全 文 ：·1474· 中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第10期2008年10月
·制剂与质量·
附子与不同药昧药材配伍后乌头碱类生物碱的电喷雾质谱研究
皮子凤1，越皓2，宋凤瑞1，刘志强1，刘淑莹1
(1．中国科学院长春应用化学研究所长春质谱中心，吉林长春130022I2．香港浸会大学化学系．中国香港)
摘要：目的通过研究不同药味药材与附子的配伍机制，揭示酸、甘、辛、苦味中药对附子化学成分的影响规律。
方法利用电喷雾质谱和内标法，分别对生附子，生附子加五味子、黄芪、独活、黄连共煎液和药渣中乌头碱类生物
碱进行考察。结果附子与五味子合用，双酯型和脂型生物碱的量增加，附子与黄芪、独活配伍双酯型生物碱的量
下降，附子与黄连配伍脂型生物碱和生物碱的总量均降低，但双酯型生物碱变化无规律。结论 附子与五味子合用
毒性增加，附子与黄芪、独活毒性降低。
关键词：附子；配伍}五味子；黄芪；独活；黄连}生物碱；电喷雾质谱
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)10—1474—04
AnalysisofaconitinealkaloidsincompatibleapplicationofRadixAconitiLateralisPreparata
withdifferentflavourhe bsyESI—MSspectrometry
PIZi—fen91，YUEHa02，SONGFeng—ruil，LIUZhi—qian91，LIUShu—yin91
(1．ChangchunCenterofMassSpectrometry，ChangchunInstituteofAppliedChemistry，ChineseAcad myofSciences，
Changchun130022，China；2．DepartmentofChemistry，HongKongBaptistUniversity，HongKong，China)
Abstract：ObjectiveTostudythcompatibleapp icationthe ryofRadixAconitiLateralisPreparata
(RALP)withdifferentflavourhe bs，forelucidatingtheinfluenceofsour，sweet，pungent，andbitter
flavoursaboutaconitealkaloids．MethodsTheaconitinealkaloidsweretudiedndecoctinghemixture
ofRALPwithFructusSchisandraeChin nsis(FSC)，RadixAstragali(RA)，RadixAngelicaePubescentis
(RAP)，andRhizomaCoptidis(RC)，respectively，andextractingtheresidueoftheabovem ntionedcorn—
patibilityaf erobservedbyESI—MSandinternalstandard．ResultsThediester—lipotypealkaloidswere
higherintheherbcouplesofRALP—FSCandRALP—RCthanthoseofRALP—RAandRALP—RAP，while
lipotypealkaloidswerelowerintheherbcouplesofRALP—RCandRALP—RAPthanthoseofRALP—RA
andRALP—FSC．Therewasno egularityinchangesofdiesteralkaloids．ConclusionThetox cityiSin．
creasedinthecompatibleapp icationofRALP—FSCandecreasedinRALP—RAandRALP—RAP．
Keywords：RadixAconitiLateralisPreparata(RALP)Icompatibleapp ication；FructusSchisandrae
Chinensis(FSC)；RadixAstragali(RA)；RadixAngelicaePub scentis(RAP)IRhizomaCoptidis(RC)；
