 o吴产军 o等 q中药茜草的研究进展 q沈阳药
学院学报 ot||s ozkwl }vsv q
≈w 中国药典 q一部 qt||x qus{ q
≈x 王红霞 o王秉极 o马百平 o等 q茜草糖蛋白 ± ≤ 的分离纯化及
结构探讨 q军事医学科学院院刊 ot||{ ouukwl }uzz q
≈y 陈战国 o肖娅萍 q茜草藤的生药学研究 q中草药 o usst q vu
kul }txz q
≈z 樊中心 q茜草中的抗癌成分 q国外医学#中医中药分册 ot||z o
t|ktl }vt q
≈{
¤µ¥¤µ¤ °²ª¬±§®¼ o²«±±¨ ¶ • ¶¨·¨±§²µ©o
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¤¯ q ∞√¤¯∏¤·¬²± ⁄2¥¬±§¬±ª ¦·¬√¬·¼ ²© ¼§µ²¬¼¤±·«µ¤´ ∏¬±²±¨ ¶
¦¦∏µ¬±ª¬± Ρυβια τινχτορυ µ q≤ ot||t ottxk|l }{w|zw q
≈| 田金改 o王钢力 o陈德昌 o等 q中国茜草与欧茜草的 ÷ 射线粉末
衍射分析 q分析测试学报 ot||| ot{ktl }v{ q
≈ts 王钢力 o田金改 o陈德昌 q茜草与欧茜草的化学成分研究 q
药物分析杂志 ot||z otzkwl }ut| q
≈tt 李明军 o薛建平 o邱卫花 o等 q不同因子对山药愈伤组织诱导
的影响 q广西植物 ousss ouskul }txy q
≈tu 倪德祥 o邓志先 q植物激素对基因表达的调控 q植物生理学
通讯 ot||u ou{kul }wyu q
≈tv 谭文澄 o戴策刚 q观赏植物组织培养技术 q北京 }中国林业出
版社 ousss qyv q
≈tw 杨增海 q园艺植物组织培养 q北京 }农业出版社 ot|{z qwt q
≈tx 陈雅君 o吴秀菊 o关政华 o等 q药用植物北五味子的组织培
养 q植物研究 ot||| ot|kvl }vt{ q
≈ty 朱 虹 o云希和 o朱 泳 o等 q雨堡组织培养的研究 q植物研
究 ot||| otykyl }tws q
≈责任编辑 王康正
用均匀设计优选复壮胶囊的半仿生提取工艺条件
张兆旺 o孙秀梅 o王英姿 o高新颖
k 山东中医药大学 o山东 济南 uxsstwl
≈摘要 目的 }为复壮胶囊方药优选提取工艺条件 ∀方法 }以淫羊藿苷 !Β2谷甾醇 !甜菜碱 !人参二醇 !人参三
醇 !总糖 !干浸膏为指标 o采用均匀设计法优选半仿生提取法k简称 ≥
∞法l的条件 ∀结果 }Α v .|xuw , Β z .w|uu ,
Χ { .y{|x , ∆ w q||wt ∀结论 }结合生产实际 o确定其 ≥
∞法工艺条件为 }三煎用水的 ³ 依次为 w qs oz qx o{ qz ~
提取时间依次为 txs ozx ozx °¬±∀
≈关键词 复壮胶囊 ~半仿生提取法 ~均匀设计 ~工艺条件
≈中图分类号 u{v ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsu2stsv2sy
≈收稿日期 usss2tt2sx
≈基金项目 山东省医药卫生科研课题k||tusx|s{l
≈作者通讯 电话 }ksxvtluytvwx|
复壮胶囊由淫羊藿 !肉苁蓉 !枸杞子 !人参等药
味组成 o具有温补肾阳 o振阳起痿功能 ∀本文报道采
用均匀设计法≈t 优选这 w种药材的半仿生提取法
#vst#
第 uz卷第 u期
ussu年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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