免费文献传递   相关文献

Studies on tissue culture of Dendrobium lituiflorum

喇叭唇石斛组织培养的研究



全 文 :Εφφεχτσ οφ χοµ πανιον φυνγυσ ον σεϖεραλ ενζψµατιχ αχτιϖιτιεσ οφ Γροφολα υµβελλατα
÷Œ‘Š ÷¬¤²2®¨ o Š˜’ ≥«∏±2¬¬±ª
(Ινστιτυτε οφ Μεδιχιναλ Πλαντ ∆εϖελοπµεντ , Χηινεσε Αχαδεµψ οφ Μεδιχαλ Σχιενχεσ & Πεκινγ Υνιον Μεδιχαλ Χολλεγε , Βειϕινγ tsss|w , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ©¨©¨¦·²©¦²°³¤±¬²±©∏±ª∏¶²± ¶¨√ µ¨¤¯ ±¨½¼°¤·¬¦¤¦·¬√¬·¬¨¶²© Γριφολα υµβελλατα . Μετηοδ : ≤«¬·¬2
±¤¶¨ oΒ2t ov2ª¯∏¦¤±¤¶¨ o³µ²·¨¬±¤¶¨ ¤±§ ¬¨·µ¤¦¨¯¯∏¯¤µ ±¨½¼° ¶¨²© Γ . υµβελλατα º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§§∏µ¬±ª§∏¤¯ ¦∏¯·∏µ¬±ª º¬·«¦²°³¤±¬²± ©∏±ª∏¶q
Ρεσυλτ : ≤²°³¤±¬²±©∏±ª∏¶¦²∏¯§¬±§∏¦¨ ·«¨ ¬±¦µ¨¤¶¨ ²© ¦«¬·¬±¤¶¨ ¤±§ Β2t ov2ª¯∏¦¤±¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¬¨¶²© Γ . υµβελλατα q ±²¨ √¬§¨±·¦«¤±ª¨¶º µ¨¨
©²∏±§¬± ³µ²·¨¬±¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼q • «¨ ±¬± ¬¯´∏¬§¦∏¯·∏µ¨ o·«¨ ¤¦·¬√¬·¬¨¶²© ¬¨·µ¤¦¨¯¯∏¯¤µ ±¨½¼° ¶¨¬± §∏¤¯ ¦∏¯·∏µ¨§©¬¯·µ¤·¨ º µ¨¨ ¥¨·º¨¨ ± ²©·«¨ ¶¨ ²© Γ .
υµβελλατα ¤±§¦²°³¤±¬²±©∏±ª∏¶¬± °²±²¦∏¯·∏µ¨¶qΧονχλυσιον : ≥¦¯ µ¨²·¬¤§¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²±µ¨ ¤¯·¨§°¤·¨µ¬¤¯¶¶∏³³¯¬¨§¥¼ °∏·∏¤¯ ±∏·µ¬·¬²±¤¯ ¶∏³³¯ 2¨
° ±¨·¥¨·º¨¨ ± Γ . υµβελλατα ¤±§¦²°³¤±¬²±©∏±ª∏¶¦²±§∏¦¨ ·²¶¦¯ µ¨²·¬¤¯ ©²µ°¤·¬²± ²© Γ . υµβελλατα q
[ Κεψ ωορδσ] Γροτολα υµβελλατα~¦²°³¤±¬²±©∏±ª∏¶~¦«¬·¬±¤¶¨ ~³µ²·¨¬±¤¶¨ ~³²¯¼³«¨ ±²¯ ²¬¬§¤¶¨
≈责任编辑 王康正 
喇叭唇石斛组织培养的研究
常 俊 o丁小余 3 o保曙琳 o刘冬扬 o贺 佳 o唐 凤 o丁秉中
k南京师范大学 生命科学院 o江苏 南京 utss|zl
≈摘要  目的 }筛选喇叭唇石斛快速繁殖体系的适宜培养基及培养条件 ∀方法 }对基本培养基 !光照条件 !激
素 !天然提取物浓度等进行比较研究 ∀进行叶绿素含量 !可溶性蛋白含量测定 ∀结果 }‘y 培养基是种胚萌发成苗
