全 文 ：影响大孔吸附树脂
吸附纯化黄连提取液因素的初步考察
侯世祥 o朱 浩 o孙毅毅 o毛声俊
k华西医科大学 药学院 o四川 成都 ytsswtl
≈摘要 目的 }考察大孔吸附树脂吸附纯化效果的影响因素 o为在中药纯化研究中应用吸附纯化法 !优化吸附
纯化条件提供参考 ∀方法 }以黄连水提液为样本 o小檗碱为代表成分 o研究树脂和中药提取液两方面对吸附纯化效
果的影响 ∀结果 }树脂的种类 !提取液的浓度 !提取液中盐溶液的种类和用量及外环境的温度都会不同程度地影响
吸附纯化的过程和结果 ∀结论 }用吸附纯化法纯化中药制剂 o应针对具体样品进行影响因素综合考察 o方能筛选出
较佳的纯化条件 ∀
≈关键词 大孔吸附树脂 ~纯化 ~影响因素 ~黄连提取液
≈中图分类号 u{v qy ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusssltt2yyx2sv
大孔吸附树脂是一类新型非离子型高分子化合
物 o应用于工业脱色≈t o环境保护≈u o抗生素的提取
分离≈v 等领域已近 us年 ∀近年来在药学工作者的
努力下 o已将其用于中药制剂的纯化研究并取得成
功 o其中甜叶菊苷 !白芍药总苷≈w 等均已用于生产 o
但对其影响因素研究的报道尚不多见 ∀本文以黄连
水提液为样品 o以小檗碱为代表成分 o考察了树脂吸
附纯化的影响因素 o试图为吸附纯化法在中药制剂
研究中的应用和纯化条件的优化提供参考和依据 ∀
1 材料
⁄ysx !÷2≠ 型树脂k化工部成都有机硅研究中
心l o2型树脂k南开大学化工厂l ~黄连药材为
市售 o经本校生药教研室王曙副教授鉴定符合5中国
药典6t||x年版一部的要求 ~小檗碱对照品k中国药
品生物制品检定所l ~所用试剂均为分析纯 ∀
2 评价指标及方法
211 生物碱的含量及测定方法
本文以黄连药材及所含的生物碱为代表 o进行
吸附纯化影响因素的研究 ∀含量测定方法参照5中
国药典6t||s年版一部黄连药材含量测定项下的规
定 o采用柱层析2分光光度法≈x ∀
212 吸附洗脱特性参数≈y
21211 比上柱量k Σ o¶¤·∏µ¤·¬²± µ¤·¬²l }达吸附终点
时 o单位质量干树脂吸附夹带成分的总和 oΣ k Μ上
≈收稿日期 t|||2tu2sy
p Μ残lr Μo表示树脂吸附 !承载的总体能力 oΣ 越
大 o承载能力越强 o是确定树脂用量的关键参数 ∀
21212 比吸附量k Α o¤¥¶²µ¥·¬²± µ¤·¬²l }单位质量干
树脂吸附成分的总和 Α ( Μ上 p Μ残 p Μ水洗) Μ ,
表示树脂真实吸附能力 , Α 越大吸附能力越强 o是
选择树脂种类与评价树脂再生效果的重要参数 ∀
21213 比洗脱量k Ε o¨ ∏¯¤·¬²±µ¤·¬²l }吸附饱和后 o用
一定量溶剂洗脱至终点 o单位质量干树脂洗脱成分
的质量 oΕ Μ洗脱r Μo表示树脂的解吸附能力与洗
脱溶剂的洗脱能力 oΕ越大表示洗脱溶剂的洗脱能
力与树脂的解吸附能力越强 o是选择洗脱溶剂的重
要参数 ∀
其中 Μ为干树脂质量 o即为市售树脂干燥至恒
重测得的质量 ∀ Μ上 是上柱液中指标成分的质量 o
为上柱体积与指标成分浓度的乘积 ~或以上柱液相
当于药材质量表示 o则为上柱液的体积与单位体积
浸出液相当于药材质量的乘积 ∀ Μ残 是过柱流出液
中指标成分的质量 o为流出液体积与其指标成分浓
度的乘积 ∀ Μ水洗是上柱毕 o最初用水洗脱下来的指
标成分的质量 o为水洗液体积与其指标成分浓度的
乘积 ∀ Μ洗脱为用洗脱溶剂洗脱出的指标成分的质
量 o由洗脱液体积与其中指标成分浓度计算而得 ∀
3 方法与结果
311 供试样品的制备
取黄连药材适量 o加入 ts倍水量 o分 v次煎煮 o
每次 wx °¬±o即得黄连水提液 ∀每毫升水提液相当
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第 ux卷第 tt期
usss年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o²qtt
²√ qousss
于 vv qv °ª黄连药材 o测得其中小檗碱的含量为
s qvsx °ª# °¯ p t ∀
312 树脂类型对吸附纯化效果的影响
取 ⁄ysx o÷2≠ o2 v种树脂柱 o用黄连水
提液上柱 !水洗 o再用不同浓度的乙醇梯度洗脱 o
分段收集过柱残液与水洗液 o观察柱上树脂和流出
液的颜色变化 o用碘化铋钾试液判定吸附 !洗脱终
点 o分别测定上柱液 !过柱残液 !水洗液 !乙醇洗脱液
