全 文 :中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月·847·
率高达99.07%,可作为羟基喜树碱脂肪乳质量控
制的方法。实验证明,同一样品连续进样10次(每次
色谱分析18min,不用100%甲醇洗脱脂类杂质),
柱上吸附的脂类杂质对羟基喜树碱分离及测定均无
影响。最后再用100%甲醇一次性把脂类杂质洗脱
下来,从而降低对仪器的要求。另外,两种羟基喜树
碱制剂在胰腺组织中药物浓度的检测采用HPLC
法,本实验方法专属性高,灵敏,可靠,可作为羟基喜
树碱体内组织分布研究的可靠检测方法。
临床研究将羟基喜树碱、顺铂、5一氟脲嘧啶和醛
氢叶酸联合化疗治疗晚期胰腺癌,发现对于晚期首诊
胰腺癌的治疗有较好的疗效和可耐受的毒性[6]。羟基
喜树碱对胰腺癌细胞的抑制率随药物浓度增加和作
用时间的延长而增高,单药最大抑制率为54.6%;羟
基喜树碱与顺铂联用产生协同作用,抑制率最高可达
74.8%,与临床常用的FEM化疗方案(5一氟尿嘧啶、
表阿霉素、丝裂霉素)相比无显著性差异[7]。因而开发
新的羟基喜树碱载体十分必要。
羟基喜树碱难溶于水,临床上常用的剂型是将其
内酯环打开形成钠盐制备成注射液。内酯开环后形成
的钠盐在生理条件下(pH7.4)可部分闭环转化成为
内酯型而发生药效,但其只占总药量的10%~
20%[83。然而喜树碱类药物的内酯结构是它们作用
于靶酶的必要结构,开环结构的钠盐导致活性显著
降低曲]。本研究将羟基喜树碱包裹于粒径近200am
的脂肪乳中,保护了具有活性的羟基喜树碱内酯
结构。
本实验结果也表明,将羟基喜树碱制成脂肪乳
以后,大大提高了药物在胰腺组织中的浓度。胰腺癌
是临床常见的恶性肿瘤,目前对其治疗仍缺乏有效
的手段。胰腺癌细胞对羟基喜树碱敏感且其敏感性
随药物浓度的增加而增高[3],说明胰腺癌细胞对羟
基喜树碱具有药物浓度依赖性,因此羟基喜树碱富
集于胰腺有助于胰腺癌的治疗。羟基喜树碱脂肪乳
在胰腺中的浓度比羟基喜树碱注射液提高3~32
倍,并且本研究是采用胰腺正常的家兔进行的,而肿
瘤部位毛细血管通透性比正常部位高,因此该脂肪
乳不仅有望进一步提高对癌变胰腺的靶向性,而且
还可能同时降低羟基喜树碱对其他器官及胰腺未癌
变部位的不良反应。
参考文献:
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麝香缓释双层片和普通片单剂量口服的体内释药特征
与生物利用度研究
程怡1,陈文俊2,郭波红3,陈秀娟1,郭委1
(1.广州中医药大学药剂教研室,广东广州510405f2.广州汉方现代中药研究开发有限公司,广东广州510400,
3.广东药学院,广东广州 510400)
摘要:目的研究麝香缓释双层片MSDT和普通片(MT)单剂量口服的人体释药药力学过程。进行缓释效果和
生物利用度评价。方法 对8名健康自愿男性受试者随机交叉单剂量口服麝香缓释双层片和普通片,用气相一质谱
收稿日期:2007—09—15
基金项目:广东省自然科学基金资助项目(980638)l广州市重大科技攻关资助项目(0223一E5021)
作者简介:程 怡(1955一),女,河北人,教授,博士生导师.广州广药集团博i=后流动站博士后导师,世界中医药联合会新型给药技术专
业委员会常务理事、世界中医药联合会中药药剂专业委员会理事,国家自然科学基金评审专家库专家,进行10余项省部级科
技计划项目,获得国家中医药管理局中医药科技进步三等奖1项、国家成果证书l项、获得专利授权3项。发表研究论文40
余篇,一直从事药剂学领域的研究和教学。E—mail:ncehenyi@21en.com
万方数据
·848· 中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月
联用手段测定人血清中麝香酮,数据经DAS软件处理得到两者体内的动力学参数;根据药时曲线的AUC面积计
算麝香缓释双层片和普通片的相对生物利用度。结果 人体单剂量口服麝香缓释双层片和普通片的主要动力学参
