全 文 ：1 9 9 9年 5月
第 2期 (总第 4 9期 )
中 国 林 副 特 产
Q
u r at e r l yo fF o re st B y
·
P r o due t an d外e e i al it i yn Ch in a
N o
.
2 ( G S N O
.
4夕)
M
a夕 . 1夕99
不同采集期前毛果劳药恨巾劳药可含皇溯定
. 邓光瑞 崔志萍 哈尔滨中药二厂 ( 1 5 0 0 0 1)
. 文 军 黑龙江省中药联营总公司
摘 要 未用甲醉渗滤提取 , 双波长薄层扫描法 .N1 定 不 同米集期 的毛果芍药根中芍药武的百 分含贡 。 芍药武 的含 黄
在 5 月初花期最高 , 而 相 当于鲜根 中的成分含童 (成分产贡 )在 9 月至 翌年 3 月份维特在最高水平 。 又综合分析 了 4
个 自变蚤 , 3 个 因变全 , 发现毛果 芍药根中芍药武的含黄主 要受其植物 内部自身生 长发育规律的制 约 , 而气盈 、 降雨
贡子外部 因素对其影响 占次要地位 。
关键词 双波长薄层扫描法 芍药根 芍药贰
分类号 R 28 2 . 7 1 . 0 5
芍药分为赤芍和 白芍两类 , 主要来源于毛蓖科芍药
属 ( P ae o in a ) 、 芍药组多种植物的根 , 为一种常用中药 。
它具有解痉 、镇痛 、 镇静 、 抗惊厥 、 抗炎 、 抗溃疡和抗菌作
用 。 芍药中含有芍药贰 、 经基芍药贰 、 苯甲酞芍药贰 、 芍
药内醋贰 、 芍药新贰 、 芍药贰元酮 、 芍药糖以及苯甲酸 、
奋体化合物 、挥发油等 。芍药贰为 主要有效成分 , 芍药贰
的含量可 以作为判断芍药质量的一个指标 。常见的分析
方法有薄层— 比色法 “ ’ 、 薄层— 紫外分光光度法 `2 ’ 、高效液相法 `3 一 , ’ , 以及双波长薄层扫描法`“ ’ 。本文采用双
波长薄层扫描法测定不 同采集期的芍药根中芍药贰的
含量 , 取得 了较满意的结果 。
1 材料 、 仪器 、 试剂
1
.
1 材 料 毛 果 芍 药 P . l a e t i f lo r a v a r . t r i e h o e a r p a
( B
u n g e ) st
e r n 采 自安徽省毫州市 , 定期采收主根 , 去净
泥土称鲜重 , 自然干燥后称干重 , 粉碎 , 过 80 目筛 , 干燥
器中保存备用 。
1
.
2 仪器 岛津 c s一 9 30 薄层扫描仪 , 日本岛津株式
会社 ;微量进样器 , 上海 医用激光器厂 ;紫外检斑器 , 上
海科艺光学仪器厂 ; A E 一 2 40 微量天平 ( 0 . o l m g ) , 瑞士
一M E T T L E R 。
1
.
3 试剂 硅胶 H R , 。 , 青岛海洋化工 厂 ;芍药贰标准
品 . 由金昌东老师提供 ; 甲醇 、 氯仿 、 乙酸 乙酷均 为分析
纯试剂 。
2 实验方法和结果
2
.
1 薄层层析条件 薄层板的制备 : 称取适量 硅胶 ,
加 3 倍量 0 . 5 % 的 C M C 一 N a 溶液 , 铺成 0 . 45 m m 厚 、
20
e
m x 20
e
m 的薄层板 , 室温晾干后 于 10 5℃ 活化 l 小
时 。展开剂 : 氯仿一甲醇一 乙酸 乙醋 ( 4 : 2 : 0 . 5) 。
2
.
