全 文 ：炮制对大黄 !虎杖抗氧化作用的影响
孔令东 o杨 澄 o仇 熙
k南京大学 生命科学学院 医药生物技术国家重点实验室 o江苏 南京 utss|vl
≈摘要  目的 }研究炮制对大黄 !虎杖抗氧化作用的影响 ∀方法 }采用体外氧自由基生成系统和羟自由基诱导
的小鼠肝匀浆脂质过氧化反应 o评价炮制对大黄 !虎杖抗氧化作用的影响 ∀结果 }大黄 !虎杖炮制品均可清除次黄
嘌呤2黄嘌呤氧化酶系统所产生超氧阴离子k’u#l以及 ƒ ±¨·²±反应生成的羟自由基k#’ ‹l o并能抑制羟自由基诱导
的小鼠肝脏匀浆脂质过氧化 o各炮制品 ∞≤xs之间有一定显著性差异 ∀结论 }炮制降低大黄 !虎杖抗氧化能力 ∀
≈关键词  大黄和虎杖炮制品 ~超氧阴离子 ~羟自由基 ~脂质过氧化
≈中图分类号  • u{v qt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsy2sv{{2sw
大黄和虎杖均为蓼科植物 o含有游离蒽醌 !蒽醌
甙和芪类化合物等共性化合物≈t  ∀现代研究亦已证
明这些化合物具有一定的抗氧化作用≈u ∗ x  o而炮制
对大黄 !虎杖清除氧自由基和抗脂质过氧化作用的
影响尚未见报道 ∀本文在前期工作的基础上≈y  o选
择清除超氧阴离子k’u#l和羟自由基k# ’ ‹l能力以
及抗羟自由基诱导的小鼠肝匀浆脂质过氧化作用为
指标 o评价清炒制和酒炒制对大黄 !虎杖抗氧化作用
的影响 o以期探讨炮制目的 ∀
1 材料
1 q1 药品 黄嘌呤氧化酶k¬¤±·«¬±¨ o÷ ’⁄l !次黄嘌
呤k美国 ≥¬ª°¤±公司l ~十二烷基磺酸钠k日本进口
分装l ~硫代巴比妥酸k上海试剂二厂l ~无水对氨基
苯磺酸k中国医药集团上海化学试剂分公司l ~‘2t2
萘2乙二胺盐酸盐k上海化学试剂站分装厂l ~番红花
×k上海试剂三厂l ∀其他试剂均为国产分析纯 ∀
1 q2 药材 大黄 !虎杖均购自江苏省药材分公司 o
经南京中医药大学陈建伟副教授鉴定大黄 !虎杖分
别为蓼科植物掌叶大黄 Ρηεν µ παλµ ατυ µ qo虎杖
°ολψγονυ µ χυσπιδατυ µ ≥¬¨¥q¨·∏¦¦q的干燥根茎和
根 ∀
1 q3 仪器 ÷ ‹ƒ2t高速分散器k上海金达生化仪器
厂l ~{ss…离心机k上海安亭科学仪器厂l ~zut„ 型
分光光度计k四川分析仪器厂l ∀
1 q4 动物 Œ≤ • 小鼠 ts只 o雄性 o体重kuy ? ul ªo
由江苏省实验动物中心提供 ∀
1 q5 炮制品的制备 大黄和虎杖不同炮制品均按
≈收稿日期  usss2s|2ut
usss年版5中国药典6 !5全国中药饮片炮制规范6≈z 
和5历代中药炮制法汇典#现代部分6要求自行炮制 ∀
1 q6 炮制品提取物 大黄水提取物 }取上述大黄各
炮制品 ws ªo分别加水煎煮 u次 o合并煎煮液 o减压
浓缩至 t ª# °¯ p t ow ε 冰箱保存 o临用前适当稀释 ~
大黄醇提取物 }取上述大黄炮制品各 ws ªo分别用
{s h乙醇冷浸提取 v次 o每次冷浸时间为 tu «o合并
浸提液 o减压浓缩至无醇味 o得稠浸膏 ow ε 冰箱保
存 o临用前称量配制成适当浓度 ∀大黄生品 !炒品和
酒炙品浸膏得率分别为 vy qs| h ovy qt{ h o
uz q{{ h ∀
虎杖水提取物 }取上述虎杖各炮制品 ws ªo分别
加水煎煮 u次 o合并煎煮液 o减压浓缩至 s qx
ª# °¯ p t ow ε 冰箱保存 o临用前适当稀释 ~虎杖醇提
取物 }取上述虎杖炮制品各 ws ªo分别用 {s h乙醇
冷浸提取 v次 o每次冷浸时间为 tu «o合并浸提液 o
