全 文 ：#药剂#
球面对称设计法
筛选青藤碱贴片中的透皮吸收促进剂 3
刘强 周莉玲 3 3 李锐 3 3
k第一军医大学医技系药剂教研室 广州 xtsvtxl
摘要 目的 }为制备青藤碱膜剂选择合适的透皮吸收促进剂 ∀方法 }以裸鼠皮肤为实验屏障 o采用
球面对称设计法从氮酮 !丙二醇 !油酸中选择合适的透皮吸收促进剂及最佳配比 ∀结果 }氮酮 !丙二醇 !
油酸的含量分别为 y h ot h oy h时 o青藤碱有最大的透皮速率常数 ∀结论 }氮酮2丙二醇2油酸kyΒtΒyl的
复合体是青藤碱贴片的优良透皮吸收促进剂 ∀
关键词 青藤碱 透皮吸收促进剂 球面对称设计法
透 皮 给 药 系 统 k ×µ¤±¶§¨µ°¤¯ ⁄µ∏ª
⁄¨ ¬¯√ µ¨¼ o× ⁄⁄l能绕过肝脏的首过效应及胃肠
道的破坏 o维持稳定 !持久的血药浓度 o提供可
预定的和较长的作用时间 o降低药物毒副作用 o
提高疗效 o减少给药次数 o使用方便 ∀ × ⁄⁄的
研究 o对药物的理化性质有较严格的要求 o如适
宜的溶解度 !分子量 o较低的熔点 o适宜的分配
系数及 ³ 值等 ∀事实上并非所有的药物都符
合这个要求从而保证足够量药物进入体内 ∀因
此透皮吸收促进剂的研究几乎成为所有 × ⁄⁄
制剂研究的重要内容 ∀
青藤碱k¶¬±²° ±¨¬±¨ l是中药青风藤的镇痛
消炎有效成分 o具有抗炎 !免疫抑制 !抗心律失
常等作用 o已有正清风痛宁片 !盐酸青藤碱注射
液等制剂用于临床 o作为国家中药保护品种已
用于治疗风湿及类风湿性关节炎及心律失常
等 ∀由于青藤碱口服生物利用度较低 o半衰期
较短 o且需长时间口服给药 o因而进行其 × ⁄⁄
研究极有意义≈t ∀本文报道利用裸鼠皮肤为
实验屏障 o采用球面对称设计法 o研究了透皮吸
收促进剂的最佳组合比例 o为进一步研究青藤
碱 × ⁄⁄提供实验基础 ∀
1 实验材料
青藤碱k药用 o广州白云山制药厂l o青藤碱
对照品k中国药品生物制品检定所l o甲醇k色谱
纯 o天津四友生物医学技术有限公司l o聚丙烯
酸酯压敏胶k药用 o广州市化学工业研究所l o
°∂ 2z{{k药用 o广州南方化玻公司l o氮酮k药
用 o广州化工助剂厂l o油酸k分析纯 o上海试剂
一厂l o乙醇 !氯仿 !磷酸二氢钾 !磷酸氢二钾 !氯
化钠等均为分析纯 ∀
≥«¬°¤§½∏ ≤ts× 高效液相色谱仪 k日
本l ~渗透扩散装置k中国药科大学药剂教研
室l ~≥2{u型电热恒温水浴箱k江苏太仓医疗
器械厂l ~多功能磁力搅拌器k安徽省天长恒运
电器厂l ~≥2t试管振荡混匀器k江苏医疗仪器
厂l ~⁄x2u 离心沉淀机 k北京医用离心机
厂l o≥¤±¼² §¨¬¦¤¯ ƒµ¨ ½¨¨ µ∀
¤¯¥r¦裸鼠k中山医科大学实验动物中
心l ∀
2 方法与结果
211 青藤碱体外分析方法的建立
