全 文 ：·1176· 中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月
学报，2006，22(1)：48—49．
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[6]曾德惠．滴丸剂的生产与理论[M]．北京：中国医药科技出版
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结肠炎散I号的质量标准研究
周永梅，王巨存，冯 鑫，房德敏
(天津医院，天津300211)
摘要：目的制定结肠炎散I号质量控制方法。方法采用TLC法对方中的黄连、五倍子进行了定性鉴别；采用
HPLC法对方中靛玉红进行了测定。结果本品定性鉴别薄层色谱特征明显；靛玉红在0．1293～0．226pg／mL
具有良好的线性关系(r；0．9995)，平均回收率为99．8％，RSD为1．62％．结论该方法可以准确地进行定性、
定量检测，有效地控制结肠炎散I号的质量。
关键词：结肠炎散I号；黄连；五倍子；薄层色谱；靛玉红l高效液相色谱
中图分类号：R286．02 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)08—1176一03
结肠炎散I号是我院传统中药制剂，主要由青
黛、黄连、五倍子、白及、海螵蛸等多种中药配伍而
成，具有清热解毒、收敛生肌之功效，适用于溃疡性
结肠炎。原质量标准中仅有性状及检查项，无定性、
定量项。为了提高产品质量控制水平，本研究对方
中黄连、五倍子进行了薄层色谱鉴别，并建立了其中
靛玉红的测定方法。
1仪器与试药
美国Waters高效液相色谱仪(515HPLC泵、
486紫外检测器，Millennium2010色谱工作站)，
TCQ一250超声波清洗器(北京医疗设备二厂)，
TG332A微量分析天平(湘仪天平仪器厂)。
结肠炎散I号由天津医院药剂科制剂室制备；
靛玉红(批号110717—200204)、盐酸小檗碱(批号
110713—200208)、没食子酸(批号110831—200302)对
照品，黄连(批号121751—200306)、五倍子(批号
121506—200204)对照药材购于中国药品生物制品检
定所；所用试剂均为分析纯，流动相所用试剂为色谱
纯，水为二次重蒸水，硅胶G薄层板为烟台市化学
工业研究所生产的预制板。
2薄层色谱鉴别
2．1 阴性对照的制备：依照结肠炎散I号的处方，
按照结肠炎散I号的制备方法分别制备不含黄连、
五倍子的对应散剂，作为阴性对照。
2．2黄连的鉴别[1]：取结肠炎散I号粉末4g，加甲
醇10mL，超声提取15min，滤过，滤液作为供试品
溶液。另取黄连对照药材0．050g，加甲醇同法制成
对照药材溶液。取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制
成0．5mg／mL的溶液，作为对照品溶液。照薄层色
谱法(《中国药典92005年版附录ⅥB)试验，吸取上
述溶液各2pL，分别点于同一硅胶G的薄层板上，
以苯一醋酸乙酯一异丙醇一甲醇一水(6，3：1．5：1．5。
0．3)为展开剂，加入双槽展开缸中，另一槽内加入等
体积的浓氨试液，预平衡15min展开8am，取出，
晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，结果供试品色
谱在与对照药材和对照品色谱相应的位置上显相同
颜色的荧光斑点。见图1。
卜盐酸小檗碱对照品 2一黄连对照药
材3一结肠炎皱I号4一阴性对照
1一berberinehydrochloriderefer nce
substance2-RhizomaCoptidisref—
erenceruderug3-Jiechangyan
PowderNo．14-negativesample
圈1结肠炎散I号中黄连的薄层色谱图
Fig．1TLChromatogramofRMzomaCoptidis
InJiechangyanPowderNo．1
收稿日期：2007—11—23
作者简介：周永梅(1975一)，女，黑龙江人，主管中药师．研究方向：中药制剂质量标准。
Tel／Fax：(022)28322065E—mail：pan95466@sina．corn
万方数据
中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月·1177·
2．3五倍子的鉴别：结肠炎散I号粉末7g，加甲醇
20mL，超声提取15min，静置过夜，滤过，滤液作为
供试品溶液。另取五倍子对照药材0．5g，加甲醇5
mL，同法制成对照药材溶液。取没食子酸对照品适
量，加甲醇制成1mg／mL的溶液，作为对照品溶液。
