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Determination of Total Flavonoids and Dihydromyricetin in Ampelopsis grossedentala (Hand-Mazz) W. T. Wang

显齿蛇葡萄中总黄酮和二氢杨梅素的含量测定



全 文 :≈t  江苏新医学院 q中药大辞典 q上海 }上海科学技术出版社 o
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≈u  丛浦珠 q质谱学在天然有机化学中的应用 q北京 }科学出版社 o
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Στυδιεσ ον Χηεµιχαλ Χονστιτυεντσ οφ Λαγοπσισσυπινα (Στεπη .)Ικ .2ΓαΙ .
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼ ·«¨ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶²© Λαγοπσισ συπιναqΜετηοδ : ≤²°³²∏±§¶º µ¨¨
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¦¤¯ ¤±§¶³¨¦·µ¤¯ ¤±¤¯¼¶¨¶qΡεσυλτ :≥¬¬¦²°³²∏±§¶º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§©µ²° ·«¨ ·¨«¤±²¯ ¬¨·µ¤¦·²© Λ .συπινα ¤±§¬§¨ ±·¬2
©¬¨§¤¶ ¬¨¦²¶¤±²¬¦¤¦¬§²¦·¤§¨¦¼¯ ¶¨·¨µo¨¬¦²¶¤±²¬¦¤¦¬§2ty2° ·¨«¼¯2tx oty2«¨·¤§¨ ¦¨±¼¯ ¶¨·¨µo³¤¯ °¬·¬¦¤¦¬§oΒ2¶¬·²¶2
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[ Κεψ ωορδσ] Λαγοπσισσυπινα~³¤¯ °¬·¬¦¤¦¬§~²¯ ¤¨±²¯¬¦¤¦¬§~§¤∏¦²¶·¨µ²¯
≈责任编缉 徐美珍 
显齿蛇葡萄中总黄酮和二氢杨梅素的含量测定
何桂霞 o裴 刚 o周天达 o周雪仙
k湖南中医学院 药学分院 o湖南 长沙 wtssszl
≈摘要  目的 }测定显齿蛇葡萄中总黄酮和二氢杨梅素的含量 ∀方法 }分光光度法测定总黄酮含量 o薄层扫描
法测定二氢杨梅素含量 ∀结果 }总黄酮含量wv qw h ∗ ww qs h oΡΣ∆t qxy h ∗ u qyu h ~二氢杨梅素含量vz qw h ∗
v{ qx h oΡΣ∆ t q{x h ∗ u qyx h ∀结论 }显齿蛇葡萄总黄酮和二氢杨梅素的含量极高 o具有重要的开发利用价值 ∀
≈关键词  显齿蛇葡萄 ~总黄酮 ~二氢杨梅素 ~含量测定
≈中图分类号  • u{w qu ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussslsz2swuv2sv
显齿蛇葡萄为葡萄科蛇葡萄属植物 Αµ πελοπσισ
γροσσεδενταλα k ‹¤±§q2 ¤½½ql • q × q • ¤±ª≈ Α .
χαντονιεσισ k ‹ q ·¨ „ ql °¯ q √¤µq γροσσεδεντατα
‹¤±§q2 ¤½½q ≈t  o又名甜茶藤 o田婆茶 !乌蔹 !红五爪
金龙 !大齿蛇葡萄 ∀主要分布在湖南 !湖北 !广西 !广
东 !云南 !贵州 !江西 !福建等省区≈u  ∀我国广西和湖
南等省区壮族和瑶族人民常用茎叶作饮料≈v  ∀味甘
淡 o性凉 o具有清热解毒 o祛风湿 o强筋骨之功效 o主
治皮肤癣癞 o黄疸型肝炎 o感冒风热 o咽喉肿痛 o急性
结膜炎 o痈疖≈w ox  ∀经初步化学研究 o藤茶中主要有
≈收稿日期  t|||2s|2s|
效成分为黄酮类化合物 o从中分得二氢杨梅素 o经药
理实验表明 o具有明显拮抗去甲肾上腺素和高 Žn所
致的兔胸主动脉条收缩反应及钙拮抗作用 o且毒性
低 o可作为抗心律失常 !抗心肌缺血 !抗高血压的新
型药物≈y oz  ∀本文对显齿蛇葡萄中总黄酮及二氢杨
梅素的含量进行了测定 o为今后对显齿蛇葡萄的进
一步研究及充分开发利用此药材奠定了基础 ∀
1 仪器与材料
