全 文 ：六味地黄丸缺味药的 …¤¼ ¶¨法和 °• Œ „法
定性识别研究
张 亮 o刘展鹏 o杨 春
k中国药科大学 药物分析教研室 o江苏 南京 utsss|l
摘要 目的 }对六味地黄丸缺味药进行 …¤¼ ¶¨法和 °• Œ „法定性识别研究 ∀方法 }采用反相 ‹°≤ 法对六味
地黄丸缺味药模拟方的浸出物进行分析 o选取 |个色谱峰的峰面积与内标峰面积之比值作为样本特征变量 o通过
ty|个训练集样本建立了其中 v种缺味药的 …¤¼¨ ¶法和 °• Œ „法判别分析数学模型 ∀结果 }v种缺味药 w种模式
的平均正确识别率 …¤¼¨ ¶法和 °• Œ „法均为 tss h o对 ty|个预示集样本的平均预示率 …¤¼¨ ¶法为 tss h o°• Œ „
法为 || qy h ∀结论 }…¤¼¨ ¶法和 °• Œ „法能对六味地黄丸 v种缺味药进行准确识别 ∀
关键词 六味地黄丸 ~缺味药 ~…¤¼¨ ¶法和 °• Œ „法
现代中药方剂鉴别方法主要是薄层色谱法
k׏≤l o或通过对照品 o或通过对照药材对其进行定
性鉴别 ∀由于中药方剂的复杂性和薄层色谱有限的
分离效能使得这种方法重现性较差 o结果往往带有
主观因素的影响 ∀特别是以单个成分作为某味药材
存在与否的定性鉴别指标 o显然是不全面的 ∀近几
年来 o我们尝试将综合评价方法运用于中药方剂质
量研究 o获得一些可喜结果≈t  ∀现将 …¤¼¨ ¶法≈u 和
°• Œ „法≈v 对六味地黄丸缺味药的定性识别研究
结果作介绍 ∀
1 试药和仪器
乙酰苯胺 !石油醚 !甲醇 !乙腈 o除乙腈为色谱纯
外 o其余均为分析纯 ∀
• „× ∞• ≥ xts型及岛津 ≤2y„型输液泵 ~• „2
×∞• ≥ w{y型 ˜ ∂ 检测器及杭州英谱色谱工作站 ~
色谱柱 ≠ • Š ≤t{柱 ow qy °° ≅ uxs °° ots Λ°k淮阴
精细化工研究所l ~流动相水2乙腈2冰醋酸k|sΒtsΒ
s qvl ~流速 t qs °¯ #°¬±p t ~检测波长 uxw ±° ∀
2 样品制备与数据采集
收集不同商品来源的原药材 wu个k见表 tl o按
六味地黄丸药典处方比随机分配制备分别缺熟地
黄 !缺山茱萸 !缺牡丹皮和不缺味等 w 种模式的
成药模拟方计vv{个样品 ∀称取上述模拟方粉末适
收稿日期 }t|||2st2sy
基金项目 }霍英东教育基金 ~江苏省自然科学基金资助项目
k…Ž|zszyl ~江苏省青年科技基金k…±|{swxl
表 t 药材商品来源
药材名称 购买地 药材名称 购买地
地黄 海南省 牡丹皮 四川岷山
浙江萧山 陕西西安
河北石家庄 湖北
陕西西安 湖南衡阳
甘肃 山东济南
湖南衡阳 云南昆明
湖北 浙江萧山
四川岷山 茯苓 湖北
山茱萸 海南省 海南
浙江萧山 云南昆明
陕西西安 贵州
四川岷山 四川岷山
山药 云南昆明 广西柳州
河北石家庄 浙江萧山
浙江萧山 河北石家庄
江西南昌 福建福州
贵州 泽泻 福建福州
四川岷山 四川岷山
海南省 云南昆明
湖南衡阳 江西南昌
湖北 贵州
量 o分别置锥形瓶中 o加石油醚 tx °¯ o超声提取 vs
°¬±o过滤 o用石油醚 tx °¯ 分 v次洗涤药粉 o弃去石
油醚提取液 o粉末挥干溶剂至松散状 o加入甲醇 ux
°¯ o超声提取 vs °¬±o提取液离心 o取上清液 s qt °¯
及内标溶液 s qt °¯ k精确称取内标乙酰苯胺 s qtx ª
于量瓶中 o用甲醇制成浓度为 t qx °ª# °¯ p t的储备
液 o临用前稀释成 tx Λª# °¯ p tl o置量瓶中 o挥干甲
醇 o用流动相定容 o进样 us Λ¯ o记录色谱图k见图 tl ∀
将 |个色谱峰作为样本特征k|个色谱峰相对内标
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的保留时间分别是s qtt os qtv os qty os qus os quz o
