全 文 ：中药水煎煮液分离 !纯化工艺的比较研究
冯青然 o王元瑜 o马振山 o张保献 o聂其霞 o
赵小妹 o臧 琛 o仝 燕 o王 琳
k中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要 目的 }对中药水煎液的常用精制方法进行比较研究 o以评价各种方法的优劣 ∀方法 }用醇沉法 !超滤
法 !澄清剂法 !大孔树脂法分别对淫羊藿 !黄芩汤等单味药和复方的水提液进行分离 !纯化 o并用 °≤ 及其他方法
对其单味药和复方中的指标成分及多糖 !蛋白质进行定量测定和定性鉴别 ∀结果 }w种分离纯化技术各有其优点 ∀
结论 }需根据临床治疗的需要 !药物的化学成分及所需制备剂型的要求选择不同的分离和纯化方法 ∀
≈关键词 水煎液 ~分离与纯化 ~工艺比较
≈中图分类号 u{v qy ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulst2ssu{2sv
中药水煎提取液的分离 !纯化工艺是目前中药
制剂中最常见 !应用最多的工艺方法 ∀中药水提取
物剂量大 !易吸潮 !较不稳定 o是中药制剂成型工艺
中最难解决的问题 ∀因此 o需要对其分离 !纯化进行
基础性质的方法比较研究 o找出中药水提取液最佳
分离 !纯化方法 o保证药剂疗效 o最大限度提出其有
效 !有益的化学成分 o除去大部分对其病种 !病症及
机体无用的成分 o以解决中药制剂中的剂量大 !易吸
潮 !不太稳定的状况 o使中药制剂向安全 !有效 !可
控 !体积小 !外观美 !稳定性好的现代中成药制剂迈
进 ∀
1 仪器与试药
原生药 }淫羊藿等 uv 味药购于北京市药材公
司 o经鉴定均为 t||x年版5中国药典6正品 ∀
对照品 }购于中国药品生物制品检定所 ∀
中空纤维超滤器k分子截留量 }u万 ox万l }北京
潞美分离应用技术研究所 ∀ ⁄tss ≅ v 大孔吸附树
脂 }安徽省固镇县精细化工厂 ∀tst果汁澄清剂 }上
海市徐汇区华逊应用生物化学研究所 ∀ {s冷冻离
心机 ∀ {t2u型真空干燥箱 }北京通县试验设备厂 ∀
高效液相色谱仪 }• ¤·¨µ¶yss泵 ow{y紫外分光检测
器 o¬¯¯¬±¨ ±∏° usts色谱管理者软件 ∀
甲醇k l !冰醋酸k l }北京化工厂 ∀
2 试验设计
≈收稿日期 usst2sw2tx
≈基金项目 国家中医药管理局科研基金k|xvvttl
≈作者通讯 电话 }kstslywstwwtt2u|xu 传真 }ywstv||y
对 y味生药 !w个复方水提后分别进行醇沉 !澄
清剂澄清 !超滤及大孔树脂吸附 w种方法处理 o每种
方法取 v个水平k仅超滤为 u个水平l o并分别测定
每个样品中各自的指标成分和总多糖的含量k硫酸2
苯酚法l o蛋白质 !鞣质定性检查 o并对结果进行比较
研究 ∀具体设计见表 t ∀
表 t 试验设计表
药物 指标成分 含测方法
淫羊藿 淫羊藿苷 °≤
赤芍 芍药苷 °≤
栀子 栀子苷 °≤
银花 绿原酸 °≤
甘草 甘草酸 °≤
苦参 苦参碱 滴定
黄芩汤tl 黄芩苷 °≤
大补元煎ul 人参皂苷 ªt o ¨ °≤
抗感颗粒vl 芍药苷 °≤
