全 文 ：蟾酥 Β2环糊精包合物的制备工艺
郭 涛t o宋洪涛t o赵明宏t o张汝华u o李 铣u
kt q沈阳军区总医院 o辽宁 沈阳 ttssty ~u q沈阳药科大学 o辽宁 沈阳 ttsstyl
≈摘要 目的 }研究蟾酥 Β2环糊精包合物的制备工艺 ∀方法 }采用均匀设计法筛选优化出最佳制备条件 o在此
条件下分别采用 x种不同的包合方法制备蟾酥 Β2环糊精包合物 ∀结果 }采用球磨法制备蟾酥 Β2环糊精包合物 o优
于其他几种制备方法 o其蟾毒配基类化合物的包合率达 {x qwu h ∀结论 }在本实验考察范围内 o球磨法为最佳制备
方法 ∀
≈关键词 蟾酥 ~Β2环糊精 ~包合物 ~制备工艺
≈中图分类号 u{v ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussultt2s{vx2sw
蟾酥 ∂ ±¨¨ ±∏°
∏©²±¬¶为蟾蜍科中华大蟾蜍
Βυφο γαργαριξανσ ≤¤±·²µ或黑眶蟾蜍 Β . µελανοσ2
τιχτυσ ≥¦«±¨ ¬§¨µ的干燥分泌物 ∀本品性味辛温 o有
毒 o归心经 o具有解毒 !止痛 !开窍醒神之功效≈t ∀Β2
环糊精 kΒ2 ≤⁄l包合物 o可改变药物的理化性
质≈u ∗ w ∀为减少蟾酥的刺激性 o降低其毒性 o增加药
物的稳定性 o改善其溶解性 o实验将蟾酥与 Β2≤⁄制
成包合物 o并对影响包合率的诸多因素进行考察 o经
筛选优化得到了较佳的包合工艺 ∀
1 仪器与试药
∂2tys 型紫外分光光度计 k日本岛津l o
≠ 2µ型液体快速混合器 k江西医疗器械厂l o
× 2ty
型高速台式离心机k上海安亭科学仪器
厂l o
xs2⁄型增力电动搅拌机k上海标本模型厂l o
≥xtxs型超声波清洗机k天津奥特塞恩斯仪器有
限公司l o⁄≥2uss型高速组织捣碎机k江苏江阴科研
器械厂l ~≥2∂ 型球磨机k浙江海宁新华医疗器械
厂l oy{{型真空干燥箱k大连第四仪表厂l ∀
蟾酥k沈阳市药材公司l oΒ2≤⁄k纯度 |{ h o广
东省郁南县环糊精厂l o脂蟾毒配基对照品k中国药
品生物制品检定所l o试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 蟾酥 Β2≤⁄包合物中蟾毒配基类化合物的含量
测定方法研究
2 q1 q1 紫外吸收光谱和测定条件
≈收稿日期 usst2tu2tx
≈基金项目 辽宁省政府科学技术基金资助课题k||tsxssxs{l
≈通讯作者 电话 }ksuwluv||w{ys 传真 }ksuwluv{|ts|v
取蟾酥 !蟾酥 Β2≤⁄包合物适量加乙醇超声提取
vs °¬±o过滤 o滤液稀释至适当浓度 ∀另取脂蟾毒配
基对照品适量用乙醇配成适当浓度 o在波长 uss ∗
wss ±°扫描 o三者吸收光谱完全一致 o最大吸收波
长为ku|| ? tl ±° oΒ2≤⁄乙醇液在此波长处无干扰 o
故选定 u|| ±°为测定波长 o狭缝 u ±° ∀
2 q1 q2 线性关系考察
精密称取脂蟾毒配基对照品 us °ªo置 tss °
容量瓶中 o加乙醇溶解并稀释至刻度 o作为对照品溶
液 ∀精密吸取对照品溶液 s qx ot qx ou qx ov qx ox qs
°至 ts °容量瓶中 o加入乙醇稀释至刻度 o摇
匀 o在 u|| ±°波长处进行测定 o结果脂蟾毒配基在
ts ∗ tss Λª#°p t线性关系良好 o回归方程为 Ψ
t .wutz ≅ tsp u Ξ p y .szv{ ≅ tsp v , ρ s q|||| ∀
2 q1 q3 蟾酥 Β2≤⁄包合物的含量测定
精密称取包合物约 us °ªo置 tx °具塞离心
管中 o精密加入无水乙醇 ts °o混匀 o密封 o超声 tx
°¬±后放置过夜 o次日离心ku xss µ#°¬±p tlts °¬±o
精密吸取上清液 t qx °o置 ts °容量瓶中 o补加