依照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各2pL，分别
点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿一甲酸乙酯一甲酸
(5。5：1)为展开剂，展开、取出、晾干，喷以5％的
三氯化铁试液，结果在结肠炎散I号色谱中，与对照
品及对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝黑色
斑点。见图2。
1一没食子酸2一五倍子对照药材
3一结肠炎散I号4-阴性对照
1-galicacidreferencesubstance
2-GallaChinensisreferencecruderug
3-JiechangyanPowderNo．1
4-negativesample
围2结肠炎散I号中五倍子的薄层色谮图
Fig．2TLCChromatogramofGallaChinensis
inJiechangyanPowderNo．1
3靛玉红的测定
3．1 测定波长的选择：取靛玉红对照品适量，用三
氯甲烷溶解，即得溶液，并在190～500am进行了
光谱扫描，结果靛玉红在292am处有最大吸收波
长，因此本实验选择了292am作为检测波长。
3．2 色谱条件及系统适应性：色谱柱为Thermo
C18(250mm×4．6mm，5弘m)；预柱为EliteC18(50
mm×4．6mm，5弘m)；流动相：甲醇一水(85l 15)；柱
温：室温；体积流量：1．0mL／min；检测波长：292
am；进样量：20弘L。
3．3供试品溶液的制备：精密称取经五氧化二磷干
燥至恒重的样品粉末约25mg，置具塞锥形瓶，加三
氯甲烷5mL，超声提取10min，再加入20mL甲醇
振摇，滤过。滤渣继续加入三氯甲烷4mL，超声提取
10min，再加入16mL甲醇超声5min，滤过。合并
两次滤液，用甲醇一三氯甲烷(8t 2)定容于50mL
量瓶中，即得。
3．4对照品储备液的制备：精密称取经五氧化二磷
干燥至恒重的靛玉红约10mg置10mL量瓶中，加
三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取1mL
置50mL量瓶中，加甲醇一三氯甲烷(8：2)至刻度，
摇匀，即得质量浓度为20／ug／mL的靛玉红对照品
储备液。
3．5阴性对照溶液的制备：按照处方量制备除青黛
的结肠炎散I号，按供试品溶液的制备方法制备阴
性对照溶液。
3．6干扰试验考察：在上述色谱条件下，取对照品
储备液、供试品溶液和阴性对照溶液各20pL进样，
结果见图3。在对照品色谱峰保留时间相应的位置
上，阴性对照溶液在此峰位无吸收，因此对样品的测
定无干扰。
0 2 4 6 8 0 2 4 6 8
·一靛玉红
·一indirudin
圈3靛玉红对照品(A)、结肠炎散I号(B)和阴性对照
(c)的高效液相色谱图
Fig．3HPLCChromatogramsfindirudinreference
substance(A)，JiechangyanPowderNo．1(B)，
andnegativesample(C)
3．7线性关系考察：精密量取0．4mL20／卫g／mL
靛玉红对照品储备液置10mL量瓶中，加甲醇一三
氯甲烷(8：2)稀释至刻度，摇匀。精密量取1．6、
1．8、2．0、2．2、2．4、2．6、2．8mL置10mL量瓶中，
加甲醇一三氯甲烷(8：2)至刻度，摇匀，依次进样20
pL，测定。同一质量浓度测定3次，取其平均值。以
质量浓度(C)为横坐标，峰高(日)为纵坐标绘制标
准曲线，得回归方程H=6180．66C一16．6396，
r=0．9995。结果表明靛玉红在0．1293-0．226
／．tg／mL与峰高呈良好的线性关系。
3．8精密度试验：精密吸取20／-g／mL靛玉红对照
品储备液20pL，重复进样6次，测定靛玉红峰高，
结果其RSD为0．52％。
3．9 重现性试验：分别取批号060902的样品25
mg，共6份，精密称定，制备供试品溶液，分别进样
测定峰高，计算靛玉红的质量分数，结果其RSD为
1．25％。
3．10稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液20
pL，分别在0、2、4、6、8、10h进样测定靛玉红的色
谱峰高。结果供试品溶液制备后10h内色谱峰高无
明显变化，RSD为0．85％，表明供试品溶液制备后
IOh内是稳定的。
3．11加样回收率试验：精密称取结肠炎散I号样
品适量(每份含靛玉红约4．11pg)，共6份，精密加
入0．2mL20pg／mL靛玉红对照品储备液，制备供
墨
万方数据
·1178· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月
试品。溶液，进样测定，计算，结果平均回收率为