2 q1 q1 贮备液配制 精密称取干燥器内恒重
w{«的青藤碱对照品一定量 o用稀硫酸溶解 o用
甲醇稀释 o配制成浓度为 wss qsΛª# °¯ 2t的贮备
3 国家中医药管理局重点资助课题 ²q|x
tvt
3 3 广州中医药大学 广州 xtswsz
#zyw# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 {期
液 o精密吸取贮备液一定量 o分别配制成浓度为
ts ous ows o{s otus otysΛª# °¯ p t的系列标准液 ∀
2 1 1 1 2 色谱条件 色谱柱µ²°¤¶¬¯≤t{柱 o
w qy°° ≅ uxs°° o流动相甲醇2s qt°²¯#pt磷酸
二氢钾kxxΒwxl o流速 t qs °¯ # °¬±p t o检测波长
uyx±° o灵敏度 s qsu ƒ≥ ∀
2 q1 q3 标准曲线绘制 精密吸取 t qs °¯ 浓度
为 ts ous ows o{s otus otysΛª# °¯ p t的青藤碱标
准贮备液 o移入带塞刻度试管中 o于 ws ∗ xs ε
水浴中蒸干甲醇 ∀精密加入接收液k³y q{磷
酸盐缓冲液浸泡裸鼠皮肤内表面所得lx qs °¯ o
用氢氧化钠溶液调 ³ 至 { qs o精密加入氯仿
x qs °¯ o密塞混匀 vs¶owsssµ#°¬±p t离心 tx°¬±o
精密吸取 w qx °¯ 氯仿层 o于 ws ∗ xs ε 水浴中用
氮气吹干氯仿 o加入甲醇 tssΛ¯ 溶解 o取 tsΛ¯ 进
样 o进行色谱分析 o以样品浓度为横坐标 o峰面
积积分值为纵坐标 o进行线性回归 o得回归方程
Ψ x|x Ξ n t{tvt , ρ s q|||s ∀
2 q1 q4 日内萃取回收率试验 精密吸取 t qs
°¯ 浓度为 wsΛª# °¯ p t的青藤碱标准贮备液 o于
ws ∗ xs ε 水浴中蒸干甲醇 ∀按 2 q1 q3 项下操作
k自/精密加入接收液 x °¯ , ,0开始l o在同一
天不同的时间内提取 !测定 ~同时取未经提取处
理的 ws qsΛª青藤碱标准贮备液不经萃取直接
进行色谱分析 ∀计算日内回收率 ∀结果以
³y q{磷酸缓冲液为接收液的日内回收率为
|w qyv h ? w q|s h ∀
2 q1 q5 日间萃取回收率试验 精密吸取 t qs
°¯ 浓度为 wsΛª# °¯ p t的青藤碱标准贮备液 o于
ws ∗ xs ε 水浴中蒸干甲醇 ∀按 2 q1 q3 项下操作
k自/精密加入接收液 x °¯ , ,0开始l o分别在
v§内提取 !测定 ~同时取未经提取处理的 wsΛª
青藤碱标准贮备液不经萃取直接进行色谱分
析 o计算日间回收率 ∀结果以 ³y q{磷酸缓冲
液为接收液的日间回收率为 |s qv s h ?
