全 文 ：肠内菌群对人参皂苷 ªt的代谢转化作用的研究
王 毅 3 o刘铁汉 3 3 o王 巍 o王本祥
k长春中医学院 附属医院 新药研究中心 o吉林 长春 tvssutl
≈摘要 目的 }通过离体和整体实验研究大鼠及人的肠道内细菌对人参皂苷 ªt的代谢作用 ∀方法 }用薄层
层析及电喷雾质谱检测 ªt的代谢产物 ∀结果 } ªt 在大鼠体内被代谢成一对同分异构体k «t 及 ƒtl及苷元≈us
k≥l°µ²·²³¤±¤¬¤·µ¬²¯ o°³· ∀但在人的肠道内 o则代谢物为 «t及苷元 ∀结论 } ªt在人和大鼠肠内菌作用下均被代
谢 o但沿不同的代谢途径进行代谢 ∀在大鼠体内 o代谢模式为 } ªt ϖ «tkƒtl ϖ °³·~在人体内 o代谢模式为 ªt ϖ
«t ϖ °³·∀
≈关键词 人参皂苷 ªt ~人参皂苷 «t ~肠内菌代谢 ~电喷雾质谱 ~薄层层析
≈中图分类号 u{x ~ |y| qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlsv2st{{2sv
人参皂苷为人参的主要有效成分 o具有广泛的
药理作用≈t ∀人参皂苷 ªtkª¬±¶¨±²¶¬§¨ ªtl是人
参三醇皂苷 o它有改善学习记忆功能≈u ov !增强免疫
及抗衰老作用≈w ∀日本学者研究证明 o人参皂苷
ªt等经口服给药时 o在人和大鼠肠内菌作用下 o人
参皂苷的化学结构要经受一系列脱糖降解反
应≈x oy o但何种代谢产物被吸收和产生药理作用至
今尚不清楚 o对此问题我们进行了深入研究 ∀我们
首先采用离体与整体相结合的方法 o考察了 ªt 被
肠内细菌降解变化情况 ∀
1 材料和方法
1 q1 实验材料
雄性 • ¬¶·¤µ大鼠 o体重kt{s ? tslªo购自白求恩
医科大学实验动物室 o合格证号 |xsssssts ∀人参
皂苷 ªt o «t及 °³·购于白求恩医科大学天然药化
室 o纯度 |{ h ∀ ƒt 由沈阳药科大学植化室惠赠 ∀
ƒ¬±¬ª¤± °¤·公司 ≤ ± 电喷雾质谱仪k∞≥2 ≥l ~厌
氧培养罐购自沈阳第五人民医院 ~硅胶 ysk青岛海
洋化工厂出品l ~自制代谢用鼠笼 ∀厌氧培养液≈z }
取 vz qx °¯ 液ks qz{ h u °wl和 vz qx °¯
液
≈s qwz h u°w ot qt{ h ¤≤¯ot qu h kwlu≥w o
s qtu h ≤¤≤ u¯ os qux h ª≥w# u o混匀 o再加入
s qx ª Λ2半 胱 氨 酸 o u °¯ ux h Λ2抗 坏 血
≈收稿日期 usss2s|2sw
≈基金项目 国家自然科学基金资助课题kv|xzs{ytl
3 现地址 }北京中医药大学 ||博士研究生 o北京 tsssu|
3 3 现地址 }中国科学院微生物所 |{博士研究生 o北京 tsss{s
酸 oxs °¯ { h ¤u≤ v o牛肉膏 t ªo蛋白胨 t ªo营养
琼脂 t ªo最后调 ³ z qx ∗ { qs ∀粪便采于健康志愿
者 ∀
1 q2 实验方法
1 q2 q1 薄层层析k×≤l法检测离体培养人肠内细
菌对人参皂苷 ªt的代谢作用 健康青年志愿者的
新鲜粪便 o按 s qx ªΒ t qx °¯ 的比例加入厌氧培养液
中 o用玻璃珠和玻璃棒打匀 o用沙布过滤得肠菌培养
液 ∀取此新鲜配制的肠菌培养液 y份 o每份 ts °¯ o
各加 ªt u °ªo分别于 vz ε 厌氧条件下培养 s o{ o
tu oty ouw ow{ «o用乙醚萃取培养混合物 o萃取液浓
缩后用于薄层层析k×≤l分析 ∀
1 q2 q2 ×≤ 法检测离体培养大鼠肠内细菌对人参
皂苷 ªt的代谢作用 取大鼠新鲜粪便 o按上述方
法制备离体厌氧培养大鼠肠内菌对 ªt代谢的分析
样本 o用于 ×≤ 及 ∞≥2 ≥检测 ∀
1 q2 q3 大鼠整体肠内菌对 ªt 的代谢 取大鼠 v