中小檗碱的含量 o并计算有关的特性参数 o结果见表
t ∀
表 t 不同型号树脂吸附纯化特性参数
树脂型号
比上柱量
药材
rª#ªp t
指标成分
r°ª#ªp t
比吸附量
k指标成分计l
r°ª#ªp t
比洗脱量k指标成分计l
r°ª#ªp t
xs h醇洗 zx h醇洗 |x h醇洗
⁄ysx u qxw ut qtu t| qyy ut qsu s qsv s qsv
÷ p ≠ u qy{ ut qzs tz q|u t{ qtv s qsx s qsw
p t qv| y qwy y qvt x q|y s qsw s qsx
由表 t结果可知 o以小檗碱为指标成分 o黄连水
提液在不同树脂上具有不同的吸附洗脱效果 o其中
在 ⁄ysx 和 ÷2≠ 型树脂上比上柱量较大 o而且在
⁄ysx和 ÷2≠ 型树脂上的比洗脱量较大 ∀相反在
2型树脂上性能较差 ∀由此提示 o在生产实践
和科学实验中 o有必要根据有效部位的不同 o选择适
宜的树脂型号进行研究 ∀
313 浓度对吸附纯化效果的影响
31311 供试样品的制备
黄连药材按前述方法煎煮 o浓缩 o使 t °¯ 药液
相当于 tss °ª药材 o测定小檗碱浓度为 s qwt| °ª#
°¯ p t ∀分成 y份 o加水稀释 o使小檗碱的浓度分别为
s qtsx os qtws os quts os qvss os qvw| os qwt| °ª# °¯ p t ∀
31312 不同浓度小檗碱吸附洗脱效果
取等体积上述药液分别上于 ⁄ysx型树脂柱 o
用碘化铋钾试液判定吸附终点 o水洗树脂柱 o测定其
比吸附量 o结果见表 u ∀比吸附量与上柱液浓度对
ƒµ¨±§¯¬¦«和 ¤±ª°∏¬µ公式拟合 o拟合结果良好 ∀
表 u 不同浓度小檗碱对吸附纯化效果的影响
Χsr°ª# °¯ p t Ξ/ Μr°ª#ªp t ª¯Χ² ª¯Ξ/ Μ tr Χ² tr Ξ/ Μ
s qtsx s q|uu p s q|z| p s qsvx | qxuw t qs{x
s qtws t qz{v p s q{xw s quxt z qtwv s qxyt
s quts u qvz{ p s qyz{ s qvzy w qzyu s qwut
s qvss v qzvw p s qxuv s qxzu v qvvv s quyt
s qvw| w qs{s p s qwxz s qytt u q{yx s quwx
s qwt| w q|wu p s qvz{ s qy|w u qv{z s qusu
注 }Χs q上柱样品小檗碱的浓度 Ξ/ Μ .小檗碱的比吸附量
对 ƒµ¨±§¯¬¦«公式拟合 }¯ªΞ/ Μ t qtwy n t qtv{
ª¯Χs oρ s .|{w , ν y ∀
对¤±ª°∏¬µ公式拟合 }¯ r Ξ/ Μ p s qttu|
n s qttx r¯ Χs oρ s .|y{ , ν y ∀
由上述结果可知 o浓度是影响吸附纯化效果的
重要因素 o浓度增加 o小檗碱在树脂上的比吸附量也
相应增加 o且比吸附量与小檗碱的浓度之间满足
ƒµ¨±§¯¬¦«和 ¤±ª°∏¬µ公式 o说明中药成分与大孔吸
附树脂间发生了以吸附为主的作用 ∀
314 盐溶液对吸附纯化效果的影响
在黄连水提液中分别加入氯化钠和氯化钾 o使
浓度为 s h ox h otx h ous h ovs h ~再加入 ⁄ysx型
树脂 o于 ux ε 水浴中 o用康氏振荡器振荡 t «o立即
过滤 o测量滤液中小檗碱的浓度并推算树脂的比上
柱量 o结果见表 v ∀
表 v 盐溶液对小檗碱吸附效果的影响
盐浓度
h
氯化钠
Χ
r°ª# °¯ p t
Ξ/ Μ
r°ª#ªp t
氯化钾
Χ
r°ª# °¯ p t
Ξ/ Μ
r°ª#ªp t
s s qtzt y qus s qts| y qus
x s qtwt z qzs s qtwy w qvy
ts s qtsz | qws s qtwx w qws
tx s qs|{ | q{v s qtxt w qts
us s qszv tt qs{ s qs{{ z qux
vs s qsxv tu qts s qsx| { qzs
注 }Χ为滤液中小檗碱的浓度 , Ξ/ Μ .小檗碱的比上柱量 , Π.为
盐的浓度
氯化钠对小檗碱吸附纯化效果影响曲线 }
ª¯ Χ p s .zzv{ p s .stzsv Π, ρ s .||x , ν y ∀
由上述结果可知 o中药上柱液中加入盐会对树
