全 文 ：Τηε Εφφεχτ οφ Σινοµενινε ον Χψχλοοξψγενασε Αχτιϖιτψ ανδ
τηε Εξπρεσσιον οφ ΧΟΞ2t ανδ ΧΟΞ2u µ Ρ ΝΑ ιν Ηυµ αν Περιπηεραλ Μονοχψτεσ
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Μετηοδ :  ²±²±∏¦¯ ¤¨µ¯ ∏¨®²¦¼·¨¶ º µ¨¨ ²¥·¤¬±¨ §©µ²° «¨ ¤¯·«¼ ¤§∏¯·¶qŒ¶²¯¤·¨§ °²±²±∏¦¯ ¤¨µ¯¨ ∏¦²¦¼·¨¶©µ²° «∏°¤± ³¨µ¬³«¨µ¤¯ ¥¯²²§
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[ Κεψ ωορδσ] ¶¬±²° ±¨¬±¨ ~°… ≤ ~°Š∞u ~ ≤ ’ ÷2t ~≤ ’ ÷2u ~ • ×2°≤ • ≈责任编辑 方文贤 
益肾活血方对家兔血瘀模型 °选择素表达及
对氧自由基清除作用的实验研究
詹小萍t o方 青u o楼建国t o徐锡鸿v o金晓莹t o秦光明t o鲍 军t
kt q浙江大学 医学院 附属二院 o浙江 杭州 vtsss| ~
u q浙江大学 医学院 附属邵逸夫医院 o浙江 杭州 vtssty ~v q浙江中医研究院 o浙江 杭州 vsstyvl
≈摘要  目的 }评价益肾活血方对家兔血瘀模型 ° 选择素表达的影响以及清除氧自由基的作用 ∀方法 }兔 vs
只 o随机分为健康组 !血瘀模型组 !益肾活血方大剂量组和小剂量组 !血栓心脉宁组 o各组相应处理后分别取静脉血
检测 °选择素kŠ  °2twsl o红细胞超氧化物歧化酶k∞2≥’⁄l o红细胞过氧化脂质k∞2°’l o血浆过氧化脂质k°2
°’l ∀结果 } Š  °2tws o∞2≥’⁄o∞2°’ o°2°’ o健康组与血瘀模型组比 Π s qst o血瘀模型组与益肾活血方大 !
小剂量组比 Π s qst o与血栓心脉宁组比 Π s qsx ~益肾活血方大 !小剂量组与血栓心脉宁组比 Π s qsx ~益肾活
血方大剂量组与小剂量组比 Ё s qsx ∀结论 }造模成功 o益肾活血方大 !小剂量组及血栓心脉宁组均有抑制对家兔
血瘀模型 ° 选择素表达 o增加 ≥’⁄活性 o降低 °’ 含量的作用 ∀益肾活血方大 !小剂量组均优于血栓心脉宁组 ∀
≈关键词  益肾活血方 ~血瘀模型 ~° 选择素 ~氧自由基
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvlsw2svxx2sw
≈收稿日期  ussu2tu2ty
≈基金项目  浙江省中医管理立项课题k|ysvyl
≈通讯作者  ר¯ }ksxztl{zz{vzzw ∞2°¤¬¯}ª∏² «¤± «¨ ±ªƒ tyv q
¦²°
根据中医学的整体观念和 / 心之合脉 o其荣色
也 o其主肾也0的理论 o近来国内中西医结合学者应
用不同的益肾活血中药复方有效地治疗血栓性疾病
的研究报告屡见不鲜≈t ou  ∀观察益肾活血的中药复
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第 u{卷第 w期
ussv年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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方对血栓性疾病机理影响的研究尚不多见 o但是这
种类型的研究可提供基于整体观念的中医瘀血理论
的最直接的药效学证据 o具有非常重要的意义 ∀ °选
择素kŠ  °2twsl 是目前所知反映血小板活化与释放
反应最特异的标志物≈v  o在血栓形成过程中起着始