99．8％，RSD为1．62％。
3．12样品测定：取3个不同批号的结肠炎散I号
粉末25mg，各3份，精密称定，制备供试品溶液，在
上述色谱条件下进样，测定，采用外标法计算，结果
见表1。
裹l 结肠炎散I号中靛玉红的测定结果(n一3)
Table1 IndirudininJ echangyanPowderNo．1(一----3)
4讨论
五倍子的鉴别试验中，如完全按照《中国药典》
2005年版一部五倍子项下方法操作，样品的图谱有
的斑点较浅，因此提取后放置过夜，而且采用5％三
氯化铁试液显色的方法[2]，才能使结肠炎散I号色
谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显
相同的蓝黑色斑点。
青黛为本制剂处方中的君药，但靛蓝稳定性差，
所以选择靛玉红作为测定的指标。因本法是反相色
谱法，且靛玉红易溶解于氯仿、丙酮中，而在甲醇中
溶解稍差，若单选择氯仿作溶剂，峰形会受影响，故
综合靛玉红的提取及色谱分离两个因素，经比较试
验，用甲醇一氯仿(8：2)作溶剂，不仅提取效果较好，
色谱峰形也较好。
供试品提取方法的选择中进行了超声提取、回
流提取两种提取方法比较[3]，结果在不同提取方法
制备样品中靛玉红的质量分数基本不变，但超声提
取杂质峰干扰小，提取时间短，操作简便故采用超
声提取的方法。
参考文献：
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[2]张贵君．现代中药材商品通鉴[M]．北京：中国中医出版社，
2001．
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草药，2006，37(4)：537—539．
高效液相色谱分离纯化九节龙皂苷I
李 斐1’2，王晓娟1．，孙晓莉2，黄永刚3，王荣1，常晓亮4
(1．第四军医大学第三附属医院，陕西西安 710032；2．第四军医大学化学教研室，陕西西安710032；
3．陕西盘龙制药有限公司，陕西西安710032；4．陕西中医学院药学系，陕西咸阳712046)
摘要：目的采用制备色谱系统从九节龙皂苷粗品中分离纯化九节龙皂苷I，建立其纯化工艺。方法九节龙皂
苷粗品采用柱色谱分离，然后采用制备色谱系统，收集对应峰的回收液，即得九节龙皂苷I，并对产品进行了TLC
定性和质量分数定量分析。结果产品经HPLC检测，为九节龙皂苷I，质量分数达99％以上。结论用制备色谱
系统进行九节龙皂苷I的分离和纯化，具有简便、快捷、周期短、自动化程度高、收集全面等优点。
关键词：九节龙；九节龙皂苷I；制备高效液相色谱；分离；纯化
中图分类号：R286．02 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)08—1178一03
九节龙系紫金牛科紫金牛属植物川I产九节龙
ArdisiapusillaA．DC．的全草，有清热解毒、消肿止
痛的功用，民间用于跌打损伤，活血通络，亦可用于
蛇咬伤。九节龙全草中的九节龙皂苷I有抗肿瘤活
性[1]。药理实验表明九节龙皂苷I有明显增强巨噬
细胞的吞噬活性和增加SREC数目，即有提高免疫
功能的作用。对S，叭ESC、B。。黑色素瘤有不同程度
的抑制作用[2一]。由于九节龙总皂苷中含有性质相近
的五环三萜类成分，相对分子质量相差不大，因此对
于单体的分离具有很大的难度。采用传统的分离纯
化方法，难以获得高质量分数的单体，本研究采用制
备色谱系统，根据目标产物九节龙皂苷I的性质特
点，优化色谱条件进行分离纯化，并采用HPLC法
进行质量分数测定，证实可获得高质量分数的九节
龙皂苷I，比其他的方法更先进、可靠，适用于工业
化生产。
1材料和与仪器
九节龙皂苷粗品由第四军医大学口腔医院药剂
收稿日期：2007—12-29
基金项目：陕西省科技公关项目[2004K18--G3(1)]
作者简介：李斐(1983一)，女，四川达州人，硕士，研究方向为药物化学。TeL：(029)84776189E—mail：lifeil9831226@163．corn
*通讯作者王晓娟Tel：(029)84776189E-mail：wxjyh231@fmmu．edu．an
万方数据
结肠炎散I号的质量标准研究
作者： 周永梅， 王巨存， 冯鑫， 房德敏
作者单位： 天津医院,天津,300211
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(8)

参考文献(3条)
1.中华人民共和国药典(一部) 2005
2.张贵君 现代中药材商品通鉴 2001
3.罗晓健;张任;何雁 八味锡类散质量标准的研究[期刊论文]-中草药 2006(04)

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