全 文 ：Μεασυρεµεντ οφ Βαιχαλιν Χοντεντσ βψ ΗΠΛΧ
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ¦²°³¤µ¨ ·«¨ ¦²±·¨±·¶²©¥¤¬¦¤¯¬±¬±·«¨ µ¤º ° §¨¬¦¤¯ °¤·¨µ¬¤¯ ¤±§·«¨ §¬©©¨ µ¨±·³µ¨³¤µ¨§ ° §¨¬¦¤¯ °¤·¨2
µ¬¤¯¶²© Σχυτελλαρια βαιχαλενσισq Μετηοδ : × «¨ ¦²±·¨±·¶²© ¥¤¬¦¤¯¬± º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ °≤ q ≤«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦¦²±§¬·¬²±¶¬±¦¯∏§¨ §
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¬±ª ° ·¨«²§¶¦¤± ¥¨ ∏¶¨§·²·«¨ µ¤º °¤·¨µ¬¤¯ ²© Σ . βαιχαλενσισ q
[ Κεψ ωορδσ] °≤ ~¥¤¬¦¤¯¬± ~ Σχυτελλαρια βαιχαλενσισ
≈责任编辑 刘
°≤ 法测定酸枣仁不同炮制品中
两种黄酮碳苷的含量
李会军 o李 萍
k中国药科大学 生药学教研室 o江苏 南京 utssv{l
≈摘要 目的 }用高效液相色谱法测定酸枣仁中 u种黄酮碳苷成分 ¶³¬±²¶¬± ktl及 y2©¨ µ∏¯²¶¼¯¶³¬±²¶¬±kul ∀方
法 }采用 ¯¯¶³¨ µ¨ ⁄≥2u色谱柱 o流动相采用梯度洗脱 o相为乙腈2水2冰乙酸kusΒz{Βul o
相为甲醇 o流速为 t °
#°¬±p t o检测波长为 vvx ±° o内标校正因子法定量 ∀结果 }u种黄酮碳苷在 s qst ∗ s qsz °ª#°p t呈良好线性关系 o
平均回收率分别为 |{ q{ h o|z qy h o ≥⁄分别为 t qy h ot qu h ∀结论 }方法准确 o快速 o重现性好 o可用于酸枣仁
药材不同产地及各种炮制品的品质评价 ∀
≈关键词 酸枣仁 ~黄酮碳苷 ~¶³¬±²¶¬±~y2©¨µ∏¯²¶¼¯¶³¬±²¶¬±~高效液相色谱
≈中图分类号 u{v qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusswlsw2svws2sv
酸枣仁为鼠李科植物酸枣 Ζιζιπηυσϕυϕυβα √¤µq
σπινοσαk
∏±ª¨ l ∏ ·¨ qƒ q≤«²∏的干燥成熟种子 o
具有补肝宁心 !敛汗生津的功效≈t o是较为常用的镇
静催眠中药 ∀文献报道 o酸枣仁中的有效成分为皂
≈收稿日期 usst2sy2tx
≈通讯作者 李 萍 电话 }ksuxlxvuuuxy 传真 }ksuxl
xvuuww{ ∞2°¤¬¯}¯¬³¬±ª¯¬ ³∏¥¯¬¦q³··q¶q¦±
苷类≈u 和黄酮类≈v ∀对酸枣仁的定量分析 o迄今文
献报道均以皂苷类成分为主≈w ox o而对黄酮类的分
析研究却未见相关报道 ∀为综合评价酸枣仁药材质
量 o我们建立了以橙皮苷kvl为内标 o用 °≤ 法检
测酸枣仁中 u种黄酮碳苷类成分 ¶³¬±²¶¬± ktl及 y2
©¨ µ∏¯²¶¼¯¶³¬±²¶¬±kul的含量测定方法 o并对 z个产地
不同炮制品进行了定量分析 ∀
1 仪器与试药
#syu#
第 uz卷第 w期
ussu年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qw
³µqoussu
°ttss型高效液相色谱系统 }tvtu 二元
泵 otvtx光电二极管阵列检测器 o° ≤«¨ ° ≥·¤2
·¬²±色谱数据工作站 ∀对照品 ¶³¬±²¶¬±及 y2©¨ µ∏¯²2
¶¼¯¶³¬±²¶¬±为自制 o光谱k ≥ ot 2 otv ≤2 l
鉴定结构 o纯度 ∴|| qs h ~橙皮苷k批号 szut2|xsy o
购自中国药品生物制品检定所l ~甲醇k淮阴化学试
