全 文 ：用 ∀脑缺血再灌后 o兴奋性氨基酸过度释放 o引
起细胞内 ≤¤u n 超载 o也是细胞受损的原因之
一 ∀ ∞Š¥zyt是否也通过拮抗兴奋性氨基酸毒
性作用减轻细胞损伤 o正在进一步研究 ∀
4 参考文献
t 李新岗等 q国外医学#脑血管疾病分册 ot||x ~vkyl }vts
u 林凌等 q南京大学学报 ot||x ~vtkvl }xtw
v 周敏 q中药药理与临床 ot|{| ~xkxl }uz
w 夏栾明等 q卫生研究 ot|{z ~tykwl }u|
x 徐叔云等 q药理实验方法学 q第二版 q北京 }人民卫生出版
社 ot||t }w||
y ≠¤¶∏² ’¼¤°¤ ·¨¤¯ q…µ¤¬± • ¶¨ot||w ~yvx }tux
t||z2st2sy收稿
啤酒酵母多糖抗病毒作用研究
李凡 石艳春 关显智 张绍伦
k白求恩医科大学 长春 tvssutl
田同春 k山西临汾卫校 临汾 swtsssl
摘要 采用从酵母泥中提取的酵母多糖对 tv种 • ‘„ 及 ⁄‘„ 病毒在不同种细胞上进行抗病毒作
用研究及机理探讨 ∀结果表明 o酵母多糖具有明显的抗脊髓灰质炎病毒 ¶型 !埃可病毒 y型 !柯萨奇病
毒 „ty o…v o新型肠道病毒 zt型 o水泡性口炎病毒 !腺病毒 ¶型 !单纯疱疹病毒 ´ oµ型的活性 ∀表现为能
显著抑制细胞病变的发生 o使组织培养的细胞得到保护 ∀
关键词 酵母多糖 抗病毒 细胞病变
早在 t{|w年 ≥¤¯®²º¶®¬就开始了从事酵母
多糖的研究 ∀近年来发现酵母多糖具有免疫活
性≈t 和抑制肿瘤生长等作用≈u  ∀本文研究了从
啤酒酵母泥中提取的酵母多糖抗病毒效应 o就
其体外抗病毒作用及其机制进行了初步探讨 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料
1 q1 q1 细胞 人宫颈癌细胞k‹¨¯¤l o小鼠成纤
维细胞k|u|l为本室保存 ∀人羊膜细胞kƒl由
长春生物制品研究所提供 ∀
1 q1 q2 病毒 水泡性口炎病毒k∂ ≥∂ l o仙台病
毒k≥∂ l o柯萨奇病毒 …v k ≤ ∂ …vl o风疹病毒
k• ∂ l o为本室保存 ∀脊髓灰质炎病毒 ¶型k°∂
¶l由北京生物所提供 ∀埃可病毒k∞≤ ‹ ’y ∂ l
由本校流行病教研室提供 ∀腺病毒k„§∂ ¶l来
自本校一院儿科 ∀单纯疱疹病毒 ´ oµ型k‹≥∂
´ oµl牛痘病毒k∂ ∂ l来自本校地方病研究所 ∀
麻疹病毒k  ∂ l为长春生物制品所冻干疫苗 ∀
新型肠道病毒 zt 型k∞zt ∂ l柯萨奇病毒 „ty
k≤ ∂ „tyl由日本仙台国立医院赠 ∀
1 q1 q3 酵母多糖 从啤酒酵母泥中用稀碱提
取出一水溶性多糖 o称啤酒泥酵母多糖
k°²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨¶²© …µ¨ º µ¨¶ ≠ ¤¨¶·°…≠l o由东
北师范大学生物系张翼伸教授惠赠 ∀
1 q1 q4 培养基 Œ ⁄ k美国产品l ∀
1 q1 q5 仪器 国产 ws孔微量培养板 o国产特
制 zut型分光光度计等 ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 细胞的筛选与制备 所用 tv种病毒分
别接种于 ‹¨¯¤o|u|及 ƒ细胞以测定敏感性 o
细胞按常规方法传代 ∀同时制成 u ≅ tsxr °¯ 细
胞悬液 o每孔 s qt °¯ ouw«后形成单层细胞备用 ∀
1 q2 q2 病毒毒力测定 采用 × ≤Œ⁄xs微量
法≈v  o本实验采用不同病毒的tss × ≤Œ⁄xs r
s qt °¯ ∗ uss× ≤Œ⁄xsrs qt °¯ ∀