乙醇至刻度 o混匀 o在 u|| ±°波长处测定吸收度 o计
算包合物中蟾毒配基类化合物的含量 ∀
2 q1 q4 蟾酥 Β2≤⁄包合物中脂蟾毒配基的回收率实
验
精密吸取脂蟾毒配基对照品溶液适量 o加至已
知含量的 us °ª包合物中 o依照包合工艺项下方法
进行处理和测定 o结果平均回收率为 tss qt h o
≥⁄ t qwx h k ν |l ∀
2 q2 蟾酥提取溶媒的选择
精密称取蟾酥细粉 t ªo置 tx °具塞离心管
#xv{#
第 uz卷第 tt期
ussu年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qtt
²√¨°¥¨µoussu
中 o分别用 xs h ozx h o|x h乙醇超声提取 v次 o每次
溶媒用量 ts °o超声 tx °¬±o离心ku xss µ#°¬±p tl
ts °¬±o倾取上清液合并一起 o混匀 o精密吸取上清
液 s qt °o置 ts °容量瓶中 o加无水乙醇至刻度 o
混匀 o测定 o计算蟾毒配基类化合物的提取率 o结果
xs h ozx h o|x h乙醇对蟾毒配基类化合物的提取率
分别为 |u qt h o|{ qy h ozz qv h ∀可见 ov种溶媒中
以 zx h乙醇对蟾毒配基类化合物的提取效率最高 ∀
2 q3 包合工艺的研究
2 q3 q1 不同包合方法对蟾酥 Β2≤⁄包合率的影响
2 q3 q1 q1 高速组织捣碎法 按 Β2≤⁄与蟾酥提取
液的投料比为 xΒt o称取一定量 Β2≤⁄制成饱和水溶
液 o加入蟾酥提取液 o在高速组织捣碎机中 o以 { sss
µ#°¬±p t o捣碎 | °¬±o包合物的处理方法同包合物的
制备项下 ∀
2 q3 q1 q2 超声法 按 Β2≤⁄与蟾酥提取液的投料比
为 xΒt o称取一定量 Β2≤⁄制成饱和水溶液 o缓慢滴
加蟾酥提取液 o超声 vs °¬±o包合物的处理方法同包
合物的制备项下 ∀
2 q3 q1 q3 手工研磨法 按 Β2≤⁄与蟾酥提取液的投
料比为 xΒt o称取一定量 Β2≤⁄倾入研钵内 o加入 v
倍量蒸馏水 o然后加入蟾酥提取液 o手工研磨 ys
°¬±o包合物置低温真空干燥 uw «o研碎过 {s目筛 o
其他处理方法同包合物的制备项下 ∀
2 q3 q1 q4 球磨法 按 Β2≤⁄与蟾酥提取液的投料比
为 xΒt o称取一定量 Β2≤⁄倾入球磨缸内 o加入 v倍
量蒸馏水 o然后加入蟾酥提取液 o在 wu µ#°¬±p t下球
磨 ys °¬±o包合物置低温真空干燥 uw «o研碎过 {s
目筛 o其他处理方法同包合物的制备项下 ∀
2 q3 q2 饱和水溶液电动搅拌法的条件优化
2 q3 q2 q1 均匀设计 将蟾酥 zx h乙醇提取液浓缩
至含量为 u ª生药r°k其中蟾毒配基类化合物的含
量为 s qwvu °ª#°p tl o备用 ∀预实验发现 o影响包
合效果的主要因素为 Β2≤⁄与蟾酥的比例( Ξt) !反
应温度( Ξu) !搅拌时间( Ξvl ∀为选择最佳条件 o以
此 v因素为考察指标 o组成 xkxvl表 o进行 v因素 x
水平均匀设计实验 o因素水平表见表 t ∀
2 q3 q2 q2 包合物的制备 按表 u安排的条件进行
实验 o将 Β2≤⁄加入适量蒸馏水中制成 Β2≤⁄饱和溶
液 o固定转速为 {ss µ# °¬±p t o缓慢滴加蟾酥提取浓
缩液k相当于 u ª生药r°l o在不同温度下继续搅拌
至规定时间 o冷藏 uw «o过滤 o并以少量蒸馏水洗涤 o
以洗去部分未包合的 Β2≤⁄o低温真空干燥 uw «o研
碎 o过 {s目筛得粗包合物 o粗包合物用乙酸乙酯洗
涤 v次后晾干 o即得包合物粉末 o对此粉末进行各项
指标的考察 o计算公式如下 o结果见表 u ∀
表 t 水平因素表
水平
Ξt
Β2≤⁄Β蟾酥提取液
Ω/ Ω
Ξu
反应温度
r ε
Ξv