v qvs h ∀
212 透皮吸收试验
21211 皮肤的处理 裸鼠kt{ ∗ usªl处死后直
接取腹部皮肤 o剥离皮下脂肪层 o置生理盐水中
于 p ws ε 冷冻保存 o实验前自然解冻 o于 t周内
进行实验 ∀
21212 透皮吸收扩散装置 透皮吸收扩散装
置由上下两只杯状玻璃管对合而成 o夹于玻璃
管间的皮肤将其分成上下两室 ∀上室为扩散
室 o下室为接受室 o在接受室的底部连有一个取
样管 o供取样 !补充接收液及排除气泡用 o扩散
室和接受室相接径口的直径 t qy¦° o渗透面积
为 u qst¦°u o实验中以潜水式多功能电磁搅拌
器维持接受室动态环境 o实验维持 vu ε 经皮渗
透条件 ∀实验装置见图 t ∀
图 t 透皮吸收实验装置示意图
t q给予室 u q皮肤和贴片 v q接收室 w q水浴
x q搅拌子 y q磁力搅拌器 z q转速控制器
2 q2 q3 青藤贴片的制备
将处方量青藤碱及促渗剂分散在聚丙烯酸
酯压敏胶中 o采用流涎工艺 o使含药物的压敏胶
均匀摊涂于覆盖层 o恒温加热使有机溶剂挥散 o
再覆以背衬层 o制成多层结构的青藤碱贴片 ∀
2 q2 q4 透皮吸收实验方法 将青藤碱贴片贴
于预处理动物皮肤 o注意结合紧密勿有气泡 o然
后固定在渗透扩散装置的扩散室与接受室之
间 o青藤碱贴片的背衬层面向扩散室 ∀接受室
加接收液 tz qs °¯ o液面恰与皮肤内层接触 o开
动电磁搅拌器和恒温水浴 o保持恒速搅拌k约
ussµ# °¬±2tl和恒温kvu ε l o在设定时间取样
x qs °¯ 置具塞试管中 o每次取样后均补加相同
体积的新鲜接收液并排除接受室中的气泡 o样
液按照 2 q1 q3 项下操作k自/用氢氧化钠溶液调
³值至碱性 , ,0开始l o进行色谱分析 o在测
得的峰面积标准曲线上求出相应的药物浓度 o
计算累积渗透量k Θl ∀
2 q2 q5 透皮吸收促进剂的选择
采用球面对称设计 k¶³«¨µ¬¦¤¯ ¶¼°° ·¨µ¬¦
§¨¶¬ª±l o丙二醇k Ξu) !油酸钠( Ξv) !氮酮( Ξt)v
#{yw# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 {期
种促进剂的 4 种不同浓度进行试验 ,设定透皮
速率常数()和 tu«累积透过量( Θtul两个考察
指标 ∀水平安排如表 t ∀
表 t 因素水平表
因素
水平
p vtru p t s t vtru
Ξt s qss t quz v qss w qzv y qss
Ξu t qss u q|s x qxs { qts ts qss
Ξv s qss t quz v qss w qzv y qss
表 u 实验设计表
序号
因素水平分配
Ξt( %) Ξu( %) Ξvk h l
t p tkt quzl p tku q|sl p tkt quzl
u p tkt quzl p tku q|sl tkw qzvl
v p tkt quzl tk{ qtsl p tkt quzl
w p tkt quzl tk{ qtsl tkw qzvl
x tkw qzvl p tku q|sl p tkt quzl
y tkw qzvl p tku q|sl tkw qzvl
z tkw qzvl tk{ qtsl p tkt quzl
{ tkw qzvl tk{ qtsl tkw qzvl
| p vtruks qssl skx qxsl skv qssl
ts vtruky qssl skx qxsl skv qssl
tt skv qssl p vtrukt qssl skv qssl
tu skv qssl vtrukts qssl skv qssl
tv skv qssl skx qxsl p vtruks qssl
tw skv qssl skx qxsl vtruky qssl
tx skv qssl skx qxsl skv qssl
根据球面对称设计原理 o按表 u的设计制备
各种含促进剂的压敏胶 o进行透皮吸收试验 o以
青藤碱累积透皮量对时间进行回归 o回归方程