减压浓缩至无醇味 o得稠浸膏 ow ε 冰箱保存 o临用
前称量配制成适当浓度 ∀虎杖生品 !炒品和酒炙品
浸膏得率分别为 tt qu{ h ott qx{ h ott qz{ h ∀
2 方法
2 q1 超氧阴离子自由基的生成与清除试验≈{ 
取 v qx °°²¯ # pt 次 黄 嘌 呤 t s s Λ¯ ox s
°°²¯#pt盐酸羟胺溶液 tss Λ¯ o不同浓度梯度抗坏
血酸阳性对照药和炮制品溶液 tss Λ¯ oxs °°²¯#pt
磷酸缓冲液k³‹ { qslzss Λ¯ 于试管中 o混匀后在 vz
ε 恒温水浴预热 x °¬±o加入 s qsty ˜黄嘌呤氧化酶
后继续在 vz ε 水浴中孵育 vs °¬±o取出冷却 o加入
溶于 t qvy °²¯#pt冰醋酸中的 t qzv °°²¯#pt对氨
基苯磺酸和 t| qu| Λ°²¯#pt‘2t2萘2乙二胺 u °¯ o混
#{{v#
第 uy卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
≤«¬±¤²∏µ±¤¯ ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ¤·¨µ¬¤  §¨¬¦¤
∂ ²¯ quy o‘²qy
∏±¨ ousst
匀后在室温下避光反应 o并在 xxs ±° 处测定吸收
度 ∀试剂空白组以蒸馏水代替供试样品不加 ÷ ’⁄o
设立不加 ÷ ’⁄供试样品空白对照组 o以消除样品颜
色干扰 ou组均以等量蒸馏水补足体积 ∀计算清除
率 o根据对数或线性回归获得量效曲线 o求算 ∞≤xs o
并进行 τ检验 ∀
2 q2 羟自由基的生成和测定≈| 
取 txs °°²¯#p t的磷酸缓冲液k³‹ z qwlt °¯ o
ws Λª# °¯ p t的番红花 × 溶液 t °¯ o不同浓度梯度阳
性对照药甘露醇和炮制品溶液 s qu °¯ ov h过氧化氢
溶液 t °¯ k新鲜配制l ow °°²¯ #pt ∞⁄× „2ƒ k¨ µl
溶液 s qux °¯ k新鲜配制l o混匀 o在 vz ε 水浴中反应
vs °¬±后 o在 xus ±°出测定吸收度 o空白组以 s qu
°¯ 蒸馏水代替供试样品 o对照组以 s qwx °¯ 蒸馏水
代替 ∞⁄× „2ƒ k¨ µl和甘露醇或炮制品溶液 ∀设立
供试样品空白对照组 o在系统显色反应前不加药液 o
待显色反应终止后补足药液量 o以消除样品颜色干
扰 ∀计算清除率 o根据对数或线性回归 o获得量效曲
线 o求算 ∞≤xs o并对各组进行 τ检验 ∀
2 q3 羟自由基诱导的脂质过氧化反应及其测
定≈| ots 
取 ts h 的小鼠肝脏匀浆上清液 s qt °¯ o xs
°°²¯#p tk³‹ z qwl磷酸缓冲液 s qx °¯ ott q{ °°²¯#
pt的 ∞⁄× „2ƒ k¨ µls qx °¯ k新鲜配制l o不同浓度
梯度阳性对照药甘露醇和炮制品溶液 s qu °¯ ov h
过氧化氢溶液k新鲜配制ls qx °¯ 于试管中 o混匀 o置
vz ε 水浴温育 o空白组以 s qu °¯ 蒸馏水代替样品溶
液 o对照组以 s qz °¯ 蒸馏水代替 ∞⁄× „2ƒ k¨ µl和样
品溶液 ∀设立不加小鼠心肌匀浆上清液 o以重蒸馏
水补足体积的供试样品空白对照组以消除样品颜色
干扰 ∀取上述反应液 s quz °¯ o{ qt h ≥⁄≥溶液 s qu
°¯ ous h k³‹ v qxl醋酸缓冲液 t qx °¯ ot h硫代巴比
妥酸kׅ„lt qx °¯ o蒸馏水 t °¯ o混匀后置 |x ε 水
