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白木香组织培养的初步研究



全 文 :白木香组织培养的初步研究
杜 勤 o王振华 o刘书芬 o梁惠珍 o江小间 o吴晓萍
k广州中医药大学 o广东 广州 xtswszl
≈摘要  目的 }考察因素对诱导白木香愈伤组织产生的影响 ∀方法 }用不同外植体 !光照条件 !激素进行实验 ∀
结果 }叶的诱导效果优于茎 o暗培养优于光照培养 ox号激素配比优于其他组合 ∀结论 }以叶作外植体 o在  ≥ n y2
…„ s q{ °ª#p t n ‘„„ t qs °ª#p t的培养基上进行黑暗培养对诱导白木香愈伤组织效果最好 ∀
≈关键词  白木香 ~愈伤组织 ~组织培养
≈中图分类号  ≥ xyz ~≥vt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlts2syz|2sv
白木香 Αθυιλαριασινενσισ k²∏µql Š¬¯ªk又名土
沉香l为瑞香科植物 o是我国特有的珍贵树种 ∀以带
黑色树脂的干燥心材入药 o药材名沉香 o为国产沉香
的正品来源 o广东道地药材 o十大广药之一 ∀沉香是
临床常用的理气药 o具行气止痛 o温中止嗳 !纳气平
喘功效 o用于治疗胸腹胀痛 !胃寒嗳吐 !虚喘等证 ∀
现已被列入5中国植物红皮书 ) ) ) 稀有濒危植物6中
濒危种 o成为国家 v级保护植物 ∀因此开展白木香
组织培养的研究 o对白木香种质资源保护具有重要
意义 ∀本实验考察茎 !叶 ~光 !暗培养条件以及 y2
…„ o‘„„两种激素 y个水平的不同配比对白木香愈
伤组织诱导的影响 ∀
1 材料与方法
实验所用的白木香茎 !叶采自广州中医药大学
药圃 ∀自来水冲洗干净 o滤纸吸干表面水分 ozx h酒
精漂洗 s qx °¬±ou h升汞培养基为  ≥ o经 tut ε 灭
菌 tx °¬±∀光照强度 u xss ¬o每日光照 { ∗ ts «o
培养温度kus ? ul ε ∀
2 实验结果
2 q1 不同外植体对诱导愈伤组织产生的影响 考
察茎 !叶两种外植体对诱导白木香愈伤组织产生的
影响 o结果见表 t ∀
表 t 不同外植体对白木香愈伤组织的影响
外植体 接种数 愈伤组织数 诱导率r h
茎 ws x tu qx
叶 ws uz yz qx
注 }每组接种 us瓶 o每瓶接种 u块k表 u同l
2 q2 光照条件对诱导愈伤组织产生的影响 以叶
为外植体 o考察光 !暗培养条件对诱导白木香愈伤组
≈收稿日期  usss2tu2t|
织产生的影响 o结果见表 u ∀
表 u 不同光照条件对白木香愈伤组织的影响
光照条件 接种数 愈伤组织数 诱导率r h
uxss ¬ ws uw ys qs
黑暗 wu vt zv q{
2 q3 不同激素配比对诱导愈伤组织产生的影响
考察 y2…„和 ‘„„ 两种激素对诱导白木香愈伤组
织产生的影响 o结果见表 v ∀
表 v 不同激素配比对白木香愈伤组织的影响
‘²q 激素配比 愈伤组织成愈率r h
t ‘„„ s qy zw q|
u y2…„ s qu xv qx
v y2…„ s qw n ‘„„ s q{ zu qz
w y2…„ s qy n ‘„„ s qu yu qx
x y2…„ s q{ n ‘„„ t qs |x qu
y y2…„ t qs n ‘„„ s qw {x qv
注 }激素单位为 °ª#p t
3 小结
3 q1 以白木香幼嫩茎叶为外植体进行愈伤组织诱
导 ou周后茎两端 !叶片主脉处开始膨大 o并出现淡
黄绿色愈伤组织 o到 w周时 o愈伤组织产生的量较
多 o即可进行统计 ∀
3 q2 白木香为多年生木本植物 o其愈伤组织较难诱
导 ∀通过对茎 !叶两种外植体的比较 o结果显示 }叶
的诱导效果要好于茎 ∀这可能是茎中细胞木质化程
度较高 o不易产生愈伤组织 ~另外白木香能产生树
脂 o而在茎中树脂道较多 o受伤后树脂从伤口处溢
出 o也会影响愈伤组织的产生 ∀
3 q3 对光照条件的考察结果显示 o暗培养的效果好
于光照培养 ∀因此在诱导白木香愈伤组织产生时 o
宜选择以叶为外植体进行黑暗培养 ∀
3 q4 不同配比激素的实验结果表明 oy2…„ 和 ‘„„
#|zy#
第 uy卷第 ts期
usst年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qts
’¦·qousst
都能诱导出白木香愈伤组织 o两者联合使用效果优
于两者单独使用 ox号配比较果最好 o即以叶为外植
体 o培养基为  ≥ n y2…„s q{ °ª#pt n ‘„„ t qs °ª
#p t时 o愈伤组织诱导率达 |x h以上 o此愈伤组织
