全 文 ：细梗胡枝子总黄酮对大鼠活血化瘀作用的研究
王彩云１，邓虹珠１，张东淑１，孙成宏２
（１．南方医科大学 中医药学院，广东 广州 ５１０５１５；
２．白求恩国际和平医院，河北 石家庄 ０５００８０）
［摘要］　目的：观察细梗胡枝子总黄酮对急性应激血瘀大鼠血液流变学和血液凝固的影响。方法：利用尾静脉注射阿霉
素复制大鼠微小病变肾病模型，采用在２次皮下注射肾上腺素１ｍｇ·ｋｇ－１之间将大鼠置于冰水中５ｍｉｎ的方法建立急性应激
血瘀大鼠模型。观察胡枝子总黄酮对模型大鼠全血黏度（ＴＢＡＶ）、全血还原黏度（ＴＢＲＶ）、红细胞压积（Ｈｃｔ）、红细胞聚集性
（ＥＡＩ）等血液流变学指标的作用，同时测定凝血时间（ＣＴ）、凝血酶原时间（ＰＴ）、活化部分凝血激酶时间（ＡＰＴＴ）、凝血酶时间
（ＴＴ）及血小板聚集率和血小板解聚时间。结果：胡枝子总黄酮５．５，２．２５ｇ·ｋｇ－１能明显降低高、中、低切变率下全血黏度，降
低中、低切变率下全血还原黏度和红细胞压积，降低红细胞聚集性 （与模型组比较Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。５．５，２．２５ｍｇ·ｋｇ－１
可使模型大鼠ＣＴ，ＰＴ，ＡＰＴＴ，ＴＴ明显延长（与模型组比较Ｐ＜０．０１），并使血小板最大聚集率降低和血小板开始解聚的时间缩
短（Ｐ＜０．０１），且作用呈剂量依赖性。结论：胡枝子总黄酮对血液流变学指标和血液凝固有明显的影响，具有活血化瘀作用。
［关键词］　细梗胡枝子；血瘀模型；血液流变学；血小板聚集；血液凝固
［收稿日期］　２００８１０２０
［通信作者］　王彩云，副教授，主要从事科研和教学工作，研究方
向为中药药理。Ｔｅｌ：（０２０）６１６４８２６１，Ｅｍａｉｌ：ｂａｏｂｉ９２５７＠１６３．ｃｏｍ
　　豆科胡枝子属植物胡枝子 Ｌｅｓｐｅｄｅｚａｖｉｒｇａｔａ
（Ｔｈｕｒｂ）ＤＣ，味微苦，性平，强筋益肾，健脾祛湿，润
肺清热。我国产胡枝子属植物２６种，分布广泛，民
间广为应用治疗慢性肾小球肾炎、肾盂肾炎等病症。
迄今为止共从该属植物中分离得到黄酮、生物碱、有
机酸等化学成分，具有极高的药用价值。作者已首
次从该植物中分离得到了７个化合物［１］，作者已证
实胡枝子具有较强的抗氧化活性和改善肾功能作
用，并发现细梗胡枝子改善阿霉素肾病模型大鼠肾
功能作用与其改善血液高凝状态有关［２５］。本次试
验拟制作急性应激血瘀大鼠模型，首次探讨并证实
胡枝子较强的改善血液流变学作用，同时考察其对
血液凝固和血小板聚集的影响。
１　材料
１．１　动物
ＳＰＦ级纯系ＳＤ大鼠，体重１８０～２２０ｇ，由南方
医科大学实验动物中心提供，许可证号 ＳＣＸＫ（粤）
２００６００１５。
１．２　仪器
ＥＣＨＯＬＣＤ全自动血液生化分析仪（美国，Ｃｉ
ｂａＣｏｒｎｉｎｇ），ＬＧＲ８０Ａ型自动冲洗血液黏度测试
仪（北京世帝科学仪器公司），ＬＤ５２Ａ离心机（北京
医用离心机厂）、ＴＧＬ１６８高速离心机（上海安亭科
学仪器厂）、７５６ＭＣ紫外分光光度计（上海精密科学
仪器有限公司），ＬＢＹＮＪ２型血液凝聚仪（北京普利
生医疗器械科技有限公司）。
１．３　药品
胡枝子总黄酮（紫外分光光度法检测胡枝子总
黄酮含量为 ７２％，兰州佛慈药厂提供，批号
０５０６１０），用时蒸馏水稀释配制所需浓度；注射用
盐酸多柔比克 （阿霉素 ＡＤＲ，深圳万乐药业有限
公司，批号０６１００３，每支 １０ｍｇ），临用前用生理
盐水配制；盐酸肾上腺素注射液 （上海禾丰制药
有限公司生产，批号２００６１０３１）；阿司匹林肠溶片
（陕西白鹿制药股份有限公司，批号０６０４０６），临
用前研磨为细粉，并用 ０５％羧甲基纤维素钠
（ＣＭＣＮａ）配制为所需浓度混悬溶液；ＡＤＰ
（ＡＤＰＮａ２，ＳｏｌａｒｂｉｏＡｍｅｒｅｓｃｏ）；凝血酶时间 （ＴＴ）
测定试剂盒 （批号０７１００７）；活化部分凝血活酶时
间 （ＡＰＴＴ）测定试剂盒 （批号０７２０１１）；凝血酶
原时间 （ＰＴ）测定试剂盒 （批号０７１００１） （均为
上海太阳生物技术有限公司）；二水合柠檬酸三钠