浴加热 ys °¬±o在 xvu ±°处测定吸收度 o计算抑制
率 o根据对数或线性回归获得量效关系 o求算 ∞≤xs o
并对各组进行 τ检验 ∀
3 结果
3 q1 大黄虎杖炮制品对 ’u#的清除作用
大黄生品 !清炒品 !酒炙品水提取物和醇提取物
在反应体系的终浓度分别为 uss ovvv qv oxxx qx o
|ux qx Λª#pt和 z{ q{ otvt qv out{ q| ovyw q{ Λª#p t ∀
虎杖生品 !炒品 !酒品的水提取物和醇提取物在反应
体系的终浓度分别为 ys otss otyy qz ouzz q{ Λª#p t
和 uwt qx owsu qx oyzs q{ ottt{ qs Λª#pt ∀结果见表
t ∀
表 t 大黄 !虎杖炮制品清除超氧阴离子的作用
组别
∞≤xs
水提取物 醇提取物
大黄 生品 tsv qy ? t qv uu qv ? s qv
清炒品 vsu qy ? w qxul yx qv ? s q{tl
酒炙品 usw qy ? u q|ul yu qu ? s qzul
虎杖 生品 twv qz ? t q{ us{ qw ? u qw
清炒品 tx| q{ ? t q| u{{ qw ? v qtul
酒炙品 txt qx ? t qu v{v qw ? w qyul
注 }≠ ν € x  ξ ? σk表 u o表 v同l ≈与生品比较 tl Π s qst
ul Π s qsst k表 u o表 v同l
大黄 !虎杖炮制品均具有清除 ’u#的能力 o大黄
各炮制品醇提取物清除能力远远强于水提取物 ∀与
生品比较 o炮制品水 !醇提取物清除作用均极显著地
减弱k Π s qsstl o作用大小顺序均为生品 酒炙品
清炒品 o清炒品与酒炙品之间有一定差异 ∀虎杖
各炮制品水提取物作用略强于醇提取物 ∀其水提取
物清除能力无显著性差异 ∀与生品比较 o虎杖清炒
品 !酒炙品醇提取物有显著性差异k Π s qsstl o二
者之间也有显著性差异 o清除能力大小顺序为生品
清炒品 酒炙品 ∀在此试验条件下抗坏血酸清除
’u#的 ∞≤xs为 vts Λª#p t ∀
3 q2 大黄 !虎杖炮制品对#’ ‹ 的清除作用
大黄生品 !清炒品 !酒炙品水提取物和醇提取物
在反应体系中的终浓度分别为yts qw o|vz qz owww qw o
uuu qu Λª#p t和 tu{ q{ ovtx qy ow|{ qx ozxv qy Λª#
pt ∀虎杖生品 !清炒品 !酒炙品水提取物和醇提取
物在反应体系中的终浓度分别为 tuu qs oyyy qz o
{{{ q{ ott{x qu Λª# pt和 vzu qw o|tu qw otwtx qv o
utz{ qz Λª#pt ∀结果见表 u ∀
表 u 大黄 !虎杖炮制品清除羟自由基的作用
组别
∞≤xs
水提取物 醇提取物
大黄 生品 tvyz qx ? tx q{ xyt qu ? z qw
清炒品 utvt qt ? v qttl {{y qv ? | qtul
酒炙品 uttw q| ? uv q{tl {xs qu ? | qxul
虎杖 生品 tvtu qz ? tx qy tzwu qx ? t| qx
清炒品 txtx qy ? tx q{ tyz| qu ? tw q{
酒炙品 twvt q{ ? tx qv t|s{ qw ? ut qw
大黄 !虎杖炮制品醇提取物和水提取物均有清
除# ’ ‹ 的能力 o它们的醇提取物作用强于水提取
#|{v#
第 uy卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
