全 文 ：#研究论文#
高效液相色谱法测定贯叶金丝桃药材
及无菌苗中金丝桃素的含量
陈美兰 o黄璐琦 o杨 滨 o付梅红 o罗永明
k中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要 目的 }建立贯叶金丝桃药材中金丝桃素含量测定方法 o并对不同产地贯叶金丝桃药材和无菌苗中金
丝桃素的含量进行测定 ∀方法 }样品用甲醇2吡啶k|Βtl超声提取 o液相条件为 ¼³¨µ¶¬¯¼⁄≥u 柱kw qy °° ≅ txs
°° ox Λ°l ~流动相甲醇2t qxy h 磷酸二氢钠缓冲液k用磷酸调 ³ 值为 u qtl2醋酸乙酯kwΒt q|Βtl ~流速 t °#
°¬±p t ~柱温 vx ε ~检测波长 x|s ±° ∀结果 }金丝桃素与杂质分离效果较好 o在 s qsxu w ∗ s quyu s Λª内 o进样量与
峰面积呈线性kρ s q||| {l o加样回收率为 |z qxs h ∀结论 }贯叶金丝药材中金丝桃素含量与药材的遗传因素 !环
境因素 !生长期以及干燥方式有关 o同时该方法可作为贯叶金丝桃药材的质量控制方法 ∀
≈关键词 贯叶金丝桃 ~金丝桃素 ~高效液相色谱法
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusssltt2tstv2sv
贯叶金丝桃 Ηψπεριχυ µ περφορατυ µ q是藤黄
科金丝桃属植物贯叶金丝桃的全草或带根全草 o又
名贯叶连翘 ∀在我国民间用于治疗吐血 !外伤出血 !
月经不调 !无名肿毒≈t ∀近年来 o药理实验表明其
具有抗抑郁≈u o抗病毒≈v 等作用 o而成为全球研究
的热点之一 ∀其有效成分之一为天然二蒽酮类物质
金丝桃素k«³¨µ¬¦¬±l o而不同产地样品中金丝桃素的
含量相差较大 ∀本文采用 °≤ 方法测定不同产
地贯叶金丝桃药材和无菌苗中金丝桃素的含量 o为
今后贯叶金丝桃药材质量标准提供指导 ∀
1 实验药品和仪器
1 q1 试剂及药材 贯叶金丝桃 Η . περφορατυ µ 药
材和种子分别于 { ∗ ts月采自湖北神龙架 !湖北恩
施 !陕西略阳 !陕西宁陕 !贵州贵阳 o并经黄璐琦研究
员鉴定 ∀金丝桃素对照品 kƒ ∏¯®¤公司 o纯度
|x h l甲醇k优级纯l o磷酸二氢钠k分析纯l o醋酸乙
酯k分析纯l o磷酸k分析纯l ∀
1 q2 仪器 ±2tss⁄∞型医用数控超声仪k昆山市
超声仪器有限公司l o• ¤·¨µyss泵 o• ¤·¨µ¶yss ≤²±2
·µ²¯¯¨ µo • ¤·¨µ¶ ||y °⁄ 检测器 ! • ¤·¨µ¶ ¬¯¯ ±¨
≈收稿日期 ussu2tu2t{
≈通讯作者 黄璐琦 ר¯ }kstslywstwwtt2u|xx ∞2°¤¬¯}
«∏¤±ª¯∏´¬ uyv q±¨ ·
±¬∏°vu工作站 ∀
2 色谱条件
色谱柱 } ¼³¨µ¶¬¯¼ ⁄≥ukw qy °° ≅ txs °° ox
Λ°l ouxƒ2≤ 进样器 ~流动相甲醇2t qxy h磷酸二氢
钠缓冲液k用磷酸调³值为u qtl2醋酸乙酯kwΒ
t q|tl ~流速 t °#°¬±p t o柱温 vx ε o检测波长 x|s
±° ∀
在本色谱条件下金丝桃素的保留时间为 t| qzy
°¬±o峰形较好 o无其他成分干扰 o见图 t ∀
图 t 金丝桃素对照品kl及药材k
l的高效液相色谱图
¤q金丝桃素的吸收峰
3 溶液的制备
3 q1 对照品溶液的制备 准确称取适量的金丝桃
素对照品 o用甲醇2吡啶k|Βtl定容于 ts °的容量
瓶中 o配成浓度为 s qstvt °ª#°p t的对照品溶液 ∀
3 q2 供试品溶液的制备 准确称取干燥的贯叶金
丝桃药材粉末k过 ys目筛l约 s qv ªo置于 ux °容
量瓶中 o加入甲醇2吡啶k|Βtl溶剂 us °o超声提取
t «o再用甲醇2吡啶k|Βtl溶剂定容至 ux °o摇匀 o
#vtst#
第 u{卷第 tt期