s qvu os qwy os qw| os qzy °¬±l o其峰面积与内标峰面
积之比值为特征变量值 ∀
图 t 样品色谱图
k特征变量与成分峰保留时间的对应关系l
t qτ• u qus °¬± u qτ• u qyu °¬± v qτ• v quv °¬±
w qτ• w qs| °¬± x qτ• x qy| °¬± y qτ• y qzs °¬±
z qτ• | qww °¬± { qτ• ts qut °¬± | qτ• tx qyx °¬±
Œ≥ q τ• us qyz °¬±
3 贝叶斯判别分析
3 q1 判别函数
将 vv{份样本 o一分为二 oty|个样本作训练集
样本 o其余 ty|个样本作为预示集样本 ∀其中缺熟
地黄模拟方用 Α表示(|w个样本) ,缺山茱萸模拟
方用 Β表示(zy个样本) ,缺牡丹皮模拟方用 Χ表
示({w个样本) ,不缺味药典方用 ∆ 表示({w 个样
本) ∀将各类样本特征变量值经计算 ,求得主要参数
分别为 :
类重心 :
Α类
Ξ € (s .ux|uux ,s .t|ttsu ,s .xvvxxu ,s .v|v{xv ,s .usz{|| ,
s .xsy{zu ,s .t{stw{ ,y .|ytwyε p u ,s .vvzwyx)
Β类
Ξ € (s .yyxvwt ,s .t{xxzv ,s .ww|yv| ,s .wuwzww ,s .uvtzxw ,
s .wyusw ,s .s ,v .zxswvε p u ,s .vsvvst)
Χ类
Ξ € (s .zv{|xu ,s .us|ux{ ,s .xut|t| ,s .v|ttzz ,s .uuwxzw ,
s .wvzww ,s .ttxsxz ,z .u{ut|ε p u ,s .u|zu|w)
∆类
Ξ€ (s .y|{z|w ,y .zt{zy ε p u ,s .tzvzxu ,t .t|xuw ε p u ,
v .wt|x|ε p u ,s .s ,s .tvyvzw ,w .y{x||ε p u ,s .s)
判别函数 :
ΨΑ € p vxt .txx p zu .zsv Ξt n uyv .x|u Ξu p t{v .tzt Ξv n
y{x .vsz Ξw n y{{ .vwv Ξx n xzu .w| Ξy n tuz .xyu Ξz n
xvt .vx{ Ξ{ n { .uy| Ξ|
ΨΒ € p vzs .w|z n tu{ .tsv Ξt n vwu .||z Ξu p uys .tuy Ξv n
xvu .{ut Ξw n tsut .{u Ξx n xvx .zyz Ξy n tt .|ut Ξz n
vu{ .yt{ Ξ{ p xx .zvx Ξ|
ΨΧ€ p vxv .t{{ n tyt .|tx Ξt p uuu .|w| Ξu p t{z .ysz Ξv n
wz| .yt{ Ξw n tstv .sz Ξx n wwu .t|u Ξy n ys .ywy Ξz n
xs{ .tyu Ξ{ p x{ .vsz Ξ|
Ψ∆ € p tux .|wz n vux .xz{ Ξt p vws .zx| Ξu n yw .ywy Ξv p
uss .twy Ξw n vzw .{sy Ξx p yy .sx{ Ξy n ttt .s{y Ξz n
tyw .swu Ξ{ p tuv .x|u Ξ|
式中 ΨΑ , ΨΒ , ΨΧ , Ψ∆ 分别为 Α , Β , Χ, ∆ 类的
判别函数 , Ξι分别表示 |个色谱峰面积与内标峰面
积之比值 ∀
3 .2 识别率(或回判率)与预示率
将 ty|个训练集样本特征变量值逐一回代入上
述判别函数计算 ,根据贝叶斯准则决定样本所属类
别并计算识别率 ,结果 w 类模式平均识别率为
tss% ∀