2 扫描条件 测定波长 抓 s ) 23 5 n m , 参比波长 (从 )
37 0
n
m
, 反 射 法 锯 齿 扫 描 ; 狭 缝 宽 度 1 . 2 5m m 义
1
.
25m m
, 散射参数 S x = 3 , 灵敏度中 。
2
.
3 标 准曲线 的制备 准 确称取 芍药贰标 准品
2 0 m g
, 甲醇溶解后定容至 s m l , 用微量进样器精确吸取
l
、
2
、
3
、
4
、
5川 , 点样于同一硅胶板上 , 按上述条件展开后
扫描 , 计算得回归方程为 :
Y = 2 1 3 1 5
.
0 4 + 450 69
.
3 6X r = 0
.
99 57
2
.
4 样品测定 精称芍药样品 1 9 , 装入自行拉制前端
塞有适量棉花的渗滤柱中 , 药粉上部也塞入适量棉花 。
注入适量甲醇 , 温浸 4 小时后收集渗滤液 g m l , 定容至
10 m l
。样品点样量为 2川。 展开前先饱和 30 分钟 , 然后
上行展开 15c m , 取出薄层板挥干 . 在紫外检斑器上检视
斑点位置 (图略 ) , 最后扫描测定 。 用外标二点法计算出
样品中芍药贰的含量 。
2
.
5 回收率 称样品 8 8 0 930 号 19 , 加入浓度为 7m g /
m l 的标准液 1 . 0 、 1 . 5 、 2 . Om l按前述实验条件和方法提
取 、 展开 、 扫描测定每组 5 次 , 测 得平均 回 收率 为
9 7
.
8 2 % (
n = 5 )
,
C V 为 1 . 34 % ( n = 5 ) 。
2
.
6 重现性 以相同浓度 ( 4m g / m l) , 同体积 ( 3川)的
标准品点样 , 测得板内和板间峰面积分别为 巧 7 384 . 3
( n = 5 )
、
14 7 7 1 4
.
6 3 (
n = 5 )
,
C V ( % ) 分别为 2 . 5 2 和
3
.
3 8
0
2
.
7 数据处理 将上述样品测定项下所得之结果与
文献中的数据 口 ’整理成表 l 。
3 结果与讨论
在计算机上运用 H A RW A R D G R A P H 系统绘制
不同采集期芍药根中芍药贰百分含量的直线图和趋势
图 (见 图 1 、 2 ) 。
查相关系数显著性检验表 ( N 一 2 = 2 5) 得 a 。 . 。 , =
0
.
38 1
, 与以上结果中的偏相关系数比较 , 发现药材的
干 /鲜之比 ( Y , ) 、 芍药贰含量 (叽 、 叽 )均与物候期 (凡 )
呈极显著相关 , 说明这些因变量主要受植物内部自身生
长发育规律的影响 。
收稿 日期 : 19 9 8一 06一0 8
DOI : 10. 13268 /j . cnki . f bsic . 1999. 02. 004
199 9年 5月 邓光瑞等 :不 同采集期的毛果芍药根中芍药贰含量测定 第 2 期
药材干 /鲜重比 (Y : )与日平均气温 (凡 )呈显著性正
相关。 气温高 , 则干鲜重比值上升 , 出材率增高 。
芍药贰 (含量 )与 日平均气温 呈负相关 , } : ( iX , Y i)
l 接近临界值 , 说明高温对成分积累不利 。
综合以上结果可知 , 毫州芍药根中芍药贰 (含量 )主
要受其内部自身生长发育规律的制约 。 而气温 、 降雨量
等外部因素对其影响占次要地位 。
表 1 数据表
采集时间 X . 凡 凡 .x 丫 从 叽
1 989年 l 月 16 日 1 5 一 1 . 0 62 . 8 43 . 7 1 4 . 7 8 2 . 0 8
1月30 日 1 5 1 . 1 0 . 0 42 . 3 1 4 . 0 1 1 . 7 0
2月 11日 1 5 2 . 0 5 . 2 4 1. 30 4 . 8 8 2 . 0 2