（柠檬酸三钠，分析纯，洛阳市化学试剂厂，批号
０５０５１２）；其余按说明配制。
２　方法
２．１　血液流变学实验
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２．１．１　冰水肾上腺素型大鼠血瘀模型制作与分组
处理
ＳＤ大鼠 ６０只，雌雄各半，适应性喂养 １周
后，按体重分层随机分６组，每组１０只：正常组
（００１ｍＬ·ｇ－１体重，灌胃蒸馏水 ）；血瘀模型组
（００１ｍＬ·ｇ－１体重，灌胃蒸馏水）；阿司匹林肠溶
片组依据临床等效量（００５ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）；中药细
梗胡枝子高、中、低剂量组（５５，２２５，１１３ｇ·
ｋｇ－１）。灌胃给药，每日１次，连续８ｄ。第７天灌
胃１ｈ后，除正常组外其余各组制作冰水肾上腺
素型大鼠血瘀模型［６］，均皮下注射盐酸肾上腺素
０５ｍｇ·ｋｇ－１，共２次，间隔８ｈ。在 ２次之间（
前后各间隔 ２ｈ），将大鼠浸于 ０～２℃冰水中 ５
ｍｉｎ，正常组皮下注射等容积的生理盐水，禁食不
禁水，过夜。
２．１．２　血液流变学参数检测
第８天末次给药１ｈ后，动物麻醉，腹主动脉取
血，１％肝素抗凝，用血液黏度测定仪测定全血黏度
（ＴＢＡＶ）、全血还原黏度（ＴＢＲＶ）、红细胞聚集指数
（ＥＡＩ），准确将１ｍＬ全血置压积测定管中，３０００ｒ
·ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，读取红细胞压积值。
２．２　凝血实验［７］
２．２．１　分组处理及模型制作
ＳＤ雄性大鼠６０只，分组处理与冰水肾上腺素
模型大鼠血瘀模型制作同２．１．１。
２．２．２　凝血时间（ＣＴ）测定
第８天末次给药１ｈ后大鼠剪尾采血２滴，分
开滴于玻璃片上（直径４～５ｍｍ），自血液滴在玻片
上开始计时，每隔３０ｓ用１ｍＬ注射器针头挑动血
液１次，如见针尖挑起纤维蛋白丝，停止计时，记录
时间，再挑动另１滴未挑过的血液作对照，并以前１
滴血作为结果报告。
２．２．３　凝血酶原时间（ＰＴ）、凝血酶时间（ＴＴ）、白
陶土部分凝血活酶时间（ＡＰＴＴ）的测定
末次给药２ｈ后，１０％水合氯醛３７ｍＬ·ｋｇ－１腹
腔注射麻醉大鼠，然后将大鼠固定在蜡盘上，剪开大
鼠的腹壁，分离并找到腹主动脉，并在左、右股动脉分
叉处进针取血３ｍＬ其中１ｍＬ血注入放有３８％枸橼
酸钠抗凝剂的试管中（抗凝剂和全血的比例为１∶９），
另２ｍＬ注入含有消炎痛 ＥＤＴＡＮａ０２ｍＬ的试管
内，４℃，３５００ｒ·ｍｉｎ－１，离心１５ｍｉｎ，分离血浆。按
试剂药盒说明书测定ＰＴ，ＴＴ，ＡＰＴＴ。
２．２．４　血小板聚集功能实验［７］
２．２．４．１　动物分组与处理　取ＳＤ雌性大鼠５０只，
每组１０只，体重（２３０±２０）ｇ，随机分为５个组：空
白对照组（００１ｍＬ·ｇ－１，灌胃蒸馏水）；阿司匹林
肠溶片组（００５ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）；胡枝子（５５，２２５，
１１３ｇ·ｋｇ－１）组。灌胃给药，每日１次，连续８ｄ。
末次给药后１ｈ，１０％水合氯醛３７ｍＬ·ｋｇ－１腹腔
注射麻醉大鼠，然后将大鼠固定在蜡盘上，剪开大鼠
的腹壁，腹主动脉取血。
２．２．４．２　富血小板血浆（ＰＲＰ）和贫血小板血浆
（ＰＰＰ）制备　取血３ｍＬ迅速分别置于事先备好的
留样管（含３８％枸橼酸钠１５０μＬ），并立刻轻轻旋
转留样管，使血液与抗凝剂充分混匀，离心，１０００ｒ
·ｍｉｎ－１，１０ｍｉｎ，取上清即为 ＰＲＰ备用。取完 ＰＲＰ
后剩余的血样部分，再以３０００ｒ·ｍｉｎ－１速度，离心
１ｍｉｎ，取上清即为ＰＰＰ备用。
２．２．４．３　血小板聚集率和解聚时间测定　用 ＰＰＰ
稀释 ＰＲＰ，使每份待测 ＰＲＰ中血小板数目均在
３００×１０９～４００×１０９·Ｌ－１。ＰＰＰ用以调零后（由于
药液本身颜色，故每管药液需做药液自身空白对照
以调零），采用血小板聚集仪进行血小板聚集功能
测定，将溶媒或药物（３０μＬ）与ＰＲＰ（２００μＬ）在３７