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物 ∀与生品比较 o清炒品与酒炙品水和醇提取物清
除作用均显著地减弱k Π s qst oΠ s qsstl o二者之
间无显著性差异 ∀虎杖炮制品水提取物作用略强于
醇提取物 o而生品与炮制品之间无显著性差异 ∀在
此试验条件下甘露醇清除# ’ ‹ 的 ∞≤xs为 u|{ Λª#
pt ∀
3 q3 大黄 !虎杖抗脂质过氧化作用
大黄炮制品水提取物和醇提取物在反应体系中
的终浓度分别为 ys qu o|| qx otyy qz ouzz qz Λª#pt
和 us qx ovw qt oxy q| o|w qt Λª#pt ∀虎杖炮制品水
提取物和醇提取物在反应体系中的终浓度分别为
u t { qs ov y s qx oy s v qz ot s s y qu Λª# pt和
t|z qx ouz| q{ owsv qv o{uv qs Λª#pt ∀结果见表 v ∀
表 v 大黄 !虎杖炮制品抗脂质过氧化作用
组别
∞≤xs
水提取物 醇提取物
大黄 生品 txy qy ? t qz yx qt ? s q{
清炒品 v|u qv ? w qtul zu q{ ? s q{
酒炙品 uxy qt ? v qytl xv qu ? s qy
虎杖 生品 tx| qz ? t qy vz qv ? x qt
清炒品 x|t qw ? y qyul u{s qu ? v quul
酒炙品 vvy qt ? v qtul y{x qt ? y qzul
大黄 !虎杖炮制品水提取物和醇提取物对羟自
由基诱导的小鼠肝脏匀浆上清液中混合膜性成分过
氧化脂质的生成具有一定的抑制作用 ∀大黄炮制品
醇提取物抑制作用强于水提取物 o清炒品和酒炙品
水提取物之间具有显著性差异 o抑制作用大小顺序
为生品 酒炙品 清炒品 o而其醇提取物抑制作用
无显著性差异 ∀虎杖生品水提取物的抑制作用强于
醇提取物 o而清炒品和酒炙品醇提取物抑制作用弱
于其水提取物 ∀与生品比较 o虎杖清炒品和酒炙品
水提取物和醇提取物具有极显著地差异k Π 
s qsstl o抑制作用大小顺序水提取物和醇提取物均
为酒炙品 清炒品 生品 ∀炮制品之间有显著性差
异 ∀在此试验条件下甘露醇抑制脂质过氧化作用的
∞≤xs为 vwt Λª#pt ∀
4 小结和讨论
4 q1 体外试验结果表明 }大黄和虎杖生品 !清炒品
和酒炙品水提取物和醇提取物均能清除次黄嘌呤2
黄嘌呤氧化酶反应体系产生的 ’u#和 ƒ ±¨·²±系统产
生的#’ ‹ o并能抑制#’ ‹ 诱导的小鼠肝脏匀浆上清
液过氧化脂质生成 o均具有良好的量效关系k ρ 
s q||l o表明它们具有一定的抗氧化作用 ∀
4 q2 大黄和虎杖各炮制品抗氧化作用的强弱有一
定的差异性 ∀大黄生品无论是水提取物还是醇提取
物 o其作用均强于清炒品和酒炙品 ∀在同样的温度
下所制得的酒炙品和清炒品在不同程度上具有显著
差性异 ∀虎杖生品水提取物和醇提取物生品也强于
清炒品和酒炙品 o说明炒制和酒炙降低了大黄和虎
杖的抗氧化能力 o在加热处理的过程中有可能破坏
了大黄和虎杖抗氧化成分的化学结构 ∀
4 q3 大黄和虎杖炮制品抗氧化作用的强弱与提取
时所用溶剂极性有关 o大黄和虎杖炮制品对应的水
提取物和醇提取物抗氧化作用也存在一定的差异
性 o根据此试验结果 o它们的醇提取物作用远强于水
提取物 ∀溶剂影响抗氧化成分的浸出 ∀在评价大黄
和虎杖炮制作用时需要考虑的这一问题 o以期获得
较为科学地阐明它们的炮制原理 ∀
4 q4 鉴于目前对大黄和虎杖清除自由基 !抗氧化作