黄连解毒汤wl 小檗碱 °≤
注 }≠黄芩汤由黄芩 !栀子组成 大补元煎由人参 !山药 !熟
地 !杜仲 !山茱萸 !当归 !枸杞和炙甘草组成 ≈ 抗感颗粒由赤芍 !金
银花和绵马贯众组成 …黄连解毒汤由黄连 !黄柏 !黄芩和栀子组成
3 提取和精制
3 q1 提取工艺 取上述各药 x ®ªo分别加水浸泡 t
«后煎煮 u次 o第 t次 t qx «o第 u次 t «o加水倍数分
别为 us ot{倍 ∀合并煎液 o滤过 o浓缩至每毫升 t ª
生药 o离心ku xss µ#°¬±p t ous °¬±l o上清液留用 ∀
3 q2 精制工艺 为全面反映各精制方法对结果的
影响 o采用了每种精制方法各选 u ∗ v个不同精制水
平 o每一水平做 v份平行试验的试验方法制备样品 ∀
具体工艺操作如下 }
#{u#
第 uz卷第 t期
ussu年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qt
¤±qoussu
醇沉法 }取上述上清液 wxs °o均分为 |份 o每
份 xs °o相当于 xs ª生药 o加乙醇至醇浓度分别为
xs h oys h ozs h o每一浓度平行各做 v份 ∀冷藏过
夜 o抽滤 o滤液浓缩并真空干燥成干浸膏 o粉碎后备
用 ∀
超滤法 }取上述上清液 t uss °o均分为 y份 o
每份 uss °o相当于 uss ª生药 o加入等量蒸馏水稀
释后冷藏过夜 o离心ku xss µ#°¬±p t ous °¬±l后再高
速离心kv万 µ#°¬±p tl o分别超滤 ∀超滤膜分子截留
量分别为 u万 ox万 o每个水平平行各做 v份 o超滤液
浓缩并真空干燥成干浸膏 o粉碎后备用 ∀
大孔树脂吸附法 }取上述上清液 |ss °o均分
为 |份 o每份tss °o相当于tssª生药 o分别离心
ku xss µ#°¬±p t ous °¬±l后倾出上清液 o加适量蒸馏
水返溶沉淀部分 o离心 o合并两次离心液 o加入适量
蒸馏水 o混匀后上树脂柱k生药量Β树脂量 uΒtl ∀
待药液流完后 o加入 t倍生药量蒸馏水冲柱 o待蒸馏
水流净后 o用 w倍生药量的不同浓度乙醇洗脱 ∀乙
醇浓度分别为 xs h oys h ozs h o每一浓度各平行做
v份 ∀洗脱液回收乙醇 o浓缩并真空干燥成干浸膏 o
粉碎后备用 ∀
吸附澄清法 }取上述上清液 |ss °o均分为 |
份 o每份 tss °o相当于 tss ª生药 o分别离心ku
xss µ#°¬±p t ous °¬±l后 o倾出上清液 o加适量蒸馏水
返溶沉淀部分 o离心 o合并两次离心液 o置水浴上加
热 o加入 x h的 tst果汁澄清剂溶液 o加入量分别为
药液体积的 vs h ows h oxs h o每一水平各平行做 v
份 o搅拌 tx °¬±o溶液放冷后冷藏 tu «o离心 o取上清
液浓缩并真空干燥成干浸膏 o粉碎后备用 ∀
4 结果
按表 t中的方法分别测定各精制物中指标成分
的含量 ∀其中 o蛋白质 !鞣质采用定性方法 o蛋白质
检查采用茚三酮试验与鞣酸试验 o鞣质检查采用明
胶试验 ∀蛋白质 !鞣质定性试验结果 o鞣质 }超滤没
有 o大孔树脂略有 o醇沉 !澄清法差别不大 ~蛋白质 }