℃比浊杯内孵育５ｍｉｎ，加入搅拌子，分别加入诱导
剂二磷酸腺苷 ＡＤＰ（终浓度１０μｍｏｌ·Ｌ－１）１０μＬ
诱导血小板聚集，测试并记录５ｍｉｎ内最大聚集率
以及解聚时间。
２．２．５　统计方法
实验数据以珋ｘ±ｓ表示。采用ＳＰＳＳ１３０统计软
件，单因素方差分析法比较组间差异，组间两两显著
性比较采用ＬＳＤ法。
３　结果
３．１　对血瘀大鼠的血液流变学的影响
表１，２显示，与正常组比较，模型组全血黏
度、全血低切还原黏度（ＬＳＷＢＶ）、全血高切还原
黏度（ＨＳＷＢＶ）、红细胞压积（ＨＣＴ）以及红细胞
聚集指数（ＡＩ）等血液流变学指标的测定结果均
较正常组显著升高（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１），表明模
型组大鼠存在着血液的高黏状态；而胡枝子各剂
量组与阿司匹林肠溶片组上述指标与模型组相
比均有不同程度降低（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１），具剂
量依赖性，且胡枝子中、高剂量组作用与阿司匹
林肠溶片相当。
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表１　细梗胡枝子总黄酮对血瘀大鼠血液黏度的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别
剂量
／ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１
全血黏度／ｍＰｓ·ｓ
１ｓ－１ １０ｓ－１ ３０ｓ－１ １５０ｓ－１
正常　　　　 － １３３３±１７５ ８８８±０８８ ６８２±０６８ ６３１±０６４
模型　　　　 － １７０８±１８４２） １０８１±１４８２） ８８２±１３０２） ７８５±０９３２）
阿司匹林　　 ００５ １４５５±１８９４） ９５５±１４４３） ７３０±１６２４） ６２４±０８１４）
胡枝子总黄酮 ５５０ １４２６±１９４４） ９１６±１１８４） ７１３±０６４４） ６１３±０８０４）
　 ２２５ １４７３±２３６４） ９４７±１４２３） ７２１±０９８４） ６３６±０８９４）
　 １１３ １５２５±１９１３） ９７６±１３３ ７７０±１１１３） ７１０±０９５
　　注：与正常组比１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１；与模型组比３）Ｐ＜００５，４）Ｐ＜００１（表２～４同）。
表２　细梗胡枝子总黄酮对血瘀大鼠血细胞压积和全血还原黏度的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１·ｄ－１ ηＨＣＴ／％ ηＨＳＷＢＶ／ｍＰａ·ｓ ηＬＳＷＢＶ／ｍＰａ·ｓ ＩＡＩ
正常　　　　 － ４０６０±２０１ ９０８±０９２ ２３９８±２２８ ２１０±０２４
模型　　　　 － ６６７０±５３１２） １２０１±１１３２） ３００５±３３４２） ２５３±０２２２）
阿司匹林　　 ００５ ５９００±３５０４） ９７５±１２４４） ２４６９±２４５４） ２３４±０１３３）
胡枝子总黄酮 ５５０ ５３９０±３１４４） ９５８±０７１４） ２４７５±２２４４） ２２９±０１９４）
　 ２２５ ５４３０±３５４４） ９６８±０９９４） ２５３８±２８６４） ２３０±０１３４）
　 １１３ ６１００±４４２４） １０８５±１６６３） ２７６４±３６０ ２４６±０１４
３．２　对ＣＴ，ＰＴ，ＴＴ，ＡＰＴＴ的影响
表３可见，模型组的 ＣＴ，ＰＴ，ＴＴ，ＡＰＴＴ明显少
于正常组（Ｐ＜００１）；阿司匹林肠溶片组和细梗胡
枝子５５，２２５ｇ·ｋｇ－１组的ＰＴ，ＴＴ，ＡＰＴＴ与模型组
相比有明显差异（Ｐ＜００１）；表明细梗胡枝子能延
长凝血酶时间 ＣＴ，ＴＴ，ＡＰＴＴ，以及 ＰＴ，（Ｐ＜００１，
Ｐ＜００５）而且效果与阿司匹林相当。
３．３　对大鼠血小板聚集功能的影响
