全 文 ：zs h o{s h o冷藏 uw «o过滤 o洗涤沉淀 o洗涤液与滤
液合并 o减压回收 o真空干燥 o精密称重 ∀用 ×≤ 检
查沉淀中芍药苷和阿魏酸 o并用 °≤ 测醇沉淀后
浸膏中芍药苷和阿魏酸的含量 ∀结果见表 t o表 u ∀
表 t 不同浓度乙醇沉淀物中芍药苷 !阿魏酸 ×≤ 检查结果
醇沉浓度r h 芍药苷 阿魏酸
ys 阴性 阴性
zs 弱阳性 阴性
{s 阳性 弱阳性
表 u 超滤液量的考察 h
实验号 芍药苷tl 阿魏酸tl 芍药苷ul 阿魏酸ul
t {u q| {w qu |x qv |z qu
u {x qt {y qw |v qz |x q{
v {y qu {| qt |v qu |y qu
注 }tl原液Β超滤液 tΒt qt ul原液Β超滤液 tΒt qv
2 q7 截留不同分子量超滤结果
取上述相当于处方总量 tzx ª药材的提取液 y
份 ov份经高速离心后k转速 ty sss µ#°¬±p tl ∀通过
选择截留分子量为 x万的超滤柱 o用 °≤ 法测定
超滤液中芍药苷和阿魏酸的回收率k见表 ul ∀根据
回收率选择超滤液量为原液Β超滤液ktΒt qvl ∀另 v
份选用 v种规格超滤液柱k截留分子量 t ov ox万l o
用选定好的超滤液量超滤 o回收超滤液 o{s ε 真空
干燥 o精密称量 o并用测浸膏中芍药和阿魏酸的含
量 o结果见表 v ∀
2 q8 定性比较
供试品的制备 选择干浸膏得率相近的 zs h
乙醇沉淀后干浸膏和截留分子 t万的干浸膏适量 o
分别用甲醇溶解后备用 ∀
赤芍定性比较 硅胶 2s qv h ≤ ≤2¤o薄层板
tx ¦° ≅ us ¦° o展开 o氯仿2甲醇2乙酸2乙酯k{ΒvΒtl
点样 w ∗ x Λ¯ o展开 tv ∗ tx ¦° o取出晾干 o喷 ts h硫
酸乙醇液 o热风吹至至显色明显 o日光观察 ∀
表 v 醇沉和超滤结果
项目
干浸膏量
rª
芍药苷量
r°ª
阿魏酸量
r°ª
原液 vw qtv wzw qwt tvy qxu
醇沉浓度 ys h uv q{ vwz qw{ tsu qvw
醇沉浓度 zs h tz qtx uw{ qy{ {w qsw
醇沉浓度 {s h tv q{v uts qsu xt qtz
超滤k截留分子量lt万 t{ qv{ wtv qxx |x qx{
超滤k截留分子量lu万 uv q|{ wwy qsv ttx qts
超滤k截留分子量lv万 ux q| wxs qyy tuy q|t
川芎定性比较 硅胶 2s qv h ≤ ≤2¤o薄层板
tx ¦° ≅ us ¦° o以石油醚2氯仿2甲醇ktsΒvΒul o展开
tv ∗ tx ¦° o取出晾干 o紫外灯下视检kuxw ±°l ∀
3 结果与讨论
实验结果表明 o随着醇沉浓度的提高 o超滤截留
分子量的减小干浸膏得率以及浸膏中芍药苷 !阿魏
酸的量均有所下降 ∀zs h乙醇沉淀物中 ×≤ 开始
检出芍药苷 o{s h乙醇沉淀中 ×≤ 能检出芍药苷和
阿魏酸 ∀但相近的得率干浸膏无论是芍药苷和阿魏
酸超滤均远远高于醇沉 ∀无论是从工业生产还是从
经济角度出发 o超滤更能有效地保留有效成分 ∀优
于传统的水提醇沉法 ∀
≈参考文献
≈t 贺立中 q超滤技术在制剂生产中的应用 q中国药学杂志 ot||x o
vsktul }tt q
≈u 空军北京医院药局 q超滤法制备中草药注射液的实验研究 q中
草药 ot|{s ottkyl }uw{ q
≈v 池 群 o聂惠生 o党秋萍 q2w{型超滤机级在制备中草药注射液
中超滤性能的实验 q中国中药杂志 ot|{| otwktsl }ux q
≈责任编辑 刘
高效液相色谱法2蒸发光散射检测器法测定
红参及育精胶囊中人参皂苷 ªt和 ¨的含量
秦少容 o余佳文 o岳廷哲 o王 琳