用的肯定和进一步开发 o因此在用大黄和虎杖治疗
与自由基有关的一系列疾病如肝炎 o肾炎时 o应选择
生品醇提取物入药为佳 ∀
≈参考文献 
≈t  阴 健 o郭力弓 q中药现代研究与临床研究ktl q北京 }学苑出
版社 ot||u qyt owvw q
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中国药理学报 ot||y otukul }tuy q
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≈w  ¤¬¶½¤Žq‹¤¶¬±²©©……q°µ²§∏¦·¬²± ²© ‹¼§µ²¬¼¯ • ¤§¬¦¤¯ ¥¼ Œµ²±
k ¶ l2„±·«µ¤´ 2˜¬±²±¨ ≤²°³¯ ¬¨¨ ¶ ׫µ²∏ª∏ ≥¨¯©2• §¨∏¦·¬²± ¤±§
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¤±·«¬±¨ ≥¼¶·¨° q „µ¦«¬√ ¶¨²© …¬²¦«¨ °¬¶·µ¼ i …¬²³«¼¶¬¦¶ot||x o
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·¬²± ²© ’¬¬§¤·¬√¨ ≥·µ¨¶¶¥¼ „±·¬²¬¬§¤±·¶¤±§ • ¶¨¨√ µ¨¤·µ²¯ ¬± °≤
tu ≤¨¯ ¶¯q ‘¨ ∏µ²µ¨³²µ·ot||z o{kyl }tw|| q
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¬¯¶«° ±¨·²© Ž¬·©²µ ≥∏³¨µ²¬¬§¨ ⁄¬¶°∏·¤¶¨ „¦·¬√¬·¼ q „±¤¯¼·¬¦¤¯
…¬²¦«¨ °¬¶·µ¼ ot|{w otwu }u|s q
≈|  鲁纯素 o赵会英 o史录文 q丝裂霉素促进活性氧自由基生成的
研究 q生物化学杂志 ot|{| oxkyl }xvu q
≈ts  向 荣 o王鼎年 q过氧化脂质硫代巴比妥酸分光光度法的改
进 q生物化学与生物物理学进展 ot||s otzkvl }uwt q
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中 国 中 药 杂 志
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∏±¨ ousst
Εφφεχτσ οφ Προχεσσινγ ον Αντιοξιδατιον οφ Ραδιξ ετ Ρηιζοµ α Ρηει ανδ
Ρηιζοµ α Πολψγονι Χυσπιδατι
Ž’‘Š ¬±ª2§²±ªo ≠ „‘Š ≤«¨ ±ªo ±Œ˜ ÷¬
k ‘¤±­¬±ª ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o≥¦«²²¯ ²©¬©¨ ≥¦¬¨±¦¨¶o≥·¤·¨ Ž¨¼ ¤¥²µ¤·²µ¼ ²© °«¤µ°¤¦¨∏·¬¤¯ …¬²·¨¦«±²¯²ª¼ o
‘¤±­¬±ª utss|v o¬¤±ª¶∏o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ©¨©¨ ¦·¶²© °µ²¦¨¶¶¬±ª²± ¤±·¬²¬¬§¤·¬²± ²© • ¤§¬¬ ·¨• «¬½²°¤ • «¨¬
¤±§ • «¬½²°¤ °²¯¼ª²±¬≤∏¶³¬§¤·¬q Μετηοδ : × «¨ ²¬¼ª¨ ± ©µ¨¨µ¤§¬¦¤¯¶ ª¨ ±¨ µ¤·¬²± ¶¼¶·¨° ¤±§ °²∏¶¨ ¬¯√ µ¨«²2