适宜培养基 o而 tru ≥ n ‘„„ s qx °ª#pt易于原球茎膨大增殖 ∀先暗培养 us §再光照培养有利于胚的萌发及苗的
生长 ∀tru ≥ n ‘„„ s ∗ s qx °ª#pt有利于原球茎大量增殖 o‘y n y2…„ u qs °ª#pt n ‘„„ s qx °ª#pt n ts h马铃薯
汁是原球茎分化的适宜培养基 o添加激素和马铃薯汁促进叶绿素和可溶性蛋白含量上升 ∀ ‘y n ‘„„ s qx °ª#pt n
ts h香蕉汁生根壮苗最适宜 ∀结论 }无机盐浓度 !氮源形态 !光照条件对胚萌发生长影响较大 ~氮源形态对原球茎
增殖有影响 ~叶绿素含量 !可溶性蛋白含量能反映组培苗的生长状态 o可作为筛选培养基参考指标 ∀
≈关键词  喇叭唇石斛 ~组织培养
≈中图分类号  • u{v ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsw2svtv2sv
石斛是常用名贵中药材 o在5神农本草经6中被
列为上品 !有滋阴清热 !生津益胃 !润肺止咳 !明目强
身等功效≈t  ∀近年来 o野生石斛资源日渐枯竭 o铁皮
石斛已处于濒危状态 o市场上枫斗类石斛的商品种
类繁多 !基源复杂 ∀经调查 o我国国内上海等地市场
上所售的紫皮枫斗主要由两种石斛属植物加工而
成 o一种为齿瓣石斛 ∆ενδροβιυµ δεϖονιανυµ °¤¬·q≈u  !
另一种为喇叭唇石斛 ∆ . λιτυιφλορυµ ¬±§¯ q¬± Š¤µ§∀
由这两种石斛加工成的枫斗味甘 !柔韧 !黏性强 o被
视为仅次于铁皮枫斗的药材珍品 ∀喇叭唇石斛的植
≈收稿日期  ussv2s|2us
≈通讯作者  3 丁小余 oר¯ }ksuxl{vx|{uty o∞2°¤¬¯}§¬±ª¬¼±­ƒ
uyv q±¨ ·
株高达 vs ∗ ws ¦°或更长 o粗 z ∗ ts °° o在枫斗类石
斛药材中产量较高 !黏性强 ∀因此 o对质优高产的喇
叭唇石斛 !齿瓣石斛进行组织培养研究十分必要 o但
尚未见有此类报道 ∀本试验首先对野生喇叭唇石斛
进行了胚培养和快速繁殖等研究 ∀
1 材料
实验所用喇叭唇石斛的原植物k带蒴果l采自我
国石斛主产区云南勐腊与老挝边境地区的原始森
林 ∀为避免与相似种的混淆 o在经典形态学观察的
基础上利用其 µ⁄‘„ Œ×≥区全序列对所采集的喇叭
唇石斛进行了分子鉴定≈v  ∀
2 方法
2 q1 材料处理 取生长良好未开裂的果实 o用
#vtv#
第 u|卷第 w期
ussw年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ w
„³µ¬¯oussw
zs h酒精表面消毒 o然后用 x h 次氯酸钠浸泡 us
°¬±o无菌水冲洗 w次 ∀无菌超净工作台上切开果
实 o用接种勺将胚均匀的播撒于各种培养基上 ∀
2 q2 培养基与培养条件 培养基配方见表 t ∀培
养基 ³‹ x qy ∗ x q{ o培养温度kux ? tl ε o每日光照
tu «o光照强度 t yss ∗ u xss ¬¯∀每种培养基接种 ts
瓶 o实验重复 v次 o图表中的数据为 ts组以上数据
的平均值 ∀
表 t 各阶段培养基配方
培养阶段 培养基
胚培养

不同浓度 ‘y o≥ n s qx °ª#pt‘„„ n v h蔗糖 o共 {种 ∀并以 ‘y为培养基设置 v种培养条件 }≠黑
暗培养 ~黑暗培养 us §后进行光照培养 ~≈光照培养
原球茎增殖 ‘y otru ≥ n s ∗ t qs °ª#pt‘„„ n v h蔗糖 o共 {种