动作用≈w  o氧自由基等刺激血小板颗粒及内皮细胞
导致 Š  °2tws 转移到细胞表面表达是血栓形成的
潜在危险因素≈x  ∀本课题选用 Š  °2tws 含量 o红细
胞超氧化物歧化酶k∞2≥’⁄l 活性 o红细胞过氧化脂
质k∞2°’l 含量与血浆过氧化脂质k°2°’l 含量 o
以研究益肾活血方抑制血栓始动因子 !清除氧自由
基的作用 o旨在评价益肾活血方治疗血栓性疾病的
作用以及探讨其影响血栓形成的机制 o为中医药治
疗血栓性疾病提供整体防治的依据 ∀
1 材料
1 q1 动物 短毛兔 vs 只 o体重ku qw ? s qul ®ªo雌雄
各半 ∀由浙江中医研究院动物中心提供 ∀
1 q2 药物 益肾活血方 }炮附块 x ªo仙灵脾 ts ªo制
黄精 us ªo熟地 ts ªo山萸肉 ts ªo枸杞子 ts ªo黄芪
us ªo当归 ts ªo麦门冬 us ªo炙桂枝 x ªo川芎 tx ªo
赤芍 tx ªo没药 x ªo乳香 x ªo地龙 tx ªo水蛭 x ª∀上
药由杭州市上城区中药制药中心提供 o用 xss °水
煎后浓缩成 tss °∀血栓心脉宁片系吉林华康药业
公司生产 o主要成分川芎 !丹参 !水蛭 !麝香 !牛黄 !蟾
酥等 ∀
1 q3 试剂 Š  °2tws 药盒由上海太阳公司提供 o
≥’⁄与 °’ 药盒由南京建成生物工程所提供 ∀
2 方法
2 q1 造模方法 高分子右旋糖酐 u ª#®ªp t o兔脑粉
vs °ª#®ªp t o用双蒸水化为含兔脑粉的 ts h 高分子
右旋糖酐k分子量为 xs l o兔耳静脉推注 o在 x °¬±内
推完 o在造模完毕 u «后即进行采血送检≈y  ∀
2 q2 动物分组 vs 只短毛兔随机分为 x 组 o每组 y
只 o雌雄各半 ∀健康组 o血瘀模型组k以下简称模型
组l o模型加用大剂量益肾活血方煎剂组k以下简称
大剂量组l o模型加用小剂量益肾活血方煎剂组k以
下简称小剂量组l o模型加用血栓心脉宁组k以下简
称血栓宁组l ∀
2 q3 投药方法 大剂量组用益肾活血方煎剂 o每
tss °含生药量 t{s ªo换算成兔常用量为 tu qyz ª#
§p t o按 v 倍用药量用药 o每天 ut °k每次喂 ts qx
° ot 日 u 次 o每天 v{ ª生药 ∀l o连续用药 tx §~小
剂量组用益肾活血方煎剂 o每 tss °含生药 t{s ªo
换算为兔常用量 tu qyz ª#§p t o用生理盐水化为 z °
k每次喂药 v qx °ot日 u次 ol o连续用药 tx §~血栓
宁组用血栓心脉宁胶囊 o每粒含生药 s qx ªo换算成
兔常用量为 s q{wx ª#§p t o将每天用药量用生理盐水
化成 ts °ok每次喂药 x °ot 日 u 次l o连续用药
tx §∀
2 q4 检测方法 Š  °2tws 用酶联吸附双抗体夹心
法 o≥’⁄采用邻苯三酚自氧化抑制法 o°’ 采用硫
代巴比妥酸反应物比色分析法 ∀
2 q5 统计学处理 数据用均值 ? 标准差表示 ∀组
间比较采用 τ检验 ∀
3 结果
各组 Š  °2tws o ∞2≥’⁄o∞2°’ o°2°’ 指标测
定结果见表 t ∀ Š  °2tws o∞2≥’⁄o∞2°’ o°2°’ 健
康组与模型组比有非常显著差异 Π  s qst ~模型组
与大 !小剂量组比有非常显著差异 Π s qst ~与血栓
宁组比有显著差异 Π s qsx ~血栓宁组与大 !小剂量
组比有显著差异 Π s qsx ~大剂量组与小剂量组比
无差异 Ё s qsx ∀
表 t 各组 Š  °2tws o∞2≥’⁄o∞2°’ o°2°’ 测定结果k ξ ? σ, ν € yl
组别 Š  °2twsrΛª#p t ∞2≥’⁄r˜#ªp t ∞2°’r±°²¯#ªp t °2°’rΛ°²¯#p t