剂厂l !乙腈k美国 ƒ¬¶«¨µ化学试剂厂l为色谱纯 ~各
地生 !炒酸枣仁药材样品均购自当地药材公司 o并经
作者鉴定 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件
色谱柱 ¯¯¶³¨ µ¨ ⁄≥2u ≤t{kw qy °° ≅ uxs °° o
x Λ°l o预柱 °¨¯ ¬¯¦∏¯¤µ≤t{kw qy °° ≅ z qx °° ox
Λ°l ~流动相采用梯度洗脱 o 相为乙腈2水2冰醋酸
kusΒz{Βul o
相为甲醇 o起始流动相为 s h
o至 {
°¬±起线性递增至 tw °¬±为 tu h
o维持至 us °¬±
后 o再线性递增至 ux °¬±为 tss h
o维持至 vs
°¬±结束 ~流速 t qs °#°¬±p t ~检测波长 vvx ±° o参
比波长 wss ±° ~灵敏度 s qsu ƒ≥ ~柱温 ux ε ~理论
塔板数不小于 w sss ∀
对照品及样品色谱图见图 t ∀
图 t 高效液相色谱分离图
q对照品
q酸枣仁k生l ≤ q酸枣仁k炒l
t q¶³¬±²¶¬± u qy2©¨ µ∏¯²¶¼¯¶³¬±²¶¬± v q橙皮苷k内标物l
2 q2 线性关系考察
对照品溶液的配制 }精密称取 t ou对照品 o用甲
醇溶解分别配制成 s qtw{w os qttvu °ª#°p t的混合
对照品溶液 ∀
内标物溶液的配制 }精密称取 v对照品用甲醇
溶解制成 s qwzzy °ª#°p t的内标物溶液 ∀
分别精密吸取上述对照品溶液s qx ot qs ot qx o
u qs ou qx °至 x °容量瓶中 o再依次加入内标物
溶液 t qs ° o混匀 o甲醇稀释至刻度 ∀在上述色谱
条件下 o将以上各梯度浓度的对照品溶液准确进样
us Λo以不同浓度时 t ou峰面积积分值与 v峰面积
积分值之比k Ασ/ Αι)对 t ,u的浓度( Χιl进行线性回
归 o得回归方程及线性范围分别为 t }Ψ | .ttxw Ξ
p s .szyz , ρ s .|||y , s .stw{w ∗ s .szwu °ª#
°p t~u }Ψ | .wzvw Ξ p s .sxw{ , ρ s q|||| o
s qsttvu ∗ s qsxyy °ª#°p t ∀
2 q3 精密度试验
取 2 q2 项下含内标物的混合对照品溶液 o重复
进样 x次 o计算 t ou峰面积积分值与 v峰面积积分
值之比 o结果 ≥⁄分别为 t qs h os qz h ∀
2 q4 提取时间的考察
精密称取酸枣仁细粉k过 ws目筛lx份 o每份约
xª o置索氏提取器中用乙醚回流脱脂 w «o弃去乙醚
液 o药渣挥尽醚液后 o用甲醇分别回流提取 w oy o{ o
ts otu otw oty «∀含量测定结果表明回流提取 tu «
为宜 ∀
2 q5 重复性试验
取同一产地药材样品 o按 2 q2 项下操作依法制
备 x份 o测定 t ou峰面积并计算含量 o结果 ≥⁄分别
为 v qx h ou qz h ∀
2 q6 稳定性试验
取供试品溶液在 s os qx ot ou ow和 { «分别测定 o
记录 t ou峰面积 o结果峰面积 ≥⁄分别为 t qu h和
t qx h o表明供试品溶液稳定 ∀
2 q7 加样回收率试验
精密称取已知含量的酸枣仁药粉 u qx ª o分别
加入 t ou对照品约 y ou °ª o按 2 q2 项下操作 o制备 x
份 o测定含量 o计算回收率 ∀结果为t }|{ q{ h ou }
|z qy h o ≥⁄分别为 u q| h ou qw h ∀
2 q8 最低检测限测定
取混合对照品溶液 o用甲醇依次稀释制成一系
列由高到低的梯度浓度溶液 o在上述色谱条件下分
#tyu#
第 uz卷第 w期
ussu年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qw
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别进样 o取峰面积为噪音 v倍时的浓度为最低检测
浓度 o由进样量usΛ得出最低检测限 ∀结果t }