将 ty|个训练集样本特征变量值逐一回代入上
述判别函数计算 ,根据贝叶斯准则决定样本所属类
别并计算预示率 ,结果 w 类模式平均预示率为
tss% ∀
3 .3 判别函数的检验
对所建判别函数进行检验 ∀判别函数对 w类的
判别效果可用 ςu检验 :
ς u € [ ν p λp (t n Γ)/ u] #¯ ± Υ
式中 : Υ q• ¬¯®¶统计量k由原始数据可算出l ~λ.判别函
数中的变量数 ∀
自由度 Μ€ λ#( Γ p t)
经计算 ςus .st(uz) € wy .|yv ,因为{zu .{y{ 
wy .|yv ,故所建各类判别函数对 w类的判别结果是
显著的 ∀
各类之间的判别效果可用 Φ检验 ∀统计量为 :
Φ(ε , φ) €
( ν p Γ p λn t)# νε# νφ
λ#( ν p Γ)#( νε n νφ) # ∆
u(ε , φ)
式中 : ν .样本总数 ; Γ .类别数 ; λ .变量数 ; νε .第 ε 类所
含样本数 ; νφ .第 φ类所含样本数 ; ∆u(ε , φl q¤«¤¯¤±¤¥¬¶距
离 ∀
Φ检验统计量结果分别为Φ( Α , Β) € { .|w ,
Φ( Α , Χ) € ts .zt , Φ( Α , ∆) € |s .{t , Φ( Β , Χ) €
{t .vx , Φ( Β , ∆) € xy .sz , Φ( Χ, ∆) € wx .zt ,查表
Φs qstkv otxzl € v qz{ o可见上述统计量均大于表值 o
这说明 w类模式彼此差异十分显著 o因此本文建立
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的缺味药模拟方的判别函数能较好地对是否缺味作
出正确的识别 ∀
3 q4 市售中成药检验
现购得南京同仁堂制药厂生产的六味地黄丸
k批号为 |{swsx及 |{suuzl和六味地黄胶囊k批号
|{susxl ∀将六味地黄丸剪碎 o称取 v ªo加 u ª硅藻
土研匀 o称取该混合物 t ª置量瓶中 o按样品制备项
下方法操作 o以成分色谱峰面积与内标峰面积之比
值为分类特征 o用已建立判别函数对其判别 o结果 v
批样本全部判为不缺味药模式 o与按药典方法检验
的结果一致 ∀
4 °• Œ „法识别研究
将 w类 vv{份样本 o一分为二 oty|个样本作训
练集样本 o其余 ty|个样本作为预示集样本 ∀首先
用训练集样本计算各类的类重心 !不均匀度以及类
距离 o然后 o计算每一训练集样本至各类的距离 o根
据距离最小规则 o归属各样本所属类别 ∀求得主要
参数分别为 }
类重心
Α类
Ξ € (s .ux|uux ,s .t|ttsu ,s .xvvxxu ,s .v|v{xv ,s .usz{|| ,
s .xsy{zu ,s .t{stw{ ,y .|ytwyε p u ,s .vvzwyx)
Β类
Ξ € (s .yyxvwt ,s .t{xxzv ,s .ww|yv| ,s .wuwzww ,s .uvtzxw ,
s .wyusw ,s .s ,v .zxswvε p u ,s .vsvvst)
Χ类
Ξ € (s .zv{|xu ,s .us|ux{ ,s .xut|t| ,s .v|ttzz ,s .uuwxzw ,
s .wvzww ,s .ttxsxz ,z .u{ut|ε p u ,s .u|zu|w)
∆类
Ξ€ (s .y|{z|w ,y .zt{zy ε p u ,s .tzvzxu ,t .t|xuw ε p u ,
v .wt|x|ε p u ,s .s ,s .tvyvzw ,w .y{x||ε p u ,s .s)
不均匀度 :
Α类
Σ € (v .yxtwu ε p u ,x .uxs|t ε p u ,s .txx{yy ,{ .|vsvtε p u ,