原球茎分化与幼苗生长 ‘y n s os qx °ª#pt‘„„ n s ∗ v qs °ª#pty2…„ n ts h马铃薯汁 n v h蔗糖 o共 y种
试管苗生根 ‘y n s ∗ u qs °ª#pt‘„„ n ts h香蕉汁 n u qx h蔗糖 o共 z种
2 q3 叶绿素含量的测定 参照张志良≈w 的方法 o单
位 °ª#ªpt ∀
2 q4 可溶性蛋白含量的测定 参照 …µ¤§©²µ§≈x 的方
法 o单位 °ª#ªpt ∀
3 结果
3 q1 不同培养基及条件对胚培养的影响 取成熟
种胚接种 ous §后 o胚大部分固着 o明显膨大 ~vs §后
开始转绿 o逐渐萌发为原球茎 ~ws §后 o部分原球茎
顶端产生叶原基突起 ~ys §后观察各培养基及培养
条件下胚萌发情况 o其结果如表 u所示 ∀
从表 u可以看出 o不添加激素 o≥不利于胚的
萌发 o浓度减半  萌发率上升 ∀添加 ‘„„ 后   o¡
萌发率大幅上升 o但成苗率不高 ∀这可能是萌发的
原球茎保持膨大不分化状态的缘故 o但对于原球茎
的增殖 !扩大繁殖系数以及获得体细胞无性系等具
有重大意义 ∀因此 o≈ o…对喇叭唇石斛种胚萌发成
苗较为适宜 o而¡则适宜种胚萌发为原球茎 ∀
从表 v可以看出 o种胚在 v种光照条件下前 us
§o生长状况大致相同 ovs §后出现差异 ∀暗培养 us
§后转光培养 o胚转绿萌发加快 oys §后 o原球茎及幼
苗发育良好 ∀故先进行一段时间暗培养有利于胚萌
发 o再转光照培养则对幼苗的分化发育至关重要 ∀
表 u 不同培养基对喇叭唇石斛种胚生长的影响
培养基
激素浓度r°ª#pt
萌发率
r h
成苗率
r h 原球茎状况 胚萌发状况
≠ ≥ ts s 无 几乎无萌发 o种胚先膨大后相继白化死亡
 tru ≥ ys vx 膨大 o黄 少数萌发为幼苗 o叶色淡绿 o苗弱
≈ ‘y |s {{ 少 o绿 几乎全萌发成苗 o叶色绿 o小苗整齐 o健壮
…tru ‘y |s {x 少 o淡绿 几乎全萌发成苗 o叶色淡绿 o小苗整齐
  ≥ n ‘„„ s qx ys vs 膨大 o叠生于培养基上 o黄绿 少数成苗 o叶色绿 o健壮
¡tru ≥ n ‘„„ s qx {x vs 膨大 o叠生于培养基上 o黄绿 少数成苗 o叶色绿
¢ ‘y n ‘„„ s qx |s {s 少 o绿 幼苗叶绿
£tru ‘y n ‘„„ s qx {{ zx 少 o淡绿 苗基部黄绿 o叶色淡绿
表 v 不同光照条件对喇叭唇石斛种胚生长的影响
光照条件r§ 暗培养 暗培养 us §后光照培养 光照培养
ts 胚部分固着 o部分未固着
us 胚均固着 o色淡黄 o明显膨大
vs 胚黄 oxs h萌发 胚绿 oxs h萌发 胚黄绿 owu h萌发
ws 胚部分黄绿 o部分白化死亡 ozx h萌发 胚绿 ozx h萌发 胚绿 oyx h萌发
ys

胚及萌发出的原球茎黄 o苗弱多白
化 o单叶 o叶尖淡绿 oys h成苗
胚及萌发出的原球茎绿 o苗整齐健
壮 ou叶 o叶色浓绿 o|s h成苗
胚及萌发出的原球茎绿 o苗
整齐较健壮 ou叶 o{u h成苗
3 q2 不同培养基对原球茎增殖的影响 将种胚萌
发的幼芽切断 o接种在 ‘y n y2…„ t qs °ª#pt n Œ…„
s qu °ª#pt n u qw2⁄ s qx °ª#pt上 ous §左右后 o在
芽基部开始形成黄绿色的愈伤组织 o质地较疏松 ∀
vs §左右时 o黄绿色愈伤组织表面出现小突起 o并逐
渐长大 o形成拟原球茎k³µ²·²¦²µ° ¬¯®¨ ¥²§¬¨¶o°…¶l o