k太极集团涪陵制药厂 科学研究所 o重庆 ws{sssl
≈摘要 目的 }测定红参及其制剂中人参皂苷 ªt和 ¨的含量 ∀方法 }应用高效液相色谱法2蒸发
光散射检测器k°≤r∞≥⁄l o²√¤³¤® ≤t{色谱柱kv q| °° ¬§≅ txs °° ow Λ°l o乙腈2水kt{Β{ul为
≈收稿日期 usst2sv2st
#wwx#
第 uy卷第 {期
usst年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²q{
∏ªqousst
流动相 o检测器漂移管温度为 ws ε o氮气流速 u qzx #°¬±p t ∀结果 }人参皂苷 ¨在 s qxsw ∗ u qxu Λª!人参
皂苷 ªt在 s q{w{ ∗ w quw Λª线性关系良好 o回收率分别为 |y q| h 和 |z qs h ∀结论 }本法精密度 !
重现性 !准确度好 o适用于制剂的人参皂苷成分的分析测定 ∀
≈关键词 高效液相色谱法2蒸发光散射检测器 ~红参 ~育精胶囊 ~人参皂苷 ªt ~人参皂苷 ¨
≈中图分类号 u{v qy ~ |ww qx ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstls{2sxwx2sv
红参为五加科植物人参 Παναξ γινσενγ ≤ q q
¼¨ q的栽培品经蒸制后的干燥根 ∀usss年版5中国
药典6采用高效液相色谱法2紫外检测器的方法对红
参进行含量测定≈t o由于使用较低的紫外检测波长
kusv ±°l o且紫外光谱图为末端吸收 o因此难以得到
满意的结果 ∀大量研究表明 o蒸发光散射检测器
k∞≥⁄l是一种通用型质量检测器 o国内外已报道成
功用于不挥发性成分如人参皂苷 !萜类内酯等的分
析≈u ∗ w ∀为了更好地对红参药材及其制剂进行质量
评价和制定更完善的控制指标 o本文采用了高效液
相色谱法2蒸发光散射检测器测定了育精胶囊及红
参中人参皂苷 ªt和 ¨的含量 ∀
1 仪器与试药
°ttss高效液相色谱仪k包括四元泵 !自动进
样器 !智能柱温箱 !二极管阵列检测器l o法国
≥∞⁄∞÷ xx 型蒸发光散射检测器k∞≥⁄l o岛津 ≤2
z∞型积分仪 ∀
乙腈为色谱纯k美国 ×∞⁄公司l o水为双重蒸
馏水k自制l o人参皂苷 ªtk含量为 || qv h l和 ¨
k含量为 || qy h l由中国药品生物制品检定所提供 o
红参药材由太极集团供应公司提供 o育精胶囊k由海
龙 !红参 !海参 !枸杞子 !桑螵蛸 !五倍子 !覆盆子 z味
药组成l为太极集团涪陵制药厂生产 ∀
2 实验条件的选择
2 q1 色谱条件 色谱柱为 • ¤·¨µ¶²√¤³¤® ≤t{色谱
柱kv q| °° ¬§≅ txs °° ow Λ°l o流动相为乙腈2水
kt{Β{ul o室温 o流速 t qs °¯ #°¬±p t ∀在此色谱条件
下 o人参皂苷 ªt 和 ¨和其他成分能够较好分离 ∀
色谱图见图 t ∀
2 q2 检测器优化参数 根据流动相种类和比例 o通
过观察在不同漂移管温度和不同氮气流速进样时人
参皂苷 ¨的信号强度 o再结合基线噪音的情况 o最
后确定漂移管温度为 ws ε o氮气流速为 u qzx #
°¬±p t o信号放大比k¤¬±l为 | o为实验最优条件 ∀
3 方法与结果
3 q1 溶液的制备
对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷 ¨对
照品 tu qx °ªo置 ts °¯ 量瓶中 o加甲醇至刻度 o摇
匀 o精密量取 x °¯ o置 ux °¯ 容量瓶中 o加甲醇稀释
至刻度 o摇匀 ~另精密称取人参皂苷 ªt 对照品 ts
°ªo置 ux °¯ 量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o摇匀 o即得