只 o饲养 z §o待其充分适应本室环境后 o收取空白粪
便备用 ∀禁食 tu «后 o连续灌胃给药 u §o每天 u次
kuss °ª#®ªp tl o禁食但自由饮用水 ∀不断收集粪
便 o粪便用乙酸乙酯提取 o回收乙酸乙酯 o过滤 o即得
澄明分析样本 ∀
2 结果
2 q1 离体培养人肠道内细菌对 ªt的代谢作用
×≤ 检查结果表明 }在离体条件下 o ªt被人肠
内菌代谢较缓慢 oty «后 o才相继出现 «t 和 °³·∀
w{ «后 o原形药物不能用薄层方法检出 ∀且随时间
的延长 o°³·逐渐增多 o见图 t ∀
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第 uy卷第 v期
usst年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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图 t 人参皂苷 ªt离体人肠内菌代谢物的 ×≤ 图谱
×≤ 条件 }薄层厚度 s qux °° 展开系统 q≤ ≤ v¯2 ¨ kwΒtl
喷雾显色剂 }ts h u≥w2∞·
2 q2 离体培养大鼠肠内菌对 ªt的代谢作用
在相同条件下 o大鼠的代谢速度比人要快 o在
tu «即出现代谢产物 o且除了与人相同的代谢产物
«t及 °³·外 o还出现第 v个代谢产物 o其 ©值与
«t相近 o用 ∞≥2 ≥检测上述 ©值相近似两点分
子量也相同 o推测此物质为 «t 的同分异构体 ƒt ∀
×≤ 结果见图 u ∀ ∞≥2 ≥图谱从略 ∀
图 u 人参皂苷 ªt离体大鼠肠内菌代谢物的 ×≤ 图谱
×≤ 条件 }薄层厚度 s qux °° 展开系统 q≤ v¯2 ¨ kwΒtl
喷雾显色剂 }ts h u≥w2∞·
2 q3 大鼠整体肠内菌对 ªt的代谢作用
给大鼠灌服 ªt 后 o用 ×≤ 及 ∞≥2 ≥检测到
的结果与离体实验相同k图 vl ∀
图 v 大鼠整体肠内菌对 ªt的代谢作用 ×≤ 图谱
k p l q对照 k n l q给大鼠灌胃 ªt xss °ª#®ªp t#§p t o
连续给药 u § ×≤ 条件 }薄层厚度 s qux °°
展开系统 q≤ v¯2 ¨ kwΒtl 喷雾显色剂 }ts h u≥w2∞·
3 讨论
在消化道内 o由于肠内菌可分泌水解皂苷糖基
的酶类 o如 Β2葡萄糖苷酶kΒ2ª¯∏¦²¶¬§¤¶¨l水解掉的糖
基则被细菌作为碳源≈z o{ ∀在本实验中 o离体和整
体实验证明 o ªt 在人和大鼠肠内菌作用下均被代
谢 o而且代谢产物不同 ∀在大鼠体内 o ªt 被代谢成
«t和 ƒt o最终转变为 °³·∀在人体内 o ªt 则转化
为 «t及 °³·∀人和大鼠肠内菌对人参皂苷 ªt的
代谢模式之所以有些差别 o可能由于两者参与 ªt
代谢的肠内菌株或其代谢酶有某些不同所致 ∀对于
代谢产物的检测 o׶∏·²°∏等≈y 曾报告用稀酸水解
ªt后得到的水解产物来鉴定 ªt 的肠内菌代谢产
物 o我们利用灵敏度kts ∗ tu °ª# °¯ p tl很高的 ∞≥2
≥ o再结合 ×≤ 的检测结果 o可方便 !快捷地直接
检测到代谢产物的存在 o为以后代谢产物吸收入血
的研究奠定了基础 ∀基于上述研究结果 o推测人与
大鼠的代谢途径可能如下k图 wl ∀
图 w 人参皂苷 ªt的肠内菌代谢的可能途径
综上所述 o ªt 在肠道内易被代谢 o因此 o有必
要进一步对口服 ªt后原形及代谢产物入血情况进
行研究 o并对原形与代谢产物在生物活性方面有何
异同进行考察 o以期阐明传统人参制剂中发挥作用
的真正有效成分 o为开发新药奠定化学和药理学基
础 ∀
≈参考文献
≈t 王本祥 q人参的研究 q天津 }天津科学技术出版社 ot|{x qtsz q
≈u 刘 q人参皂甙 ªt抗衰老和促智作用及其机制研究 q生理