flavours；alkaloids；ESI—MS
附子为毛茛科植物乌头Aconitumcar ichaeli
Debx．的干燥子根，味辛、甘，以回阳救逆，补火助阳
等功效广泛应用于临床。附子在经典方剂中常与其
他药材配伍使用，是因其含有二萜类双酯型生物碱
而具有毒性。本实验室已经通过电喷雾质谱系统地
研究了附子配伍前后化学成分变化，初步揭示了附
子配伍减毒增效的机制‘1~引。但对于配伍中其他药
物性味、化学成分与附子的毒性变化之间关系尚未
涉及。因此本实验研究了附子与五味子、黄芪、独活、
黄连共煎前后及药渣中生物碱的变化，结合前期工
作，阐明不同药味药材对附子毒性的影响。
1材料
FinniganLCQTM离子阱质谱仪，电喷雾离子
源，喷雾电压为4．5kV，毛细管温度为180℃，注射
泵进样速度为3taL／min。
甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。五味子、
黄芪、独活、黄连购自长春市吉林大药房，生附子购
自四川I江油饮片厂，经过长春中医药大学王淑敏教
收稿日期：2008．01．04
基金项目：。973”计划资助项目(2006CB504706)；国家自然科学基金资助项目(30672600)l吉林省科技发展计划资助项目(20050912)
作者简介：皮子风(1978一)，女．山西省新绛县人，助理研究员．硕士，2000年本科毕业于中国药科大学，2005年硕士毕业于南开大学-主
要从事乌头属中药药效物质基础研究。Tel；(0431)85262079Fax：(0431)85262886E-mail：mslab21@ciac．j1．cn

万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第10期2008年10月·1475·
授鉴定。氢溴酸高乌甲素对照品(批号10289—0001)
购自中国药品生物制品检定所。
2方法与结果
2．1 共煎液和单煎液中生物碱的提取：将生附子
10g分别与五味子20g、黄芪30g、独活10g、黄连
60g混合粉碎，粗粉加10倍量水浸润后，微沸提取
40、20min，滤过，药渣50℃烘干备用，滤液合并后
醇沉至乙醇终体积分数为50％，24h后滤过，滤液
减压浓缩至50mL，用10％氨试液调节pH9．5，等
体积乙醚萃取3次，萃取液合并后50℃蒸干，得到
各提取液的生物碱部分。为与药对配伍对比，另取生
附子重复上述试验，得到生附子单煎液。
将烘干备用药渣分别用10％氨试液润湿，加5
倍量乙醚超声提取2次，每次30min，滤过，合并滤
液，50℃蒸干，得到药渣中的生物碱部分。
取生物碱部分分别用甲醇10mL溶解，稀释
250倍后，与等体积13．5弘glmL内标物氢溴酸高乌
甲素漩涡震荡混合Imin，供质谱检测。
2．2 附子中的生物碱的分析：附子炮制品种类较
多，临床配伍使用常根据症况不同选择[．．5]。为了系
统地比较实验结果，本实验采用生附子与其他药材
配伍，更明确地阐述药味配伍与毒性的关系。
生附子单煎液中主要含有次乌头碱(m／z
616)、中乌头碱(m／z632)、乌头碱(m／z646)等双
酯型生物碱(图1)。苯甲酰中乌头原碱(mlz590)、
苯甲酰乌头原碱(m／z604)、苯甲酰次乌头原碱(m／
2574)等单酯型生物碱是双酯型生物碱C。位水解
的产物。8一亚油酰一苯甲酰次乌头原碱(m／z836)、8一
油酰一苯甲酰脱氧乌头原碱(m／z852)、8一亚油酰一苯
甲酰中乌头原碱(m／z852)等脂型生物碱可由脂肪
616
)，
585
556．574l[
604
6》，‰ 啪872
．刊J』I．。l I I 66j ．．1．1。
500 550 600 650 7∞ 750 800 850
m／z
图l生附子的电喷雾质谱圈
Fig．1ESI—MSSpectrumofRALP
酸与双酯型或单酯型生物碱反应生成[6]。由于在水
煎过程中生物碱骨架C。位发生了水解和脂交换反
应，水煎液中的单酯型和脂型生物碱比原药材中对
应的生物碱的量高[7]。
以内标物氢溴酸高乌甲素的丰度为100，其他
成分与内标物比较的丰度结果见表1。
裹1 附子与五味子、黄芪、独活、黄连配伍后共煎液和
药渣中乌头碱类生物碱的丰度
TableAbundancebetweenaconitinealkaloids
incO—decoctionandresiduesfromRAI．P
compatibilityw thFSC，RA，RAPS，andRe