ussv年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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放置 t «后 o过 s qwx Λ° 的微孔滤膜 o作为供试溶
液 ∀
3 q3 线性关系考察 对照品溶液过 s qwx Λ°的微
孔滤膜 o分别进样 w o{ ots otu oty ous Λo测定峰面
积 o以峰面积k Ψ)为纵坐标 ,以对应的金丝桃素的质
量( Ξl为横坐标 o绘制标准曲线 o回归方程为 }Ψ
u s{{ ut| q{{÷ p y x{u oρ s q||| { ∀线性范围
为 s qsxu w ∗ s quyu s Λª∀
3 q4 稳定性实验 精密吸取供试品溶液 us Λo每
隔 s qx «进样 o连续测定 w «o结果表明在 w «内峰面
积基本稳定 ∀
3 q5 精密度与重现性试验 精密吸取对照品溶液
us Λo连续进样 x次 o测得峰面积的 ≥⁄为 t quw h
k ν xl ∀按供试品溶液制备方法处理同一批样品
k湖北恩施花期样品lx份 o精密吸取溶液 ts Λ进
样测定 o金丝桃素平均含量为s qtw|{ h o ≥⁄为
t qzx h ∀
3 q6 加样回收率试验 准确称取已知含量的陕西
宁陕花前期样品 x份 o每份约 s qt °ªo分别加入对
照品k对照品溶液浓度为 s qstv y ª#ptlu °o按
供试品溶液制备的方法制备 ∀计算加样回收率结果
见表 t ∀
表 t 金丝桃素加样回收率实验结果
样品中
含量r°ª
回收率
r h
ξ
r h
≥⁄
r h
s qsvz | s qsyw t |y qvu
s qsvs z s qsxz x |{ qxv
s qsvw t s qsys { |{ qty |z qxs
s qsvw w s qsys x |x q|y
s qsvz z s qsyw x |{ qxv
注 }加入量均为 s qsuz u °ª
3 q7 样品的测定 称取不同产地的药材 o按供试品
溶液制备方法制备 o测定 o结果见表 u ∀
表 u 不同产地药材中金丝桃素的含量 h
产地 生长期 金丝桃素含量
湖北恩施 花期 s qtxs
湖北神龙架 花期 s qtw{
贵州贵阳 果期 s qs{u
陕西略阳 果期 s qsxt
陕西宁陕 花前期 s qsvw
3 q8 无菌苗的测定 采用 °⁄中遗传距离最远
k °⁄实验结果将另文报道l的两个样品进行无菌
苗实验 ∀无菌苗采用种子在 ≥基本培养基上培养
w个月获得 o按供试品溶液制备方法制备 o测定 o结
果无菌苗中金丝桃素含量湖北恩施 s qstx s h ~陕西
宁陕为 s qstu s h ∀
4 讨论
4 q1 不同提取溶剂的比较
本实验分别采用甲醇 !乙醇 !碱性甲醇 !碱性乙
醇 !甲醇2吡啶k|Βtl溶剂提取 o结果表明采用甲醇2
吡啶k|Βtl提取金丝桃素效果最好 ~采用碱性甲醇和
碱性乙醇 o贯叶金丝桃药材中其他二蒽酮类化合物
不稳定而转化为金丝桃素造成药材中金丝桃素含量
偏高 o与文献的报道结果≈w 一致 ∀
4 q2 结果
不同产地贯叶金丝桃药材中金丝桃素的含量差
异较大 ∀贯叶金丝桃药材中金丝桃素的含量受基因
型≈x !环境因素≈x !生长期≈y 和干燥方法≈z 等多种
因素的影响 ∀本实验开花期样品中金丝桃素的含量
比文献报道≈{ 的高 o可能是由于本实验样品采用硅
胶快速干燥的结果 ∀
本实验样品中湖北恩施与陕西宁陕地区样品中
金丝桃素含量相差最大 o虽然这种差异与植物的生
长期k不同生长期样品之间最大相差近 v倍l有关 o
但 °⁄实验湖北恩施样品和陕西宁陕样品之间
遗传距离最大的结果与贯叶金丝桃无菌苗中金丝桃
素含量测定的结果预示着金丝桃素的含量与贯叶金
丝桃样品的遗传基因之间存在一定的相关性 ∀
≈参考文献
≈t 江苏新医学院 q中药大辞典 q上册 q上海 }科学技术出版社 o
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≈w 候团章 o曾建国 o张 胜 q贯叶金丝桃不同溶媒提取物质量研
究 q国外医学#植物药分册 ousss otxkwl }txt q