健康组 v qws ? s qxyul u |zs qwy ? vu| qzyul uv qxy ? w qs|ul z qvx ? s q{xul
模型组 { qyt ? s q|t u tvv qwz ? tv{ q|v vw qsx ? u qwz ts qvz ? s qy{
大剂量组 x qut ? s qysu qwl u zsy qz{ ? uwu qzwu qvl uv qxt ? w qzt t qvl z q{{ ? s qyxu qvl
小剂量组 z qyx ? s qx|t qvl u y|| q|t ? uv| qs|u ovl uv qzv ? w qvt u ovl z q|u ? s qyzu ovl
血栓宁组 z qyx ? s qx|tl u ws{ qss ? tz{ qzstl u| q|u ? u q|stl { q{z ? s q{{tl
注 }与模型组比 tl Π s .sx u) Π s .st 大 !小剂量组与血栓宁组比 v) Π s .sx w) Π s qst
4 讨论
本文研究结果证实益肾活血方大 !小剂量组及
血栓心脉宁组对家兔血瘀模型均有抑制 ° 选择素表
达 !增加 ≥’⁄活性 !降低 °’ 含量的作用 ∀令人产
生兴趣的是益肾活血方大 !小剂量组均优于血栓心
脉宁组 ∀ 5素问#五脏生长篇6曰 }0心之合脉 o其荣色
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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也 o其主肾也 ∀0 这说明心主血脉的功能 o很大程度
上取决于肾之精气是否充盈 ∀肾气不足导致心气亏
虚 o推动无力则血液运行迟缓而瘀滞 ∀根据中医学
理论 o按照/以药探理0的思路可以认为肾虚是血瘀
的一种病因 ∀同时也阐明了/心0 !/肾0之间的生理
病理的有机联系 ∀
Š  °2tws 是细胞粘附分子中选择素家族的一
员 oŠ  °2tws 正常贮存在静止血小板颗粒及内皮细
胞 º ¬¨¥¨ 2¯³¤¯¤§¨ 小体中 o当被炎性介质如组胺 !凝血
酶 !氧自由基等刺激后 o随着脱颗粒释放作用 o颗粒
膜与细胞膜发生融膜作用 o导致 Š  °2tws 快速转位
到细胞表面进行表达≈x  o其数值反映体内血小板 !内
皮细胞的活化程度 o以及血栓形成或血栓前状态≈z  o
Š  °2tws 含量模型组比大 !小剂量组及血栓宁组
高 o而血栓宁组又高于大 !小剂量组 o这可能与益肾
活血方及血栓心脉宁能稳定血小板颗粒膜避免与细
胞膜发生融膜 o稳定内皮细胞 o阻止 Š  °2tws 转位
到细胞表面进行表达有关 ∀
°’ 是生物膜中多不饱和脂肪酸受氧自由基攻
击而产生 o具有很强的生物毒性 o其含量反映了脂质
过氧化程度并间接反映氧自由基的量 o≥’⁄是抗氧
化体系中的重要金属酶 o它有效清除氧自由基 o使过
氧化脂质物处于动态平衡 o它的改变或变化对机体
起着重要生理和病理的调控作用≈{  ∀ ∞2≥’⁄活性
大 !小剂量组高于血栓宁组 o血栓宁组高于模型组 ~
∞2°’ 含量模型组高于血栓宁组 o血栓宁组又高于
大 !小剂量组 ∀说明急性血瘀时存在 ≥’⁄活性下
降 o使 °’ 生成增多 o体内过氧化脂质含量升高 o升
高的过氧化脂质可抑制动脉壁前列环素k°ŠŒul 合
成酶活性 o使 °ŠŒu合成减少 o促使血栓素 „uk× ÷ „ul
生成 o× ÷ „u与 °ŠŒu的比例失调 o可促进血小板聚集
增强 ~氧自由基损伤血小板及红细胞膜促表面负荷
减少 o致细胞流动性减慢易积聚进而加重血瘀≈|  o益
肾活血方及血栓心脉宁均能提高 ≥’⁄活性 o清除氧
自由基 o通过此环节抑制血瘀形成 ∀
益肾活血方抑制 ° 选择素表达 o清除氧自由基
作用优胜于血栓心脉宁的机理 o有待今后进一步研
究 ∀
≈参考文献 