s qsv Λªou }s qsx Λª∀
2 q9 样品含量测定
校正因子的测定 }取系列梯度浓度中某一浓度
的混合对照品溶液 o重复进样 x次 o测定 t ou及内标
物峰面积积分值 o以下式计算校正因子 φ :
φ φι/ φσ µ ι/ µ σ# Ασ/ Αι
结果测得 t ou的平均校正因子分别为 s qxw{{ o
s qvx{s ∀
样品含量测定 }精密称取酸枣仁细粉k过 ws目
筛l约 x ª o置索氏提取器中用乙醚回流脱脂 w «o弃
去乙醚液 o药渣挥尽醚液 o甲醇回流提取 tu «o甲醇
液转移至 xs °容量瓶中 o甲醇定容至刻度 o过滤 o
取续滤液 u °至 x °容量瓶中 o加入 t qs °内
标物溶液 o混匀 o甲醇定容至刻度 o作为供试品溶液 o
临测定前用微孔滤膜过滤 ∀
取供试品溶液 o在上述色谱条件下进样 o测定 o
每个样品重复 v次 o取平均值 ∀按校正因子法测定
含量 o结果见表 t ∀
3 讨论
本试验曾比较了不同系统和比例的流动相 o结
果表明以 相k乙腈2水2冰醋酸l和
相k甲醇l作梯
度洗脱 t ou与其最近的杂质峰得到基线分离 o且样
品分离与柱平衡 t次完成 o缩短了分析时间 ∀
在选定条件下 o橙皮苷保留时间合适 o与样品中
各峰有良好分离 o故选作内标物 ∀
在 t|s ∗ {|s ±° 对色谱峰进行扫描 o发现 t ou
在 vvx ±°处有最大吸收 o而在 wss ±°处 t ou ov均
无吸收 o故选择检测波长 vvx ±° o参比波长 wss ±° ∀
表 t 生 !炒酸枣仁中 ≥³¬±²¶¬±oy2©¨ µ∏¯²¶¼¯¶³¬±²¶¬±
的含量测定结果k ν vl °ª#ªp t
产地 日期
酸枣仁k生l
t u 总量
酸枣仁k炒l
t u 总量
河北安国 t||{2sz v quw t qv| w qyv w qst t q{y x q{z
河北邢台 t||{2sz u qwy t qus v qyy v qxz t qzx x qvu
河北石家庄 t||{2s{ u qzx t qs| v q{w v qt{ t quw w qwu
山东济南 t|||2su t qtt s qzt t q{u t qvz t qv{ u qzx
山东泰安 t|||2sx v qs| t qyx w qzw v qy{ u qvt x q||
山东枣庄 t|||2sx t qwy s qyz u qtv t qyv t qs| u qzu
山东临沂 t|||2sx v qwu t qwv w q{x v qx{ t qxz x qtx
采用内标校正因子法进行定量分析 o可以减少
因仪器波动而产生的系统误差 o提高分析精度 ∀实
验中不需每个试样都做校正因子 o一般 t个新做的
校正值可使用于几个样品的计算 o甚至在同一天内
只使用 t个校正值也是可行的 ∀
酸枣仁中黄酮类成分均为芹菜素型黄酮碳苷类
化合物 o以¶³¬±²¶¬±及 y2©¨ µ∏¯²¶¼¯¶³¬±²¶¬±含量较高 o
且各样品中炒品均高于生品 o其原因可能与炒制后
失水或脂肪油而致相对含量升高及鼓胀 !爆裂后内
含物更易提出有关 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qt||x qvuu q
≈u • ¤·¤±¤¥§o≥¤¬·² oפ®¤ª¬o ·¨¤¯ q°«¤µ°¤¦²¯²ª¬¦¤¯ ≥·∏§¬¨¶²©
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≈w 王 健 o林 晓 q酸枣仁中酸枣仁皂苷 和
的含量测定 q中草
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≈x 李会军 o李 萍 q高效液相法蒸发光散射检测器测定酸枣仁中
酸枣仁皂苷 及
的含量 q药物分析杂志 ousss ouskul }{u q
≈责任编辑 刘
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≈责任编辑 方文贤
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