数分别为:c。。:(0.532±0.005)、(O.679士0.049)/19lmL(P<0.05);f—:(h):2.0、(2.062士0.177)/19/mL(P>
0.05)l吸收半衰期tl,2(h):(6.677士0.143)、(1.581±0.116)h(P<0.05);AUCo~。:(6.033土0.111)、(6.041±
0.229)pg·h/mL(P>0.001)IMRTo.。。:(41.848土2.343)、(26.303±3.807)h(P<0.001);麝香缓释双层片的
相对生物利用度为(99.87土4.232)%(n一8)。结论麝香缓释双层片首剂量速释层能与普通片一样迅速释药,能
保持良好的缓释效果与普通片有显著性差异,缓释片与普通片具有生物等效性。所试剂量范围内麝香缓释双层片
的药时曲线符合一级吸收的一房室模型。
关键词:麝香缓释双层片;药动学;生物利用度;释放度
中图分类号:R286.1 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2008)06—0847—04
人工麝香为中药一类原料药材,与天然麝香等
同使用,具有开窍醒神、活血通经、消肿止痛的功效,
用于热病神昏,中风痰厥,中恶昏迷,气郁暴厥,心腹
暴痛(现代医学的脑血栓、中风、缺血性冠心病、心绞
痛,胸闷等)诸症。人工麝香的主要活性成分为麝香
酮,但是麝香酮在动物体内具有吸收、分布迅速,半
衰期短的特点[1]。本课题组研究的人工麝香缓释双
层片具有速效层和缓释层,使药物具有口服后立即
释放首剂量达到迅速起效缓解症状的作用,随后维
持12h释放,保证心血管患者日常工作和夜间生活
的安全性,避免频繁给药。本实验进行了该药的人体
释药的动力学特征和相对生物利用度研究。
I仪器与材料
Sartoriusl712型电子天平(德国),Agilent
8453E分光光度系统、Agilent6890--5973气相色
谱一质谱联用仪(美国惠普公司),TLL—C高速冷冻
离心机(北京四环科学仪器厂),FZQ一2旋涡混合
器(江苏泰县医疗器械厂),微量进样器CE海安亭微
量进样器厂)。
麝香酮(批号719—8702)、异补骨脂素(批号
0378—200108)对照品均购于中国药品生物制品检
定,麝香缓释双层片(muskustained—releasedouble
layertablet)和普通片(musktablets)为自制样品;
高纯氮气(99.999%),其他试剂均为AR级。
健康男性受试者8名,年龄(25±2)岁,身高
(171±3)em,体重(62±5)kg。受试者经全面体
检,肝肾功能(SGPT、BUN、Cr)和心电图正常,符
合试验要求,试验前两周至试验结束未服用其他药
物,试验期间用统一中餐,试验期间不吸烟和饮用含
乙醇的饮料,试验前签订知情同意书。
2方法与结果
2.1 单剂量给药:8位受试者按随机交叉试验设
计,分别服用麝香缓释双层片和普通片各600mg。
两次给药间隔时间为两周。药物均用200mL温开
水送服。各受试者服药前禁食过夜,服药后4h用统
一餐。采用埋置肝素留置针头法取血,各受试者服药
前取空白血,并在服药后0.5、1、1.5、2、2.5、3、3。5、
4、5、6、8、12h取血。每次取血5mL,置离心管内,
放置规定时间,再经高速冷冻离心(温度5℃、转速
12000r/min、10rain),分离的血清置一20℃冰箱
中保存,作为给药血清供试品。
2.2供试血清预处理:取测定用血清1mL,精密加
入内标溶液20pL,饱和硫酸铵溶液1mL,以12000
r/min高速冷冻离心10min,上清液用乙醚一二氯甲
烷(4:1)提取3次,每次1mL,提取液合并于35
℃氮气吹干,用40弘L正己烷溶解,作为供试品溶
液。同法处理空白血清,作为随行血样。
2.3 内标物溶液的制备:取异补骨脂素对照品适量
用正己烷配制成0.2ttg/mI。的溶液。
2.4 麝香酮对照品储备液的制备:精密称取麝香酮对
照品1mg,乙醇定容为1mL,作为对照品储备液。
2.5 色谱条件:GC为HP一5弹性石英毛细管柱(30
m×0.25mm);进样口温度250℃,接口温度230