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≈y 郭 玫 o董晓萍 o郭 力 o等 q贯叶连翘及同属植物的总金丝桃
素含量 q中药材 ot||| ouuktsl }w|z q
≈z 刘一兵 q贯叶金丝桃研究进展 ) ) ) 原植物 !采收 !制剂和化学
成分 q国外医药#植物药分册 ot||{ otvkvl }|| q
≈{ 曾建国 o张 胜 o陈玉秀 q°≤ 法分析贯叶连翘不同部位中
金丝桃素的含量 q西北药学杂志 ousss otxkwl }tx{ q
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第 u{卷第 tt期
ussv年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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∆ετερµινινγ τηε Θυαντιτψ οφ Ηψπεριχιν ιν Μεδιχιναλ Ματεριαλσ ανδ
Ασεπσισ Σεεδινγσ οφ Ηψπεριχυµ περφορατυµ βψ ΗΠΛΧ
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[ κεψ ωορδσ] Ηψπεριχυ µ περφορατυ µ ~«¼³¨µ¬¦¬± ~¤¶¨³¶¬¶¶¨ §¨¬±ª¶~«¬ª« ©¨©¬¦¬¨±¦¼ ¬¯´∏¬§¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼
≈责任编辑 袁桂京
天南星中草酸钙针晶形态炮制前后变化比较
赫 炎 o冯雪峰 o孙 洁 o王祝举
k中国中医研究院中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要 目的 }提供天南星样的刺激作用是由其草酸钙针晶尖端所至的实验证据 ∀方法 }从炮制前后及加工
过程的动态变化 o对天南星中草酸钙针晶的显微及超微改变进行了定性定量观察 o并结合同批样品刺激反应的时
效及量效数据的定量分析为南星的刺激物质的确定提供相关证据 ∀结果与结论 }毛须针晶不同含量的天南星具有
不同刺激作用 ∀天南星中草酸钙针晶尖端变化率与兔眼结膜刺激反应呈量效关系kρ s q||xl ~与矾水浸泡时间呈
时效关系kρ s q||vl ∀
≈关键词 天南星 ~草酸钙针晶
≈中图分类号 u{v qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvltt2tstx2sw
天南星生品有毒 o传统列为毒性中药 ∀为确保
临床用药安全 o5中国药典6规定内服0一般炮制后
用0 ∀t|uw年 o5≥¦¬¨±¦¨6曾报道一些植物中的草酸
钙针晶具有刺激作用 o并阐明了其作用机制≈t ∀
t|{w年日本学者≈u ov 又从针晶的超微结构证实了针
晶的尖端k¥¤µ¥¶l的刺激性 ∀南星生品含有大量草酸
钙针晶 ∀南星样的刺激作用是否由草酸钙针晶尖端
≈收稿日期 ussu2tu2t{
≈通讯作者 赫炎 ר¯ }kstslywsvvvst
所至 o从应用上是急待确认的课题 ∀目前南星毒性
的公认检测指标是口尝有无刺舌 !喉感k麻辣感l ∀
由于人的个体差异 o在0微麻与无麻0 !0微麻与麻0
之间存有一定的灰色性 o作为炮制程度的指标 o口
尝一直受到怀疑 ∀也尚需科学实验数据给予证实 ∀
因此确认刺激物质基础 o进而合理地指导口尝标准
和建立定量的炮制程度指标 o在此基础上 o指导工艺
和饮片质量研究是天南星质控研究首要任务之一 ∀
我们从炮制前后及加工过程的动态变化 o对南星中
草酸钙针晶的显微及超微改变进行了定性和定量观
#xtst#
第 u{卷第 tt期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ tt
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