以后再进一步发育成原球茎 ∀将胚萌发出的原球茎
和诱导出的拟原球茎接种到各原球茎增殖培养基上
#wtv#
第 u|卷第 w期
ussw年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ w
„³µ¬¯oussw
继代培养 ovs §后统计结果 o见表 w ∀原球茎在 {种
培养基上均可增殖 o增殖倍数与原球茎生长状况均
有不同 ∀以 tru≥为基本培养基添加 ‘„„ s ∗ s qx
°ª#pt对原球茎的增殖最为适宜 ∀
表 w 不同培养基对喇叭唇石斛原球茎增殖的影响
培养基激素浓度r°ª#pt 始重rª 鲜重rª 增殖倍数 原球茎生长状况
≠ tru ≥ v qsxt tu quxv w qsty 体积较大 o色淡绿 o无分化
 tru ≥ n ‘„„ s qu v qutx tv quwy w qtus
≈ tru ≥ n ‘„„ s qx v qwut tw q|wv w qvy{
…tru ≥ n ‘„„ t qs v qtzw tv qyvv v qxys
  ‘y v qtxw tt qv|| v qytw 颗粒小而致密 o色绿表明被白色绒
¡‘y n ‘„„ s qu u q|yx tt qtys v qzyw 毛 o约 tx h原球茎分化出单叶
¢ ‘y n ‘„„ s qx v qtw| tu qu|t v q|sv
£‘y n ‘„„ t qs v qusw ts qyu{ v qvtz
3 q3 原球茎的分化与幼苗的生长 原球茎于 y种
分化培养基培养 wx §后结果如表 x ∀添加了不同浓
度 y2…„的  o≈ o…分化率与 ≠相比有所上升 o≈添
加 y2…„ u qs °ª#pt最好达到 {s h o…y2…„浓度过高
反而抑制了原球茎分化 ∀添加 ‘„„ s qx °ª#pt的  
分化率高 o分化出的幼苗健壮 o叶色绿 ∀ ¡‘y n y2…„
u qs °ª#pt n ‘„„ s qx °ª#pt n ts h马铃薯汁效果
最好 ∀原球茎接种分化 xs §时 o测定了各叶绿素含
量及可溶性蛋白含量k图 t oul ∀实验发现添加 y2…„
t qs ∗ u qs °ª#pt o促进了幼苗的可溶性蛋白含量的
上升和幼苗的生长 o表明 }y2…„直接或间接刺激了植
物核酸代谢 !诱导了相关基因表达 o表现出翻译水平
上的蛋白质大量合成和形态水平上的植物体生长受
到促进≈y  ∀添加马铃薯汁后 o幼苗的长势达到最佳
状态 o叶绿素含量及 ¤与 ¥的比值分别达到最大值 ∀
叶绿素 ¤为蓝绿色 o叶绿素 ¥为黄绿色 o这一结果正
解释了  o≈ 叶色淡绿 o而 ¡分化出的幼苗健壮 o叶
色浓绿的原因 ∀添加马铃薯汁 o植株生长高大健壮 o
可溶性蛋白含量升高 o可能与其含有一定量的内源
激素及可促进蛋白质合成的钾元素有关≈z  ∀
表 x 不同培养基对喇叭唇石斛原球茎分化的影响
培养基激素浓度r°ª#pt 分化率r h 原球茎分化状况
≠ ‘y ux 多不分化保持继续增殖状态 o表面被绒毛 o有单叶分化 o有白化
 ‘y n y…„ t qs ys 部分分化为球状丛生簇芽 o叶 t ∗ u片 o淡绿 o苗高 s qt ∗ s qv ¦°
≈ ‘y n y…„ u qs {s 大多分化为丛生簇芽 o叶 t ∗ u片 o淡绿 o苗高 s qu ∗ s qv ¦°
…‘y n y…„ v qs xs 部分分化为丛生簇芽 o叶 t ∗ u片 o部分原球茎膨大 o表面被绒毛 o有褐化
  ‘y n y…„ u qs n ‘„„ s qx {x 大多分化为丛生簇芽 o叶 t ∗ u片 o绿色 o苗较健壮 o苗高 s qu ∗ s qw ¦°