℃;载气为高纯氦气,体积流量1.2mL/min;柱压100
kPa,分流比10:1,进样量2.0tLL;柱温从70℃升温
到280℃,于3rain内完成;MS为EI源(70eV),双
灯丝;全程扫描。色谱柱为HP一5弹性石英毛细管柱
(30m×0.25mm)。温度为接口250℃,气化室220
℃,柱初温70℃,保持1min后以20℃/min升至
260℃。载气为高纯氦气,体积流量为1.2mL/min,
分流比为6;1,选择总离子流检测。
2.6 回归方程的制备:吸取麝香酮对照品储备液
5、10、50、100、150gL,氮气吹干,分别用空白血清溶
解定容为1mL,并加入饱和硫酸铵溶液1mL,以
12000r/rain高速冷冻离心lOmin,上清液用乙醚一
二氯甲烷(4:1)提取3次,每次1mL,提取液合并
于35℃氮气吹干,用正己烷定容至100mL,制成质
量浓度分别为0.05、0.1、0.5、1、1.5ttg/ml。溶液,
再分别加入1mL异补骨脂素溶液。进样,测定。以
麝香酮对内标物异补骨脂素的各峰面积比(X)对质
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月·849·
量浓度(y)进行回归,得到回归方程y=0.631X一
0.1629,R2=0.9998。结果显示人血清中麝香酮在
0.1~3.0/_£g/mL有较好线性关系。
2.7精确度和准确度试验:在实验条件下,测定5
种不同质量浓度的待测血药浓度供试品,在ld内
定时测定3次,每2h测定1次;以后再每24h测定
1次,共测3次。以5次测定平均值计算,结果日内
与日间分析的RSD分别为2.52%、3.56%。
50、100、150弘L,氮气吹干,空白血清加至1mL,按
供试血清预处理项下方法操作至氮气吹干后,加正
己烷定容至100m,作为加样预处理后的回收样品。
另取麝香酮对照品储备液5、10、50、100、150pL,氮
气吹干,加入内标物0.2/xg,正己烷加至100mL,作
为未处理样品。将两组样品同精确度和准确度试验
项下方法测定计算。重复3次试验,以质量浓度平均
值计算,将预处理后样品的测定值和未处理样品的
2.8 回收率试验:取麝香酮对照品储备液5、10、 测定值相比计算回收率,结果见表1。
表1人血清中麝香酮的回收率
Table1 Recoveryrateofmusconeinhumanserum
2.9血药浓度测定结果:取供试品溶液2.0弘L进
样测定,测得麝香酮对内标物异补骨脂素的各峰面
积比值,经回归方程换算血药浓度。人空白血清和给
药血清的GC—MS图谱见图1。体内1.0ng/mL药
物成分均可在GC—MS联用仪中检测到。取血液供
试品测定,各时间点的平均血药浓度绘制药一时曲线
见图2。
2.10数据处理及药动学参数:通过最小AIC值房
室模型判断,结果以一房室模型和权重W一1时为
合适参数,用最小AIC法判断房室模型和权重系数
缈,输入孙瑞元等编制的DAS药动学软件程序处
理,得到该药体内主要动力学参数。比较缓释特征,
所试剂量范围内麝香缓释双层片的药时曲线符合一
级吸收的一房室模型,见表2;DAS计算的主要药动
学参数见表3。
表2人单剂量口服给药麝香不同制剂后的AIC值
Table2 AICValueofsingleoraladministrating
muskpreparations
2.11麝香缓释双层片体内的相对生物利用度测
定:对药一时曲线下面积(AUC。一。)计算出人体内缓
释片相对于常释片的相对生物利用度,结果见表4。
AUC、C。。和f。。经对数转换后采用SPSS12.0作双
单侧t检验统计学处理,结果见表5。以85%~
115%为等效标准,评价缓释制剂与普通制剂的生物
等效性。以AUC。一计算,麝香缓释双层片的相对生
物利用度(F)平均为(99.87±4.232)%(,2—8)。
衰3人单剂量口服给药不同麝香制剂后的药动学参数
Table3 Pharmacokineticparametersofsingleoral
administratingmuskpreparations
表4麝香缓释双层片体内的相对生物利用度