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第 ux卷第 tt期
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中 国 中 药 杂 志
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脂的吸附能力产生一定影响 o这种影响因盐的种类
和用量不同而不同 ∀当氯化钾的浓度为 x h ∗ tx h
时 o小檗碱的比上柱量降低 ∀当加入高浓度氯化钾
和氯化钠时 o其比上柱量增加 o且氯化钠浓度的变化
与滤液中小檗碱浓度变化满足一定的数学规律 ∀
315 温度对吸附纯化效果的影响
取黄连水提液分别加入等量 ⁄ysx型树脂 o在
us ovs ows oxs oys ozs ε 下 o用康氏振荡器振荡 t «o
立即过滤 o测量滤液中小檗碱的浓度并推算树脂的
比上柱量 o结果分别为 y qus ox qwx ox qws ow qyx ow qxs o
w q{s °ª#ªp t ∀
由上述结果可知 o温度也是影响吸附纯化效果
的重要因素 o温度升高 o树脂比上柱量下降 o尤其超
过 xs ε 后 o比上柱量仅为 us ε 时的 zs h左右 o说明
中药成分在树脂上的吸附为一放热过程 o低温有利
于提高中药成分的比上柱量 o但在室温范围内kus ∗
ws ε l温度对比吸附量影响较小 ∀
4 讨论
411 本文为应用基础研究 o为了更准确地评价上柱
前后成分变化 o作者设计了相应的吸附洗脱特性参
数 o包括比上柱量 !比吸附量和比洗脱量 v个参数 ∀
v个参数之间的变化反映出药物在吸附前 !吸附后 !
解吸附后三过程中的量变关系 ∀同时 ov个参数均以
单位质量干树脂计 o可以提高评价指标的准确性与
科学性 o亦便于估算树脂的用量 o利于工业化生产 ∀
412 据有关文献报道 o在某些发酵液中加入少量氯
化钠可以提高抗生素≈v o中药成分在树脂上的比上
柱量随盐溶液变化的情况未见报道 o本文研究结果
表明 o不同浓度的氯化钠和高浓度的氯化钾可以提
高指标成分的比上柱量 ~低浓度的氯化钾则会降低
其比上柱量 ∀增加盐溶液的浓度 o可以提高有效成
分的保留率 o而且盐溶液的浓度与残液中小檗碱的
浓度满足一定的数学关系 o这些发现有利于制剂工
艺改进 o值得进一步研究 ∀
413 树脂的吸附为一物理化学过程 o中药成分吸附
在树脂表面 o通常伴随着熵变 !焓变和 ¬¥¥¶自由能
改变 o从而导致整个体系表面自由能下降 o为一放热
过程 o所以升高温度会造成比上柱量降低 o这一结果
与相关报道相似≈z ∀
414 据报道 o影响大孔吸附树脂吸附纯化效果的因
素多为树脂的种类 !中药药液与树脂用量的比例
等≈w o这在本研究中也得到了证实 ∀此外 o中药药液
的浓度 !药液中盐的种类和用量 !外环境的温度同样
影响树脂的吸附能力 o控制好这些因素 o有利于纯化
工艺的改进和完善 o提高树脂的利用率 o值得进一步
研究 ∀
≈参考文献
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中国抗生素杂志 ot||t otykul }|{1
≈w 金继曙 o郁达虎 o种明才 1 用大孔吸附树脂分离白芍药总甙 1
中国中药杂志 ot||w ot|ktl }vt1
≈x 中国药典 1 一部 1t||s1
≈y 朱 浩 o侯世祥 o孙毅毅 1 大孔吸附树脂吸附纯化不同中药有
效部位特性研究 1 中国中药杂志 ot||{ ouvktsl }ysz1
≈z 赵凤生 o邬行彦 1 一种新型的弱碱大孔型阴离子交换树脂吸着
链霉素的静力学和动力学 1 医药工业 ot|{v okyl }|w1
≈责任编辑 李 禾
正交设计2重复试验法优选当归芍药散的提取工艺
汤明辉 o寇俊萍 o朱丹妮 o严永清
k中国药科大学 中药学院 o江苏 南京 utssv{l
≈摘要 目的 }筛选抗老年性痴呆药2当归芍药散的提取工艺参数 ∀方法 }以蒎烷单萜苷2芍药苷为指标成分 o
以 °≤ 法为含量测定方法 o以芍药苷提取率为评价标准 o采用正交设计2重复试验法 o优化选择提取工艺 ∀结果 }
≈收稿日期 usss2sw2ux
≈基金项目 国家新药基金资助项目k|y2|st2sx2v{l
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第 ux卷第 tt期
usss年 tt月
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