搅拌时间
r«
t tΒt us t
u uΒt vs u
v vΒt ws v
w wΒt xs w
x xΒt ys x
包合物收得率k h l
包合物收得量
Β2≤⁄投入量 n蟾酥提取物投入量 ≅ tss h
包合率k h l
包合物中蟾毒配基类化合物含量 ≅包合物重量蟾毒配基类化合物投入量 ≅ tss h
表 u 蟾酥 Β2≤⁄包合物均匀设计方案与结果 h
²q 包合物收率 蟾毒配基类化合物含量 包合率
t v{ qux t{ q{s uv q{w
u yu qyz tx qwt xw qvz
v ws qvv tx qvz w| quw
w yt qz| tt qxw zv qtx
x zt qx| | qzx {z qzv
2 q3 q2 q3 数据处理与结果分析 将表 u中各因素
的各水平对包合率和包合物收率用5均匀设计和统
计优化软件6k沈阳药科大学研制l进行多元逐步回
归分析 ∀
≠蟾毒配基类化合物包合率对各因素水平的回
归方程 Ψ p uw .zwys n uy .styx Ξt n s .yty| Ξu p
u .wszx Ξtu ,复相关系数 Ρ s .|||u ,残数平方和
Θ v .yuws ,标准差 Σ t .|svz , Φ utz .yuv| ;经
上述优化软件自检 , Α s .sw|z , Φ检验通过 ,各因素
优化值为 Ψ最大值 {{ .t|% , Ξt w .|zΒt( Ω/ Ω) ,
Ξu y| .{{ ε , Ξv t .tw «∀
包合物收得率对各因素水平的回归方程 Ψ
tt .{t{s n u .sxus Ξt n s .|sxy Ξu p u .zzys Ξv , Ρ
s .||{z , Θ u .t|sw , Σ t .w{ss , Φ tvu .|ytu ;经
上述优化软件自检 , Α s .syvy , Φ检验通过 ,各因素
优化值为 Ψ最大值 {u .v{% , Ξt w .|xΒt( Ω/ Ω) ,
Ξu y| .{{ ε , Ξv t qsv «∀
#yv{#
第 uz卷第 tt期
ussu年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qtt
²√¨°¥¨µoussu
从以上 u个回归方程可以看出 o影响包合率及
包合物收得率的主要因素为 Ξt , Ξv o即 Β2≤⁄与蟾
酥提取液的投料比和时间 ∀根据优化的自变量值并
结合生产的情况和需要 o设计了一个新的试验条件 }
Ξt xΒt( Ω/ Ω) , Ξu zs ε oΞv t «∀按此条件
实施 v次 o结果包合物中蟾毒配基类化合物的含量
为| qsu h o包合物收得率为z| qtw h o包合率为
{| qzy h ∀以上几种方法制备包合物的结果比较见
表 v ∀
表 v x种方法制备蟾酥 Β2≤⁄包合物结果比较k ν vl
制备方法 τr°¬±
包合物
收率r h
蟾毒配基类化
合物含量r h
包合率
r h
电动搅拌法 ys z| qtw | qsu {| qzy
超声法 vs y| qux { quv zt qyy
高速组织捣碎法 | yx qty z qvz ys qv{
手工研磨法 ys tss v q|u w| qu|
球磨法 ys tss y qz| {x qwu
3 讨论
蟾酥中的化学成分基本上可分为脂溶性和水溶
性两大部分 ∀水溶性部分主要为吲哚碱衍生物 o脂
溶性部分主要为蟾毒配基类化合物 o目前研究认为 o
蟾毒配基类化合物是蟾酥中的主要有效成分≈x o因
此 o我们主要考察了不同浓度乙醇对蟾毒配基类化
合物浸出率的影响 ∀结果表明 o以 zx h乙醇的提取
率最高 o可达 |{ qy h ∀由于蟾毒配基类化合物结构
相似 o其紫外最大吸收波长基本一致≈y o故本实验采
用 ∂ 法对包合物中总的蟾毒配基类化合物进行了
测定 o来求算总蟾毒配基类化合物的包合率 ∀
按照优化条件 o对常用的电动搅拌法 !超声法 !