样品鞣一碱虢嚣8-篡
油酰一苯甲酰
乌头原碱
生附子药渣中主要含有脂型生物碱，而单酯型
和双酯型生物碱由于水溶性较好，丰度较小。
2．3附子与五味子的配伍：五味子性温，味酸、甘，
含有三萜酸类、内酯和木脂素，单煎液pH2．9～
3．0。五味子并不是传统中药理论中与附子禁忌使用
的中药。虽然二者配伍并不多见，但因其与附子共用
造成的中毒案例偶有发生[8]，有必要对其药在配伍
过程中化学成分的变化进行深入研究，从而科学地
解释临床上产生中毒的原因。
五味子与附子共煎液的质谱图见图2一A。与生
附子单煎液相比，主要毒性成分双酯型生物碱的丰
度显著提高，分别为次乌头碱2．5倍、中乌头碱
76．4倍、乌头碱28．2倍，即毒性增加。脂型生物碱
8一亚油酰一苯甲酰次乌头原碱(17．4倍)和8一油酰一苯
甲酰脱氧乌头原碱、8一亚油酰一苯甲酰中乌头原碱混

万方数据
·1476· 中草喃 Chin船eTraditionalandHerbalD邝祭第39卷第10期2008年10月
合物(10．9倍)的丰度增加，是由于五味子中的脂肪
酸与附子中的生物碱发生反应。单酯型生物碱的丰
度变化不大(变化量<1倍)，说明双酯型生物碱增
加不是由于五味子中的化学成分抑制其水解反应造
成的。共煎液药渣中生物碱的量均低于单煎液药渣
中的量，说明五味子中的化学成分能够显著促进附
子中生物碱的溶出。为证实上述推断，单独提取五味
子中的有机酸成分，配伍后的各项数据与上述结果
相似。因此认为五味子能够促进双酯型生物碱的溶
出和稳定，配伍后毒性增加；同时脂型生物碱的量也
增加。十八反中的半夏攻乌头禁忌原理之一也是由
于共煎液的酸性能够促进双酯型生物碱的溶出，因
此对于水煎液pH值较低的药材，应谨慎与附子等
乌头属植物配伍[7]。
《中国药典》收录的其他酸味药材，如诃子与附
子配伍，也可见大量脂碱生成，合煎液中双酯型生物
碱的量增加，因此传统蒙药诃子用于乌头的炮制，即
通过与诃子共煮，弃去水煮液，可以使药材中的毒性
成分双酯型生物碱大大降低，而产生大量的水溶性
差而热稳定性好的脂类生物碱。
2．4附子与黄芪的配伍：黄芪性微温，味甘，含有多
糖、黄酮和三萜皂苷类化合物，单煎液pH5～5．2。
配伍见于《魏氏家藏方》。附子助心肾之阳，温中焦脾
阳，黄芪补肺健脾，实卫固表，配伍后用于治疗阳虚
自汗，畏寒，脾肾阳虚等症。
黄芪解附子之毒显著，与单煎液比较，共煎液中
双酯型生物碱的量显著降低，次乌头碱降为1．1％，
中乌头碱降为6．5％，乌头碱降为10．2％，见表1。
但同时单酯型生物碱的量也显著降低，见图2一B。原
因在于双酯型生物碱的量下降，使溶液中的水解平
衡左移，不利于与之相对应的单酯型生物碱生成。与
单煎后药渣提取液相比，共煎后药渣提取液中单酯
型(增加2～4倍)和双酯型生物碱(增加1～14倍)
增加，提示黄芪的解毒机制在于吸附和沉淀生物碱，
减少其溶出。与单煎液及其药渣提取液相比，共煎液
及其药渣提取液中脂型生物碱的总量变化不大，共
煎液中脂碱增加了1．6～2倍，但脂交换反应并不是
解毒的主要机制。其他味甘并与黄芪类似的药材，如
甘草解毒机制也在于生成脂型生物碱和药材的吸
附、沉淀作用，减少双酯型生物碱的煎出[2]。
2．5附子与独活的配伍：独活性微温，味辛、苦，含
有香豆素和挥发油，单煎液pH5．3～5．5。配伍见于
《太平圣惠方》、《奇效良方》。附子散寒除湿，独活祛
风胜湿，用于风寒湿毒，脚气肿满，挛急痹痛等症。
附子与独活配伍后，全部乌头类生物碱的量显
著降低，见图2一C。说明伍用之君药为独活，附子起
辅助作用。与单煎液药渣比较，共煎液药渣中生物碱
的量变化不超过1．7倍(表1)。此外，双酯型生物碱
在共煎液中的量降低的另一个原因可能是独活中的
香豆素与生物碱生成了不溶性复合物。将附子和独
活的单煎液混合，发现有沉淀生成，进一步佐证了以
上推断。从化学角度看，独活减附子毒性的能力与甘
草相当。独活另一主要成分挥发油在共煎时损失较
大，对通过化学反应方式减毒影响甚微。干姜JII芎
等辛味药材与附子的配伍原理都在于机体内部抑制
乌头碱样心脏毒性[9]，独活是否具有此作用尚有待
进一步研究。
2．6附子与黄连的配伍：黄连性寒，味苦，主要含有
生物碱，单煎液pH5．2～5．4。配伍见于《伤寒论》、
《证治宝鉴》、《圣济总录》。附子为臣药，助心阳、暖脾
胃、补肾阳。黄连为君药，泻心胃实热、止湿热痢疾，
用于心下痞满，脘腹胀痛，泄泻等症。
与生附子单煎液相比，双酯型生物碱中乌头碱