°²ª¨ ±¤·¨ ¬¯³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²±¬± √¬·µ² º µ¨¨ ∏¶¨§q Ρεσυλτ : ׫¨ ³µ²¦¨¶¶¨§³µ²§∏¦·¶²© • ¤§¬¬ ·¨• «¬½²°¤ • «¨¬¤±§
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¶¼¶·¨° ¤±§k#’ ‹l ª¨ ±¨ µ¤·¨§·«µ²∏ª« ƒ ±¨·²± ¤¦·¬²±o¤±§¬±«¬¥¬·¯¬³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²±¬±§∏¦¨§¥¼ «¼§µ²¬¼¯ µ¤§¬¦¤¯
ª¨ ±¨ µ¤·¬²± ¶¼¶·¨° oµ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ q ׫¨ µ¨ ¬¨¬¶·¨§¶¬ª±¬©¬¦¤±·§¬©©¨ µ¨±¦¨¶¤°²±ª·«¨ §¬©©¨ µ¨±·³µ²¦¨¶¶¨§³µ²§∏¦·¶q
Χονχλυσιον :„©·¨µ• ¤§¬¬ ·¨• «¬½²°¤ • «¨¬¤±§ • «¬½²°¤ °²¯¼ª²±¬≤∏¶³¬§¤·¬º µ¨¨ ³µ²¦¨¶¶¨§o·«¨¬µ ©¨©¨ ¦·¶¥¨¦¤°¨
º ¤¨®¨ µq
[ Κεψ ωορδσ] ³µ²¦¨¶¶¬±ª³µ²§∏¦·¶~• ¤§¬¬ ·¨• «¬½²°¤ • «¨¬~• «¬½²°¤ °²¯¼ª²±¬≤∏¶³¬§¤·¬~¶∏³¨µ²¬¬§¨ µ¤§¬2
¦¤¯ ~«¼§µ²¬¼¯ µ¤§¬¦¤¯ ~ ¬¯³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²±
≈责任编辑 刘  
干姜片切制厚度需改进
门 学
k山东省蓬莱市结核病防治所 o山东 蓬莱 uyxyssl
干姜来源于姜科植物姜的根状茎 o性热 o辛烈之
性较强 o温中散寒 o回阳通脉 o为治里寒之证的常用
药 o其主要有效成分是辣味素及挥发油 ∀
工作中 o笔者偶然发现干姜片具有一定的不亲
水性 o含干姜的复方中药剂煎毕后 o药渣中的部分干
姜片尚残留没有煮透的干心 o这说明干姜生药成分
不能有效煎出 o必然影响药效 ∀
笔者从蓬莱市中医院购得干姜片 o做了浸泡 !煎
煮的小实验 ∀干姜片厚度在 w °°以内 o符合5中国
药典 6规定 ∀浸泡结果是u °°以内的薄片可在
s qx ∗ x «润透 ou ∗ v °°的中厚片需 y ∗ tx «才能
润透 ov °°以上厚片 o浸泡 us «尚不能全部湿润透
心 ~按常规中药煎煮法 o干姜片 tss ª冷水浸泡 vs
°¬±o煮沸 us °¬±o掰片观察 o尚有约 ws h ∗ xs h的
干姜片未能煮透 o这些没有煮透的干姜片 o多为 v
°°以上的厚片 ∀
通过这个实验 o笔者认为5中国药典6规定干姜
片 u ∗ w °°的厚度 o不利于其有效成分的煎出 ∀干
姜片的切制规格应以 u °°以下的薄片为宜 o以便
生药成分的煎出 o保证药效 ∀
≈责任编辑 刘  
≈收稿日期  usss2tt2us
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第 uy卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
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