k每 t °¯ 中分别含人参皂苷 ªts qw °ªo人参皂苷
¨s qux °ªl ∀
供试品溶液的制备 取育精胶囊内容物约 x ª
k相当于红参药材粉末约 t ªl o精密称定 o置索氏提
取器中 o加氯仿 xs °¯ o加热回流 v «o弃去氯仿液 o药
渣挥去氯仿 o连同滤纸筒移至 tss °¯ 具塞锥形瓶
中 o精密加入水饱和的正丁醇 xs °¯ o密塞 o放置过
夜 o超声处理k功率 uxs • o频率 xs ®½lvs °¬±o滤
过 o精密量取续滤液 ux °¯ o置蒸发皿中 o蒸干 o残渣
加甲醇溶解并转移至 x °¯ 量瓶中 o加甲醇至刻度 o
摇匀 o即得 ∀
3 q2 测定方法 分别吸取对照品 ts otx Λ¯ 溶液及
供试品溶液 ts Λ¯ o注入液相色谱仪中 o将峰面积及
浓度取自然对数后用外标法计算供试品的含量 ∀
3 q3 空白试验 按处方及工艺自制缺红参的育精
胶囊颗粒 o按供试品溶液的制备方法制成空白溶液 ∀
注入液相色谱仪中 o结果空白溶液无干扰k见图 tl ∀
3 q4 线性关系考察 分别精密称定人参皂苷 ¨和
ªt 对照品适量 o加甲醇溶解 o分别配成浓度为
s quxu °ª# °¯ p t和 s qwuw °ª# °¯ p t的溶液 ∀分别进
样 u ow oy o{ ots Λ¯ ∀以进样量 ΞkΛªl的自然对数为
横坐标 o峰面积 Ψ的自然对数为纵坐标绘制标准曲
线 ∀按照最小二乘法原理进行回归 o人参皂苷 ¨在
s qxsw ∗ u qxu Λª!人参皂苷 ªt 在 s q{w{ ∗ w quw Λª
线性关系良好 ∀回归方程分别为 ¨ }¯ ± Ψ
u qy|vv ±¯ Ξ n wy .tu , ρ s q|||u ~ ªt }¯± Ψ
v qu|zvs¯ ± Ξ n tv .ty , ρ s q|||y ∀
3 q5 精密度试验 精密量取对照品溶液 o照拟定色
谱条件 o分别取 ts Λ¯ 注入液相色谱仪 o重复测定 x
次 o其人参皂苷 ¨和 ªt峰面积的相对标准偏差分
别为 t qv h和 t qx h ∀
#xwx#
第 uy卷第 {期
usst年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²q{
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图 t 人参皂苷 ªt和 ¨高效液相色谱分离图
q人参皂苷 ªt对照品
q人参皂苷 ¨对照品 ≤ q供试品
⁄q阴性对照 t q人参皂苷 ªt对照品 u q人参皂苷 ¨
3 q6 重复性试验 取育精胶囊k批号 sssystl粉末
共 x份 o按供试品溶液制备方法及测定方法分别制
备 !测定其人参皂苷 ¨和 ªt 的含量 o计算其相对
标准偏差分别为 s q{ h和 t qu h ∀
3 q7 稳定性试验 吸取同一批号样品溶液每隔 t «
测定 t次 o人参皂苷 ¨和 ªt 的含量的 ΡΣ∆ 分别
为 s q{ h和 t qt h o表明样品溶液在 w «稳定 ∀
3 q8 回收率试验 精密称取已测定含量的样品 x
份 o精密加入人参皂苷 ªt 和 ¨对照品适量 o依法
测定 o计算得其平均回收率 ∀见表 t o表 u ∀
表 t 育精胶囊中加人参皂苷 ¨回收率实验结果
样品中含量
r°ª
加入量
r°ª
测定量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
ΡΣ∆
r h
s qtvw s qsy s qt|ty |y qs
s qtvw s qsy s qt|tz |y qu
s qtvw s qts s quvsy |y qy |y q|
