全 文 ：较,测定结果相似,方法简便, 重现性好,为杜仲皮质
量控制提供了参考。同时, 通过对不同生长年限杜
仲皮松脂醇二葡萄糖苷量的研究,为杜仲的合理采
收提供了科学依据。
致谢:感谢中国药材集团都江堰华泰川芎药业
有限责任公司在采集药材方面提供的支持和帮助!
参考文献:
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HPLC法测定滨蒿中对羟基苯乙酮
叶 娉1 ,万 丽1* ,周 立2 ,王 敏1 ,王 凌1
( 11 成都中医药大学,四川 成都 611137; 21 贵阳市农业局, 贵州 贵阳 550000)
摘 要:目的 从滨蒿中分离得到对羟基苯乙酮并建立其定量测定方法。方法 采用硅胶柱色谱和 Sephadex LH-
20 从滨蒿的三氯甲烷部位分离得到对羟基苯乙酮; 采用 DiamonsilT M C18色谱柱 ( 250 mm @ 4. 6 mm, 5Lm) , 甲醇-
2% 醋酸溶液 ( 30B 70) 为流动相, 检测波长为 275 nm,对不同产地滨蒿中对羟基苯乙酮的量进行测定。结果 对
羟基苯乙酮在 01 098~ 01 786 Lg 线性关系良好,精密度、稳定性、重现性、加样回收率试验的 RSD 均小于 2% , 平均
加样回收率为 991 80%。结论 该方法准确、快速、重现性好, 可用于滨蒿中对羟基苯乙酮量的测定。
关键词:滨蒿; 对羟基苯乙酮; 定量测定
中图分类号: R2821 6 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2009) 04-0653-02
滨蒿为5中国药典62005 年版一部茵陈项下收
载品种之一, 为菊科植物滨蒿 Ar temisia scoparia
Waldst. et Kit. 的干燥地上部分, 具有清湿热, 退
黄疸的功效 [ 1] , 为利胆退黄的要药[ 2] , 现代研究表
明,对羟基苯乙酮具有明确的利胆活性[ 3] ,是滨蒿的
有效成分之一, 而茵陈的现行质量标准中没有定量
测定项, 相关文献报道[ 4~ 8] 也尚未见关于滨蒿中对
羟基苯乙酮定量测定方面的报道。本实验运用硅胶
柱色谱从滨蒿的三氯甲烷部位中分离得到对羟基苯
乙酮, 1H-NMR、13 C-NMR 光谱数据与对羟基苯乙
酮文献值一致[ 9] 。采用 H PLC 法测定了 10 个产地
滨蒿中对羟基苯乙酮, 为滨蒿的质量控制以及茵陈
药材质量标准的建立奠定基础。
1 仪器与试药
Varian ProStar 210 高效液相色谱仪 ( Varian
Model 325检测器) : 美国瓦里安公司; BP211D (万
分之一、十万分之一) 型电子天平: 德国 Sartorius
公司; 对羟基苯乙酮对照品: 自制, 质量分数大于
98% ;滨蒿药材购自四川、山西、辽宁、广西、陕西、河
南、安徽、新疆, 经成都中医药大学严铸云教授鉴定
为滨蒿 A . scopar ia Waldst . et Kit . 的干燥地上部
分;甲醇为色谱纯,水为重蒸水, 其余试剂为分析纯。
2 方法与结果
21 1 色谱条件: DiamonsilTM C18色谱柱 ( 250 mm @
4. 6 mm, 5 Lm) ;以甲醇-2% 醋酸溶液 ( 30B 70) 为
流动相; 体积流量为 1 mL/ min; 检测波长为 275
nm;柱温: 30 e 。理论塔板数按对羟基苯乙酮峰计
算应不低于 3 000。色谱图见图 1。
图 1 对羟基苯乙酮对照品(A)和样品(B)的 HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLCChromatogram of p-hydroxyacetophen-
one reference substance (A) and sample (B)
21 2 对照品溶液的制备:精密称取对羟基苯乙酮对
照品适量, 加甲醇制成含 01 1 mg / mL 的溶液作为
