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高效液相色谱法测定八珍益母颗粒中芍药苷和阿魏酸的含量



全 文 :#研究简报#
高效液相色谱法测定八珍益母颗粒中芍药苷和阿魏酸的含量
李顺意 o蔡 敏 o韩凤梅 o陈 勇
k湖北大学 生命科学学院 o湖北 武汉 wvssyul
八珍益母丸具有补气血 !调月经功能 o为妇女气
血两虚 !体弱无力 !月经不调的常用中成药≈t  ∀处
方为 }益母草 !党参 !白术k炒l !茯苓 !甘草 !当归 !白
芍k酒炒l !川芎 !熟地黄等 ∀由于传统丸剂制造工艺
比较粗糙 o同时质控标准较低 o导致产品的质量不
高 ∀因此我们与武汉健民药业集团公司联合研制了
八珍益母无糖颗粒 ∀八珍丸或八珍制剂等复方制剂
质量标准多采用薄层层析方法≈u 或用高效液相色
谱法 o且测定的指标较少≈v ow  ∀本文报道用反相高
效液相色谱法同时测定八珍益母无糖颗粒中 u种主
要有效成分芍药苷和阿魏酸的含量 ∀
1 材料和方法
1 q1 药材与仪器 八珍益母无糖颗粒 k批号
usssswst ousssswsu ousssswsvl及各处方药材由武
汉健民药业集团公司提供 ∀芍药苷和阿魏酸k反式l
对照品为中国药品生物制品检定所提供 ~甲醇k色谱
纯l为 ƒ¬¶«¨µ公司提供 ~其他试剂均为分析纯 ∀ • ¤2
·¨µ¶xtx型液相色谱仪泵 o• ¤·¨µ¶||y紫外可见二极
管阵列检测器 o¬¯¯ ±¨±¬∏° vu色谱工作站 ∀
1 q2 标准溶液的配制 精密称取芍药苷对照品适
量 o加甲醇溶解 o配制成 u qus °ª# °¯ p t的芍药苷标
准溶液 ~精密称取阿魏酸对照品适量 o加甲醇溶解 o
配制成 u qvs °ª# °¯ p t标准溶液 o并稀释至 s quv °ª
# °¯ p t避光保存备用 ∀取 u qus °ª# °¯ p t芍药苷
t °¯ os quv°ª# °¯ p t阿魏酸 t °¯ 混合稀释至 ts °¯ o
配成 s quu °ª# °¯ p t芍药苷和 s qsu °ª# °¯ p t阿魏酸
对照品混合液 ∀
1 q3 供试液的制备 精密称取八珍益母颗粒 u ªo
加甲醇用超声提取k功率 uss • l o离心 o取上清液 ∀
残渣中再加入甲醇重复提取 ∀每次加入甲醇 ts
°¯ o超声波提取 tu °¬±o共提取 w次 ∀合并 w次提取
液 o旋转蒸发浓缩 o用甲醇定容至 ux °¯ o过滤 o得供
试液 ∀
≈收稿日期  usss2tt2tx
1 q4 阴性样品液的制备 按照处方工艺制备阴性
样品 o按供试液制备方法提取定容后过滤 o得阴性样
品提取液 ∀
2 结果与讨论
2 q1 色谱条件 Œ±·¨µ¶¬¯ ’⁄≥2v色谱柱kw qy °° ¬§
≅ uxs °° ox Λ°l ~流动相 xs h甲醇k冰乙酸调 ³‹
u qxl ~流速 s qy °¯ # °¬±p t ~检测波长 }芍药苷 uws
±° o阿魏酸 vuv ±° ∀分析对照品 !供试液及阴性样
品溶液 o阴性样品在相应的位置无干扰 ∀
2 q2 线性实验 在上述色谱条件下 o对芍药苷和阿
魏酸对照品混合液进行测定 o以进样量为横坐标 o色
谱峰面积为纵坐标作图 ∀芍药苷回归方程为 }Ψ € |