¡‘y n y…„ u qs n ‘„„ s qx n ts h马铃薯汁 {{ 大多分化为丛生簇芽 o叶 t ∗ v片 o浓绿 o苗较健壮 o高 s qv ∗ s qw ¦°
图 t 不同培养基上幼苗叶绿素含量的变化
图 u 不同培养基上幼苗可溶性蛋白含量的变化
3 q4 生根壮苗培养基的优化 原球茎分化出的小
苗及胚萌发出的幼苗 o在 ‘y n ‘„„ s qx ∗ t qx °ª#
pt n y2…„ s qw °ª#pt上继代培养 o待丛生苗长至 u
∗ v ¦°高时 o将其分株培养 o转接于各生根壮苗培
养基上进行培养 oxs §后观察统计结果见表 x ∀实
验中作者发现添加较低浓度 ‘„„ 使生根率大幅上
升 o但并不利于根的生长 o o≈中根都成棒状 o且根
端成球状突起 ∀刘骅≈{ 认为较高浓度的 ‘„„ u qs ∗
x qs °ª#pt有利于石斛兰试管苗的生长 o根系发育 ∀
而本实验发现当 ‘„„上升到 u qs °ª#pt时 o根异常
粗壮 o而根长 !生根率 o苗高都呈下降趋势 ∀有报
道≈| 壮苗培养阶段不加 ‘„„ o只用 ‘y n ts h香蕉汁
苗长的更壮 ∀本实验表明 ‘y n ‘„„ s qx °ª#pt n
ts h香蕉汁的 ¢是生根壮苗最适宜培养基 ∀经过生
根壮苗 o待喇叭唇石斛苗长至 x ∗ y ¦°高 o真叶 w ∗ x
枚时 o即可出瓶移栽 ∀
#xtv#
第 u|卷第 w期
ussw年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ w
„³µ¬¯oussw
表 y 不同培养基对喇叭唇石斛苗生根的影响
培养基激素浓
度r°ª#pt
根长
r¦°
根粗
r°°
每株根
数r条
生根

根毛状况 苗况
苗高
r¦° 叶色
≠ ‘y s qx ∗ t qu s qv ∗ s qx w ∗ x us 根毛不明显 细弱 u qx ∗ v qx 浅绿
 ‘y n ‘„„ s qu s qy ∗ t q{ s qx ∗ s q{ w ∗ y ys 根毛不明显 o根棒状 整齐 v qs ∗ v qx 绿
≈ ‘y n ‘„„ s qx t qs ∗ u qx s qx ∗ s q{ x ∗ y {x 根毛不明显 o根棒状 o 整齐 v qs ∗ w qs 绿
根尖成圆球状突起
…‘y n ‘„„ t qs t qx ∗ u q{ s qx ∗ t qs x ∗ y {x 根毛较明显 o不发达 较健壮 v qx ∗ w qx 绿
  ‘y n ‘„„ u qs t qu ∗ u qx t qx ∗ u qs w ∗ y ys 根粗短 o根毛较发达 粗矮 v qs ∗ v qx 绿
¡‘y n ts h香蕉汁 t qx ∗ w qs t qs ∗ t qu y ∗ { |s 根毛明显 o较发达 高大健壮 w qx ∗ y qs 浓绿
¢ ‘y n ‘„„ s qx n ts h香蕉汁 u qs ∗ w qs t qs ∗ t qx y ∗ { tss 根毛发达 o根粗壮 高大健壮 w qx ∗ y qx 浓绿
4 讨论
4 q1 喇叭唇石斛组织培养方案的筛选 培养基的
无机盐浓度常因研究对象不同而出现较大差异 ∀
≥∏°¤± Ž等认为在进行石斛属植物 ∆ . φιµβρατυµ 的
种胚萌发时需用盐分较高的培养基≈ts  ∀如前所述 o
作者在进行喇叭唇石斛种胚萌发时发现 }tru ≥培
养基好于 ≥培养基 o因此认为喇叭唇石斛的种子萌
发不需要较高的无机盐浓度 ∀可见 o不同种石斛种
胚培养时所需的盐分具有一定的差异 ∀另据实验 o