科学进展 ot||y ouzkul }tv| q
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≈{ 康 白 q微生态学 q大连 }大连医学院出版社 ot|{{ q|x q
Ρεσεαρχη ον τηε Τρανσφορµ ατιον οφ Γινσενοσιδε Ργt βψΙντεστιναλ Φλορα
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º¤¶¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨§¥²·«¬± √¬·µ²¤±§¬± √¬√²q Μετηοδ : ׫¨ §¨¦²°³²¶¬·¬²±¶º µ¨¨ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨§¥¼ ° ¤¨±¶²©·«¬±2¯ ¤¼¨ µ
¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼ ¤±§ ∞¯ ¦¨·µ²± ¶³∏µ·¬²± °¤¶¶qΡεσυλτ :·º¤¶©²∏±§·«¤· ªt º¤¶¦²±√ µ¨·¨§¬±·²·º² ° ·¨¤¥²¯¬·¨¶
≈ «t ¤±§ usk≥l2³µ²·²³¤±¤¬¤·µ¬²¯ kus≥2°³·l ¥¼ «∏°¤± ¬±·¨¶·¬±¤¯ ¥¤¦·¨µ¬¤¬± √¬·µ²o º«¬¯¨ ·«µ¨¨ ¦²°³²∏±§¶
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׫¨ §¨¦²°³²¶¬·¬²± ¤±§r²µ ° ·¨¤¥²¯¬¶° ²© ªt ¬± µ¤·¤±§«∏°¤± §¬ª¨¶·¬√¨·µ¤¦·º¤¶¦²±©¬µ° §¨q ׫¨ °²§¨ ²©
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[ Κεψ ωορδσ] ª¬±¶¨±²¶¬§¨ ªt ~ ª¬±¶¨±²¶¬§¨ «t ~¬±·¨¶·¬±¤¯ ¥¤¦·¨µ¬¤~ ∞¯ ¦¨·µ²± ¶³∏µ·¬²± °¤¶¶~·«¬± ¤¯¼¨ µ
¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼
≈责任编辑 方文贤
全国中药研究与发展学术会议征文通知
为了促进中药的现代研究 o加强中药学领域研究 !生产与临床人员彼此间的信息交流 o推动我国/十五0
期间中药科研进程 o商讨我国入关后中药发展新对策 o积极推动中药与国际接轨 o湖南中医学院药学院与中
国中药杂志社拟于 usst年 ts月中 !下旬在湖南省联合举办/全国中药研究与发展学术会议0 ∀届时将有国
家中医药管理局科教司和国家药品监督管理局有关领导与专家莅会指导 ∀
会议主要内容 }
t !我国/十五0期间中药基础研究主要课题 ∀
u !我国入关后中药发展方向与对策 ∀
v !中药新药开发研究与成果推广 ∀
会议期间将进行中药学各学科k包括中药理论 !质量标准 !工艺制剂 !药事管理 !中药药理 !中药临床药
理 !中药药房 !临床应用等l学术论文交流 ∀
会议征文启事如下 }
t !欢迎中药学界各学科教学 !科研 !临床 !药房等有关人员积极投稿 o参加会议 ∀
来稿请寄 }北京东直门内北新仓 t{号中国中药杂志社 方文贤 !古云霞收 o并在信封注明/征文0字样 o
同时汇寄审稿费每篇 vs元 o汇至北京东直门内北新仓 t{号中国中药杂志社 张尚云收 ∀
u !欢迎各有关企业 !事业单位及药厂赞助会议 ∀联系人 }中国中药杂志社 方文贤 !程志铭 ∀电话 }
kstslywswx{vs ~传真 }kstsl{wsv{y{w
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