1 q2 q3 初筛 形成单层的细胞孔弃去培养液 o
加入 °…≠ 作用 uw«o吸出药液加入病毒液 o按一
般病毒吸附时间 o均采用 vz ε 吸附 t«o吸出 o加
入含 °…≠ 的维持液 o置 vz ε x h ≤ ’u恒温箱培
养 w{«∗ |y«o待病毒对照孔病变 7 p 8 o细胞
#tzt# 中国中药杂志 t||{年第 uv卷第 v期
对照正常时测结果 ∀
1 q2 q4 分组实验 将初筛有意义的病毒分 w
组≈w 进行试验 o探讨 °…≠ 的具体作用环节 ∀ ´
组 }感染前 uw«给药 ∀吸出药液 o用 ‹¤±®. ¶液
洗 v遍加入病毒液 ~µ组 }感染后给药 ∀先加病
毒液置 vz ε 吸附 t«o洗去病毒 o加含药维持液 ~
¶组 }药液与病毒液同时加入细胞层 ~·组 }药
液与病毒液混合 o置 vz ε 作用 u«后加入细胞
层 ∀以上均设正常对照及相应病毒对照 ∀
1 q2 q5 结果测定 ≠ 光镜下观察细胞病变
k≤°∞l ~ 染色摄入法≈v  }根据 ≤°∞有脱落特
征 o采用存留细胞结晶紫染色 o使用分光光度计
以波长 xws±°测定 ’⁄值 ~≈ °…≠ 对组织细胞
保护率用下式计算 ∀
保护率 €加药孔 ’⁄值 p病毒对照孔 ’⁄值细胞对照孔 ’⁄值 ≅ tss h
2 结果与分析
2 q1 °…≠ 对 ‹¨¯¤o|u|及 ƒ细胞的毒性测定
实验结果表明 otΒyw 以上稀释的 °…≠ 对
‹¨¯¤o|u|及 ƒ细胞均无毒性作用 ∀
2 q2 °…≠ 保护浓度的测定
选用药液与病毒液同时加入上述 v种细胞
层的方法测定了 tΒyw otΒtu{ otΒuxy otΒxtu等 w
个浓度的 °…≠ 抗病毒作用 o结果 otΒyw otΒtu{ o
tΒuxy三个稀释度的 °…≠ 均有明显的抗病毒效
应k Π s qstl ∀
根据毒性测定结果 o本实验采用 tΒuss稀
释的 °…≠ o其含量为 zxsΛªr°¯ ∀
2 q3 初筛结果
利用光镜观察 ≤°∞o结果表明 °…≠ 可以不
同程度地抑制 |种病毒对组织细胞的 ≤°∞o详
见表 t ∀
表 t °…≠ 对病毒致 ≤°∞的影响
细胞对照 病毒对照 实验
∂ ≥∂ p n n n n p
≥∂ p n n n n n n n n
∞≤ ‹ ’y ∂ p n n n n p
∞zt ∂ p n n n n p
 ∂ p n n n n n n n
• ∂ p n n n n n n n n
„§∂ ¶ p n n n n p
∂ ∂ p n n n n n n n n
‹≥∂ ´ p n n n n p
‹≥∂ µ p n n n n ?
≤ ∂ …v p n n n n p
≤ ∂ „ty p n n n n p
°∂ ¶ p n n n n p
注 }p示无细胞病变 n示 trw以下的细胞有病变 n n
示 trw ∗ tru的细胞有病变 n n n示 tru ∗ vrw的细胞有病
变 n n n n示 vrw以上的细胞有病变
2 q4 分组结果
结晶紫染色测定结果 o镜下观察 ≤°∞基础
上 o用结晶紫染色测定 ’⁄值 o以便客观地反映
加药与不加药之差别 ∀ ´组 }实验目的是观察
药物能否进入细胞或吸附于细胞表面以阻止病
毒的吸附与进入 ∀结果表明 o此法对 °∂ ¶ o
„§∂ ¶ o∂ ≥∂ o‹≥∂ ´ o µ o≤ ∂ „ty o≤ ∂ …v o∞2
≤ ‹ ’y∂ o∞zt ∂ 有意义k Π  s qstl ∀ µ组 }实验
的目的是观察药能否对细胞内的病毒起作用 o
抑制其生物合成及成熟释放 ∀结果表明 o此法
对 °∂ ¶ o„§∂ ¶ o∂ ≥∂ o‹≥∂ ´ ! µ o≤ ∂ „ty o
≤ ∂ …v o∞≤ ‹ ’y ∂ o∞zt有意义k Π s qstl ∀ ¶组 !