≈t  丘瑞香 o刘红健 o冯 君 o等 q补肾通脉法在治疗更年期冠心病
中的应用 q中医杂志 ousss owtk{l }xsz q
≈u  李海山 o李金斗 o赵学恩 o等 q补肾活血化痰汤治疗脑梗塞 {s
例 q实用中医药杂志 ousss otykul }ut q
≈v  •¬±§¨µ‹  o≥±¼§¨µ∞¯o…¦±¤± o ·¨¤¯ q „¦·¬√¤·¬²±¬± ≥·²µ¨§
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≈y  陈小野 o艾景录 o吕爱平 o等 q实用中医证侯动物模型学 q北
京 }中国医科大学与中国协和医科大学出版社 ot||v q
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≈{  丁克祥 o张凤翔 o邓长生 o等 q≥’⁄临床研究集 q北京 }原子能
出版社 ot||u q
≈|  刘 华 o洪允祥 o周君富 o等 q颠倒补阳还五汤治疗血液高粘滞
综合症临床研究 q中西医结合实用临床急救 o t||y ovkttl }
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Χλεανινγ Ουτ τηε Οξψγενιχ Φρεε Ραδιχλε ον Ραββιτσ Βλοοδ Στασισ Μοδελ
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ª¨ ±¬¦©µ¨¨µ¤§¬¦¯¨²±µ¤¥¥¬·¶¥¯²²§¶·¤¶¬¶°²§¨¯q Μετηοδ : ׫¬µ·¼µ¤¥¥¬·¶º µ¨¨ §¬√¬§¨ §µ¤±§²°¯ ¼¬±·²©¬√¨ªµ²∏³¶¤¶·«¨ ±²µ°¤¯ ªµ²∏³o
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°²§¨¯ªµ²∏³o ¤¯µª¨ §²¶¨ ²© 0 ≠¬2≥«¨ ±2‹∏²2÷∏¨ ƒ¤±ª0 ªµ²∏³o¶°¤¯¯ §²¶¨ ²© / ≠¬2≥«¨ ±2‹∏²2÷∏¨ ƒ¤±ª0 ªµ²∏³¤±§ / ÷∏¨2≥«∏¤±2÷¬±2
¤¬2‘¬±ª0 ªµ²∏³q „©·¨µ¥¨¬±ª·µ¨¤·¨§µ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ oªµ¤±∏¯¨ °¨°¥µ¤±¨ ³µ²·¨¬± twskŠ  °2twsl o¨µ¼·«µ²¦¼·¨ ¶∏¨µ²¬¬§¨ §¬¶°∏·¤¶¨ k∞2
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°’ o°2°’ ¬± ±²µ°¤¯ ¦²±·µ²¯ º µ¨¨ ¦²°³¤µ¨§ º¬·«·«²¶¨ ¬± °²§¨¯ªµ²∏³¶o • ¬·«·«¨ §¬©©¨ µ¨±¦¨k Π s qstl o°²§¨¯¦²±·µ²¯ ªµ²∏³ º¤¶
¦²°³¤µ¨§ º¬·« ¤¯µª¨ §²¶¨ ªµ²∏³¤±§¶°¤¯¯ §²¶¨ ªµ²∏³k Π  s qstl o º¬·« / ÷∏¨2≥«∏¤±2÷¬±2 ¤¬2‘¬±ª0ªµ²∏³k Π  s qsxl o ¤¯µª¨ §²¶¨
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¦¤±¬±«¬¥¬·¨ ¬³µ¨¶¶¬²± ²© Š  °2tws o¨ ±«¨ ±¦¨ ≥’⁄ ¤¦·¬√¬·¼ ¤±§§¨¦µ¨¤¶¨ °’ ¦²±·¨±·²± ¥¯²²§¶·¤¶¬¶µ¤¥¥¬·°²§¨¯q¤µª¨ §²¶¨ ªµ²∏³
¤±§¶°¤¯¯§²¶¨ ªµ²∏³«¤√¨¶·µ²±ª¨µ ©¨©¨ ¦··«¤± / ¬∏¨2¶«∏¤±2¬¬±2°¤¬2±¬±ª0ªµ²∏³q