3月 3日 1 5 2 . 8 19 . 9 42 . 3 5 4 . 71 2 . 99
3月 7 日 1 5 11 . 5 0 . 0 42 . 94 5 . 4 8 2 . 35
3月2 9日 1 5 8 . 8 4 . 3 43 . 10 3 . 93 1 . 69
19 88年 4月 13日 2 1 14 . 0 1. 1 35 . 3 3 3 . 55 1 . 25
4月23日 2 2 16 . 0 0 . 2 24 5 5 6 . 81 1 . 67
5月 2 日 2 2 20 . 5 0 . 7 22 . 9 0 8 . 03 1 . 84
5月 15 日 2 2 17 . 7 7 1 . 9 25 . 63 5 . 04 1 . 29
5月 25月 2 3 20 . 7 11 . 6 3 5 . 3 6 4 . 87 1 . 72
6月 10 日 2 3 26 . 8 5 . 6 4 8 . 0 8 3 . 07 1. 48
6月 25 日 2 3 2 5. 2 0 . 2 5 2 . 8 6 1 . 3 1 0 . 69
7月 7 日 2 3 2 8 . 2 10 . 3 4 9 . 3 6 2 . 14 1. 06
7月 18 日 2 4 3 0 . 0 59 . 6 5 8 . 10 2 . 20 1 . 2 8
7月 27 日 2 4 2 7 . 0 101 . 8 5 1 . 4 2 2 . 1 5 1. 1 1
8月 9日 2 4 2 8 . 0 0 . 6 5 3 . 98 1 . 3 1 0 . 71
8月 22 日 2 4 2 4 . 0 37 . 4 5 6 . 87 1 . 60 9 . 0 1
9月 4日 2 5 2 3 . 7 2 1 . 1 4 7 . 27 3. 3 0 1 . 55
9月 15日 2 5 21 . 1 10 . 4 52 . 36 2 . 4 3 1 . 27
9月 3 0日 1 5 18 . 7 0 . 5 50 . 80 4 . 0 7 2 . 0 9
10月 11 日 1 5 18 . 4 0 . 7 48 . 7 7 4 . 12 2 . 0 2
10月 2 3日 1 5 15 . 5 4 6 . 4 47 . 5 2 4 . 0 6 1 . 93
11月 3日 1 5 10 . 4 0 . 0 45 . 4 1 4 . 3 1 1 . 96
11月 16 日 1 5 9 . 7 0 . 3 4 5. 4 1 4 . 36 1 . 98
11月27日 1 5 6 . 9 0 , 0 45 . 4 0 3 . 9 1 1 . 78
12月26 日 1 5 4 . 0 10 . 9 4 3. 50 3 . 96 1 . 72
注 : X . = l , 休眠期 ; X : 二 2 , 活动期 ;凡 二 l , 苗期 ; 凡 = 2 , 营
养生长期 ; 凡 = 3 , 显蕾开花期 ; 凡 = 4 , 果期 ; 又 = 5 , 枯萎休眠
期 ;凡 , 日平均气温 (℃ ) ; .x , 计时降雨量 ( m m ) : Y 、 , 根的干 /鲜
重 比 ;叽 , 芍药贰的含量 ( % ) ;其中凡 、 .x 项来自安徽省毫州
市气象局 ; Y : 系定期采收主根 , 去净泥土称鲜重和 自然干燥后
称干重 , 即千重和鲜重的比值 ;姚 本实验测定所得芍药贰的含
量 ( % ) ;叽 相当于鲜根中的芍药贰含量 ( % ) 。
表 2 相关分析结果
从表 1得出 , 不同采集期毫州芍药干燥根 , 其芍药
贰的含蚤在 5 月初花期最高 , 但此时药材干 /鲜比值最
低 。不同采集期药材的出材率和干燥根中芍药贰的含量
相乘 ,得到相当于鲜根中的成分含量 , 可近似看作药材
产量 。 从图 3 、 4 上看到 , 5 月 (营养生长 期 )成分产量并