s .suwx| ,s .ts|xsv ,y .stw|{ε p u ,t .{t||uε p u ,{ .zwywzε p
u)
Β类
Σ € (x .|yvsy ε p u ,v .wvtvx ε p u ,s .twtuv{ ,| .zyuvvε p u ,
u .s{ywwε p u ,s .ttt|{y ,s .s ,| .suyyvε p v ,{ .t{wz{ε p u)
Χ类
Σ € (s .syv|wv ,w .suszz ε p u ,s .txzuzz ,z .wvu{u ε p u ,
u .wyvty ε p u ,s .tsvwy ,w .{xsuy ε p u ,t .vwyu| ε p u ,
z .zt{xtε p u)
∆类
Σ € (s .sx{vz ,u .vvvsw ε p u ,w .zv|vxε p u ,u .wvzsxε p u ,
t .utyswε p u ,s .s ,w .zy|szε p u ,t .u|ss|ε p u ,s .s)
类间距离
∆(t ,u) € v .uwx|{ , ∆(t ,v) € v .ys|zw , ∆(t ,w) € y .zx{yt ,
∆(u ,v) € t .uuwuw , ∆(u ,w) € y .v|wv , ∆(v ,w) € y .t|vw|
结果 ,w类模式的识别率均为 tss% ∀ty|个预
示集样本计算出的各类的预示率分别为 Α 类
tss% , Β类 |{ .v% , Χ类 tss% , ∆类 tss h o市售 v
批样本检验结果均判为不缺药味类 ∀
5 结果与讨论
5 q1 本文对样品制备及测定方法学按现行中药单
指标质量标准研究要求作了系统考查 ∀如样品制备
采用加热回流与超声提取进行了比较 o对样品测定
的精密度 !稳定性 !重现性等进行了测定 o结果表明 }
这些分析效能指标均符合一般质量标准要求 ∀同时
对 ‹°≤ 系统适用性作了规定k包括柱效及分离
度l o因此本文所建的多指标方法具有较好的稳定性
和重现性 ∀
5 q2 中药材质量受多种因素的影响 o要建立一个具
有广泛适用性的多指标分析方法 o应尽可能收集不
同产地k或不同商品来源l的药材样品 ∀本文采用
wu种不同商品来源的药材随机分配制备 vv{个训
练集样本和预示集样本 o结果表明该方法是成功的 o
经不断完善能用于市售药品的检验 ∀
5 q3 通过训练集样本建立的贝叶斯判别数学模型
是关于特征变量的多元线性方程 o未知样本的判别
只需将特征变量值代入方程进行简单计算即可得出
结论 o方程直观 o方法简便 o加之有多种方法对判别
函数及结果进行检验 o确保其判别结果的正确性 ∀
因此 o贝叶斯k…¤¼¨ ¶l判别分析方法的实用性是显而
易见的 ∀
参考文献
≈t  张 亮 o马仁玲 o徐 娟 o等 1 人工神经网络和非线性映射技术
评价中药复方制剂戊己丸的质量 q中国药科大学学报 ot||y ouz
kul }|t
≈u  张福良 q聚类分析与中药质量研究 1 北京 }人民卫生出版社 o
t||w1uwx
≈v  相秉仁 1 计算药学 1 北京 }中国医药科技出版社 ot||t
#tv#
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Θυαλιτατιϖε Ρεχογνιτιον ον Οµιττεδ Ινγρεδιεντσ
ιν Λιυωει ∆ιηυανγ Πιλλσ βψ Βαψεσιαν Αναλψσισ ανδ ΠΡΙΜΑ
‹„‘Š ¬¤±ªoŒ˜ «¤±2³¨ ±ªo ≠ „‘Š ≤«∏±
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Αβστραχτ Οβϕεχτιϖε: ײ ∏´¤¯¬·¤·¬√¨¯¼ µ¨¦²ª±¬½¨ ·«¨ ²°¬··¨§¬±ªµ¨§¬¨±·¶¬± ¬∏º ¬¨ ⁄¬«∏¤±ª °¬¯¯¶ ¥¼