Table4 RelativebioaVailabiI萱tyofdoublelayersustained
releasemuskpreparationinvivo
2.12延迟熵R。:心是表达药物在体内的,血药浓
度维持在峰浓度一半以上水平的时间为半值持续时
间(half—valueduration,HVD),R△为试验制剂的半
值持续时间HVDT与参比制剂的半值持续时间
万方数据
·850· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月
A
. . . ⋯【..^。n f K
B
.1.。^。^ }^ 1
⋯⋯.h.¨. 【.. hL。
0 2 4 6 8 10
t/min
1一异补骨脂素2一麝香酮
1-isopsoralen2-muscone
圈1 人空白血清(A),内标+对照品人空白血清(B)
和加内标的给药血清(C)的GC—MS图谱
Fig.1GC-MSChromatogramsfhumanblankserum
(A),serumsampleofavolunteerwithinternal
standardnmuskstandard(B),andserum
samplewithinternalstandardafterasingleoral
dose(C)
,
●
E
●
∞
j
≮
睡
I;缸
醢
O.3
t/h
圈2 口服给药麝香普通片和缓释双层片后的
药时曲线图
Fig.2Drugconcentration—timecurveofsingle
oraladministrating
裹5麝香缓释和瞢通制剂的药物动力学参数统计分析
Table5 Statisticsofpharmacokineticparameters
ofmuskpreperations
HVDn的比值,表示缓释作用的强弱。用药时曲线参
数计算,缓释制剂的HVDT为7.5h,常释制剂的
HVDR为3.5h,R△一7.5/3.5=2.14。
3讨论
口服人工麝香缓释双层片的主要动力学特征分
别为:血药浓度峰C。,较普通片平坦,低于常释片的
C。。(P<0.05);因麝香缓释双层片设计了首剂量
30%药量的速释部分,因此和常释片的达峰时间
f。。无显著性差异(P>0.05),速释层能达到与普通
片一样迅速释药发挥缓解症状的速效作用,这一点
与普通的缓释制剂不同;消除半衰期tl/z和平均滞留
时间MRT(h)与常释片相比显著延长(P<0.001)。
药时曲线为一级动力学曲线,无突释现象,从曲线上
看,受试者食物不影响药物的吸收,这些动力学参数
完全符合缓控释制剂设计应该具备的基本要求Ⅱ]。R。
表达了血药浓度一时间曲线的峰宽,也是显示缓释特
征的参数。R△=1时,表示没有缓释作用;Ra=1.5,
表示有弱的缓释作用;R。=2,有中等强度的缓释作
用;R。=3有强的缓释作用[2]。麝香缓释双层片的R。
为2.14,比普通片明显延长,具有较好的缓释作用。
将两种制剂的AUC。⋯C~和£。,作对数转换
后,进行双单侧t检验,结果表明,3个参数均无显
著性差异(P>0.05)。这表明麝香缓释双层片与普
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万方数据
麝香缓释双层片和普通片单剂量口服的体内释药特征与生物
利用度研究
作者: 程怡, 陈文俊, 郭波红, 陈秀娟, 郭委
作者单位: 程怡,陈秀娟,郭委(广州中医药大学,药剂教研室,广东,广州,510405), 陈文俊(广州汉方现
代中药研究开发有限公司,广东,广州,510400), 郭波红(广东药学院,广东,广州,510400)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2008,39(6)
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本文链接:http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200806016.aspx