质地紧密 o颜色黄绿 o长势良好 ∀
综上所述 o诱导白木香愈伤组织产生的最佳条
件为以叶为外植体 o在  ≥ n y2…„s q{ °ª#pt n
‘„„t qs °ª#p t培养基上 o进行黑暗培养 ∀
≈责任编辑 王康正 
枇杷叶中农药残留量测定研究
薛 健 o张 琪 o张国良 o王力为 o陈建民
k中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 o北京 tsss|wl
≈摘要  目的 }研究制订测定枇杷叶中 ts种有机氯农药残留量的方法 o并对 ts份样品进行测定 ∀方法 }用有
机溶剂提取并经净化 o用气相色谱配电子捕获检测器进行测定 ∀结果 }方法回收率为 zw qs h ∗ tsu qs h o方法相对
标准偏差  tx qs h o所测定 ts个样品中总 …‹≤ 和总 ⁄⁄× 含量  s qs{ Λª#ªp t ∀结论 }方法简便 !准确可用于枇杷
叶药材的测定 o所测样品中有机氯农药残留量低于相关标准 o可以安全使用 ∀
≈关键词  枇杷叶 ~有机氯农药 ~农药残留量 ~气相色谱
≈中图分类号  • u{u qzts qv ~≥w{u qv n u ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlts2sy{s2su
农药的使用对药材的稳产 !高产有着重大的意
义 o但长期广泛地使用农药也带来了中药材的农药
残留问题 ∀有机氯农药因其降解速度很慢 oys ozs
年代的大量使用 o使环境中广泛存在 o并且在食物链
中有蓄积的可能 o所以 o对人们的健康有很大威胁 ∀
枇杷叶是常用药材 o有关枇杷叶的农残研究尚还未
见报道 o为此对此问题进行了研究 ∀
1 材料与设备
1 q1 实验样品 枇杷叶样品共 ts个 o由本所余世
春采集并鉴定 o详细资料如下 }≠ 四川成都 ~ 安徽
合肥 ~≈ 四川成都 ~…江苏吴县 ~ 安徽黄山 ~¡安
徽中医学院附院 ~¢安徽亳州 ~£北京药材公司 ~¤
广东药市 ~
1 q2 试剂 六六六k…‹≤l和滴滴涕k⁄⁄×l各异构
体 浓度为 t s s Λª# °¯ p t !五氯硝基苯 k °≤‘… o
|{ qx h o国家标准物研究中心l o艾氏剂k „⁄ o
|| qs h o农业部农药检定所l ∀丙酮k分析纯l ~石油
醚k分析纯 ovs ∗ ys ε l ~浓硫酸k分析纯l ~水k双蒸
水l ~二氯甲烷k分析纯l ~无水硫酸钠k分析纯l ∀石
油醚 !二氯甲烷 !丙酮 o均用全玻璃装置重蒸 o经气相
色谱检测 o确认符合测定要求 ∀
≈收稿日期  usst2sw2us
≈基金项目  国家/九五0攻关课题k|y2|sv2su2sul
1 q3 仪器 ∂¤µ¬¤± ysss 气相色谱仪 k配 yv‘¬2
∞≤⁄~不分流r分流进样系统l ~‹°2xks qxu °° ≅ vs
°l弹性石英毛细管柱 ~∂¤µ¬¤± wuzs积分仪 ~{u2t离
心机 ~∞¯ °¤·µ¤±¶¶²±¬¦vts 超声波清洗机 ~∞≠ ∞„
旋转蒸发仪 ∀
2 实验方法
2 q1 色谱条件 进样口温度 uvs ε ~检测器温度
vss ε ~柱升温程序初始 tss ε ots ε # °¬±p t升至
uus ε o{ ε # °¬±p t升至 uxs ε o保持 ts °¬±~载气
高纯氮k  || q|| h l ∀进样方式为不分流进样 ∀
2 q2 标准曲线的绘制 分别精确称取 u .sy °ª
°≤‘…和 u qsx °ª „⁄o分别置于 u °¯ 量瓶中 o用
石油醚溶解并定容 o作为贮备液 ∀逐渐稀释并加入
…‹≤ o⁄⁄× 混合标准品溶液 ∀使其浓度为 } °≤‘…
x qtx Λª# °¯ p t o„⁄v qx| Λª# °¯ p t o…‹≤ 各异构体 x
Λª# °¯ p t o⁄⁄× 各异构体 x Λª# °¯ p t o制成 ts种农药
的混合标准品贮备液 ∀准确移取贮备液 o逐渐稀释
成 x个浓度梯度的混合标准品稀释液 ∀各取 t Λ¯ o注
入气相色谱仪 o依 2 q1 色谱条件 o以峰高为横坐标 o
含量为纵坐标 o计算其回归方程k见表 tl ∀
2 q3 供试品溶液的制备 精密称取样品kys ε 干
燥lu qs ª于 tss °¯ 具塞锥型瓶中 o加入 us °¯ 水浸
泡过夜 o精密加入 ws °¯ 丙酮称重 o超声 vs °¬±o补
足重量 o再加约 y ª氯化钠及精密加入 vs °¯ 二氯甲
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第 uy卷第 ts期
usst年 ts月
中 国 中 药 杂 志
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