非最高 , 而在 9 月 (枯萎休眠期开始 ) . 至翌年 3 月 (枯萎
休眠期结束 )维持在最高水平 。
八 - - - - - - - - - - - -一守入 {伙 `一二二万,卜了 一二二 -
0 . 10 1. a 盆. 的
图 1 不同采集期芍药根中芍药贰百分含量的直线图
纵轴— 芍药贰百分含量 ;横轴— 采集日期
l : 1989一0 1一16 8: 1988一 04一 23 15: 1988一0 7一 18 22: 1988一 1卜 11
2: 198卜 0 1一30 9: 1988一 05一 02 16: 1988一 07一 27 23: 19 88一 l卜 23
3: 1989一 02一 1 1 10 : 1988一05一 15 17: 1988一 08一 09 24: 19 88一 11一 03
4: 198-9 03一 03 11: 1988一05一 25 18: 1988一 08一 22 25: 19 88一 11一 16
5
: 1989一0 3一 17 12 : 1988一0卜10 19: 1988一 09一 04 26: 19 88一 11一27
6: 1989一0 3一29 13: 1988一0卜25 20: 1988一 09一 15 27: 1988一 12一 26
7
: 1988一 4一 13 14: 1988一07一07 21: 1988一O卜 30
八扭…比广…-
幻 1. 2 0 2肠 口0
图 2 不同采集期芍药中芍药贰百分 含量的趋势图
纵轴— 芍药贰百分含量 ;横轴— 采集 日期
Y i 一一 . -堕担兰至兰一- 一 ~ 剩余为 凡 凡 凡 方差 方差 复相关系 数
YI 0
.
0 855 0
.
9 15 2 0
.
60 52 0
.
00 70 7
.
7 0 10
姚 0 . 3622 0 . 8 2 62 一 0 . 1 86 1 一 0 . 09 6 3 0 . 544 9
叽 0 . 6 39 4 0 . 5626 0 . 14 84 0 . 1311 0 . 512 5
79
.
03 9
2
.
378 1
0
.
190 3
0
.
9 500
0
.
878 0
0
.
854 7
八、 仁久{一与动八t 达兰。 , _
, 气八 ~公亚二 -二丫 ” 权牙气 ,反彬二丫月 ” ’ J~
图 3 不同采集期芍药根中芍药试含量 及出材率直线图
纵轴— 芍药贰含量 ( % )及 出材率 ( 10 一 ’ ) ;横轴— 采集日期
1 9 9 9 年 5 月
第 2 期 (总第 4 9 期 )
中 国 林 副 特 产
Q
u a r t e r ly o f F o r e s t B y
一
P r o d u e t a n d S p e e i a l i ty i n C b i n a
N o
.
2 ( G S N O
.
4 9 )
M
a夕 , 1 99 9
蝴蝶兰的组织培养
. 李 晶 黑龙江省林业科学研究所 (哈尔滨 巧0 0 4 0)
. 韩雪梅 姜 晶 中国科学院黑龙江农业现代化所
一产七亡Jl飞」
沈一一94R,1
弓`,几,l
68420635311060
内JO矛,几」2. .1,4,气工`飞ù月片
周434“7240315298内JQ了2门、ù,`2,几2门J4
蝴蝶兰属洋兰中气生兰的一种 , 花大 , 蝶形艳丽 ;
叶阔 , 光滑 , 光泽诱人 。 其花名贵 , 繁殖较难 。 多年来 , 我
们进行了组织培养基的优化基筛选 , 研究结果我们认为
初步确定利用 凡 培养基的大量元素 , 利用 M S 基的微
量元素和铁盐 , 苗子长势较好 , 在此基础上我们于 19 9 8
年又进行激素种类的对 比试验 , 从而初步筛选出较为适
宜的分生培养基和生根培养基 。
1 供试材料
取材 1 99 7年 5 月购买的一瓶试管苗 。
2 试验方法
2
.