喇叭唇石斛萌发的胚苗在 ‘y上比在 tru ≥上生长
健壮 o说明硝态氮对胚苗生长影响可能大于氨态氮 o
而 tru‘y 上胚苗叶色淡绿不够健壮 o则可能与培养
基无机盐浓度偏低有关 ∀
愈伤组织的分化及形态与植物激素和氮源有
关 o在激素不变的情况下 o增减氨态氮与硝态氮可促
进或抑制细胞的分裂≈tt  ∀喇叭唇石斛的原球茎在
tru ≥上体积较大 o生长旺盛不分化 ~而在 ‘y上体
积小而致密 o并有分化现象 ∀ ≥和 ‘y 在氮源上的
差异显著 o氨态氮与硝态氮比值分别为 t q|tk≥l o
v q||k‘yl ∀因此 o作者认为氮源不同可能导致原球
茎在两种培养基上增殖状况的差异 ∀
经过反复试验 o本试验已经筛选出喇叭唇石斛
组培快速繁殖体系的最佳方案 o即 }以 ‘y 基本培养
基为种胚萌发培养基 otru ≥ n ‘„„ s qx °ª#pt易
于原球茎膨大增殖 o先暗培养 us §再光照培养有利
于胚的萌发及苗的生长 ∀ ‘y n y2…„ t qs °ª#pt n
Œ…„ s qu °ª#pt n u qw2⁄s qx °ª#pt上可诱导出拟原
球茎k°…¶l ∀tru ≥ n ‘„„ s qx °ª#pt适宜原球茎
的增殖 o‘y n y2…„ u qs °ª#pt n ‘„„ s qx °ª#pt n
ts h马铃薯汁适宜于原球茎的分化 o‘y n ‘„„ s qx
°ª#pt n ts h香蕉汁是生根壮苗的最适培养基 ∀
4 q2 叶绿素含量 !可溶性蛋白可作为试管幼苗长势
的检测指标 徐红≈tu 等在研究鼓槌石斛组织培养
时 o认为 „×°可作为反应幼苗发育过程中对营养和
能量需求的动态指标 ∀作者则发现可溶性蛋白及叶
绿素含量的变化和组培苗的苗高 !叶色等生长状况
呈现正相关 ∀因此 o叶绿素含量 !可溶性蛋白可以作
为衡量试管幼苗长势以及筛选培养基的检测指标 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qt|{x qzx q
≈u  丁小余 o徐珞珊 o王峥涛 o等 q齿瓣石斛的位点特异性 °≤• 鉴
别 q药学学报 oussu ovzkttl }{|z q
≈v  丁小余 o王峥涛 o徐 红 o等 q枫斗类石斛 µ⁄‘„ Œ×≥区的全序
列数据库及其序列分析鉴别 q药学学报 oussu ovz kzl }xyz q
≈w  张志良 q植物生理学实验指导 q北京 }高等教育出版社 ot||s q
txw q
≈x  …µ¤§©²µ§ q„ µ¤³¬§¤±§¶¨±¶¬·¬√¨ °¨ ·«²§©²µ·«¨ ∏´¤±·¬·¤·¬²±²©°¬¦µ²2
ªµ¤° ∏´¤±·¬·¬¨¶²©³µ²·¨¬± ∏·¬¯¬½¬±ª·«¨ ³µ¬±¦¬³¯¨²©³µ²·¨¬±2§¼¨ ¥¬±§¬±ªq
Αναλ Βιοχηεµ ,t|zy ozu }uw{ q
≈y  王冬梅 o黄学林 o黄上志 q细胞分裂素类物质在植物组织培养
中的作用机制 q植物生理学通讯 ot||y ovukxl }vzv q
≈z  潘瑞炽 o懂愚得 q植物生理学 q第 v版 q北京 }高等教育出版
社 ot||x qvv q
≈{  刘 骅 o张治国 q铁皮石斛试管苗壮苗培养基的研究 q中国中
药杂志 ot||{ ouvkttl }yxw q
≈|  曾宋君 o程式君 q石斛的试管苗快速繁殖 q中药材 ot||y ot|
ktsl }w|s q
≈ts  Ž∏°¤µ¬¤≥ oפ±§²± ° q„¶¼°¥¬²·¬¦ª¨µ°¬±¤·¬²± ²© ∆ενδροβιυµ φιµβρα2