≤≥2|vs 型薄扫描仪 k日本岛津l o岛津 ˜ ∂2
uyxƒ • 分光光度计 ozxt⁄Š紫外分光光度仪k上海
仪器总厂l o硅胶 Šk青岛海洋化工厂l o点样定量毛
细管k⁄µ∏°°²±§≥¦¬¨±·¬©¬¦≤²q˜≥„l ∀
#vuw#
第 ux卷第 z期
usss年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qz∏¯¼ ousss
二氢杨梅素对照品k由本院周天达教授提供 o经
光谱鉴定 o含量 || q|x h l o显齿蛇葡萄 Α . γροσσεδεν2
ταλα k‹¤±§2 ¤½½l • q × q • ¤±ªk湖南江华县林业科
学研究所提供 o本院周天达教授鉴定l o所用试剂均
为分析纯 ∀
2 实验方法与结果
2 q1 供试品及对照品溶液的制备
供试品溶液 显齿蛇葡萄约 t ªk粉碎 o过 us目
筛l o精密称定 o置索氏回流器中 o石油醚适量加热回
流 u «o|x h乙醇于 {s ε 加热回流提取 w «o得醇提
取液 o放冷 o过滤 o滤液水浴蒸除部分乙醇 o浓缩液移
至 ts °¯ 容量瓶中 o|x h乙醇定容 o吸取 t °¯ 置 ts
°¯ 容量瓶中 o定容 ∀
对照品溶液 精密称取二氢杨梅素对照品
ts qxs °ªo加 |x h乙醇溶解并定容至 ts °¯ ∀
2 q2 总黄酮的含量测定
2 q2 q1 最大吸收波长的测定 精密吸取二氢杨梅
素对照品溶液 s qv °¯ 和供试品溶液 s qx °¯ o分别置
于 ts °¯ 容量瓶中 o精密加入 x h „ ≤¯ v¯ 溶液 v °¯ o
|x h乙醇定容 o摇匀后室温放置 ws °¬±o随行空白 o
扫描 ∀结果供试品和对照品的吸收图谱一致 o最大
吸收波长为 vtw ±°k见图 tl ∀
图 t 紫外吸收光谱
t1 供试品 u1 二氢杨梅素 v1 空白溶液
2 q2 q2 标准曲线制作 精密吸取对照品溶液s o
s qt os qu os qv os qw os qx °¯ 分别置 ts °¯ 容量瓶中 o
照 2 q2 q1 项下进行 o于 vtw ±°处测定吸收度 ∀以对
照品溶液的体积为横坐标 o吸收度为纵坐标 o回归方
程 Α € x .w{ Ξ p s .sxw , ρ€ s .|||x( ν € xl ∀
2 q2 q3 样品含量测定 精密吸取样品液 s qx °¯ 置
于 ts °¯ 容量瓶中 o照 2 q2 q1 项下进行 o测定吸收
度 ∀根据回归方程计算总黄酮含量 o结果见表 t ∀
2 q3 二氢杨梅素的含量测定
2 q3 q1 薄层扫描条件 定量毛细管吸取供试品溶
液 t Λ¯ o对照品溶液 u Λ¯ o分别点样于硅胶 Š2≤  ≤2
‘¤薄层板ktsx ε 活化 s qx «l上 o甲苯2乙酸乙酯2甲
酸ktsΒ{Βxl展开 o展距 tx ¦° ov h ƒ ≤¨ v¯乙醇溶液喷
雾 o显色后 o覆盖相同大小的玻璃板 o四周用透明胶
纸密封 ∀二氢杨梅素斑点呈紫色 o薄层扫描图见图
u ∀故选Κ≥ € wws ±° oΚ• € yxs ±° o反射法锯齿扫描 o
狭缝 t qu °° ≅ t qu °° o≥÷ € v o灵敏度中 o背景校
正 ∀
图 u 薄层扫描图谱
t1 样品 u1 二氢杨梅素
2 q3 q2 线性化范围 准确吸取对照品溶液 u ow oy o
{ ots Λ¯ o分别点于同一硅胶 Š薄层板上 o展开 o显
色 o覆盖玻璃后扫描测定各斑点的面积积分值 ∀以
对照品点样量kΛªl为横坐标 o斑点面积积分值为纵
坐标 o回归方程 Ψ € tvv{ Ξ n |uz , ρ € ||xt o二氢杨
梅素在 s qut ∗ t qsx Λª具良好的线性关系 ∀采用外
标两点法测定含量 ∀
2 q3 q3 样品测定 吸取样品液 x Λ¯ 及对照品溶液
v Λ¯ 和 y Λ¯ 点于同一硅胶 Š薄层板上 o展开 o显色 o
扫描 o计算各样品中二氢杨梅素的含量 o结果见表
t ∀
表 t 显齿蛇葡萄中总黄酮和二氢杨梅素的含量 h
样品重

总黄酮
含量 ΡΣ∆

二氢杨梅素
含量 ΡΣ∆
t qs{s wv qy u qwu v{ qu u quu
s q|{s ww qs t q{{ v{ qx t q{x
s q||u wv qx u qyu v{ qt u qyx
t qs{y wv qw t q|v vz qw t q|y
s q||s wv q{ t qxy vz qz u qvx
t qssy wv qt u quw v{ qs u qsw