大孔树脂没有 o其他方法均有 o差别不大 ∀总多糖的
定量采用苯酚2硫酸法 ∀结果见表 u ∗ w ∀
5 结论与讨论
5 q1 由表 u可知 o单味药及复方精制后的出膏率均
呈现以下规律 }澄清法 超滤法 !醇沉法 大孔树脂
法 o超滤法与醇沉法相差不大 o澄清法较高 o大孔树
脂法最低 ∀由表 v可以看出 o对不同类型的有效成
表 u 各种方法处理后的出膏率 h
药物 空白 醇沉法 超滤法 大孔树脂法 澄清法
淫羊藿 us qw tx qu tu qy w qvs t{ qt
赤芍 uz qy ut q{ tz q{ y quz uu q{
栀子 uw q{ tx qu tv qt x qxw ut qu
银花 vy q{ uy q{ uv qx w q|x vv qu
甘草 us qw tx qx tz qz z qs| t| qw
苦参 t{ q{ tv q| tu qy v q|v tz qt
黄芩汤 u{ qs tt qu tw qx x qvv u{ qt
大补元煎 v| qy uw qw ux q{ v qzt vt qy
抗感颗粒 u{ qs tz q{ ty qv w qsy uw qx
黄连解毒汤 ts qs z qyw y q|s v qu| ts qu
表 v 精制干膏中化学成分含量k ν vl
°ª#ªp t
药物 醇沉法 超滤法 大孔树脂法 澄清法
淫羊藿 y qxu s x qvy w qyv
赤芍 vu qtt uu qxu vu qv{ uw qxw
栀子 us quz t{ qzz { q|v ut q{t
银花 t{ qw{ tw qw{ u q{| ty qsv
甘草 tx qtt w qtz x qzs us qsz
苦参 ts qyt v qsx u qtt w qws
黄芩汤 tx q|s ty qzw t q{| us qw{
大补元煎 p p p p
抗感颗粒 y qzz x quw y qt{ y qyt
黄连解毒汤 s qw| s qu| s qx{ s qwz
注 }≠ 含量为相当于每克生药中的毫克数 大补元煎中的人
参量太小 o人参皂苷测不出
表 w 精制干膏中总多糖含量 °ª#ªp t
药物 醇沉法 超滤法 大孔树脂法 澄清法
淫羊藿 xs qt vs q{ tx q| w{ qu
赤芍 tu| qv |x qs uy q| tt| qw
栀子 y{ qw wy qt uv qs {s qs
银花 ttv qz {y qy tx q| tvv qt
甘草 p p p p
苦参 | qs v| qz { qy x| qz
黄芩汤 xs qy xv qt tu qv tst qt
大补元煎 ty| qt tyu q| t{ qs t|| qw
抗感颗粒 {z qx zw q| tv q{ ttv qv
黄连解毒汤 u{ qu uw qy ts q{ vv qu
注 }≠多糖含测用硫酸2苯酚法 o故含量为总糖量 o包括单糖等
甘草样品量不足 o故未测
分 o醇沉法和澄清法大多可以予以较大程度的保留 o
大孔树脂法对于淫羊藿 !赤芍 !抗感颗粒和黄连解毒
汤较佳 o且保留程度与所测成分相关 ∀至于淫羊藿
水煎液超滤后淫羊藿苷测不出 o可能是由于蛋白质 !