τυµ √¤µqοχυλατυµ ‹ Žq©q¶¨ §¨¶²± §¬©©¨µ¨±·° §¨¬¤ °µ²¦¨ §¨¬±ª²©·«¨
Œ±§¬¤±q Νατιοναλ Σχιενχε Αχαδεµψot||t oxzkvwl }uzz q
≈tt  李浚明 q植物组织培养教程 q第 u版 q北京 }中国农业大学出版
社 oussu qww q
≈tu  徐 红 o刘 峻 o王峥涛 o等 q鼓槌石斛组织培养研究 q中国中
药杂志 ousst ouykyl }vz{ q
#ytv#
第 u|卷第 w期
ussw年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ w
„³µ¬¯oussw
Στυδιεσ ον τισσυε χυλτυρε οφ ∆ενδροβιυµ λιτυιφλορυµ
≤‹„‘Š ∏±o⁄Œ‘Š ÷¬¤²2¼∏o…„’ ≥«∏2¯¬±ªoŒ˜ ⁄²±ª2¼¤±ªo ‹∞ ¬¤oׄ‘Š ƒ ±¨ªo⁄Œ‘Š …¬±ª2½«²±ª
( Σχηοολ οφ Λιφε Σχιενχε , Νανϕινγ Υνιϖερσιτψ, Νανϕινγ Νορµαλutss|z , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¶¨¯¨ ¦·²³·¬°¤¯ ° §¨¬¤¤±§¦²±§¬·¬²±¶©²µ·«¨ ·¬¶¶∏¨ ¦∏¯·∏µ¨ ²© ∆ενδροβιυµ λιτυιφλορυµ . Μετηοδ : ׫¨ ¥¤¶¬¦
° §¨¬¤o ¬¯ª«·¬¯¯∏°¬±¤·¬²± ¦²±§¬·¬²±o³«¼·²«²µ°²±¨ o¤±§ ±¤·∏µ¤¯ ¤´ ∏¨²∏¶ ¬¨·µ¤¦·¶q º µ¨¨ ·¨¶·¨§¤±§¦²°³¤µ¨§q ׫¨ ¦«¯²µ²³«¼¯¯ ¦²±·¨±·¶¤±§
¶²∏¥¯¨³µ²·¨¬± ¦²±·¨±·¶º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§q Ρεσυλτ : ‘y ° §¨¬∏° º¤¶¶∏¬·¤¥¯¨©²µ °¨¥µ¼² ª¨µ°¬±¤·¬²± ¤±§ªµ²º·«qtru ≥ n ‘„„ s qx °ª#pt
¦²µ§§¥¨ ∏¶¨§¤¶·«¨ ²³·¬°¤¯ ³µ²·²¦²µ° °∏¯·¬³¯¼¬±ª° §¨¬¤q≤∏¯·∏µ¨ us §¤¼¶¬± §¤µ®±¨ ¶¶¬±¤§√¤±¦¨ o¤±§·«¨ ±¬± ¬¯ª«·¬¶∏¶¨©∏¯·² °¨¥µ¼²ª¨µ°¬2
±¤·¨ qtru ≥ n ‘„„ s ∗ s qx °ª#pt¬¶¥¨ ±¨ ©¬¦¬¤¯ ·²³µ²·²¦²µ° °∏¯·¬³¯¬¦¤·¬²± ¤¯µª¨ ¼¯ q‘y n y2…„ u qs °ª#pt n ‘„„ s qx °ª#pt n ts h
³²·¤·²­∏¬¦¨ ¬¶∏¶¨©∏¯ ·² ³µ²·²¦²µ° §¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²±q°«¼·²«²µ°²±¨ ¤±§³²·¤·²­∏¬¦¨ ¤§§¨§·²·«¨ ° §¨¬¤³µ²°²·¨§¦«¯²µ²³«¼¯¯¦²±·¨±·¤±§¶²∏¥¯¨
³µ²·¨¬± ¦²±·¨±·q‘y n ‘„„ s qx °ª#pt n ts h ¥¤±¤±¤­∏¬¦¨ ¬¶·«¨ ¥¨¶·° §¨¬∏°©²µ³¯¤±·¯¨·µ²²·¤ª¨ ¤±§¶·µ¨±ª·«¨ ±¬±ªqΧονχλυσιον : ≤²±¦¨±2