t qts qtvw s qts s quvtv |z qv
s qtvw s qus s qvuzs |y qx
s qtvw s qus s qvvus || qs
表 u 育精胶囊中加人参皂苷 ªt回收率实验结果
样品中含量
r°ª
加入量
r°ª
测定量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
ΡΣ∆
r h
s quuz s qsw{ s quzv{ |z qx
s quuz s qsw{ s quzvu |y qv
s quuz s qs{s s qvsvx |x qy |z qs
t qts quuz s qs{s s qvsys |{ q{
s quuz s qtys s qv{ux |z qu
s quuz s qtys s qv{t| |y q{
3 q9 样品测定 分别取不同来源的红参药材及育
精胶囊样品 o依法制备成供试液 o分别进样测定 o以
外标两点法计算 o结果见表 v ∀
表 v 红参药材及育精胶囊样品中
人参皂苷 ¨和 ªt的含量测定结果
名称 来源 人参皂苷 ¨和 ªt总量r h
红参 吉林 s quyv
黑龙江 s qv{{
辽宁 s qu{t
育精胶囊 批号 sssyst s qsvt
批号 sssysu s qsvx
批号 sssysv s qsuu
4 讨论
4 q1 在色谱条件优化中 o分别试验了乙腈2水2异丙
醇kusΒ{sΒtxl !甲醇2水kuxΒzxl !乙腈2水kt{Β{ul等
不同流动相考察人参皂苷 ¨和 ªt分离情况 o结果
用乙腈2水kt{Β{ul为流动相时人参皂苷 ¨和 ªt
与其他成分谱峰的分离达到要求 o故选为本实验流
动系统 ∀
4 q2 曾选用了 °«¨ ±²° ±¨¨ ¬ ⁄≥kvlkw qy °° ¬§≅
uxs °°l o°«¨ ±²° ±¨¨ ¬ ∏±¤ ⁄≥kulkw qy °° ¬§≅
uxs °°l o²µ¥¤¬ ⁄≥kw qy °° ¬§≅ uss °°l o≥«¬2
°¤§½∏kw qy °° ¬§≅ txs °°l o• ¤·¨µ¶²√¤³¤® ⁄≥
kv q| °° ¬§≅ txs °°l等色谱柱 o考察人参皂苷 ¨
和 ªt 分离情况 o结果用 ²√¤³¤® ⁄≥kv q| °° ¬§
≅ txs °°l色谱柱时 o分析时间短 !柱压低 !峰形好 ∀
4 q3 在用 ∞≥⁄检测时 o系统平衡快 k大约 vs
°¬±l o基线相当稳定 o重现性 !灵敏度均较好 o且通过
自然对数拟合 o峰面积值与进样量之间呈良好的线
性关系 o因而结果较准确 ~而用 ∂ 检测 o系统平衡
慢kt ∗ u «l o基线不稳定 o再加上人参皂苷 ¨和 ªt
为末端吸收k其 ∂ 光谱图与流动相相似l o因而重
现性 !灵敏度均较差 o因此当样品含量较低时结果不
准确 o与 ∞≥⁄所测结果相差较大 ∀
4 q4 红参及制剂的提取方法采用了5中国药典6
usss年版一部人参含量测定项下的提取方法 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qusss q
≈u 汤 俊 o鲁 静 q应用 °≤r∞≥⁄法测定西洋参中拟人参皂
苷 ƒtt的含量 q药物分析杂志 ot||| ot|kwl }uwt q
≈v 刘 军 o王燕横 o傅承光 q高效液相色谱法分析人参皂苷 q药物
分析杂志 ot||{ ot{kul }tvu q
≈w 冯埃生 o邹汉法 o汪海林 o等 q影响高效液相色谱r挥发激光散射
检测器性能基本因素的考察 q药物分析杂志 ot||y otykyl }wtw q
≈责任编辑 李 禾
#ywx#
第 uy卷第 {期
usst年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²q{
∏ªqousst