1 分生培养基 4 种
①凡 十 B戊 、 . 十 G戊 ` . + IA OA 、 。 十 2 , 4 一 残 2、 .
②凡 + B戊 、 : 十 G凡 、 . + BI 人 、 。 + 2 , 4 一 玖 : 、 .
③凡 十 B人 、 .
④戊 十 不加激素
以上 4 种培养基 1 9 9 8 年 8 月 2 7 日配制 , 灭菌 2 9
日接种 。
2
.
2 生根培养基 4 种
以上 4 种培养基
接种 。
3 结果与分析
表 1
1 9 98 年 1 2 月 4 日配制 , 灭菌 6 日
培养结果调查
基号 接种
株数
诱导
成苗
诱导出
芽苞
分化
总数
分化
基号 调查株数
生 根 时间株 数 ( % )
①合、 十 B A I二 . + N A OA : , .
②奇“ + B A加 . + N A oA 、 .
③奋“ + B 、 。 . 十 2 , 4 一 。 。 l。 .
④寺“ 十 B 、 、 .
3
.
1 将试管分别接种到上述 4 种分生培养基中 , 经过
5 0 天左右时间的诱导 , 可产生丛生苗 . 从表 1 中可 以看
出 , 1号培养基诱导出芽苞 、 丛生苗效果较好 . 分化率较
高 , 其它 3 种培养基效果不理想 。
3
.
2 将 已分化的丛生苗转生根培养基 , 从表 2 中可以
看出 , 2 号培养基生根效果较好 , 其主要成分是 戊 基加
生长素 , 其它 3 种培养基效果不理想 。
.
八认 /一火二、 一丫卜、 ~ ~气乙二一入 / V .… 月军石~` “ 二 , 子又八一 汀 . ’ . …“’ 护 ’ `犷人丫叹气芬七二声丫一 ` ’ 1 ” ’一`
图 4 不同采集期芍药根中芍药贰含量及 出材率趋势图
纵轴— 芍药贰含量 (% )及出材率 ( 10一 ’ ) ;横轴— 采集日期参考文献
1 何丽一 芍药贰的含最测定方法 .药学学报 , 19 8 0 ; 18 ( 4) :
2 3 1
2 顾丽贞 , 朱小燕 , 南继红 .薄层层析一紫外分光光度法测定
芍药中芍药贰及明目逍遥散制剂中芍药贰的含量 . 药物分析杂
志 , 19 85 ; 5 ( 1 ) : 2 0
3 金昌东 , 徐国钧 , 金蓉莺等 . 反相 H P L C 法测定 13 种芍药
根中贰类和苯甲酸的含量 . 中国药科大学学报 , 19 8 9 ; 2 0 ( 3) :
14 1
4 王杰民 , 何怀冰 , 竺叶青等 .芍药中芍药贰的高效液相色谱
法测 定 . 中成药 , 19 9一; 1 3 ( 4 ) : 3 3
5 赵章万 , 刘三康 , 郭平等 . 高效液相色谱法测 定芍药及 14
种含白芍药成药中芍药贰的含量 .药物分析杂志 , 19 90 ; 10 (6) :
3 3 7
6 毛丽珍 , 阎小卫 , 阴沛红等 . 薄层扫描法测定八珍制剂中芍
药贰的含童 . 药物分析杂志 , 1 991 ; 19 (7) : 2 9 3
7 金昌东 , 徐国钧 , 金蓉变等 . 不同采集期芍药根中化学成分
含量的多元数蚤化回归分析 . 中国中药杂志 , 1 9 9 3 ; 1 8 ( 6) : 33
8 金昌东 , 徐国钧 . 金蓉鸳等 . 反相 H IP , C 法测定不同采集期
毛果芍药根中贰类苯甲酸含 t . 中国药科大学学报 . 19 91 ; 2
( 5 )
: 2 7 9