对照品溶液。
21 3 供试品溶液的制备: 取滨蒿药材约 2 g, 精密
称定,加入甲醇 30 mL,回流提取 2 次,每次 1 h,滤
#653#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
* 收稿日期: 2008- 07-18 作者简介:叶 娉( 1984 ) ) ,女,南宁市人,在读硕士研究生,研究方向为中药药效物质基础与质量标准的研究。
T el : ( 028) 61801628 E-mail: yep 130@ 163. com
* 通讯作者 万 丽
过,每次精密量取续滤液 15 mL,合并续滤液, 低温
蒸干,残渣加甲醇水浴加热使溶解, 转移至 10 mL
量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀, 作为供试品溶液。
21 4 线性关系的考察:分别精密吸取对羟基苯乙酮
对照品溶液 1、2、4、6、8 mL, 分别置 10 mL 量瓶中,
加甲醇稀释至刻度, 摇匀,取上述对照品溶液各 10
LL, 注入液相色谱仪, 记录色谱图。以对羟基苯乙
酮的量为横坐标, 峰面积为纵坐标, 绘制标准曲线,
得回归方程 A= 6 @ 107 M+ 340 141 ( r= 0. 999 3) ,
结果表明,在 01 098~ 01 786 Lg 有良好的线性关系。
21 5 精密度试验:精密吸取对羟基苯乙酮对照品溶
液 10 LL,连续进样 6 次,测定,结果表明 6次测定
的 RSD 为 11 66%。
21 6 稳定性试验:取同一供试品溶液,分别于 0、2、
6、12、24 h 进样 10 LL, 依法测定峰面积。结果表
明,样品中对羟基苯乙酮 RSD 为 01 71%, 供试品溶
液在 24 h 内稳定。
21 7 重现性试验: 取同一批滨蒿药材 6 份, 每份约
2 g ,精密称定,按供试品溶液制备方法制备,依法测
定,计算样品中对羟基苯乙酮的量, 结果表明 RSD
为 11 66%。
21 8 加样回收试验: 取已测定的滨蒿药材约 1 g,
精密称定, 分别加入 80%、100%、120% 的对羟基
苯乙酮对照品, 按供试品溶液的制备方法制备,依法
测定,计算回收率。结果,对羟基苯乙酮的平均回收
率为 991 80% , RSD 为 11 32% ( n= 9)。
21 9 样品的测定: 取各产地滨蒿药材, 按供试品制
备方法制备,依法测定对羟基苯乙酮质量分数。结
果见表 1。
3 讨论
对羟基苯乙酮是滨蒿利胆的药效物质基础之
表 1 不同产地滨蒿中对羟基苯乙酮的测定结果 (n= 3)
Table 1 Determination of p-hydroxyacetophenone in A.
scoparia f rom different habitats (n= 3)
药材来源 对羟基苯乙酮/ % 药材来源 对羟基苯乙酮/ %
四川 01 033 新疆 01 021
广西 01 022 辽宁 01 032
陕西 01 036 贵州 01 020
河南 01 016 云南 01 025
安徽 01 028 山东 01 027
一,易溶于甲醇、乙醚、丙酮等溶剂,在制备供试品溶
液时分别对不同的提取溶剂 (甲醇、乙醇)、提取方
法 (超声、回流)、提取时间 ( 1、11 5、2 h) 以及提取
次数 ( 1、2、3次) 进行了考察,最后确定甲醇回流 2
次,每次 1 h 提取最为完全。
对甲醇-水、甲醇-磷酸、甲醇-醋酸不同流动相系
统进行了比较, 结果发现用甲醇-2% 醋酸溶液
( 30B70) 为流动相时, 对羟基苯乙酮的保留时间、
峰型以及分离效果较好, 可用于滨蒿中对羟基苯乙
酮的定量测定。
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#654# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月