和乌头碱分别增加到3．66、1．33倍，见表1。除此之
外，在共煎液中其他生物碱的丰度均有所降低，见图
2一D。次乌头碱减少到18％。药渣中所有生物碱的量
也不同程度地下降。附子与黄连的单煎液混合后，有
沉淀生成。说明：其一，在脂交换反应方面，黄连中的
生物碱与乌头类生物碱发生竞争性抑制并使平衡左
移，致使易于生成脂型生物碱的中乌头碱和乌头碱
未反应而相对增加。而由次乌头碱生成脂型生物碱
的能力比较强[10。，推知在上述反应中由脂型生物碱
到次乌头碱的量比较少；其二，黄连能够与乌头类生
物碱生成不溶性的复合物；其三，能够显著抑制乌头
类生物碱的溶出；其四，黄连中可能存在抑制乌头碱
毒性的化合物。
苦寒类药材大黄与附子配伍的减毒原理亦在于
与乌头类生物碱生成不溶性复合物[2]。
3讨论
采用电喷雾质谱加内标法，避免了对照品的局
限性，可以对附子中的生物碱成分进行全面检测。研
究结果表明，附子与酸味药材配伍，在生成脂型生物
碱的同时双酯型生物碱的量明显增加，增加用药后
中毒的风险。与甘味药材配伍，由于配伍药材产生物
理吸附而使双酯型生物碱的量下降，并有利于脂型
生物碱的生成和溶出，减毒增效，此类方式可能与药
材的质地有关。与苦昧药材配伍，能够通过与乌头类
生物碱生成不溶性沉淀减少毒性。由于辛味药材多

万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第10期2008年10,El‘ 477’
_ _
500550600 650 700750800 850
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圈2附子分别与五昧子(A)、黄芪(B)、独活(C)、黄连(D)共煎液的电喷雾质谱圈
Fig．2ESI—MSSpectraofRALP-1-FSC(A)，RALP-{-RA(B)，RALP+RAP(C)，andRALP+RC(D)
含有挥发油，共煎时挥发油对于通过化学变化的减
毒作用不显著。另外，配伍中附子为臣药时，通常乌
头类生物碱的总量显著下降。
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去甲基斑蝥素一壳聚糖纳米粒的表征和体外释放研究
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(苏州大学药学院，江苏苏州 215123)
摘要：目的研制粒径小于200nrrt的去甲基斑蝥素一壳聚糖纳米粒，并对其质量进行评价，对其结构、体外释放
性能进行研究。方法 以低相对分子质量的壳聚糖为载体。通过离子诱导法，制备去甲基斑蝥素一壳聚糖纳米粒，并
07一12—11
家科技支撑计划资助项目(2006BAl09800)；江苏省科技厅社会发展资助项目(BS200522)，江苏省高新技术产业发展资助
目(JHB05～46)-江苏省卫生厅招标课题(H200630)
玮(1980一)，男，广西桂林市人．硕士研究生，从事靶向农药系统研究。E—mail：22437654@qq．corn
张学农Tel：(0512)66998348E—mail：zhangxuenong@163．corn
07届药学本科毕业实习生霉!涸项涨者浩
期目介作
日项简讯陈稿金者通。收基作．。

万方数据
附子与不同药味药材配伍后乌头碱类生物碱的电喷雾质谱研
究
作者： 皮子凤， 越皓， 宋凤瑞， 刘志强， 刘淑莹， PI Zi-feng， YUE Hao， SONG Feng-rui
， LIU Zhi-qiang， LIU Shu-ying
作者单位： 皮子凤,宋凤瑞,刘志强,刘淑莹,PI Zi-feng,SONG Feng-rui,LIU Zhi-qiang,LIU Shu-
ying(中国科学院长春应用化学研究所长春质谱中心,吉林,长春,130022I)， 越皓,YUE
Hao(香港浸会大学,化学系,中国,香港)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(10)
被引用次数： 5次

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2.朱日然.李启艳.张学顺.朱宗敏.黄超 附子与半夏不同炮制品种配伍应用的ESI-MSn研究[期刊论文]-中国实验方
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