·µ¤·¬²± ²©¬±²µª¤±¬¦¶¤¯·o±¬·µ²ª¨ ± ¶²∏µ¦¨ ¤±§¬¯¯∏°¬±¤·¬²± ¦²±§¬·¬²± ¤µ¨ ¬°³²µ·¤±··² °¨¥µ¼² ª¨µ°¬±¤·¬²± ¤±§ªµ²º·«q׫¨ ±¬·µ²ª¨ ± ¶²∏µ¦¨ ·¼³¨
«¤¶ ©¨©¨¦·²±·«¨ ³µ²·²¦²µ° °∏¯·¬³¯¬¦¤·¬²±q׫¨ ¦«¯²µ²³«¼¯¯¦²±·¨±·¶¤±§¶²∏¥¯¨³µ²·¨¬±¦²±·¨±·¶°¤¼ ¥¨ ¬±§¨¬·²¬±§¬¦¤·¨·«¨ ªµ²º·«¦²±§¬·¬²± ²©
³¯¤±·¯¨·¶oº«¬¦«¦¤± «¨ ³¯·²¶¨¯¨ ¦··«¨ ²³·¬°¤¯ ° §¨¬¤q
[ Κεψ ωορδσ] ∆ενδροβιυµ λιτυιφλορυµ ~·¬¶¶∏¨ ¦∏¯·∏µ¨ ≈责任编辑 王康正 
恩七叶甜 !恩五叶蜜与绞股蓝原变种
成分分析及显著性测验
郑小江
k湖北民族学院 生物科学与技术学院 o湖北 恩施 wwxsssl
≈摘要  目的 }为合理开发利用药食两用植物绞股蓝提供依据 ~方法 }将恩七叶甜 !恩五叶蜜两个新品种与绞
股蓝原变种k苦味l按方差分析要求种植在相同的生态环境中给予相同的田间管理 o同时播种和收获干全草进行成
分分析 ~结果 }u个新品 所含人参总皂苷 !总氨基酸 !维生素 ∞ !维生素 …t !维生素 …u分别高于绞股蓝原变种 vv qv h o
vw qv h ~tt q{ h ow qz h ~zy h owx q{ h ~wy h ozy qt h ~wt qu h oux h o均达到极显著水平 ~总糖分别低于绞股蓝原变种
ty qv h ow qw h ∀结论 }两个新品种不仅各有风味 o适口性好 o而且有效成分含量更高 o应用领域更宽 o市场需求量更
大 o医疗保健效果更好 o更具有工业开发价值 ∀
≈关键词  绞股蓝原变种 ~成分分析
≈中图分类号  ≥ xyz ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvltu2svtz2sw
绞股蓝 Γψνοστεµ µα πενταπηψλλυµ ¤®¬±²为药食
两用植物 o绞股蓝原变种k苦味l是国内外 us世纪 {s
年代至今推广的种植品种 o由于口感差一直未得到
应有的推广应用≈t  ∀恩七叶甜 !恩五叶蜜是湖北民
族学院绞股蓝课题组经过 ts余年选育后通过了国
家种子部门品种审定并要求推广的具有清凉甜和蜂
≈收稿日期  ussu2sy2ux
≈基金项目  湖北省教育厅资助重点科研项目 k|v„sy{l !
ksu„ss{ss|l
≈通讯作者  郑小江 oר¯ }kszt{l{wvsxyw ~∞2°¤¬¯ }¨ ¶«¥°¼½¬­ƒ
tyv q¦²°
蜜甜风味的绞股蓝新品种 o经过成分分析 o它们含的
人参总皂苷和氨基酸 !维生素 ∞等都极显著高于绞
股蓝原变种 o仅总糖含量略低 o干全草总糖含量 tt q
uu h ∗ tu qz h o用途宽 !用量大 o具有工业提取价
值≈u ov  ∀绞股蓝原变种含的苦味总糖口感极苦 o应用
面窄 o用量不大 ∀因此 o两个甜味品种比绞股蓝原变
种综合性状优 o可大量应用于医药 !保健 !化妆品 !
饮食品 !低毒香烟工业和抗变饲料工业中≈w2y  ∀
1 材料与仪器
甜味绞股蓝恩七叶甜 Γ . πενταπηψλλυµ k׫∏±ql
Μακινο χϖ. θιψελιαν 检测号 }÷×st !恩五叶蜜 Γ . πεν2
#ztv#
第 u|卷第 w期
ussw年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ w
„³µ¬¯oussw