oΘ见表 v ∀
为考察各指标与促进剂间的关系 o拟合指
标与各参数间的回归方程 o得下式 }²µ Θ
(βs αt ξt n αu ξu n αv ξv)v n βt εχt ξt n βu εχu ξu n
βv εχv ξv n βw εχw ξt ξu n βx εχx ξt ξv n βy εχy ξu ξv得出的
各系数见表 w o各返回值见表 x ∀
根据上述回归结果 o用随机数优化技术进
行优化 o结果极大点为 Ξt y% , Ξu t% , Ξv
y h ∀在上述优化条件下制备贴片进行实验 o
得 实验值为 uyx qsu ? ux q{xΛª# k¦°u #
«trul p t ∀
3 讨论
球面对称设计法是在总结球面设计及其他
设计方法优点基础上提出来的较新颖的筛选试
验方法 ∀其优点是试验次数较少 o试验精度高 o
并适用于多因素 !多水平的试验 ∀比正交试验
法更简化 o比均匀设计法更全面 o并且得到的关
系式可以确定在实验范围内的任何试验点的预
测值 o而此时因素的状态并不一定是已作过的
表 v 各主变量的实验值
序号 Θ p τt/ u方程 Θtu
t Θ x{ .x|τt/ u p yy .tw x{ .x| tvy .{u
u Θ z{ .{xτt/ u p w{ .vv z{ .{x uuw .{t
v Θ ttt .||τt/ u p t{ .xw ttt .|| v{| .ts
w Θ {s .v|τt/ u p t{ .y| {s .v| ux| .z|
x Θ yu .||τt/ u p tz .uv yu .|| uss .|y
y Θ zt .x{τt/ u p uv .zx zt .x{ uuw .us
z Θ usx .tzτt/ u p tyx .ws usx .tz xwx .vt
{ Θ uuv .zwτt/ u p uuw .ys uuv .zw xxs .ww
| Θ ty .vwτt/ u p v .vt ty .vw xv .t|
ts Θ xv .xzτt/ u p xx .vu xv .xz tvs .ux
tt Θ v{ .y|τt/ u p y .ux v{ .y| tuz .zz
tu Θ zz .{wτt/ u p vw .zy zz .{w uvw .{{
tv Θ {w .zuτt/ u n tu .xw {w .zu vsy .st
tw Θ tv{ .z{τt/ u n s .v{ tv{ .z{ w{t .tt
tx Θ vt .xwτt/ u n uy .tw vt .xw tvx .v|
注 : Θ q累积渗透量 Λª q透皮吸收速率常数 Λª#k¦°u#
«trul p t
表 w 各系数的回归值
系数 Θ
βs t .uuwwvu p t .v|yx{
βt vuww .{us ts|vv .|t
βu s ts .uyvzv
βv tut| .uzt wx .zw|vw
βw wz .stwux vz .syttu
βx p wwzz .|v p ts{{z .w
βy s .ssssxx s .sss||z
αt s .wwszv| s .{ut|vx
αu t .xytz{t t .vz{vvx
αv u .x|yv|y p w .vwxus
χt s .ssvzxu s .sss||v
χu uv .xusyu t .wuwtsw
χv p s .sv|wwz t .{v|yyu
χw s .xs{vyt t .uuty|v
χx s .sss{t| s .sst|wz
χy p tw .sxv p tu .y{ww
ρ s .||y{uyx s .||s|{wu
#|yw# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 {期
表 x 及 Θtu的回归值
处方 回归值 Θtu 回归值
t x{ .x| x| .tw tvy .{u tws .vw
u z{ .{x {w .yt uuw .{t uvs .tw
v ttt .|| ttz .x{ v{| .ts vzy .ws