·组 }为药物与病毒在不同条件下作用 o观察药
物对病毒的直接灭活作用 o结果表明 o°…≠ 对
细胞的保护率最高可达 |y qv h o详见表 u ∀
表 u °…≠ 对组织培养细胞的保护率 h
组别 ∂ ≥∂ °∂ ≤ ∂ …v ‹≥∂ ´ ‹≥∂ µ „§∂ ¶ ∞≤ ‹ ’y ∂ ≤ ∂ „ty ∞zt ∂
´ {s qy {{ q| vy qu ux q| ws qv uu qs ux qs yz qv vy qz
µ {u q{ |s qu yu qt yu q| v{ qt |u qw yw qx zt q{ ww qu
¶ zx q{ {| qu yv qy {s qs ws q| |y qv {s q| zz qv yt qx
· zw qx |t q{ {{ qu |v qy yt qs |u qz {s qs yx qx xx q{
2 q5 药物对病毒毒力的影响
将 °…≠ 与 °∂ o≤ ∂ …v o≤ ∂ „ty o∞≤ ‹ ’y ∂ o∞zt
∂ 分别在 vz ε 下作用 u«o测定病毒的 × ≤Œ⁄xs
k滴度以 ª¯× ≤Œ⁄xsrs qt °¯ 表示l结果病毒对照
#uzt# 中国中药杂志 t||{年第 uv卷第 v期
组分别为 w qx ox ow qzx ox ox ~实验组分别为 u ou o
u ou qux ov ov ∀经此作用后病毒滴度明显下降 o
抑制对数k对照组与实验组 × ≤Œ⁄xs之差l分别
为 u qx ov ou qx ou ou ∀进一步证实 °…≠ 对 °∂ o
≤ ∂ …v o≤ ∂ „ty o∞≤ ‹ ’y ∂ o∞zt ∂ 直接灭活作用 ∀
3 讨论
实验结果表明 o°…≠ 具有明显抗病毒效应 o
特别是对肠道属 x种 • ‘„ 病毒有显效 ∀抑制
对数可达 u ∗ v o经定量试验证明 °…≠ 在
x{x q|wΛªr°¯ 时对各种病毒均有抑制作用 ∀
关于 °…≠ 抗病毒作用机制 o从分组实验结
果可看出作用是多途径的 o不仅有直接灭活作
用 o而且对细胞内外的病毒都有抑制作用 ∀至
于 °…≠ 抗病毒作用是通过改变细胞膜上的某
种成分的作用 o还是促进干扰素等细胞因子的
产生 o我们正在研究 ∀
4 参考文献
t ƒ∏±¤¼¤°¤  ·¨¤¯ q≤¤µ¥²«¼§µ• ¶¨ot|{v ~ttz }uu|
u ’®¤º¤ ≠ ·¨¤¯ q ≤¤µ¥²«¼§µ• ¶¨ ot|{u ~ts{ }vu{
v 戴华生 q新实验病毒学 q北京 }中国学术出版社 ot|{v }ttv
w 曾产毅等 q中华医学杂志 ot|yw ~xsk{l }xut
x 王克夷 q生理科学进展 ot|{v ~twkul }tvx
t||y2tt2ux收稿
三七总皂甙对 ≥‹ • 心肌细胞内 ≤¤u n
及其肌浆网膜上钙泵活性的影响
冯培芳 蒋惠芳 3
k浙江中医学院附属医院 杭州 vtsssyl
摘要 通过对三七总皂甙k ×≥°‘≥l及 ‘≥ !开搏通治疗 ≥‹ • 效果的对比研究 o并以月龄相仿的
• Ž≠ 为正常对照 o发现 ×≥°‘≥能显著提高心肌细胞内肌浆网膜上钙泵活性 o减少心肌细胞 ≤¤u n o减轻
左室心肌重量 ∀
关键词 三七总皂甙 钙离子 钙泵 肌浆网 自发性高血压大鼠
三七总皂甙k×≥°‘≥l为三七的主要活性成
分 o本研究就其对 ≥‹ • 心肌细胞内 ≤¤u n浓度 !
肌浆网膜上钙泵活性及左室游离壁心肌重量的
影响进行观察 o以对 ×≥°‘≥改善高血压病左室
舒张功能提供细胞内生化调节水平的理论依
据 ∀
1 材料
111 动物
y周龄 ‘≥‹ • 和京都威斯特大鼠k≥¬¶·¤µ
Ž¼²·²o• Ž≠l由上海高血压研究所提供 ∀
112 主要仪器与试剂
美国 ∂¬§¨²2uu 型双通道双光束原子分光
光度计 o…¨ ¦®°¤±wu 型分光光度计 o≤²∏¯·¨µ2
‹∞ ’2 • × °血红蛋白仪 o恒温振荡水浴箱 o低
温冰箱 ∀喹巴因 !皂碱 ! ≤¼¦¯²2³¬¤¼²±¬¦ „¦¬§
k≤°„l为 ≥¬ª°¤产品 o„×° o组氨酸为中国科
学院上海生化研究所产 o其余试剂均为国产分
析纯 ∀
113 药品
×≥°‘≥为昆明制药厂产品ku °¯ 含 ×≥°‘≥
tss°ªo批号 |vs{vv otul o开搏通为上海施贵宝
产品 ∀
2 方法
211 观察指标
21111 左室心肌重量测定 乙醚麻醉大鼠后 o
快速剖胸取出心脏 o分离出左心室游离壁 o剔除
心包膜后立即称重 ∀
21112 心肌细胞内 ≤¤u n测定 取 s qtª左右
3 浙江省中医药研究院附属医院 杭州 vtssss
#vzt# 中国中药杂志 t||{年第 uv卷第 v期