2 q3 q4 加样回收率 已知含量的显齿蛇葡萄粉末 o
分别添加对照品溶液 otss ε 烘干 o按供试品溶液的
制备方法 o扫描测定 o计算回收率 o结果见表 u ∀
4 讨论
4 q1 本品含有大量色素 o采用石油醚脱脂除去杂
质 o较好地解决了斑点重叠和拖尾现象 ∀
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第 ux卷第 z期
usss年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qz∏¯¼ ousss
表 u 回收率实验结果
‘²q 样品量r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
ξ
r h
ΡΣ∆
r h
t s qx{x s qxss t qs{u || qz
u s qx{x s qyss t qtwy |y qz
v s qu|w s qxss s qz|{ tss qx |{ qx t qy
w s qu|w s qyss s q{y| |z qu
x s qx{{ s qxss t qszv |{ qy
4 q2 样品在进行 ׏≤ 时 o以甲苯2乙酸乙酯2甲酸
ktsΒ{Βxl≈v 和甲苯2乙酸乙酯2甲醇ktsΒ{Βxl为展开
剂展开 o结果后者分离效果好 ∀
4 q3 从图 u的展开情况看 o显齿蛇葡萄中黄酮主要
是二氢杨梅素 o另外还含有杨梅素等 o但含量很低 o
故以二氢杨梅素为对照品 ∀
4 q4 经测定显齿蛇葡萄中总黄酮含量为 wv qw h ∗
ww qs h o二氢杨梅素的含量高达 vz qw h ∗ v{ qx h o
该药材具有非常重要的开发利用价值 ∀
4 q5 由于二氢杨梅素的结构中具有邻三酚羟基 o容
易氧化 o所以总黄酮含量测定时 o时间不宜太长 o尽
量在 w «内完成 ∀
≈参考文献 
≈t  全国中草药汇编编写组 q中草药汇编 q下册 q北京 }人民卫生出
版社 ot||z qz{{ q
≈u  广西医药研究所 q广西药用植物名录 q南宁 }广西民族出版社 o
t|zw qusv q
≈v  周天达 o周雪仙 1 藤茶中双氢黄酮醇的分离结构鉴定及药理
活性 1 中国药学杂志 ot||y ovtk{l }wx{ q
≈w  覃洁萍 o许学键 o李剑江 1 广西瑶族藤茶化学成分的研究 1 天
然产物研究与开发 ot||z o|kwl }wt q
≈x  袁阿兴 o黄筱美 1 显齿蛇葡萄化学成分的研究 1 中国中药杂
志 ot||{ ouvkyl }wx{ q
≈y  周雪仙 o周天达 1 双氢杨梅树皮素对兔胸主动脉条平滑肌收
缩反应的影响 1 现代应用药学 ot||z otwkul }{ q
≈z  江明性 1 药理学 q第 w版 q北京 }人民卫生出版社 ot||u qtws o
tx| otz{ ot{z1
∆ετερµινατιον οφ Τοταλ Φλαϖονοιδσ ανδ ∆ιηψδροµ ψριχετιν
ιν Αµ πελοπσισ γροσσεδενταλα (Ηανδ2Μαζζ) Ω . Τ . Ωανγ
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[ Κεψ ωορδσ] Α . γροσσεδενταλα ~©¯¤√²±²¬§¶~§¬«¼§µ²°¼µ¬¦¨·¬±~¦²±·¨±·§¨·¨µ°¬±¤·¬²±
≈责任编缉 徐美珍 
5中国中药杂志6为中国自然科学核心期刊 o所刊论文全面体现我国中医药科研最高学术水平 o在国际上
被 ≤ „k化学文摘l o…„k生物学文摘l oŒ°„k国际药学文摘l等著名文摘收录 o历年均进入 ≤ „ 千名表 ~我刊亦
是被国际医药学界最权威的数据库 ) ) ) 美国国立医学图书馆  ∞⁄Œ‘∞数据库收录的唯一的中药学术刊
物 ∀
继 t||{年之后 o本刊 t|||年度再度获得中国科协和中国自然科学基金委员会择优支持基础性 !高科技
学术期刊经费资助 o是获得该项资助的基础性 !高科技优秀期刊中唯一的中药学术刊物 ∀
据5中国科技期刊引证报告6k扩刊版l o在 t||{年 uyw{种中国科技期刊中 o我刊总被引频次为 tuuw o名
列第 ty位 ~影响因子为 s qwyx o列第 twt位 o居中医药类期刊首位 ∀
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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