表３　细梗胡枝子总黄酮对ＣＴ，ＰＴ，ＴＴ，ＡＰＴＴ的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）） ｓ　
组别 剂量／ｇ·ｋｇ－１ ＣＴ ＰＴ ＴＴ ＡＰＴＴ
正常　　　　 － ４５０３０±３３８８ １３４４±１８８ ２０３３±２０３ ２９２４±３３５
模型　　　　 － ２８８７０±５４０３２） ８９７±１４４２） １３３９±２８２２） ２０１９±３７９２）
阿司匹林　　 ００５ ３９５８０±５９１６４） １１５５±１９８４） １８５５±３４９４） ２５２８±４２３４）
胡枝子总黄酮 ５５ ３９６６０±４１６９４） １１９６±２２０４） １８９６±３２７４） ２６０７±４３９４）
　 ２２５ ３３６３０±５３８５３） １１６９±２０８４） １７９５±３１５４） ２５１４±３４２４）
　 １１３ ３１８７０±３５１１ ６９２０±３１５ １６２５±３０８３） ２４５７±３８８３）
　　表４结果表明，胡枝子总黄酮各剂量组与阿司
匹林组均可使血小板最大聚集率和血小板开始解聚
的时间降低（Ｐ＜００１，Ｐ＜００５）。
表４　细梗胡枝子总黄酮对血小板聚集的影响
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别
剂量
／ｇ·ｋｇ－１
最大聚集率
／％
解聚时间
／ｓ
正常　　　　 － ３６９０±３６３ ２６９５±３９２０
阿司匹林　　 ００５ ２７９３±４４０２） １８７１±３３６１２）
胡枝子总黄酮 ５５ ２６１３±４１４２） １７９３±３２９４２）
　 ２２５ ２８９１±３８５２） ２０６９±３２０６２）
　 １１３ ３０５１±４２０２） ２２６７±３８９８１）
４　讨论
现代医学理论认为，血瘀主要是血液发生了
“浓、黏、凝、聚”现象，即血液流变学异常，它可导致
血液瘀滞，血液循环和能量代谢紊乱，是引起疾病的
重要原因之一。血液黏度是衡量血液在血管内流动
时的内摩擦或流动阻力的指标，不随切变率的变化
而变化，是影响全血黏度的重要因素之一。全血黏
度受红细胞的流变性的影响，红细胞相互聚集越严
重，血液黏度越大，血液流速越慢，黏度会进一步增
高；红细胞本身还具有很大的可塑性，极易变形，红
细胞的变形性减低，血流速度减缓，血黏度增高。在
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低切变率时，血液形成红细胞聚集体，红细胞聚集体
越多，红细胞聚集会越强，血液黏度越高。低切变率
下的全血黏度值，可以反映红细胞的聚集程度；而高
切变率下的，可反映红细胞的变形程度，高切黏度
高，红细胞变形性差 ［８］。而红细胞压积增加，常导
致全血黏度增加，呈现血液高黏滞综合征。此外，血
浆复钙时间、凝血酶时间、凝血酶原时间、凝血时间、
以及血小板的聚集性等多种因素均可以影响和反映
血液的流变学状态和血液的凝固过程。
作者在实验中发现胡枝子具有改善肾病作用，
作用机制与抗氧化作用有关［２，５］，还可能与减轻血
液高凝状态有关［８］，作者在近期的阿霉素肾病模型
实验中也已证实。本实验成功地复制了冰水肾上
腺素血瘀应激大鼠模型，结果显示胡枝子可有效降
低模型大鼠异常增高的全血黏度和全血还原黏度，
降低红细胞压积及聚集指数等血液流变学指标。此
外，作者通过对凝血时间、血浆复钙时间、凝血酶时
间和凝血酶原时间的测定，以及考察对血小板聚集
的影响，证实胡枝子具有较强改善血液高黏、高凝状
态的作用并可以抑制血小板的聚集，且药物的作用
强度与给药剂量呈正相关系。但胡枝子的活血化瘀
方面的作用为首次研究，其相关机制有待进一步研
究。
［参考文献］
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出版社，２００２：１２７１．
［８］　张国华．肾病综合征高凝倾向及其防治［Ｊ］．国外医学·内科
学分册，１９９７，２４（３）：３７３．
［责任编辑　古云侠］
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