多糖等大分子对淫羊藿苷的吸附 !包埋作用较强 o在
超滤时淫羊藿苷随上述大分子一起除去所致 ∀大补
元煎干扰较多 o ªt o ¨难以检测 o故未测定 ∀由表 w
#|u#
第 uz卷第 t期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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及定性试验结果可知 o含糖量 }澄清法 !醇沉法 超
滤法 大孔树脂法 o超滤法与大孔树脂法除多糖效
果较好 o大孔树脂法除蛋白质效果好于其他各方法 o
综合比较 o以大孔树脂法除杂效果最好 ∀
5 q2 醇沉法能减少提取量 o基本保持原药成分 ~缺
点是不经济 o成本高 o多糖 !蛋白质等杂质多数不能
除净 o不能解决吸潮问题 o需要用加辅料等其他手段
保证提取物制成制剂后的稳定性 ∀
5 q3 澄清剂法目前能不能替代其他方法 o还需进一
步研究 ∀澄清剂没有法定标准 o其优点是能在一定
程度上保持有效成分 ~缺点是提取物剂量大 o沉降速
度慢 o工期长 o沉淀不完全 o多糖 !蛋白质等杂质多数
不能除去 o还可能给提取物中带进其他成分 ∀
5 q4 高速离心2超滤法提取物量和化学成分与醇沉
法基本一致 o某些制剂可取代醇沉法 ~缺点是小分子
糖分等杂物不能除去 o提取物吸潮无法解决 o有醇沉
法的共同缺点 o大生产价格下降 o适宜于液体制剂 ∀
5 q5 大孔树脂法的优点是提取物得量低 o杂质少 o
不太吸潮 o有效成分可大大富集 ~缺点是技术条件要
求较高 o树脂种类和型号需优选 o用一种树脂很难照
顾到多种化学成分 ∀
5 q6 上述结果缺乏药效学对比试验 o有待今后进一
步深入研究 ∀几种精制方法各有优缺点 o提取精制
时 o必须根据药物化学成分 !剂型需要等因素确定采
用某一种方法 ∀
Χοµ παρατιϖε Στυδιεσ ον Ισολατιον ανδ Πυριφιχατιον οφ Χηινεσε Μεδιχινε ∆εχοχτιον
ƒ∞ ±¬±ª2µ¤±o • ≠∏¤±2¼∏o «¨ ±2¶«¤±o
¤²2¬¬¤±o ∞ ±¬2¬¬¤o
÷¬¤²2° ¬¨o ≤«¨ ± o × ≠¤± o • ¬±
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ √¨¤¯∏¤·¨ §¬©©¨ µ¨±·° ·¨«²§¶¥¼·µ¨¤·¬±ª º¤·¨µ2§¨¦²¦·¨§ ¬¯´∏¬§²©y ≤«¬±¨ ¶¨ ° §¨¬¦¤¯ «¨µ¥¶¤±§w ¦²2³µ¨2
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³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¤±§³µ²·¨¬± o º¤¶°¤§¨ q Ρεσυλτ : ∞¤¦« ° ·¨«²§¶«²º §¨¬·¶¤§√¤±·¤ª¨¶¤±§§¬¶¤√¤±·¤ª¨¶qχονχλυσιον : ⁄¬©©¨ µ¨±·° ·¨«²§
¦¤± ¥¨ ¦«²¶¨± ¤¦¦²µ§¬±ª·²·«¨ ¦¯¬±¬¦¤¯ ¤±§³µ¨³¤µ¤·¬²± §¨ °¤±§¶²µ·«¨ ¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦²©¦²°³²±¨ ±·¶q
[ Κεψ ωορδσ] º¤·¨µ2§¨¦²¦·¨§ ¬¯´∏¬§~¶¨³¤µ¤·¬²±}³∏µ¬©¬¦¤·¬²±~·¨¦«±¬¦¶¦²°³¤µ¬±ª
≈责任编辑 李 禾
降糖馨胶囊中人参皂苷 ¥t的含量测定
徐秀珍 o韩义欣 o逯海龙
k宁夏回族自治区药品检验所 o宁夏 银川 zxssswl
≈摘要 目的 }建立降糖馨胶囊中人参皂苷 ¥t 的含量测定方法 ∀方法 }高效液相色谱法 o≠ • ≤t{分析柱 ∀
结果 }本文提取方法有效去除了同类成分的干扰 o色谱分离效果好 o平均回收率为 |z qw h o ≥⁄ u qtv h ∀结论 }结
果准确 o重现性好 o可作为控制降糖馨胶囊质量的方法 ∀
≈关键词 降糖馨胶囊 ~人参皂苷 ¥t ~高效液相色谱法
≈中图分类号 u{v qy ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulst2ssvs2sv
≈收稿日期 usss2tt2tx
#sv#
第 uz卷第 t期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qt
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