…¤¼¨ ¶¬¤± ¤±¤¯¼¶¬¶¤±§°• Œ „ q Μετηοδσ: ׫¨ ¬¨·µ¤¦·¶²©·«¨ ³¬¯¯¶º µ¨¨ ¤±¤¯¼½¨ §¥¼ ‹°≤ o©²µ ¤¨¦«²¥­¨¦·o·«¨
¤µ¨¤¶²©±¬±¨ ³¨ ¤®¶µ¨ ¤¯·¬√¨·²·«¤·²©·«¨ ¬±·¨µ±¤¯ ¶·¤±§¤µ§º µ¨¨ ¶¨¯¨ ¦·¨§¤¶¦¯¤¶¶¬©¬¦¤·¬²± ©¨ ¤·∏µ¨¶q׫¨ ¦¯¤¶¶¬©¬¦¤2
·¬²± °²§¨¯ º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §²± ty| ·µ¤¬±¬±ª2¶¨·²¥­¨¦·¶qΡεσυλτ : ׫¨ ¦¯¤¶¶¬©¬¦¤·¬²± ¤√ µ¨¤ª¨ ¤¦¦∏µ¤¦¼ º¤¶tss h ©²µ
©²∏µ³¤··¨µ±¶¥¼ …¤¼ ¶¨¬¤± ¤±¤¯¼¶¬¶o¤±§|| qy h ¥¼ °• Œ „ ¤±¤¯¼¶¬¶qΧονχλυσιον : …¤¼¨ ¶¬¤± ¤±¤¯¼¶¬¶¤±§°• Œ „
¤±¤¯¼¶¬¶¦¤± ¥¨ ∏¶¨§·²¦¯¤¶¶¬©¼ ¤±§µ¨¦²ª±¬½¨ ·«¨ ²°¬··¨§¬±ªµ¨§¬¨±·¶¬± ¬∏º ¬¨⁄¬«∏¤±ª °¬¯¯¶q
Κεψ ωορδσ ¬∏º ¬¨⁄¬«∏¤±ª °¬¯¯¶~²°¬··¨§¬±ªµ¨§¬¨±·¶~…¤¼¨ ¶¬¤± „±¤¯¼¶¬¶¤±§°• Œ „
≈责任编缉 李 禾 
当归及其复方透皮吸收特性的研究
魏 莉 o蔡贞贞 o徐莲英
k上海中医药大学 o上海 usssvul
摘要 目的 }考察单味当归 o当归与常用中药丹参 !冰片配伍以及三药组成复方后的透皮特性 ∀方法 }以阿魏
酸为指标成分 o采用体外透皮吸收实验方法和 ‹°≤ 检测法 ∀结果 }当归所含阿魏酸的渗透系数大于单体阿魏酸
k Π s .st) ;当归伍用丹参后其所含阿魏酸的渗透系数减小( Π s .st) ;冰片对当归所含阿魏酸具有促透作用( Π
 s .st) ∀附方中阿魏酸的渗透系数大于单味当归及当归 p丹参 !当归 p冰片配伍( Π s .stl ∀结论 }药材所含某
一成分透皮吸收量的变化不仅受配伍药味的影响 o药材本身所含成分对其透皮吸收亦有影响 ~单体 !单味中药的透
皮情况不能完全反映复方的透皮吸收情况 ∀
关键词 当归 ~配伍 ~复方 ~透皮吸收
当归为伞形科植物当归 Ανγελιχασινενσισ
k’ ¬¯√ ql ⁄¬¨ ¶¯的干燥根 o其性味甘 !辛 !温 o归肝 !心 !
脾经 o具补血活血 o调经止痛等功效 ∀随着活血化瘀
方面研究的深入 o当归在心血管方面的作用越来越
引起人们的重视 o并进行了多方面的实验研究≈t  ∀
药理学研究证明 o当归的有效成分之一阿魏酸是其
活血功效的主要物质基础≈u  ∀本室曾对阿魏酸进行
对透皮吸收实验研究≈v  ∀
本实验根据现代药理学研究报道 o选择当归的
收稿日期 }t||{2s{2uy
基金项目 }国家中医药管理局科研基金资助项目k|x„vvtul
有效成分阿魏酸为指标成分 o采用体外透皮吸收实
验方法 o分别考察单味当归的透皮吸收 o当归与常用
中药丹参 !冰片配伍及三药组成复方后的透皮吸收
特性 o以探讨中药透皮吸收的特点和相应的规律 o为
开发当归新的外用制剂奠定理论基础和提供实验依
据 ∀
1 材料 !仪器与试剂
动物 裸鼠 o雄性 ots周龄k上海肿瘤研究所实
验动物中心提供l ∀
试药 阿魏酸对照品k中国药品生物制品检定
所l ~阿魏酸k上海试剂一厂l ~当归 !丹参药材k上海
徐汇中药饮片厂l ~冰片k药用规格 o上海试剂厂l ∀
#uv#
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