≅ tsy Ξ p vxzz| , ρ€ s q|||{ o在 s qww ∗ u qus Λª线
性关系较好 ~阿魏酸回归方程为 }Ψ € u ≅ tsy Ξ p
tsv|u{ , ρ€ s q|||w o在 s qsx ∗ s quv Λª线性关系较
好 ∀
2 q3 精密度实验 精密吸取供试液 ts Λ¯ o在上述
色谱条件下测定 o连续进样 x次 ∀芍药苷峰面积的
ΡΣ∆为 t q{ h o阿魏酸峰面积的 ΡΣ∆为 t qv h ∀
2 q4 稳定性实验 精密吸取芍药苷和阿魏酸对照
品混合液 ts Λ¯ o分别在 s ot ow oy ots «测定 o芍药苷
峰面积 ΡΣ∆为 t qz h o阿魏酸峰面积 ΡΣ∆ t q| h o
表明 ts «内芍药苷和阿魏酸稳定性较好 ∀
2 q5 含量测定和重现性实验 精密称取 v批八珍
益母颗粒各 x份 o每份 u ªo按供试液制备方法制备
tx个供试液 ∀在以上色谱条件下进样 o每个样品溶
液连续进样 v次 ∀根据分析结果 o八珍益母颗粒中
芍药苷含量平均值为 s q||x °ª#ªp t o ΡΣ∆为
t qy h o阿魏酸含量平均值为 s qs|y °ª#ªp t oΡΣ∆
为 t q{ h ∀
2 q6 加样回收实验 精密称取 x份八珍益母颗粒
各 tª o分别加入 ts q|s °ª# °¯ p t芍药苷 tss Λ¯
kt qs| °ªl和 t qzt °ª# °¯ p t阿魏酸 ys Λ¯ ks qts
°ªl o按供试液制备方式制备得 x个加样回收的样
#tvy#
第 uy卷第 |期
usst年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²q|
≥ ³¨qousst
液 ∀分别在以上色谱条件下进行测定 o得芍药苷加
样回收率平均值为 |{ qt h oΡΣ∆ 为 s q| h ~阿魏酸
加样回收率平均值为 || qt h oΡΣ∆为 t qy h ∀
本文应用高效液相色谱法同时测定芍药苷和阿
魏酸 o提取方法简单 o分析速度快 o线性范围广 o分析
精度好 o回收率高 o具有良好的灵敏度和重现性 o可
用于八珍益母颗粒的质量控制 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qt||x qvyz q
≈u  王宝 q中成药质量标准与标准物质研究 q北京 }中国医药科
技出版社 ot||w qx| q
≈v  梁 宏 o王春芳 q高效液相色谱法测定八珍丸中芍药苷的含
量 q药物分析杂志 ot||| ot|ktl }ww q
≈w  李 俊 o胡志厚 o刘良初 o等 q高效液相色谱法测定八珍制剂
中的芍药甙 q中国药学杂志 ot||t ouykxl }u{| q
≈责任编辑 李 禾 
黄芩苷对糖尿病患者红细胞醛糖还原酶活性及肾小球滤过率的影响
刘长山 o马丽丽 o李 萍
k山东省潍坊市人民医院 o山东 潍坊 uytswtl
糖尿病的主要危险是糖尿病慢性并发症k§¬¤2
¥¨·¬¦¦«µ²±¬¦¦²°³¯¬¦¤·¬²±¶o⁄≤≤l的发生 o这些并发
症常累及视网膜 !神经 !肾脏 !心脏等 o是糖尿病致
死 !致残的主要原因 ∀大量动物及人类的研究证明 o
⁄≤≤的发生 !发展与多元醇通路的代谢密切相关 o