w {s .v| z| .w{ ux| .z| uw{ .|w
x yu .|| yv .{z uss .|y utt .z|
y zt .x{ yx .ws uuw .us uvy .{z
z usx .tz t|| .wu xwx .vt xv| .|y
{ uuv .zw uuv .tz xxs .ww xwy .|t
| ty .vw tu .uy xv .t| {{ .xy
ts xv .xz yu .t| tvs .ux tw{ .ys
tt v{ .y| u| .|v tuz .zz yy .ut
tu zz .{w zz .{v uvw .{{ uwt .wv
tv {w .zu {w .vx vsy .st vty .t|
tw tv{ .z{ tv| .|w w{t .tt w{s .xz
tx vt .xw vx .st tvx .v| tuz .sx
试验 ,即实验以外的状态 ,其缺点是设计比较复
杂 ,并须有丰富的专业知识来确定各因素的范
围 ∀本文选用的球面对称设计法是三因素五水
平的实验 ∀根据 , Θ对各实验条件回归后 ,发
现 , Θ均有一类似的函数 o²µ Θ (βs αt ξt
n αu ξu n αv ξv)v n βt εχt ξt n βu εχu ξu n βv εχv ξv n
βw εχw ξt ξu n βx εχx ξt ξv n βy εχy ξu ξv ,且相关性较好 ,
相关系数 ρ s .|| ,尤其 更见其规律 ,这可能
与其影响因素较 Θ略少有关 ∀
氮酮 !油酸 !丙二醇是较常用的透皮吸收促
进剂 ∀其中氮酮用量少 o对皮肤毒性 !刺激性很
低 o是目前公认的优良渗透促进剂 ∀其最佳促
渗浓度 s qt h ∗ x h ∀它对于亲水性和亲脂性
化合物均具有良好的促渗效果 ∀氮酮具有相当
的亲脂性 o与极性溶剂丙二醇并用可有效地缩
短滞后时间 ∀油酸k钠l的作用机制是渗入角质
层细胞间脂质中与其作用 o影响脂质双分子层
排列的密实性和流动性 ∀油酸k钠l常与丙二
醇 !乙醇并用产生协同作用 o丙二醇 !乙醇作为
溶剂能够增加油酸k钠l在角质层的分配量 o从
而增加其对角质层的作用时间和强度 o其常用
量 ts h ∀丙二醇在透皮制剂中经常用作溶媒
或载体 o对药物和其他促渗剂起到溶解和均匀
混合作用 ∀本研究表明当氮酮2丙二醇2油酸ky
ΒtΒyl o青藤碱的渗透速率常数有最大值 o为青
藤碱透皮吸收制剂的进一步研究提供了依据 ∀
4 参考文献
t 周莉玲 o李锐 o周华 o等 1 青藤碱制剂药动学相关性研究 1
中成药 ot||y ok|l }t
u 孙国庆 o平其能 o刘国杰 o等 1 促进剂对青蒿琥酯体外经皮
渗透的影响 1 中国药科大学学报 ot||y ouzkyl }vwx
v 盛海林 o涂家生 1 球面对称设计在药剂学上的应用 1 中国
药科大学学报 ot||y ouzkwl }utt
致谢 中国药科大学涂家生博士帮助处理部分数
据 ∀
t||{2sz2u|收稿
太白 木根皮的提取工艺研究
王忠壮 高玮 3 全山丛 胡晋红
k第二军医大学长海医院药学部 上海 usswvvl
摘要 目的 }研究太白 木根皮提取工艺 ∀方法 }采用正交试验法设计 o紫外分光光度法测定齐墩
果酸含量 ∀结果 }发现对提取效果影响较大的因素依次为提取溶剂含醇量 !提取次数 !提取溶剂用量 !提
取时间等 ∀结论 }以 {倍 zs h乙醇提取 v次 o每次 t«o提取效果最佳 ∀
关键词 太白 木 正交设计 提取工艺 齐墩果酸
五加科 木属植物太白 木 Αραλια
ταιβαιενσισ q q• ¤±ª ·¨ q≤ q«¨ ±ª分布于我
国中西部山区≈t o野生资源非常丰富 ∀主要以
根皮入药 o用于治疗各种肝炎 !肝硬化腹水 !消
渴 !跌打损伤及风湿痹痛等证≈u ∀该种的研究
在生药鉴定 !化学成分 !含量测定 !药效学方面
3 解放军成都军区昆明总医院药局 昆明 yxssst
#szw# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 {期