高速组织捣碎法 !手工研磨法 !球磨法等 x种方法进
行比较 ∀结果表明 o饱和水溶液电动搅拌法制备的
包合物其包合率比其他 w种方法均高 ∀
对所制备的包合物经薄层层析 !÷2射线粉末衍
射和红外光谱鉴定 o表明包合物确已形成 ∀初步稳
定性实验表明 o蟾酥 Β2≤⁄包合物的抗光解性 !热稳
定性和湿稳定性明显高于混合物 o包合物的吸湿性
显著低于混合物 o而且 o蟾酥被 Β2≤⁄包合后其溶解
性和体外溶出度显著提高 o刺激性明显降低 o达到了
预期目的 ∀
≈参考文献
≈t 阴 健 o郭力弓 q中药现代研究与临床应用k ´l q北京 }学苑出
版社 ot||v qy{z q
≈u ½§¨ °¬µ o µ§∏ ≥ q°³µ²√¨° ±¨·²© ⁄¬¶¶²¯∏·¬²± °µ²³¨µ·¬¨¶²©
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·¤2≤¼¦¯²§¨ ¬·µ¬±¶q±·°«¤µ° ot||z otw|ktwl }t q
≈w 严 枫 o秦建芳 qΒ2环糊精包合物应用于中药制剂的研究进
展 q中药材 ot||y ot|kyl }vty q
≈x 金向群 q蟾蜍化学与药理作用研究进展 q中草药 ot||y ouz
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≈y 杨 锡 o罗兴平 q本底校正分光光度法测定蟾酥及其制剂中蟾
毒内酯的含量 q药物分析杂志 ot||w otwkwl }t| q
Στυδψ ον τηε Πρεπαρατιον οφ ς ενενυµ Βυφονισ
Β2Χψχλοδεξτριν Ινχλυσιον Χοµ πλεξεσ
פ²t o≥ ²±ª2·¤²t o ¬±ª2«²±ªt o ∏2«∏¤u o ÷¬¤±u
kt q≥«¨ ±¼¤±ª ¬¯¬·¤µ¼ ±¨¨ µ¤¯ ²¶³¬·¤¯ o≥«¨ ±¼¤±ª ttssty o¬¤²±¬±ªo≤«¬±¤~
u q≥«¨ ±¼¤±ª °«¤µ°¤¦¨∏·¬¦¤¯ ±¬√ µ¨¶¬·¼ o≥«¨ ±¼¤±ª ttssty o¬¤²±¬±ªo≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ³µ¨³¤µ¤·¬²± ²© ∂ ±¨¨ ±∏°
∏©²±¬¶Β2¦¼¦¯²§¨ ¬·µ¬± ¬±¦¯∏¶¬²± ¦²°³¯ ¬¨¨ ¶qΜετηοδ : ± ²³·¬°¤¯
¦²±§¬·¬²± º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §¥¼·«¨ ∏±¬©²µ° §¨¶¬ª± q±§¨µ·«¨ ²³·¬°¤¯ ¦²±§¬·¬²±¶·«¨ ∂ ±¨¨ ±∏°
∏©²±¬¶Β2¦¼¦¯²§¨ ¬·µ¬±¬±¦¯∏¶¬²±¦²°³¯ ¬¨2
¶¨ º µ¨¨ ³µ¨³¤µ¨§ º¬·«x §¬©©¨ µ¨±·° ·¨«²§¶q Ρεσυλτ : × «¨ ¥¤¯¯ ªµ¬±§¬±ª ° ·¨«²§ º¤¶¶∏³¨µ¬²µ·² ²·«¨µ©²∏µ° ·¨«²§¶q ׫¨ ¥∏©¤§¬¨±²¯¬§¨
¬±¦¯∏¶¬²± µ¤·¨ ²© ∂ ±¨¨ ±∏°
∏©²±¬¶Β2¦¼¦¯²§¨ ¬·µ¬± ³µ¨³¤µ¨§ º¬·«¥¤¯¯ªµ¬±§¬±ª ° ·¨«²§º¤¶{x qwu h qΧονχλυσιον :
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¬¶·«¨ ¥¨¶·° ·¨«²§©²µ·«¨ ³µ¨³¤µ¤·¬²± ²© ∂ ±¨¨ ±∏°
∏©²±¬¶Β2¦¼¦¯²§¨ ¬·µ¬±¬±¦¯∏¶¬²± ¦²°³¯ ¬¨¨ ¶q
[ Κεψ ωορδσ] ∂ ±¨¨ ±∏°
∏©²±¬¶~Β2¦¼¦¯²§¨ ¬·µ¬±~¬±¦¯∏¶¬²± ¦²°³¯ ¬¨~³µ¨³¤µ¤·¬²±
≈责任编辑 刘
#zv{#
第 uz卷第 tt期
ussu年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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