该通路的关键酶 ) ) ) 醛糖还原酶k¤¯§²¶¨ µ¨§∏¦·¤¶¨ o
„ • l在高糖条件下将葡萄糖转化为大量不易透过细
胞膜的山梨醇 o引起细胞的渗透性损伤 o是 ⁄≤≤ 发
生的重要原因 o使用醛糖还原酶抑制剂k¤¯§²¶¨ µ¨2
§∏¦·¤¶¨ ¬±«¬¥¬·²µ¶o „• Œ¶l引起了广泛的重视≈t ou  ∀
作者在以前的基础研究中发现中药黄芩的有效成分
黄芩苷不仅具有体内外抑制 „ • 活性作用 o而且对
实验糖尿动物的多种并发症具有明显的防治效
果≈v ∗ x  o本文在此基础上观察了黄芩苷对糖尿病患
者红细胞 „ • 活性及早期糖尿病肾脏病变的主要指
标 ) ) ) 肾小球滤过率kŠƒ • l的影响 ∀
1 对象与方法
1 q1 病例选择 选择 Šƒ • 升高的Œ型或ŒŒ型糖尿
病患者 vx例 o为我院住院及门诊病人 o糖尿病诊断
符合 „⁄„kt||zl标准 ∀vx例患者随机分为对照组
和治疗组 ∀对照组治疗措施包括 }糖尿病教育 o饮食
控制 o按标准体重计算 o总热量每日 tsw qy ®#®ªp t o
每日蛋白质 s qy ∗ s q{ ª#®ªp t o控制血糖应用胰岛
素或口服降糖药物糖适平 ~治疗组在上述治疗基础
≈收稿日期  usss2s{2ty
上加黄芩苷治疗 ∀其中 o对照组 tz 例k男 | o女 {
例l o年龄 ut ∗ y{岁kws qz ? ty q|l岁 o平均病程ky q{
? z qvl年 ∀治疗组 t{例k男 | o女 |例l年龄 t| ∗ yy
岁kvx qz ? tw qxl岁 o平均病程ky q| ? z qyl年 o两组年
龄 !性别构成 !体重指数及每日摄取热量经统计学处
理kτ检验l无差异 ∀正常对照组 }健康人 ty例k男
ts o女 y例l o年龄 us ∗ ys岁kv| qz ? ts q|l岁 o无心 !
肝 !肾疾病及高血压 !糖尿病等 ∀
1 q2 观察方法 两组糖尿病患者 o晨起空腹肘静脉
采血测定血糖及红细胞 „ • o同时测定 Šƒ • o然后 o
对照组维持原常规治疗不变 o治疗组加服黄芩苷每
次 yss °ªo每日 v次k黄芩苷为上海中药一厂生产
粉剂 o装胶囊服用l o治疗期间除降糖药物 o未用其他
药物 ∀疗程 w周 o治疗结束后重复上述项目检测 ∀
1 q3 检测项目与方法 红细胞 „ • 测定采用作者
设计的荧光法≈y  ∀ „ • 活性测定的反应体系包括以
下成分k最终浓度l }yz °°²¯#pt的钠2钾磷酸缓冲
液k³‹ z qsl os qu °²¯#p t的硫酸铵 os qt °°²¯#p t
的 ‘„⁄°‹ ots °°²¯#pt的 ⁄2甘油醛和红细胞溶
血液 ts Λ¯ o总体积 t qs °¯ ∀空白管以双蒸水代替
⁄2甘油醛 ∀在 vz ε 水浴反应 x °¬±后加 s qv °²¯#
pt的 ‘¤’ ‹ u °¯ 终止反应 ∀用日立 {xs型荧光分
光光度计在 vyzrwxx ±° 条件下测定相对荧光强
度 o再从事先绘制的 ‘„⁄°荧光测定工作曲线上读
出 ‘„⁄°含量 ∀t单位k˜l酶活性表示 t °¬±内 t
Λ°²¯ ‘„⁄°‹ 被氧化的酶量 o每份标本的 „ • 活性
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