[ Κεψ ωορδσ] ≠¬2≥«¨ ±2‹∏²2÷∏¨ ƒ¤±ª ~¥¯²²§¶·¤¶¬¶°²§¨¯~ªµ¤±∏¯¨ °¨°¥µ¤±¨ ³µ²·¨¬± twskŠ  °2twsl ~²¬¼ª¨ ±¬¦©µ¨¨µ¤§¬¦¯¨
≈责任编辑 方文贤 
蓝萼香茶菜对大鼠全心缺血2再灌注时
心肌¦2©²¶基因表达的影响
刘兰娣t o叶丽卡t o潘东军t o姜彦多t o张铁铮u o杨 辉v
kt q解放军第 usu 医院 o辽宁 沈阳 ttsssv ~
u q沈阳军区总医院 o辽宁 沈阳 ttsstx ~
v q辽宁省人民医院 o辽宁 沈阳 ttsstyl
≈摘要  目的 }研究蓝萼香茶菜对大鼠全心缺血2再灌注时心肌 ¦2©²¶基因表达的影响 ∀方法 }采用 ¤±ª¨ ±2
§²µ©©离体全心缺血2再灌注损伤模型 o• ¬¶·¤µ大鼠 ws 只 o随机分为 x 组 o每组 { 只 ∀ ‘组为单纯 Ž2‹ 液灌注对照
组 ~≤‘组为缺血2再灌注对照组 ok高 ÷ ‹ o中 ÷  o低 ÷浓度l蓝萼香茶菜灌注 v组k浓度分别为 x h ot h os qu h l ∀
采用免疫组化 ≥° 法 o用相应的 ¦2©²¶抗体检测心肌细胞中 ¦2©²¶基因表达情况 ∀用计算机图像分析系统分析 ¦2©²¶
基因表达情况 ∀结果 }与 ‘组相比 o≤ ‘o÷ ‹ o÷  o÷组 ¦2©²¶基因表达水平明显提高k Π s qstl ∀与 ≤ ‘组相比
÷ ‹ o÷  o÷组 ¦2©²¶基因表达水平明显降低k Π s qsxl ∀ ÷  o÷组较 ÷ ‹ 组 ¦2©²¶基因表达水平明显降低k Π
s qstl !÷  较 ÷组相比 ¦2©²¶基因表达下降k Π s qsxl ∀结论 }蓝萼香茶菜能显著抑制心肌 ¦2©²¶基因的表达 o它
保护缺血2再灌注心肌损伤可能部分与其抑制 !下调 ¦2©²¶基因的蛋白表达有关 ∀蓝萼香茶菜具有与剂量相关的心
肌保护作用 o但并非浓度越大越有效 ∀
≈关键词  蓝萼香茶菜 ~心肌再灌注损伤 ~基因 ~¦2©²¶
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvlsw2svx{2sw
心肌缺血2再灌注所致的心肌细胞死亡以往多
认为是细胞坏死 o近来研究提示尚有心肌细胞凋
亡≈t  ∀细胞凋亡涉及多种基因的复杂变化 o其中
¦2©²¶基因表达变化与凋亡的关系倍受关注 ∀唇形
科植物蓝萼香茶菜 Ραβδοσια ϕαπονιχα k…∏µ° ƒl
≈收稿日期  usst2tu2tu
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kv|zzs|twl
≈通讯作者  ר¯ }ksuwluvsxv{zt ƒ¤¬}ksuwluv{zvxzx ∞2
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‹¤µ¤√¤µq γλαυχοχαλψξ k ¤¬°l‹¤µ¤o经国内十几年
的研究 o发现有很多的改善微循环作用和抑制血小
板凝集作用≈u ov  o对心脏营养性血流量和冠脉流量
都有明显改善≈w  ∀本研究采用离体心脏灌注模型观
察蓝萼香茶菜对大鼠全心缺血2再灌注时心肌 ¦2©²¶
基因表达的影响 ∀
1 材料与方法
1 q1 主要试剂与器材
1 q1 q1 试剂 Ž¨µ¥¶2‹ ±¨¶¨¯¨¬·kŽ2‹l液k °°²¯ #
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第 u{卷第 w期
ussv年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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